基于超滤-HPLC-MS/MS技术的苦荞提取物抑制线粒体肿胀活性研究

为了阐明苦荞对肝脏线粒体肿胀的抑制作用和物质基础，采用超滤技术，结合HPLC-MS/MS分析，研究苦荞中靶向肝脏线粒体发挥活性的功能成分。结果表明，苦荞含有丰富的总酚和总黄酮，其中以乙醇-麸皮粉提取物(YF)中总酚和总黄酮含量最高，为(32.48±0.37)mg GA/g DW和(63.06±0.21)mg rutin/g DW,丙酮和水提取物次之。同时，YF对FeSO₄-VC诱导的肝脏线粒体肿胀抑制效果最好，超滤-HPLC-MS/MS分析发现，苦荞YF中发挥肝脏线粒体肿胀抑制作用的主要活性成分为槲皮素、山奈酚、大黄素和L-苹果酸，其中槲皮素和山奈酚的效果优于大黄素和L-苹果酸。细胞实验进一步证实，槲皮素和山奈酚可有效恢复高脂诱导的线粒体膜电位下降，降低ROS水平，发挥线粒体保护作用。     

甜荞麦与苦荞麦的营养及功能活性成分对比分析

目的:对比研究甜荞和苦荞籽粒部分营养组分及功能活性成分的差异。方法:以7种苦荞和6种甜荞籽粒为原料,分别测定其中基本组分水分和灰分;营养组分氨基酸、脂肪酸、淀粉、蛋白质以及功能组分黄酮、多酚和芦丁的含量。结果:甜荞中的水分含量要显著高于苦荞(p0.05),而灰分含量则低于苦荞。甜荞和苦荞淀粉、脂肪酸和蛋白质的含量和分布丰富,但两者无显著性差异(p0.05)。苦荞总黄酮和多酚含量分别是125.33 mg/g和107.24 mg/g,分别是甜荞的15.23倍和2.68倍。苦荞还含有丰富的芦丁、槲皮素、异槲皮素和山奈酚等功能活性物质。甜荞中的低聚糖含量,包括水苏糖和棉籽糖均显著高于苦荞(p0.05)。结论:甜荞和苦荞的氨基酸、脂肪酸、淀粉等营养组分含量均无显著性差异。但功能性组分黄酮、多酚和功能性低聚糖等含量方面,两者存在显著性差异。     

液质联用分析测定苦荞黄酮

本文采用RP-HPLC-DAD/MS在苦荞籽粒中发现了山奈酚;并对苦荞中的总黄酮和其中的四种主要黄酮醇:槲皮素-3-芸香糖葡萄糖苷(Ⅰ)、芦丁(Ⅱ)、山奈酚-3-芸香糖苷(Ⅲ)、槲皮素(IV)进行了定量。总黄酮含量为0.174%～4.614%,(I)、(II)、(III)、(IV)在壳、麸皮、外层粉、心粉、山西苦荞粉中的含量分别为0.0153%～0.0448%,0.0816%～4.1054%,0.0043%～0.1330%,0.0062%～0.5332%。     

不同大孔树脂苦荞黄酮富集品中4种主要黄酮的定量检测

此次试验建立了高效液相色谱同时定量检测不同大孔树脂苦荞麸皮黄酮富集品中芦丁、烟花苷、槲皮素和山柰酚4种黄酮类化合物含量的方法。分别使用ADS-7、AB-8、D101型大孔树脂富集苦荞麸皮黄酮,采用Intersustain C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈和0.2%磷酸水溶液作为梯度洗脱的流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长360 nm。结果显示,芦丁、烟花苷、槲皮素和山柰酚分别在25~400,1.25~20,9.375~150和0.625~10μg/mL的浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.48%,100.86%,100.93%和102.27%。结果表明,ADS-7型大孔树脂纯化的苦荞麸皮总黄酮含量较AB-8和D101更高,该方法操作方便、准确性高、重复性好。     

