bcl-2和Fas/Apo-1基因在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达

目的:观察凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因Fas/Apo-1在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达情况。方法:制备家兔心肌缺血-再灌注损伤(RI)、缺血预适应(IP)、持续缺血(CI)和control模型。实验方法:①采用免疫组织化学方法观察bcl-2基因表达。②采用逆转录扩增(PCR)方法观察Fas/Apo-1表达情况。结果:①免疫组化检测bcl-2基因蛋白标记阳性者,在病变边缘区,IP组为(46.5±11.0)%,CI组为(42.9±9.9)%,两者之间无明显差别(P>0.05),但均明显高于RI组(19.4±5.6)%和对照组(1.92±0.88)%(P<0.01);在病变中心区,IP组为(52.5±8.8)%,均明显高于RI组(32.2±10.2)%和CI组(28.0±10.2)%(P<0.01);而RI组与CI组之间比较则无显著性差异(P>0.05);在正常对照组分别仅为(1.92±0.88)%和(1.92±1.02)%,说明正常心肌中bcl-2无表达或弱表达。从自身不同部位对照来看,RI组在病变中心区bcl-2基因蛋白的表达明显强于边缘区(P<0.01);而IP组2个部位比较无明显差别(P>0.05);CI组则表现出病变边缘区bcl-2基因蛋白的表达增强(P<0.01)。②在RT-PCR方法观察Fas蛋白的表达中,可见凝胶电泳在control和IP组的心肌细胞中Fas基因蛋白的表达水平极低,在RI组和CI组的心肌细胞中则见Fas基因蛋白的表达明显增高(P<0.01);而对照β-actin基因的mRNA表达水平在各组基本一致,无显著性差异(P>0.05)。结论:缺血可诱发凋亡促进基因Fas/Apo-1基因蛋白的表达增强,而再灌注则加重这一过程。     

雷米普利对充血性心力衰竭患者Fas/Apo-1水平的影响

目的观察雷米普利对充血性心力衰竭（CHF）患者细胞凋亡抑制因子Fas／Apo-1的影响。方法酶联免疫方法检测84例CHF患者（雷米普利治疗42例；常规治疗42例）治疗前后及30例健康人血清中Fas／Apo-1水平。结果与健康人相比，84例CHF患者Fas／Apo-1水平显著生高（P〈0．01）；CHF患者Fas／Apo-1水平随着心功能损害加重而升高，各组间差异有显著性（P〈0．05）；雷米普利组与常规治疗组治疗前Fas／Apo-1水平两组间差异无显著性（P〉0．05）；与常规治疗组相比，雷米普利组治疗后血清中Fas／Apo-1水平降低更为明显（P〈0．01）。结论CHF患者血清中Fas／Apo-1水平可反映心力衰竭的程度，雷米普利改善CHF患者心脏功能的作用可能与其抑制心肌细胞凋亡的机制有关。     

癃闭康对实验性大鼠前列腺增生组织bax/bcl-2表达的影响

[目的]观察实验性大鼠前列腺组织bax/bcl-2的表达及癃闭康对其的影响.[方法]雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、前列康组、癃闭康低、中、高不同剂量组.去势加丙酸睾丸酮注射法复制前列腺增生模型,干预后观察前列腺湿重、前列腺指数、bax/bcl-2的表达及病理变化.[结果]bax在对照组大鼠前列腺组织中表达呈强阳性,在模型组表达呈弱阳性;各治疗组bax表达均强于模型组;bcl-2蛋白在对照组大鼠前列腺组织中表达呈弱阳性,在模型组表达呈阳性,各治疗组bcl-2蛋白均为弱阳性表达;光镜下组织结构接近对照组.[结论]癃闭康可能通过调节bax/bcl-2的表达促进前列腺增生的上皮细胞凋亡而抑制前列腺组织增生.     

