含吡咯里西啶生物碱中成药潜在风险评估

吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)是一种双环吡咯啶生物碱,因多数具有肝毒性,又称肝毒性吡咯里西啶生物碱(hepatotoxic PAs)。PAs广泛存在于菊科、豆科、紫草科的多种药用植物中。《中国药典》2020年版共收载含有PAs的药材8种,包括千里光Senecionis Scandentis Herba、款冬花Farfarae Flos、佩兰Eupatorii Herba、紫草Arnebiae Radix等,涉及成方制剂数十种。此外,《卫生部药品标准》《药品注册标准》等收载含PAs制剂尚有200余种。除千里光药材外,其他含PAs中药及其制剂均没有关于PAs类成分的安全限量标准,其临床用药安全存在极大的风险。对含PAs中成药的研究概况进行了系统总结、分析,以期为此类中成药的临床用药安全提供警示和参考。     

含吡咯里西啶生物碱植物的特殊毒性及致毒机制研究进展

吡咯里西啶类生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)是一类在植物中广泛分布的成分,含有吡咯里西啶类生物碱的植物在民间被作为草药和植物茶饮品应用的现象极为普遍.然而,研究发现吡咯里西啶类生物碱具有明确的毒性作用,其中的肝毒性早已引起人们的关注,而生殖毒性、致突变和致癌性方面的毒性却研究较少.本文主要就PAs的生殖毒性、致突变和致癌方面的特殊毒性进行综述,主要总结了20世纪50年代以来关于PAs特殊毒性的临床报道及动物实验研究,并对现有研究所认为的影响PAs特殊毒性的因素及PAs特殊毒性产生的机制进行了归纳.     

含吡咯里西啶生物碱的山紫菀类药材的分子鉴别

目的：采用分子生物学的方法对含吡咯里西啶生物碱(HPAs)与不含吡咯里西啶生物碱的山紫菀类药材(橐吾属植物)进行鉴剐。方法：采用CTAB法提取9种不同基源的山紫菀类药材的总DNA，进行PCR扩增和测序，并对序列进行系统分析。结果：通过提取、扩增和测序，得到了9种橐吾属植物的nrDNA ITS区间序列，统计分析结果得到了9种植物的遗传距离和转换、颠换数，分支分类结果得到了系统树。结论：9种橐吾属植物nrDNA ITS区间序列的分析结果表明了两类山紫菀类药材有着明显的区别，是两类药材鉴别的有效方法之一。     

肝毒吡咯里西啶生物碱与中草药

结合研究工作，就含肝毒吡咯里西啶生物碱中草药的安全性、质量控制、合理开发利用及从中草药中寻找拮抗、治疗吡咯里西啶生物碱肝脏毒的活性成分等方面提出了一些思路。     

单麻叶千里光中肝毒吡咯里西啶生物碱的分离与鉴定

目的:研究菊科千里光属植物单麻叶千里光Senecio cannabifolius var.integrilifolius的肝毒性吡咯里西啶生物碱.方法:运用多种色谱方法进行分离纯化,应用现代波谱学分析方法进行结构鉴定.结果:从单麻叶千里光的总碱部位中分离得到4个吡咯里西啶生物碱,分别鉴定为:jacobine(1),jacoline(2),jaconine(3),senecicannabine(4).结论:化合物1～4均为首次从该植物中分离得到.     

国内外中草药吡咯里西啶类生物碱控制情况浅析

吡咯里西啶生物碱(PAs)是一类分布广泛的植物性毒素,具有1,2位双键结构和7、9位酯基取代的PAs具有较强肝毒性(HPAs),其在国内外食品、中草药中的控制得到广泛关注。本文重点阐述蜂蜜、茶产品、中草药等不同产品中PAs前处理方法、检测方法以及相关控制要求,为多种中药材和其他产品中PAs的检测和控制提供参考依据。     

羊耳蒜吡咯里西啶生物碱的气相色谱-质谱联用检测

目的 对羊耳蒜化学成分吡咯里西啶生物碱(PAs)进行检测.方法 对羊耳蒜全草以70%乙醇为溶媒超声波细胞粉碎机提取,离心、除杂进而选择试剂分离纯化,所得提取物采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)机分析.结果 从不同溶剂中的羊耳蒜中共检测到19个PAs,分子量分别为353,393,395和397.结论 不同溶剂的羊耳蒜分离液含有的PAs不完全相同,系统地检测吡咯里西啶生物碱(PAs)是否合理,对羊耳蒜的PAs检测为进一步的科学研究起到积极作用,将为以后开发利用羊耳蒜提供理论依据.     

