一测多评法测定复方五仁醇胶囊中6种木脂素类成分

目的建立一测多评法同时测定复方五仁醇胶囊(五味子、三七、柴胡、叶下珠)中6个木脂素类成分的量。方法以五味子醇甲为内参物,建立五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素与内参物的相对校正因子。同时采用外标法测定,比较计算值与实测值的差异。结果在两个实验室的两种HPLC系统(Waters、Shimadzu)和两种色谱柱[Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)和Lichrosphere C18(4.6 mm×250 mm,5μm)]对10批制剂中6个成分的相对校正因子测定的RSD均小于5%。结论所建立的方法表明具有良好的重现性。可用于复方五仁醇胶囊质量评价。     

复方五仁醇胶囊含药血清中木脂素类成分的UPLC-MS/MS分析

目的:分析复方五仁醇胶囊大鼠灌胃后消化吸收进入血液的木脂素类成分,以便与该制剂血清药理学研究相结合,阐明其药效物质基础。方法:采用UPLC-MS/MS方法,比较复方五仁醇胶囊含药血清、体外制剂、空白血清及对照品提取离子流色谱图(EIC),并通过质谱图相关离子峰分析,确认进入血液的木脂素类成分。结果:发现制剂中存在的五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素5个木脂素类成分进入血液。结论:这5个木脂素类成分很可能是复方五仁醇胶囊体内直接作用物质的重要组成部分,结合血清药理学作进一步研究有助于阐明该制剂药效物质基础。     

复方五仁醇胶囊血清药化学研究(Ⅱ)

目的对复方五仁醇胶囊含药血清中的药源性成分作进一步鉴定,并测定主要成分的量。方法HPLC-DAD和UPLC-MS/MS检测相结合进行成分鉴定,HPLC-UV法测定主要木脂素类的量。结果HPLC-DAD检测鉴定出含药血清中8个制剂原形成分中的7个,分别为五味子醇甲、戈米辛J、五味子醇乙、去氧五味子素、戈米辛N、五味子乙素和五味子丙素,5个代谢产物的紫外光谱图具有联苯环辛烯类木脂素的吸收特征;UPLC-MS/MS检测结果显示含药血清中除存在五味子醇甲等7个木脂素类成分外,还含有五味子酯甲;含药血清中五味子醇甲、五味子醇乙、去氧五味子素、五味子乙素的质量浓度分别为(8.1453±1.0202)、(6.6045±1.3414)、(0.5601±0.1375)、(5.9330±0.9666)μg/mL。结论复方五仁醇胶囊含药血清中的药源性成分主要有木脂素及其代谢产物。     

复方五仁醇胶囊的研制

我院研制的纯中药制剂复方五仁醇胶囊(主要成分:五仁醇浸膏,柴胡,叶下珠,三七),具有保护肝细胞、降低转氨酶等作用,用于急慢性肝炎的治疗,效果良好.现将其制备工艺、质量标准研究结果报道如下.     

复方五仁醇胶囊治疗慢性乙型肝炎78例临床疗效观察

目的观察复方五仁醇治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法选择慢性乙型肝炎患者156例(HBeAg阳性或HBV-DNA阳性,伴有ALT升高),其中复方五仁醇组和护肝片组各78例。用药方法为复方五仁醇4粒/次,3次/d,口吸取;护肝片4片/次,3次/d,口吸取,疗程均为2~4周。观察治疗前后乏力、纳差、肝区疼痛、肝脾肿大、ALT及HBeAg、HBV-DNA的变化。结果乏力、纳差的消失率两组无显著差异(P>0.05);对减轻肝区疼痛、肝脾肿大回缩的疗效,治疗组明显优于对照组(P<0.01);两组治疗后ALT均明显下降,治疗组优于对照组(P<0.01);HBeAg及HBV-DNA阴转率,治疗组均优于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论复方五仁醇具有明显改善慢性乙型肝炎患者临床症状及肝功能的作用,具有明显的降酶及一定的抗病毒作用,同一般降酶药相比具有更全面的疗效。     

复方五仁醇胶囊血清药化学研究

目的对复方五仁醇胶囊进行血清药化学研究,以便与该制剂血清药理学研究结果进行谱效关系分析,阐明其药效物质基础。方法以已经建立的高效液相色谱指纹图谱分析方法,比较复方五仁醇胶囊含药血清色谱图和空白血清色谱图,分辨该制剂给药后血清中产生的药源性成分,进一步比较全方制剂及各缺味、单味制剂给药后的血清色谱图,分析血中药源性成分的来源,并通过对照品比对对部分成分进行鉴定。结果ig给药后血清中产生药源性成分13个,13个成分全部来自君药五味子,其中8个为制剂原形成分,包括五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素,其余5个为代谢产物。结论复方五仁醇胶囊体内直接作用物质很可能出自血清中的13个药源性成分,结合血清药理学对其作进一步研究有助于阐明该制剂药效物质基础。     