大剂量孕激素治疗对子宫内膜腺癌细胞凋亡和bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的探讨大剂量孕激素治疗对子宫内膜腺癌组织细胞凋亡及其调控基因bcl-2、bax蛋白表达的影响.方法选取2000～2005年收住院手术治疗、资料完整的子宫内膜腺癌患者病理标本30例,应用原位细胞凋亡检测技术(TUNEL)检测孕激素治疗前后子宫内膜腺癌组织细胞凋亡指数,其中16例采用免疫组化S-P法检测bcl-2和bax蛋白表达.结果孕激素治疗前后子宫内膜腺癌组织细胞凋亡指数、bcl-2和bax蛋白表达率分别为(6.00士5.68)和(27.67±2.41)、87.50%和75.00%、100.00%和93.75%.孕激素治疗后子宫内膜腺癌组织中细胞凋亡指数较治疗前明显增加(P＜0.01),其变化与bcl-2及bax蛋白表达无关.结论大剂量孕激素治疗通过促进细胞分化、增加细胞凋亡而达到治疗子宫内膜腺癌的目的.     

前列腺癌组织中bcl-2和bax蛋白表达的临床病理意义

目的检测bcl-2和bax蛋白在前列腺癌组织中的表达情况,并探讨其与前列腺癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化检测bcl-2和baX蛋白在32例前列腺癌及癌旁组织中的表达情况。结果bcl-2和bax蛋白在前列腺癌组织中的阳性表达率分别为53．1％和43．6％（17／32和14／32）,而在癌旁组织中的阳性表达率分别为6．3%和100％（2／32和32／32）,两者比较有显著性差异（P〈0．05）。bcl-2蛋白的表达与前列腺癌分化程度及临床分期密切相关（P〈0．05）。bcl-2蛋白的表达与前列腺癌患者年龄无显著相关性（P〉0．05）。结论bcl-2和bax蛋白可能参与前列腺癌的发生发展,有望成为前列腺癌诊断和判断预后的分子标志物。     

纳米磁性靶向药囊对人肝癌裸鼠移植瘤bcl-2/bax蛋白表达的影响

目的观察纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗人肝癌裸鼠移植瘤对肿瘤细胞凋亡bcl-2及bax蛋白表达的影响。方法透射电镜观察各组移植瘤形态学特征，免疫组化SABC法测定bcl-2和bax蛋白表达水平。结果电镜观察可见B组（5-Fu）和D组（纳米磁性5-Fu药囊加内磁场）肿瘤组织大量癌细胞凋亡。B和D组bcl-2蛋白表达水平低于A组（生理盐水对照）、C组（纳米磁性5-Fu药囊）和E组（纳米磁小体加内磁场）（P〈0．01），D组bcl-2蛋白表达水平低于B组（P〈0．01）；B组和D组bax蛋白表达水平高于其他三组（P〈0．01），D组bax蛋白表达水平高于B组（P〈0．01）。结论纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗能够降低bcl-2蛋白表达，增加bax蛋白表达，促进人肝癌裸鼠移植瘤细胞凋亡，提高5-Fu抗肿瘤作用。     

重离子对人肝癌细胞细胞凋亡及bcl-2/bax基因表达的研究

目的 探讨重离子诱导人肝癌细胞SMMC-7721细胞凋亡及bal-2／bax的表达在重离子治癌中的作用。方法 应用流式细胞技术、MTT法及免疫组化法,观察重离子诱导人肝癌细胞SMMC-7721细胞凋亡和bal-2／bax表达的情况,并应用AO／BE荧光染色,在荧光显微镜下,观察各组织细胞凋亡的形态学变化。结果 经MTT比色法测定细胞增殖能力,可见随辐射剂量的增加,细胞存活率逐渐降低。流式细胞仪检测重离子对SMMC-7721细胞的DNA含量变化,结果显示2．0、3．0Gy组的SMMC-7721细胞在G2／M期所占细胞比率较对照组及1．0、1．5Gy组增高（P〈0．01）。免疫组化法观察随辐射剂量的增加,bax的表达显著上调,而bcl-2的表达则受抑制。结论 重离子能在体外诱导SMMC-7721细胞凋亡,且具有剂量依赖性;重离子在一定剂量时,使细胞增殖能力降低;重离子能诱导SMMC-7721细胞bax蛋白表达上调。而bcl-2表达降低,从而诱导细胞凋亡。     