几种吡咯里西啶类生物碱对肝细胞毒性的探讨

目的：考察几种吡咯里西啶类生物碱体外实验中对肝细胞的毒性。方法：用MTF法检测了6种吡咯里西啶类生物碱clivorine，monocrotaline，isoline，LP-01(yamataimine)，LP-02(12-acetyl yamataimine)，LJ-09(platyphylline)对人正常肝细胞株L-02细胞活性的影响，对于其中有毒性的clivorine又用结晶紫染色的方法进一步确证其毒性。结果：Clivorine对肝细胞具有强烈的毒性作用，未发现其它几种吡咯里西啶生物碱对肝细胞的毒性。结论：Clivorine体外对肝细胞具毒性作用。     

含款冬花和紫草的中成药制剂中吡咯里西啶生物碱的鉴定和含量分析

目的 采用可同时测定32个吡咯里西啶类生物碱（PAs）的液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）对紫草药材及含款冬花和紫草的中成药制剂中的PAs成分进行鉴定和含量分析。方法 药材和中成药制剂经提取后用阳离子交换固相萃取小柱净化富集;富集后的样品采用Phenomenex Prodigy 5μ ODS3 100A色谱柱（150 mm×3.2 mm,5 μm）梯度洗脱后,使用电喷雾离子源、正离子多反应监测模式进行检测。结果 14种含款冬花的中成药制剂所含PAs主要为克氏千里光碱,PAs的总检出量为0.059~5.330 μg·g^–1或μg·mL^–1,按药品说明书计算的PAs日摄入量为2.24~95.92 μg;紫草药材主要含有蓝蓟定、石松胺、印美定及其氮氧化物等PAs,8批药材的PAs总检出量为0.60~140.69 μg·g^–1;在10种含紫草的中成药制剂中,PAs日摄入量为0.38~25.20 μg。结论 大多数紫草药材PAs含量相对较低,有望通过控制紫草药材中PAs含量,使含紫草的中成药制剂中PAs含量满足欧盟限量要求;而对于含款冬花的中成药制剂中,大多数（8/14）PAs检出量超过了欧盟限量的10倍,提示含款冬花的中成药制剂有必要开展克氏千里光碱的质量控制及其摄入所致的潜在安全风险评价。     

中草药中毒性吡咯里西啶类生物碱分析方法研究进展及控制现状

吡咯里西啶类生物碱（pyrrolizidine alkaloids,PAs）是一类种类繁多、分布广泛的植物内源性毒性成分,具有不同程度的肝毒性、遗传毒性和致癌性。目前已在约3%的开花植物中鉴定出600余种PAs及其氮氧化物。对可能含有毒性PAs的中草药,尤其是《中国药典》2020年版收录的品种进行了详尽梳理,对PAs的基本结构、植物来源和各国监管机构对其风险评估和限值制定情况,以及近年来分析方法的最新进展进行综述,并对其定性和定量分析中的难点进行讨论,对毒性PAs的监控提出建议,旨在为毒性PAs的检测研究、监管部门的政策制定提供警示和参考依据。     

基于UPLC-MS/MS同时测定款冬花中吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物的含量

目的:建立一种同时测定15个吡咯里西啶生物碱(pyrrolidine alkaloids,PAs)及其氮氧化物的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC/MS/MS),完成15批不同来源的款冬花样品的含量测定。从而初步了解不同来源款冬花中PAs的分布现状,为药材的安全合理使用提供相关参考。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(3. 0 mm×150 mm,1. 8μm),流动相为含0. 05%甲酸和2. 5 mmol·L-1甲酸铵的水溶液(A)以及含0. 05%甲酸和2. 5 mmol·L-1甲酸铵的甲醇(B),梯度洗脱,流速0. 4 m L·min-1,进样量2μL,柱温40℃。采用Agilent 1290-6470 QQQ型超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪,离子化模式为ESI+,多反应监测模式(MRM)。利用外标法计算药材样品中所测成分的含量,通过计算不同成分的相对标准偏差(RSD)对样品间的差异进行分析。结果:建立的测定方法灵敏度高,分离度良好,方法学考察结果良好。样品测定结果表明,15批药材均含有PAs及其氮氧化物,且所含PAs种类基本相同。克氏千里光碱(senkirkine)是款冬花中最主要的PAs类成分。药材款冬花中不同PAs的含量与分布有较大差异。结论:款冬花中普遍含有吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物,且以具有显著肝毒性的克氏千里光碱为其中最主要种类。针对PAs的含量测定为确保款冬药材的用药安全提供了有效的保证。     