复方五仁醇胶囊入血成分对原代培养肝细胞损伤的保护作用

目的:研究复方五仁醇胶囊含药血清对原代培养肝细胞损伤的保护作用。方法:建立CCl4诱导的大鼠肝细胞损伤模型,采用L8(27)正交设计给药和取血方案,制备大鼠含药血清或血浆,并考察含药血清或血浆对MTT和培养上清液中ALT的影响。结果:复方五仁醇胶囊含药血清或血浆对CCl4诱导的肝细胞损伤具有保护作用,不同给药方式及取血时间对作用有显著影响,且两者之间有交互作用,血浆略优于血清,动物是否造模对作用无明显影响。结论:复方五仁醇胶囊连续灌胃给药3天,每天上下午各给药1次,末次给药2h后获得的大鼠血浆对CCl4诱导的肝细胞损伤有良好的保护作用。     

复方五仁醇胶囊保肝作用的实验与临床研究

目的 考察复方五仁醇胶囊对损伤肝细胞的保护作用及对慢性肝炎的治疗效果.方法 以SD大鼠为供体制备复方五仁醇胶囊含药血清,CCl4诱导大鼠原代培养肝细胞损伤模型,采用血清药理学方法考察含药血清对损伤肝细胞增值(MTT法)和培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的影响;将446例慢性乙型肝炎患者随机分成治疗组和对照组,以临床症状、体征、肝功能为主要指标,考察复方五仁醇胶囊的治疗效果.结果 与模型组比较,含药血清组MTT值明显升高,上清液中ALT均显著下降,体系中加入10%含药血清效果最佳;治疗组、对照组临床症状、体征及肝功能指标均明显得到改善,复方五仁醇胶囊的疗效优于阳性对照药护肝片.结论 复方五仁醇胶囊对肝细胞损伤具有明显保护作用,对慢性肝炎有较好治疗作用.     

复方五仁醇胶囊入血成分分析及制剂中相关成分含量测定

目前,多数中药制剂是以测定一个或几个体外成分的含量为质量控制指标,是否是药效的代表性成分尚待商榷。中药虽成分众多,但只有那些被消化吸收进入血液的成分或其代谢产物才有产生药效的可能,中药药效成分研究应该以服用药物后的血清(即含药血清)为入手点[1],中药及其制剂质量控制指标也应该以真正能够被吸收入血的成分为对象[2]。复方五仁醇胶囊由五味子、柴胡、叶下珠、三七4味药组成,其中五味子为君药,是一种治疗急慢性肝炎的科研制剂[3],该制剂组方简单,疗效确切。先期发表的论文建立了该制剂中五味子乙素的含量测定方法[4],此次我们选…     

多指标正交试验优选复方五仁醇胶囊含药血清的制备方法

目的 药效与化学指标相结合优选复方五仁醇胶囊含药血清制备方法.方法 建立CCl_4 诱导的大鼠肝细胞损伤模型,采用L_8(2~7)正交设计给药和取血方案,制备大鼠含药血清或血浆,考察含药血清或血浆对损伤肝细胞增值(MTT)和培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的影响,高效液相法测定含药血清或血浆中五味子乙素含量,并对结果综合加权评分和方差分析.结果 给药方式及采血时间对结果有显著影响,且两者之间有交互作用,血浆优于血清,但综合加权评分无统计学意义,动物是否造模无明显影响.结论 复方五仁醇胶囊含药血清较优的制备方法为正常大鼠连续ig给药3 d,上、下午各1次,末次给药后2 h采血分离血浆.     