外源bax基因表达对人视网膜色素上皮细胞bcl-2表达的影响

０引言视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞是视网膜重要的功能细胞之一，其异常增生或退行性变，都会引起感光细胞结构或功能障碍而致盲，详细机制尚不清楚［１，２］．我们的前期实验证实，ｂａｘ表达增强、或ｂｃｌ－２／...     

bcl-2基因过表达致急性髓系白血病对柔红霉素耐药机制的初步探讨

目的 探讨bcl-2基因过表达导致人急性髓系白血病对柔红霉素耐药的机制.方法 通过分子克隆技术构建质粒pcDNA3.1(+)/bcl-2,将其转染人急性髓系白血病U937细胞,分正常对照组、空载体对照组、转染组,与柔红霉素培养24 h,采用CCK-8法检测细胞增殖率,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达变化,从而比较转染bcl-2基因前后,U937细胞对柔红霉素敏感性的变化.结果 成功构建质粒pcDNA3.1(+)/bcl-2,转染入U937细胞,PCR证实其转染效果;CCK-8法检测结果显示U937/ bcl-2组细胞存活率显著高于对照组和空载体对照组;bcl-2基因过表达降低caspase-3片段的裂解活化,降低U937细胞对柔红霉素的敏感性.结论 bcl-2过表达抑制caspase-3激活、抑制柔红霉素杀伤U937细胞,导致细胞对柔红霉素耐药.bcl-2可作为临床治疗急性髓系白血病的靶点.     

缺血再灌注后胆管上皮细胞凋亡和bcl-2/bax的表达及意义

目的探讨肝脏经不同时间热缺血再灌注后胆管上皮细胞的凋亡和bcl-2／bax的表达及意义。方法以大鼠肝脏原位缺血再灌注为模型，经15、30和60min缺血再灌注6h后取材，用TUNEL法原位检测胆管上皮细胞的凋亡，免疫组织化学方法检测bcl-2／bax在胆管上皮细胞中的表达。结果随着缺血时间延长，经再灌注后发生凋亡的胆管上皮细胞逐渐增多，bcl-2／bax蛋白表达指数呈进行性降低，bax则随凋亡细胞的增多表达增强。结论热缺血再灌注损伤引起胆管上皮细胞的凋亡，并随缺血时间的延长而加重，bcl-2／bax凋亡基因介导了缺血再灌注后损伤引起的胆管上皮细胞的凋亡，bcl-2对细胞凋亡具有抑制作用。     

bcl-2和Fas/APO-1在宫颈癌的表达及其意义

目的 :探讨bcl 2和Fas/APO 1基因在宫颈癌患者血浆中的表达水平及与宫颈癌发生发展的关系。方法 :用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 2 1例宫颈癌患者血浆中bcl 2和Fas/APO 1基因的表达水平 ,与 18例宫颈正常妇女的表达水平比较。结果 :bcl 2在 2 1例宫颈癌患者血浆中的水平为 (2 2 3.5 6 3± 1.6 19)U/ml(x- ±s) ,显著高于 18例宫颈正常者的 (6 6 .4 2 0± 1.4 0 1)U/ml(x- ±s) ,两者比较经t检验P <0 .0 5 ,差异有显著性 ;Fas/APO 1在 2 1例宫颈癌患者血浆中的水平为 (5 2 0 .116± 1.15 8)ng /L(x- ±s) ,明显低于 18例宫颈正常者 (6 38 2 6 3± 1 2 4 1)ng/L(x- ±s) ,两者比较P <0 .0 5 ,差异有显著性。结论 :在宫颈癌中bcl 2高表达 ,而Fas/APO 1低表达 ,bcl 2和Fas/APO 1基因可能通过调控细胞凋亡参与了宫颈癌的发生和发展     