紫红曲霉发酵对黑苦荞的营养及主要功能性活性成分影响分析

黑苦荞黄酮、酚酸等活性组分含量较高,而微生物发酵能进一步促进植物基质活性组分再提升。本研究采用紫红曲霉发酵黑苦荞,以原料苦荞(TB)、发酵苦荞(FTB)、发酵苦荞溶剂脱脂物(FTB-C)、发酵苦荞超临界脱脂物(FTB-S)为试样,从感官、营养成分、微生物、真菌毒素、主要功能性活性成分等多角度剖析和挖掘发酵对苦荞基质品质提升的有效性、两种脱脂方法对其活性组分的影响。结果表明:发酵后淀粉含量有明显降低,发酵过程安全可行且能显著改善和提升黑苦荞品质(P<0.05),总酚和总黄酮含量有大幅度提升,其中已测定酚酸类物质没食子酸、绿原酸、对羟基苯甲酸、阿魏酸含量均显著增加且FTB中新增反式肉桂酸含量达到117.45 mg/100 g,黄酮类物质槲皮素、山奈酚含量也有提升,其中总芦丁含量从2 636.71 mg/100 g富集到8 171.51 mg/100 g。脱脂过程对多酚和黄酮含量有一定的影响,其中FTB-C损失较大但其含量也明显高于TB。     

蛹虫草发酵苦荞菌质的成分分析及抗氧化活性的研究

以苦荞为培养基质,对蛹虫草固体发酵前后的营养和功能成分及抗氧化活性进行测定,分析各种物质含量及抗氧化活性变化。结果表明,发酵苦荞菌质总氮、总糖、可溶性总糖、还原糖含量显著[总氮、总糖(p<0.01),可溶性总糖、还原糖(p<0.05)]低于未发酵基质,游离氨基酸含量有极显著性增加(p<0.01),粗多糖、总黄酮、总酚、花色苷、维生素C、GSH(谷胱甘肽)、SOD(超氧化歧化酶)等功能成分均显著(粗多糖p<0.05,其余均p<0.01)高于未发酵基质。苦荞ABTS[2,2′-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)]体外抗氧化实验表明各萃取(石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部及水部)均具有一定的抗氧化作用,当浓度为10mg/mL时,乙酸乙酯萃取部和水部与TBHQ(叔丁基对苯二酚)、BHT(2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚)及VC(维生素C)清除率相当,达100%。对抗氧化活性最高的水部和乙酸乙酯萃取部进行HPLCMS/MS分析,结果显示乙酸乙酯萃取部含有芦丁、槲皮素及含有槲皮素结构碎片、儿茶素结构碎片的物质;水部含有槲皮素、芦丁、山奈酚-3-芸香糖苷及含有槲皮素结构碎片、山奈酚结构碎片的物质。     

高良姜中4种黄酮化合物的体外抗氧化能力及抑菌活性研究

从高良姜中提取纯化得到高良姜素、山奈素、山奈酚和槲皮素,以该4种黄酮化合物为原料,对比分析其抗氧化活性,及其对6种食源性腐败菌的抑制作用。结果表明,在抗氧化方面,槲皮素表现出较好的抗氧化活性,山奈酚和山奈素次之,高良姜素最低,但高良姜素在ABTS自由基清除试验中活性与山奈酚和山奈素相似。在抑菌方面,金黄色葡萄球菌对4种黄酮化合物较为敏感,其中枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌对槲皮素较为敏感(MIC值分别为1.25,2.50mg/mL,MBC值均为2.5mg/mL);大肠杆菌、白色念珠菌、黑曲霉和绿脓杆菌对4种化合物敏感性低,抑菌活性均不明显。     