复方五仁醇胶囊含药血清指纹图谱研究

 目的建立复方五仁醇胶囊含药血清指纹图谱,分辨该制剂给药后血中产生的共性的药源性成分,并对这些成分的来源作初步分析,为该制剂血清药化学研究奠定基础。方法大鼠分组灌胃给药制备10批含药血清,高效液相色谱法建立其指纹图谱,并与相同条件下测定的体外制剂和对照品的图谱比对,对其共有峰归属进行分析。结果标出10批含药血清色谱图除血清固有成分外的共有峰13个,其中8个为制剂原形成分,5个为代谢产物,鉴定出3个成分。结论本研究建立的方法准确、可靠,可用于复方五仁醇胶囊血清药化学研究。     

复方五仁醇胶囊、五酯胶囊对他克莫司血药浓度影响及肝损伤保护作用的比较

目的比较复方五仁醇胶囊、五酯胶囊对他克莫司血药浓度影响及肝损伤保护作用。方法 72只大鼠随机分成他克莫司组(1.2 mg/kg)、他克莫司+复方五仁醇胶囊组(1.2 mg/kg+0.1 g/kg)、他克莫司+五酯胶囊组(1.2 mg/kg+0.05 g/kg)、空白对照组,每组18只。在第7、14、21天给药4 h后,每组随机抽取6只大鼠进行腹主动脉取血,测定他克莫司血药浓度和血清ALT水平。结果与他克莫司组比较,给药后2个联合用药组他克莫司血药浓度显著升高(P0.05,P0.01)。与空白对照组比较,给药后他克莫司组ALT水平显著升高(P0.01);与他克莫司组比较,给药后他克莫司+复方五仁醇胶囊组ALT水平显著降低(P0.05,P0.01),而他克莫司+五酯胶囊组无显著差异(P0.05);与他克莫司+五酯胶囊组比较,给药7 d后他克莫司+复方五仁醇胶囊组其水平显著降低(P0.01),而给药14、21 d后无显著差异(P0.05)。结论复方五仁醇胶囊和五酯胶囊均可提高他克莫司血药浓度,以前者效果更优。他克莫司可引起大鼠肝损伤,而联用复方五仁醇胶囊时有所减轻,但联用五酯胶囊时效果不明显。     

基于Q-Marker成分定性与定量的双黄连制剂质量评价

目的:基于中药质量标志物(Q-Marker)的新概念,系统评估中药复方双黄连制剂(胶囊、颗粒、口服液)质量,建立超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)快速鉴定双黄连制剂中的主要化学成分,根据鉴定化学物质基础分析其生源途径、成分特异性及相关药理作用,建立HPLC-DAD同时定量分析双黄连制剂中环烯醚萜苷类、有机酸类、木脂素类和黄酮类共计22种主要活性成分(新绿原酸,绿原酸,咖啡酸,隐绿原酸,马钱苷,獐牙菜苷,断氧化马钱苷,芦丁,野黄芩苷,木犀草苷,连翘脂苷A,松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷,异绿原酸B,异绿原酸A,异绿原酸C,黄芩苷,连翘苷,木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷,汉黄芩苷,黄芩素,汉黄芩素,千层纸素A)的含量,结合双黄连活性成分现代药理研究与化学计量学分析结果,为双黄连质量Q-Marker的制定提供依据。方法:定性分析采用UPLC-Q-TOF-MS,Waters CORTECS C18色谱柱(2.1 mm×100mm,1.6μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)梯度洗脱,柱温45℃;飞行时间质谱,采用负离子模式扫描。定量分析采用HPLC-DAD,安捷伦Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1%甲酸和3%甲醇的水溶液(B)梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温30℃。二极管阵列检测器的检测波长为240,276,326 nm。结果:UPLC-Q-TOF-MS经过质谱精确质量数及对照品比对,准确鉴定双黄连制剂中的22种化学成分(包括环烯醚萜苷类、有机酸类、木脂素类和黄酮类),并以其为基础分析Q-Marker依据,四类成分均具有代表性,建立的HPLC-DAD同时测定22种双黄连制剂主要成分的定量分析方法,在考察的浓度范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r0.999 0);回收率均在95%~106%,RSD 2.0%~4.6%,并且通过化学计量主成分分析结合Marker现代药理研究情况,选择双黄连制剂的Q-Marker。结论:通过UPLC-Q-TOF-MS联用技术,为鉴定双黄连制剂的化学成分提供了一种快速、高效的定性分析方法;建立的HPLC-DAD同时测定双黄连中4大类共22种活性成分的定量分析方法准确,可靠,进一步筛选作为双黄连制剂的Q-Marker成分,为全面评价双黄连制剂的质量提供参考。     