bcl-2和bax在三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡过程中的变化

目的:探讨bcl-2和bax在三氧化二砷(arsenic trioxide,As₂O₃)诱导HL-60细胞凋亡过程中的变化。方法:7.5μmol/L的As₂O₃作用HL-60细胞12、24 h,RT-PCR和Western-blot分别检测bcl-2和bax基因mRNA表达及相应的蛋白表达变化。结果:7.5μmol/L的As₂O₃作用HL-60细胞12、24 h后,bcl-2 mRNA相对表达分别为(65.02±4.69)%、(40.70±3.94)%,baxmRNA相对表达分别为(46.71±4.26)%、(95.65±5.57)%,Western-blot检测bcl-2蛋白相对表达分别为(56.34±6.45)%、(42.01±3.01)%,bax蛋白质表达分别是(50.65±4.50)%、(66.78±5.05)%,对照组与实验组差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:As₂O₃诱导HL-60细胞凋亡过程中,下调bcl-2 mRNA和蛋白质表达,同时上调bax mRNA和蛋白质表达,可能是As₂O₃诱导细胞凋亡信号传导通路之一。     

银杏叶提取物联合依达拉奉对气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(EGb)与依达拉奉(ED)联合应用对气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞凋亡率及bcl-2/bax表达的影响。方法:采用饥饿、疲劳、高脂饮食等复制大鼠气虚血瘀模型,再用线栓法阻断大脑中动脉2 h,再灌注治疗72 h后,观察EGb、ED及EGb+ED组对气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞凋亡率及bcl-2/bax表达的影响。结果:与模型组比较,EGb、ED及EGb+ED组均能降低气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织凋亡细胞数(P<0.01),下调bax基因表达,上调bcl-2基因表达,减轻神经细胞损伤(P<0.01),两药联用变化趋势更明显。结论:银杏叶提取物和依达拉奉能降低气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤模型鼠脑组织细胞凋亡基因bax的表达,增加具有神经元保护作用的bcl-2基因表达,从而抑制神经细胞凋亡,加速神经功能的恢复,共同发挥脑保护作用。     

Survivin在子宫内膜异位症的表达及其与bcl-2、bax相关性的研究

目的 探讨凋亡抑制基因survivin在子宫内膜异位症的表达,及其与bcl-2、bax的相关性. 方法应用免疫组织化学S-P法,检测40例子宫内膜异位症异位内膜组织中survivin、bcl-2、bax蛋白的表达,并与正常在位子宫内膜组织25例进行对照.结果 子宫内膜异位症异位内膜组织中survivin蛋白阳性表达率为67.5%,明显高于正常在位内膜组织的表达率4.2%(P＜0.05),并且异位内膜组织中survivin蛋白表达与月经周期无相关性(P＜0.05);survivin蛋白表达与bcl-2蛋白呈正相关(P＜0.05),而与bax蛋白呈负相关(P＜0.05). 结论 survivin可通过抑制异位内膜细胞凋亡,对子宫内膜异位症的发生、发展起作用;survivin与bcl-2、bax在子宫内膜异位症的发生、发展中分别起协同和拮抗作用.     

通脑灵对缺氧条件下培养的神经细胞bcl-2和bax基因表达的影响

目的 :观察通脑灵对缺氧条件下培养的神经细胞 bcl- 2和 bax基因表达的影响。方法 :采用原位杂交检测 bcl- 2 m RNA和 bax m RNA。结果 :通脑灵组 bcl- 2的表达在复氧后 6 h出现 ,2 4h及 48h阳性信号逐渐增强 ,而对照组在复氧 6 h出现 bcl- 2阳性信号 ,但随复氧时间的延长逐渐下降。通脑灵组和对照组 bax的表达均于复氧后6 h出现阳性信号 ,2 4h达高峰 ,48h逐渐下降。结论 :通脑灵的神经保护作用可能部分地与调控缺氧损伤神经细胞内 bcl- 2和 bax基因的表达有关     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注神经元凋亡、bcl-2和bax表达的影响

