鸡脑脊髓炎高免卵黄抗体的制备及治疗试验

鸡脑脊髓炎是由鸡脑髓炎病毒引起的主要侵害雏鸡的一种传染病,其主要特征是共济失调,头颈部震颤和非化脓性脑炎.近年来河南许多鸡场发生本病,为探索有效治疗措施,我们开展了此项研究,现将结果报告如下:     

鸡脑脊髓炎高免卵黄抗体的制备及治疗试验

鸡脑脊髓炎是由鸡脑脊髓炎病毒引起的主要侵害雏鸡的一种传染病,其主要特征是共济失调,头颈部震颤和非化脓性脑炎。近年来在河南许多鸡场发生,为探索有效治疗措施,我们开展了鸡脑脊髓炎高免卵黄抗体的制备及治疗试验,现将结果报告如下:1材料与方法1.1试验鸡选择健康蛋用鸡50只,     

鸡脑脊髓炎高危卵黄抗体的制备及治疗试验

鸡脑脊髓炎是由鸡脑髓炎病毒引起的主要侵害雏鸡的一种传染病，其主要特征是共济失调，头颈部震颤和非化脓性脑炎。近年来河南许多鸡场发生本病，为探索有效治疗措施，我们开展了此项研究，现将结果报告如下： 1材料与方法 1． 1试验鸡 　　选择健康蛋用鸡 50只，经检查没有白痢等垂直传播的疾病，由郑州牧专微生物教研室饲养。 1． 2疫 苗 　　鸡 AE弱毒苗，购自河南兽医防治站，鸡 AE油乳剂灭活苗，由郑州牧专微生物教研室自制。 1． 3鸡 AE琼扩抗原及阳性血清 　　由郑州市畜牧工作总站提供。 1． 4试验鸡免疫 　　一免，每只鸡分别肌…     

猪大肠杆菌高免鸡卵黄抗体的研制

用猪大肠杆菌Ｋ８８,Ｉ９９,９８７Ｐ标准菌株做成混合株油佐制剂免疫蛋鸡,以平板凝集试验检定性高免疫卵黄抗体对各菌株的凝集反应。结果表明,高免鸡卵黄抗体对标准菌株均产生明显的凝集,而未兔对照鸡卵黄抗体不出现凝集;经醋酸纤维薄膜电泳分析高免疫卵黄抗体的γ－的球收白含量,也显示出未免对照鸡卵黄抗体有明显的提高。     

鸡抗猪瘟高免卵黄抗体的研制

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病。近年来,尽管普遍对猪群用猪瘟兔化弱毒苗进行免疫接种,但免疫失败的现象时常发生,给养猪业造成了很大的经济损失。为了找到一个治疗猪瘟的经济有效方法,我们开展了鸡抗猪瘟高免卵黄的研制。１材料与方法１．１试...     

猪瘟高免卵黄抗体的研制试验

猪瘟是危害养猪生产的主要传染病之一。病猪和带菌猪是本病的主要传染源。通过对病猪注射猪瘟高免卵黄抗体可明显遏制患猪病情恶化。注射猪瘟高免卵黄抗体后3天．试验猪抗体水平明显提高。连续观察15天，受试猪精神状态良好。未见不适症状或死亡。预防保护率达100％．     

应用微量凝集试验检测鸡抗猪大肠杆菌抗体方法的探索

本试验建立了用微量凝集试验检测鸡抗猪大肠杆菌抗体的方法。经方阵试验，抗原最适浓度为40亿菌/ml，最佳反应温度为37℃，3～4小时观察结果为宜。本方法具有较高的敏感性和特异性，可用于监测免疫猪大肠杆菌疫苗鸡群的抗体水平。     

Development of immunoglobulin class-specific enzyme-linked immunosorbent assays for measuring antibodies against avian rotavirus

Immunoglobulin class-specific enzyme-linked immunosorbent assays were developed for detecting antibodies against avian rotavirus in serum, intestinal contents, and bile from experimentally infected specific-pathogen-free (SPF) chickens. Both indirect and antibody-capture (AbC) assays were developed based on monoclonal antibodies specific for chicken IgG, IgM, and IgA. Treatment of purified rotavirus with sodium thiocyanate before coating the plate improved the rotavirus-specific reading in the indirect assay. Use of Immunolon 2 plates facilitated attachment of monoclonal antibodies to the plate in the AbC assay. Addition of 5% powdered skim milk to the diluent buffer reduced nonspecific background readings. The indirect assay was superior for detecting rotavirus-specific IgG, whereas the AbC assay was better for detecting rotavirus-specific IgM and IgA. The presence of intestinal contents in the assay wells did not reduce the measurable titers of IgG, IgM, or IgA. These assays showed that SPF chickens produced systemic and mucosal antibodies against avian rotavirus.     

抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白特异性单克隆抗体的研制及鉴定

以抗H5亚型禽流感病毒（AIV）JSD株鸡胚尿囊液免疫8周龄BALB/c小鼠,第4次免疫后取其脾淋巴细胞与SP2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验（HI）对杂交瘤进行筛选,经3次亚克隆后,共获得4株针对血凝素（HA）蛋白的特异性单克隆抗体,分别命名为：2D2、2C8、3D3和3D11。该4株单抗的小鼠腹水的HI效价在2^13～2^15,ELISA效价为1.2×10^5～5.1×10^5。亚类鉴定结果表明,2D2和3D11属于IgG1,2C8属于IgG3,3D3属于IgG2a亚类;特异性试验结果表明,上述4株单抗仅与H5 AIV毒株发生特异性反应,而不与其他亚型AIV以及NDV、IBV和EDSV-76等病毒反应;鸡胚中和试验结果显示,4株单抗均具有较好的中和活性。本研究成功获得4株针对H5 AIVHA蛋白的特异性单抗,为临床H5 AIV的血清学监测及鉴定提供了必需的试剂。     

H3亚型禽流感病毒血凝素特异性单克隆抗体的制备

以H3亚型禽流感病毒(AIV)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验(HI)筛选阳性杂交瘤细胞并克隆化。结果获得了4株针对H3亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体,分别命名为1D7、1F9、5A4、5F5。这些单克隆抗体小鼠腹水HI效价为212～214。用H1、H6、H10亚型禽流感病毒各2株,H4、H5、H9和新城疫病毒(NDV)各1株进行特异性试验。结果表明:所有这些单抗仅与H3亚型AIV发生特异性HI反应,而不与其他亚型AIV及NDV反应。用28株H3亚型禽流感病毒进行排谱试验,结果证明:4株单抗均具有广谱性,其中1F9、5A4、5F5与受试的28株H3亚型AIV均反应,而1D7只与其中的26株反应。以上单抗将为控制畜禽及人类的流感提供必需的诊断试剂。     

Preparation and characterization of monoclonal antibodies against an avian reovirus

Thirteen monoclonal antibodies against avian reovirus strain Uchida were derived. Of the 13 antibodies, three (MAb1, MAb2, and MAb3) had the ability to neutralize the infectivity of the virus. MAb1 neutralized strains Uchida, CS-108, and TS-142 equally. MAb2 neutralized the same three strains, but the activity of neutralization was 10 times higher against Uchida than against CS-108 and TS-142. MAb3 neutralized only strain Uchida. It seems that MAb1 and MAb2 have a rather broad neutralization activity and that MAb3 has a type-specific activity. These data indicate that there are both type-specific and more broadly specific neutralization epitopes in avian reovirus particles, as in mammalian reoviruses. In Western blot analysis, MAb1 bound to a sigma protein of strain Uchida, so it was suggested that this protein carries the epitope of the less specific neutralizing activity.     

抗禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的研究——禽脑脊髓炎病毒抗原的培养和纯化

为获得用于制备AEV单克隆抗体的抗原，将禽脑脊髓炎病毒（AEV VR）接种于鸡胚成纤维细胞（CEF）盲传，通过间接免疫荧光试验（IFA）监测AEV增殖情况，以第六代CEF培养物作为种毒扩大培养，将其培养物经差速率心后的半提纯物接种6日龄SPF鸡胚、1日龄SPF鸡，再将半提纯物经密度梯度离心后进行PAGE－SDS电泳，电镜观察。结果证实，AEV VR在CEF上增殖成功。