复方五仁醇胶囊对他克莫司大鼠体内药动学的影响

目的比较复方五仁醇胶囊(CWC)和五酯胶囊(WZC)及CWC单次和长期给药对他克莫司(FK506)在大鼠体内药动学的影响。方法 24只大鼠随机分成FK506组、CWC+FK506组、WZC+FK506组和CWC7d+FK506组,每组6只。FK506组、CWC+FK506组和WZC+FK506组分别一次性ig给予FK506、CWC+FK506、WZC+FK506,CWC7d+FK506组前6 d连续ig给予CWC,第7天ig给予CWC和FK506。各组大鼠于给药前和给药后不同时间点(CWC7d+FK506组为末次给药前后)眼眶取血,测定FK506血药浓度,计算FK506主要药动学参数。结果与FK506组比较,WZC+FK506组和CWC+FK506组大鼠FK506血药浓度峰值(Cmax)明显提高(P0.05、0.01),药-时曲线下面积(AUC0～t)显著增加(P0.01),体内滞留时间(MRT0～t)明显延长(P0.05、0.01),表观分布容积(V/F)及药物消除率(CL/F)显著减少(P0.01);与WZC+FK506组比较,CWC+FK506组大鼠FK506 AUC0～t显著增加(P0.01),CL/F明显减少(P0.05)。与CWC+FK506组比较,CWC7d+FK506组大鼠FK506Cmax显著提高(P0.01),血药浓度达峰时间(tmax)明显缩短(P0.05),AUC0～t明显增加(P0.05),CL/F明显减少(P0.05)。结论 CWC和WZC均可提高FK506Cmax,增加AUC0～t,延长MRT0～t,减小V/F和CL/F;在增加FK506 AUC0～t、减少CL/F方面,CWC优于WZC;在提高Cmax、增加AUC0～t、缩短tmax方面,CWC长期给药优于单次给药。     

复方天麻胶囊定性定量方法的研究

目的建立复方天麻胶囊的定性定量方法.方法采用薄层色谱法鉴别制剂中的五味子和麦冬,采用高效液相色谱法测定天麻中天麻素的含量.结果在薄层色谱中五味子和麦冬能得到很好的鉴别;天麻素在(0.121～1.93)μg线性关系良好,平均回收率为99.2%,RSD为2.O%(,n=9).结论该方法准确、简便、重复性好,可用于复方天麻胶囊的质量控制.     

基于LC-MS联用的杜仲主要化学成分定性及定量分析

目的:建立超高效液相串联质谱(UPLC-MS/MS)对杜仲主要成分定量及定性的方法。方法:采用UPLC-QE高分辨质谱负离子监测模式进行定性分析;采用UPLC-MS/MS法,负离子多反应监测(MRM)模式进行含量测定,分析杜仲中松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇单葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、桃叶珊瑚苷、京尼平苷、京尼平苷酸、车叶草苷共7个主要成分的含量。结果:定性共鉴定出98个化合物,包括木脂素类38个,环烯醚萜类13个,黄酮类9个,苯丙素类15个,酚类7个,其余化合物共16个;定量分析在考察的浓度范围内测定的成分线性关系良好(r0.995 7),精密度RSD3.42%,重复性RSD4.32%,回收率(n=9)均在91.04%～108.15%,RSD均小于4.89%。结论:该方法灵敏度高、重复性好,分析快速、准确、可靠,可用于定性、定量检测杜仲中主要化学成分,为综合评价杜仲的质量提供参考。     

HPLC测定复方关节炎胶囊中维生素B1、 吡罗昔康和醋酸泼尼松

目的:建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定复方关节炎胶囊中维生素B1、吡罗昔康和醋酸泼尼松3种西药成分。方法:采用HPLC-DAD分析技术确定复方关节炎胶囊中3种西药成分,并对其进行含量测定。色谱柱Phenomenex Luna ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(38∶62),柱温室温,流速1.0 mL.min-1,检测波长254 nm。结果:复方关节炎胶囊中检出维生素B1、吡罗昔康和醋酸泼尼松3种西药成分含量分别为22.6,13.8,7.12mg.g-1。结论:方法简便,结果准确,可作为中药制剂中西药成分的检测分析方法。     

复方三芪丹胶囊质量标准的研究

目的:建立复方三芪丹胶囊的质量控制方法.方法:采用薄层色谱(TLC)法对方中所含的三七、黄芪、丹参、桑椹进行定性鉴别;采用高效液相色谱法–蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定方中所含黄芪甲苷的含量.结果:薄层色谱法可鉴别出三七、黄芪、丹参、桑椹,且阴性对照无干扰;黄芪甲苷在1.016～5.08 μg范围内呈良好线性关系,r=0.999 7,平均回收率为98.09%,RSD= 1.15 %.结论:本方法操作简便、准确可靠,重现性好、可作为复方三芪丹胶囊的质量控制方法.