目的观察促红细胞生成素(Epo)对大鼠局灶性脑缺血再灌注神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白bc l-2、bax表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为6组,缺血再灌注治疗A组、B组、C组、D组(分别在缺血前30 m in及再灌注后2 h、6 h、12 h腹腔注射Epo 3 000 IU.kg-1)、缺血再灌注组(E组)和假手术组(F组)。观察Epo对大鼠脑缺血再灌注后脑组织的病理变化,Epo、bc l-2、bax的表达及神经细胞凋亡情况。结果(1)A组、B组、C组及F均未见明显病理性改变,D组及E组显示梗死区神经元缺血改变;(2)各组均可见不同程度Epo阳性表达细胞,且A组、B组、C组较D组、E组表达明显增多(P<0.05);(3)TUNEL法见A组、B组、C组、F组凋亡阳性细胞较D组、E组明显减少(P<0.05);(4)A组、B组、C组bc l-2蛋白表达较D组、E组、F组明显增多(P<0.05),而bax蛋白表达较D组、E组及F组明显减少(P<0.05)。结论Epo通过调控凋亡相关基因bc l-2/bax的比率而发挥抗神经元凋亡的脑保护作用。     

红花注射液对肝星状细胞 HSC-T6 增殖、凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的 研究红花注射液对肝星状细胞 (hepatic steuate cell,HSC) HSC-T6 增殖、凋亡及凋亡相关基因 bcl-2 及 bax mRNA 表达的影响。方法 体外培养 HSC 株,用不同质量浓度的红花注射液处理 HSC-T6,采用 MTT 法检测细胞增殖;采用 5、10、20 mg/mL 红花注射液干预细胞 24 h,流式细胞仪检测细胞周期;倒置显微镜下观察细胞凋亡形态学改变;并用琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA Ladder 凋亡梯度;Annexin V-FITC/PI 双染色流式细胞仪分析凋亡率;Real time-RT PCR检测凋亡相关基因 bcl-2、bax mRNA 的表达水平。结果 红花注射液对 HSC 增殖有明显的抑制作用,且作用呈剂量和时间依赖性;红花注射液 (10、20 mg/mL) 作用 24 h 流式细胞术测出 G0/G1 期细胞所占比例增多,与对照组比较差异显著 ( P ＜0.05、0.01);药物干预后细胞表现不同程度的凋亡,琼脂糖电泳可见 DNA 出现断裂、PI/Annexin V 双染流式细胞仪分析对照组凋亡率为 (0.73±0.33)%,红花注射液在 5、10、20 mg/mL 凋亡率分别为 (2.04±0.58)%、(9.46±1.29)%、(16.55±1.27)%,差异显著 ( P ＜0.01);Real time-RT-PCR 结果显示红花下调抗凋亡基因 bcl-2 的 mRNA 表达,同时上调 HSC-T6 的促凋亡基因 bax 的 mRNA 表达。结论 红花注射液能抑制 HSC 增殖及增殖周期,促进活化的 HSC 凋亡,其机制可能是调控 bcl-2/bax mRNA 的表达。     

The Effect of Targeted Magnetic Nanopaticles on Hepatoma and the Expression of bcl-2/bax Protein