荞麦麸皮提取物对α- 葡萄糖苷酶活性的影响

本实验分别用乙醇和水从荞麦麸皮中提取到了以荞麦黄酮为主要成分的乙醇粗提物和以荞麦糖醇为主要成分的水粗提物,并将乙醇粗提物经高压水解,获得乙醇粗提物的水解物。研究这3 种提取物对α- 葡萄糖苷酶活性的影响,并以阿卡波糖和D- 手性肌醇为参照。比色法和液相色谱法测得,苦荞麸皮乙醇粗提物的主要成分为苦荞黄酮,黄酮含量为74.0%,其中86.5% 为芦丁,槲皮素和异槲皮素微量;乙醇粗提物经高压水解后,总黄酮含量为76.2%,其中,芦丁、槲皮素和异槲皮素分别占60.6%、25.2%、13.5%。甜荞麸皮水粗提物的主要成分为D- 手性肌醇、肌醇,其含量分别为43.6%、2.9%。3 种荞麦麸皮提取物均具有抑制α- 葡萄糖苷酶的活性,作用强度分别为：乙醇粗提物的水解物＞乙醇粗提物＞水粗提物, IC50 分别为0.0085、0.0578、17.3551g/L。苦荞黄酮经高压水解后,抑制α- 葡萄糖苷酶活性显著提高,与阿卡波糖IC50(0.0335g/L)相比,约是它的1/4;水粗提物在低质量浓度下抑制效果不明显,在较高的质量浓度下则表现出抑制活性。     

枸杞晒干过程中黄酮类化合物和苯丙氨酸解氨酶活性的变化

本实验在枸杞表面涂抹Na2CO3、Na2SO3溶液作为除蜡剂,以不涂抹除蜡剂为空白对照,研究晒干过程中总黄酮和苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonialyase,PAL）活性的变化,并利用高效液相色谱（highperformance liquid chromatography,HPLC）法检测枸杞中山奈酚、芦丁和槲皮素含量的变化。对总黄酮含量和PAL活性、3 种不同处理方式条件下3 种黄酮类化合物含量之间进行相关性分析。结果表明：Na2CO3、Na2SO3和空白对照处理下的枸杞在晒干过程中PAL活性、总黄酮含量呈现持续上升的趋势,山奈酚、芦丁和槲皮素含量均呈现先增加后下降趋势;同一处理下的PAL活性和总黄酮含量变化呈显著极强正相关,山奈酚、芦丁和槲皮素含量变化呈正相关;除蜡剂影响同一干燥时间下PAL活性、总黄酮、山奈酚、芦丁和槲皮素含量的大小,并且其达到最高值的时间也受除蜡剂的影响。     

甜荞和苦荞籽中多酚存在形式与抗氧化活性的研究

目的:对比研究两种荞麦籽粒在多酚物质分布、存在形式和抗氧化活性上的差异。方法:以甜荞、苦荞的麸皮和内粉为试材,分别测定其中自由态多酚(free phenolics)、结合态多酚(bound phenolics)、黄酮及芦丁的含量,并利用ABTS+·、DPPH·清除实验及抑制β-胡萝卜素氧化模型分别考察其抗氧化活性。结果:各样品中总酚、总黄酮含量由高到低依次为:苦荞麸粉>苦荞粉>甜荞麸>甜荞粉,各样品间存在显著性差异,其中苦荞麸的总酚与总黄酮含量分别为2433.98mgGAeq/100gDW、3306.60mgRutineq/100gDW,苦荞中芦丁含量远高于甜荞,其中苦荞粉、麸中芦丁含量分别是甜荞对应部位的183～275和136～207倍,但同种荞麦麸、粉间芦丁含量无显著差异。其次,荞麦多酚主要以自由酚形式存在,苦荞粉与甜荞粉自由酚占总酚比例分别为96%、93%,苦荞麸与甜荞麸自由酚占总酚比例分别为95%、88%。此外,荞麦抗氧化能力与多酚含量之间呈线性相关(P>0.90),且苦荞麦麸抗氧化活性最强。结论:荞麦麸多酚含量明显高于荞麦粉,且主要以自由酚形式存在,它们具有较强的抗氧化活性,是优质的功能性食品资源,尤其是苦荞麸。     

Nutritional composition and flavonoids content of flour from different buckwheat cultivars

Thirty nine buckwheat cultivars were collected from China, of which twenty one were tartary buckwheat and others were common buckwheat. Flour samples from these cultivars were analysed for colour properties, nutritional composition and flavonoid content. Buckwheat cultivars exhibited high variations for each of these parameters. The flour of common buckwheat showed a higher whiteness index than that of tartary buckwheat and contained very low levels of flavonoids. On average, the tartary buckwheat flour contained a higher level of ash (2.38%) and lower levels of total starch (70.22%), amylose (22.32%), resistant starch (17.66%) than the common buckwheat flour (2.17%, 73.69%, 23.01%, 18.69% respectively) (P < 0.05) whereas the contents of proteins, fats and crude fibres of the tartary buckwheat flour were similar to those of common buckwheat flour. The Mei‐Hua‐Shan tartary buckwheat flour contained the highest level of total flavonoids and quercetin (22.74 mg g^?1 and 2.38 mg g^?1, respectively).     