LC-MS鉴定肝毒性吡咯里西啶类生物碱千里光碱大鼠体内代谢产物

目的 研究肝毒性吡咯里西啶类生物碱千里光碱的大鼠体内代谢。方法 SD大鼠口服千里光碱,收集胆汁、尿液及粪便样本,采用液相色谱-多级质谱联用对代谢产物进行研究,推导其体内代谢模式。结果 正负离子下共检测到38种代谢产物,主要为千里光碱及其代谢物的氮氧化物,羟化产物,水解产物,以及硫酸结合物,葡萄糖醛酸结合物和谷胱甘肽结合物。另外,尿液、胆汁与粪便中检测到的代谢物有一定差异,胆汁和尿液中代谢产物较多。结论 千里光碱在大鼠体内代谢广泛,形成多种代谢产物。     

基于UPLC-MS/MS同时测定番泻叶中吡咯里西啶生物碱的含量

目的:通过超高效液相串联质谱(UPLC-MS/MS)方法测定番泻叶中吡咯里西啶生物碱(PA)的含量,为番泻叶的安全评估奠定基础。方法:以95%甲醇水为溶剂对番泻叶药材进行超声提取,阳离子交换固相萃取小柱净化富集。采用Zorbax Eclipse Plus C_(18)(150 mm×3.0 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-0.1%甲酸,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min~(-1);电喷雾离子源,正离子多反应监测模式。结果:14个PA化合物具有较好的线性关系(r0.990 5),各化合物回收率为80.60%～103.22%,精密度和准确度良好,方法检出限和定量限分别为0.1～0.5、0.2～1.0μg·L~(-1)。从12批番泻叶主要检测出5种PA,且PA的总质量分数为7.06～187.97μg·kg~(-1)。根据最高日摄入量计算,5批番泻叶药材中的PA摄入量超过0.42μg·d~(-1)。结论:本研究首次通过UPLC-MS/MS检测到了番泻叶中的PA,通过对其日摄入量的分析,为番泻叶的安全评价提供参考。     

飞扬草中肝毒性吡咯里西啶生物碱的含量分析及风险评估

目的 对飞扬草中肝毒性吡咯里西啶生物碱的含量进行测定,并根据测定结果进行初步的风险评估.方法 建立液质联用法测定印美定、石松胺、N-氧化印美定、N-氧化石松胺和克氏千里光碱的含量.根据含量测定结果,采用暴露限制(MOE)法进行风险评估.结果 6批飞扬草样品中印美定、石松胺、N-氧化印美定、N-氧化石松胺和克氏千里光碱的...     

金丝桃苷对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究金丝桃苷对乙醇致小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双脂组(5.625 mg/kg)和金丝桃苷(12.5、25、50 mg/kg)剂量组。每日灌胃给药1次,连续7 d。末次给药1 h后,除正常组外,分别灌胃给予50%乙醇14 ml/kg复制酒精性肝损伤模型。复制模型12 h后,处理动物,测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰转移酶(GGT)以及甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)水平;测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量。苏木素-伊红(HE)染色,观察肝组织病理学变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠清ALT,AST,GGT及TG水平显著升高,肝组织SOD活性及GSH含量显著降低,MDA含量显著升高,病理学结果显示模型组肝组织损伤明显。与模型组比较,金丝桃苷(25、50 mg/kg)剂量组均能降低血清中ALT、AST,GGT和TG水平以及肝组织中MDA含量,同时升高SOD活性和GSH含量;金丝桃苷(12.5 mg/kg)剂量组能降低血清中ALT、AST水平,升高SOD活性;金丝桃苷各剂量组(12.5、25、50 mg/kg)均能减轻肝损伤的病变程度。结论:金丝桃苷对乙醇所致的小鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用和抑制脂质过氧化损伤有关。     