The effect of targeted magnetic nanoparticles on hepatoma and the underlying mechanism were examined. Nude mice transplanted with a human hepatoma cell line （HepG2 cells） were randomized into 5 groups, including： （1） group A, receiving normal saline, （2） group B, receiving 5-fluorouracil （5-Fu）, （3） group C, receiving magnetic nanoparticles containing 5-Fu, （4） group D, consisting of treatment with magnetic nanoparticles containing 5-Fu and inside magnetic field and （5） group E, receiving pure magnetic nanoparticles and inside magnetic field. Morphological features of transplanted tumors in mice in each group were observed under transmission electron microscope （TEM）. The expression of bcl-2/bax protein was immunohistochemically detected by SABC method. The results showed that a large number of apoptotic tumor cells were found in group B and group D under TEM. The expression of bcl-2 protein was significantly decreased and the expression of bax protein increased significantly in both group B and D as compared with those in group A, C and E （P〈0.01 for all）. The decrease in bcl-2 and the increase in bax were more in group D as compared with group B （P〈0.01）. It is concluded that the targeted magnetic nanoparticles containing 5-Fu can improve the chemotherapeutic effect of 5-Fu by decreasing bcl-2 expression, increasing bax expres- sion and inducing apoptosis of the liver cancer cells.     

子宫肉瘤和子宫肌瘤中bcl-2和bax蛋白的表达及意义

目的：研究凋亡调节蛋白bcl-2及bax在子宫肉瘤和子宫肌瘤中的表达及意义。方法：用免疫组织化学ABC法检测34份子宫平滑肌肉瘤标本（Ⅰ期18例,Ⅱ期1例,Ⅲ期8例,Ⅳ期7例）和34份子宫平滑肌瘤以及34份正常子宫肌层标本中的bcl-2及bax蛋白的表达。结果：子宫肌瘤中bcl-2表达强于子宫肉瘤和正常子宫肌层（P<0.01）,肉瘤中的表达强于正常子宫肌层（P<0.05）。正常子宫肌层中bax的表达强于子宫肌瘤和子宫肉瘤（P<0.01）,但bax在肌瘤和肉瘤之间的表达无显著性差异（P>0.05）。Ⅰ,Ⅱ期子宫肉瘤中bcl-2和bax蛋白表达均高于Ⅲ,Ⅳ期者（P<0.01）。bcl-2表达阳性的子宫肉瘤的预后好于bcl-2表达阴性者。结论：bcl-2和bax的表达失调在子宫肌瘤和子宫肉瘤的发病机制中起一定作用。bcl-2和bax主要在子宫肉瘤发生的早期起作用,bcl-2与肉瘤预后相关。     

缺血再灌注后bcl-2/Fas在胆管上皮细胞的表达及意义

目的 观察大鼠肝脏经不同时间热缺血再灌注后胆管上皮细胞的凋亡和调控基因bcl-2／Fas蛋白表达的变化并探讨其意义。方法 以大鼠肝脏原位缺血再灌注为模型，经15min、30min、60min缺血再灌注6h后取材，用TUNEL法原位检测胆管上皮细胞的凋亡，免疫组织化学方法检测调控基因bcl-2、Fas蛋白在胆管上皮细胞上的表达。结果正常组与缺血15min组发生凋亡的胆管上皮细胞极少，随缺血时间的延长，凋亡的胆管上皮细胞增多。发生凋亡的胆管上皮细胞主要局限于较大的肝内胆管（〉20μm）。正常胆管上皮细胞即表达较高的bcl-2蛋白，主要表达在肝内细小胆管上皮细胞。大的胆管包括汇管区胆管和纵隔胆管bcl-2蛋白的表达水平相对较低。随着肝脏热缺血时间的延长，大胆管bcl-2蛋白表达阳性率逐渐增高，60min组bcl-2蛋白表达较对照组差异具有显著性。Fas蛋白阳性表达率对照组较低，随着热缺血时间的延长，再灌注后Fas蛋白阳性表达率明显增高，缺血30min和60min两组与对照组比较差异均有显著性。结论 缺血再灌注能够诱导肝内大胆管上皮细胞发生凋亡，细小胆管上的胆管上皮细胞较少发生凋亡，主要与bcl-2蛋白在不同细胞上的表达差异有关，同时，调控基因Fas蛋白的表达可促进胆管上皮细胞凋亡的发生。