Changes in phytochemical compositions,antioxidant and α-glucosidase inhibitory activities during the processing of tartary buckwheat tea

This study focused on the evaluation of changes in phytochemical compositions, antioxidant and α-glucosidase inhibitory activities during the processing of tartary buckwheat tea. Soak-treating tartary buckwheat significantly decreased the contents of total starch and rutin, whereas significantly increased the contents of quercetin, kaempferol, total flavonoid, and total phenolic compounds. In steam-treating soaked tartary buckwheat for 40–60 min, the contents of total starch, protein, crude fat, isoquercitrin, quercetin, kaempferol, total flavonoid and total phenolic compounds significantly decreased, whereas the content of rutin significantly increased. The reaction of rutin degrading might be catalyzed in soaking processing, and a catalytic reverse shift reaction of rutin-synthesizing might take place in steaming processing. The process of drying and roasting significantly decreased the contents of total starch, rutin, total flavonoid, and total phenolic compounds. The total phenolic content of collected tartary buckwheat materials positively correlated with the antioxidant and α-glucosidase inhibition activities.     

Comparison of flavonoids profile in sprouts of common buckwheat cultivars and wild tartary buckwheat

In this study, major types of flavonoids in 7‐day sprouts of five common buckwheat cultivars grown in Poland (Hruszowska, Kora, Panda, Luba and Emka) and wild tartary buckwheat were investigated. Results demonstrated that sprouts of common buckwheat cultivars and wild tartary buckwheat contained both known and a newly discovered flavonol: quercetin 3‐O‐galactosyl‐rhamnoside. An exceptionally high content of this flavonoid was found in cotyledons of wild tartary buckwheat (30.79 ± 0.14 mg g^?1 DW), exceeding about 10 times level of rutin (3.16 ± 0.07 mg g^?1 DW). The results are not consistent with the data published so far on the content of flavonoids in sprouts of tartary buckwheat. Higher levels of flavonoids were measured in cotyledons than in hypocotyls with the exception of anthocyanins, which were present in higher amounts in hypocotyls. Cotyledons of common buckwheat sprouts were rich in C‐glycosides of luteolin and apigenin, the total content of which exceeded ca. 5 times the concentration of rutin.     

苦荞黄酮提取物体外清除自由基活性的研究

苦荞黄酮粗取物经大孔吸附树脂纯化得到精提物,以芦丁、Vc为对照,对精制前后苦荞黄酮提取物对超氧阴离子自由基(O-2·)、羟自由基(OH·)、DPPH·自由基、H2O2以及NO-2的清除效果进行了体外研究。结果表明,苦荞黄酮提取物具有较强的清除自由基能力,而且经大孔吸附树脂纯化后提取物的抗氧化活性几乎不受影响,而且对部分自由基的清除作用有一定的提高。     

液态发酵对西农9940苦荞主要成分及其抗氧化活性的强化作用

利用液态发酵技术富集苦荞渣中的营养物质,测定分析西农9940苦荞粉及其经液态发酵后所得苦荞渣的蛋白质、粗脂肪、矿物质、粗纤维、灰分、总黄酮、总酚含量以及氨基酸和脂肪酸组成,并以总还原能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-dipheny1-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基和2,2'-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)radical,ABTS+·)清除能力为指标对抗氧化活性进行综合评价。结果表明苦荞渣的蛋白质、粗脂肪、灰分、粗纤维、矿物质含量均显著提高,且液态发酵过程不改变苦荞粉的氨基酸及脂肪酸组成。苦荞渣的总酚含量为1 343.22 mg/100 g,显著高于苦荞粉559.76 mg/100 g,总黄酮含量为2 186.06 mg/100 g,显著低于苦荞粉2 464.10 mg/100 g,芦丁和槲皮素含量的测定也进一步证明发酵后苦荞渣的总黄酮含量显著降低,但其总还原能力、DPPH自由基和ABTS+·清除能力显著高于苦荞粉,说明经过发酵后苦荞渣的抗氧化能力更强。     