紫草科植物中的吡咯里西啶类化学成分及药理活性研究概况

 目的介绍紫草科吡咯里西啶类化学成分及活性研究进展,为深入研究该科植物提供参考。方法对近年来有代表性的文献进行分析、归纳。结果紫草科植物具有广泛的药用价值,但许多植物含吡咯里西啶类化学成分,虽有抗肿瘤活性,但不良反应也限制了应用。结论对吡咯里西啶类进行化学合成,进行药理和毒理活性筛选,寻找抗癌、抗菌等活性先导化合物,再进行结构改造,开发出高效低毒的药物。     

吡咯里西啶生物碱的药理作用、毒性及药(毒) 物代谢动力学研究进展

含有吡咯里西啶生物碱的植物在传统医药中有广泛使用,其肝毒性引起广泛关注.作者综述了吡咯里西啶生物碱的药理作用、毒性和药(毒)物代谢动力学等方面的研究进展,以便为后期研究提供基础.     

灯盏细辛中吡咯里西啶生物碱的含量分析及其肝毒性风险评估

目的 测定灯盏细辛中吡咯里西啶生物碱的含量,根据测定结果对其肝毒性进行初步的风险评估。方法 灯盏细辛样品经过固相萃取法提取后,采用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定印美定、石松胺、印美定-N-氧化物和石松胺-N-氧化物的含量。根据含量测定结果,采用暴露限制（MOE）法对其肝毒性风险进行评估。结果 8批灯盏细辛样品中印美定、石松胺、印美定-N-氧化物和石松胺-N-氧化物质量分数分别为15.14～66.72、11.32～42.55、26.32～98.34、19.82～55.23 μg·kg^–1。MOE值为4787～12 130。结论 灯盏细辛中吡咯里西啶生物碱的含量超过欧洲药品管理局的规定,经初步风险评估显示部分批次存在一定的安全风险。     

Isoline致小鼠急性肝损伤后肝亲水性蛋白的双向电泳分析

目的：利用双向电泳技术（2-DE）观察吡咯里西啶生物碱isoline致小鼠急性肝损伤后对肝内亲水性蛋白表达的影响，方法：小鼠一次性灌胃给药isoline，通过血清生化指标检测和病理切片观察isoline的急性肝毒性，抽提肝组织亲水性蛋白做双向电泳分析，利用PDQuest软件以正常组作为参考胶进行匹配分析．结果：丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）检测和肝组织病理切片结果表明，口服isoline造成小鼠急性肝损伤，双向电泳图像分析发现与对照组相比，isoline组小鼠肝组织亲水性蛋白表达图谱中有39个蛋白斑点变化差异显著，其中新出现5个蛋白斑点，缺失10个蛋白斑点结论：Isoline灌胃可以造成小鼠急性肝损伤，其中蛋白双向电泳分析结果中差异表达的蛋白质点可能参与了isoline的急性肝毒性作用。     

金丝桃苷对免疫性肝损伤小鼠的保护作用

目的:观察金丝桃苷(Hyp)对刀豆蛋白A(Con A)诱导免疫性肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法:昆明种小鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,金丝桃苷低、中、高剂量(12.5,25,50 mg·kg^-1)组和联苯双酯(200 mg·kg^-1)组。给药组连续ig给药10 d,末次给药后1 h,除正常组外,其余各组均尾静脉注射Con A(20 mg·kg^-1)造模,造模12 h后,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;肝脏组织中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;血清白细胞介素-2(IL-2),白细胞介素-4(IL-4),干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,血中CD3⁺,CD4⁺和CD8⁺含量;并通过HE染色观察肝脏组织的病理学变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清ALT,AST活性及肝脏组织MDA含量明显升高,肝脏组织SOD活性明显降低,IL-2,IL-4,IFN-γ和TNF-α水平明显升高,CD3⁺,CD4⁺和CD8⁺含量明显降低(P<0.01);与模型组比较,Hyp明显降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT和AST活性,降低肝脏组织MDA含量,升高SOD活性,同时明显降低IL-2,IL-4,IFN-γ和TNF-α水平,明显升高CD3⁺,CD4⁺和CD8⁺含量(P<0.05,P<0.01);肝脏病理学检测显示,模型组肝脏组织病理损伤明显,Hyp能明显减轻Con A对肝脏组织的病理损伤。结论:Hyp对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与清除自由基、减少炎性因子释放、调节T细胞亚群平衡有关。