荞麦黄酮和荞麦糖醇对胰脂肪酶的抑制作用

目的：了解荞麦麸皮中活性成分抑制胰脂肪酶的活性。方法：以苦荞麸皮醇提物（主要成分为芦丁）、醇提残渣水解物（主要成分为芦丁、槲皮素和异槲皮素的混合物）和甜荞麸皮水提物（主要成分为荞麦糖醇）为实验材料,测定3 个样品对胰脂肪酶的抑制作用,以市售胰脂肪酶抑制剂--奥利司他为参照;通过研究底物、抑制剂和酶的加入顺序对抑制率的影响,初步确定醇提水解物的抑制机理。结果：实验材料对胰脂肪酶的抑制作用依次为奥利司他＞醇提水解物＞醇提物＞水提物,半数抑制浓度（IC50）分别为0.47、1.94、2.53、17.6 mg/mL;醇提水解物的抑制作用机理主要是通过苦荞黄酮与底物相互作用,从而阻碍了底物与酶的作用,属于竞争性抑制。结论：荞麦黄酮（即醇提物和醇提水解物）对胰脂肪酶有抑制活性;醇提残渣经高压水解后更有利于其对胰脂肪酶的抑制作用;荞麦糖醇（即水提物）在低质量浓度下抑制效果不明显,在较高的质量浓度下则表现出抑制活性。     

苦荞黄酮抗氧化作用的研究

苦荞黄酮对猪油和亚油酸所起的抗氧化效果不同,在猪油体系中,含槲皮素较多的苦荞黄酮抗氧化作用强;在亚油酸体系中,苦荞黄酮各组分协同抗氧化效果好。     

Composition and antioxidative properties of the flavonoid-rich fractions from tartary buckwheat grains

Tartary buckwheat, a healthy food, is associated with a reduced risk of certain human chronic diseases; however, its bioactive components are unknown. This study used high performance liquid chromatographyphotodiode array-mass spectroscopy (HPLC-PDA-MS) to identify the flavonoids in flavonoid-rich fractions (FRFs) from tartary buckwheat grain and tested antioxidative capacity of FRFs to confirm their bioactivity. Ultraviolet (UV) absorption and electrospray ionization (ESI⁻) MS/MS spectra identified several flavonols in the embryo, endosperm, testa, and hull, including the predominant flavonoid rutin and minor flavonoids quercetin 3-O-rutinoside-3′-O-β-glucopyranoside, kaempferol 3-O-rutinoside, and quercetin. Tartary buckwheat FRFs extended the Rancimat induction period of lard less than common buckwheat FRF did, while their scavenging rate of DPPH free radicals exceeded that of common buckwheat FRF and rutin. These results indicate that tartary buckwheat FRFs from the grains have potential health benefits.     

响应面法优化苦荞酒糟黄酮提取工艺的研究

苦荞酒糟是苦荞酒加工的副产物,苦荞酒糟中含有丰富的黄酮组分,采用食用乙醇提取酒糟黄酮还原到苦荞蒸馏酒中,是一种资源合理利用方法.为确定采用乙醇回流法提取苦荞酒糟中黄酮类成分的最佳工艺条件,以黄酮得率为指标,采用响应面法对主要工艺参数进行优化并得到回归模型.方差分析结果表明:回归模型较好地反映了苦荞酒糟黄酮得率与乙醇体积分数、提取时间和液固比的关系;最优工艺条件为乙醇体积份数为70％vol,提取时间3.3h,液固比为24∶1 (mL∶g).此工艺条件下提取酒糟黄酮得率为1.642g/100g,回收率为93.3％,回归模型的预测值与实际值之间具有较好的拟和度.     

苦荞黄酮抗氧化作用的研究

苦荞黄酮对猪油和亚油酸的抗氧化效果不同.在猪油体系中,含槲皮素较多的苦荞黄酮抗氧化作用较强;在亚油酸体系中,苦荞黄酮各组分协同抗氧化效果较好.