p16-nm23-H1蛋白在胃癌及转移淋巴结中的表达

目的观察抑癌基因p16和转移抑制基因nm23-H1蛋白在人胃癌及转移淋巴结中的表达,探讨两者在胃癌转移及预后评估中的作用.方法应用SP免疫组织化学方法检测46例原发性胃癌及69枚转移淋巴结中p16和nm23-H1蛋白表达.结果p16和nm23-H1蛋白在受检原发性胃癌中的阳性表达率分别为17.4%(8/46/)和28.3%(13/46),在转移淋巴结中的阳性率分别为15.9%(11/69)和14.5%(10/69).原发癌伴淋巴结转移组p16的阳性表达率(6.9%)低于不伴淋巴结转移组的阳性率(35.3%),差异具有显著性(P《0.05).原发癌伴淋巴结转移组nm23-H1的阳性表达率(10.3%)低于不伴淋巴结转移组的阳性率(58.8%),差异具有显著性(P《0.01).nm23-H1在乳头状腺癌中的表达率明显高于其他组织学类型(P《0.05).p16和nm23-H1表达与肿瘤大小、部位、浸润深度、Bormann分型、年龄及性别等因素无相关性(P》0.05).p16和nm23-H1在原发性胃癌及转移淋巴结中的表达无相关性(P》0.05).结论p16和nm23-H1基因蛋白对胃癌的发展及淋巴结转移有抑制作用.检测胃癌p16和nm23-H1基因蛋白对评估胃癌生物学行为、预测胃癌淋巴结转移以及预后可能具有一定的价值.     

肝癌缺失基因在胃癌中的表达及启动子甲基化

目的探讨肝癌缺失基因(DLC1)与胃癌及其临床分期、分化程度等关系,DLC1mRNA表达与启动子甲基化的关系。方法用半定量逆转录聚合酶链反应方法检测34例原发性胃癌及癌旁正常组织中DLC1mRNA表达;用甲基化特异聚合酶链反应法(MSP)检测启动子甲基化。结果正常组织中DLC1mRNA均正常表达,胃癌组织DLC1mRNA低表达或表达缺失;正常组织0.62±0.11,胃癌组织0.24±0.17,差异有统计学意义(P<0.01)。DLC1mRNA表达与淋巴结转移和肿瘤分化程度有关,与性别、肿瘤大小和临床分期无关。正常组织中未发现DLC1基因启动子甲基化;胃癌组织中DLC1启动子甲基化阳性12例,甲基化率35.3%。启动子甲基化与无甲基化患者间DLC1mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论DLC1与胃癌存在明显相关性,是重要的抑癌基因。启动子甲基化与DLC1mRNA表达抑制密切相关,可能是影响DLC1在胃癌中低表达的最主要因素,DLC1是胃癌甲基化谱中主要成员。     

VEGF-D和VEGFR-3在胃癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的:探讨血管内皮生长因子-D(VEGF-D)和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)在胃癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法:应用酶联免疫分析法(ELISA)检测VEGF-D和VEGFR-3蛋白在62例胃癌病人的肿瘤组织和相应正常黏膜中的表达,并分析其表达水平与胃癌病人临床病理特征的关系.结果:VEGF-D在胃癌和相应正常黏膜组织中的表达水平无明显差异(218.3 pg/mL比231.8 pg/mL,P=0.738),但VEGFR-3在胃癌组织中的表达水平显著高于相应正常黏膜(2 387.9 pg/mL比1786.5 pg/mL,P=0.015).VEGF-D在胃癌组织中的绝对表达水平与病人性别(P=0.001)和组织学类型(P=0.042)密切相关,但与病人年龄、肿瘤大小、T分期、N分期、淋巴结转移、转移淋巴结数和TNM分期均无关.VEGFR-3在胃癌组织中的绝对表达水平与病人性别(P=0.022)、组织学类型(P=0.026)和TNM分期(P=0.001)密切相关,但与病人年龄、肿瘤大小、T分期、N分期、淋巴结转移和转移淋巴结数均无关.VEGF-D和VEGFR-3在胃癌组织中的绝对表达水平呈线性相关(r=0.81,P=0.000).VEGF-D和VEGFR-3的相对表达水平(肿瘤与正常黏膜组织中表达水平的比值)密切相关(P=0.000),且均与N分期(P=0.004和P=0.000)、淋巴结转移(P=0.002和P=0.000)、转移淋巴结数(P=0.000和P=0.000)和TNM分期(P=0.001和P=0.000)相关.受试者工作特征(ROC)分析显示,VEGF-D和VEGFR-3的相对表达水平对胃癌淋巴结转移判断的价值均较高(曲线下面积分别为0.75和0.79).结论:VEGF-D和VEGFR-3的相对表达水平均与胃癌淋巴结转移相关,且VEGF-D与VEGFR-3的表达水平密切相关,所以VEGF-D可能在胃癌中通过VEGFR-3信号通道促进淋巴结转移.     

IL-6 mRNA在进展期结直肠癌低蛋白血症组织中的表达及意义

目的 研究白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)与进展期结直肠癌低蛋白血症的关系.方法 根据入院第二天用溴甲酚绿法(bromcresol green,BCG)测量空腹血白蛋白(Albumin,Alb)的浓度,将标本分为两组:低蛋白血症组(Alb<35 g/L)及非低蛋白血症组(Alb≥35 g/L),应用RT-PCR半定量的方法检测IL-6 mRNA在低蛋白血症组以及非低蛋白血症组中的表达.结果 IL-6 mRNA在低蛋白血症组癌组织中的阳性表达率较非低蛋白血症组癌组织中的阳性高(P 0.000),在两组相应的正常黏膜组织标本中均不表达.结论 IL-6通过影响机体对白蛋白的摄入、排出及代谢,在进展期结直肠癌低蛋白血症的发生、发展中起到重要作用.     

乳腺癌p16，p53基因蛋白和mRNA的表达及其意义

目的:探讨乳腺癌组织p16和p53基因蛋白及其mRNA的表达及其意义。方法:采用免疫组化法和RT-PCR技术，检测乳腺癌组织和癌旁组织中p16和p53基因蛋白及其mRNA的表达。分析其表达与乳腺癌临床病理学特征之间的关系。结果:癌旁乳腺组织中p16基因蛋白的表达率为90.0%（27/30），p53基因蛋白的表达率为6.67%（2/30）;乳腺癌组织中p16基因蛋白表达率为38.3%（23/60），p53基因蛋白表达率为48.3%（29/60）。癌旁乳腺组织的p16 mRNA显著高于乳腺癌组织(P=0.023)，而在乳腺癌组织的p53mRNA水平显著高于癌旁乳腺组织（P=0.001）。乳腺癌细胞分化程度越高p16蛋白表达率越高，而p53表达蛋白正相反;有淋巴结和/或器官转移者p16蛋白表达率明显低于无淋巴结和/或器官转移者，而p53蛋白的表达率则相反。p16mRNA在组织学Ⅰ级的水平显著高于Ⅱ，Ⅲ级，而Ⅱ，Ⅲ级之间差异无显著性;p53mRNA在组织学Ⅰ级的水平显著低于Ⅲ级。有淋巴结和/或器官转移的p16mRNA和p53mRNA表达明显低于和高于无淋巴结和/或器官转移者。结论:p16和p53基因的改变与乳腺癌的发生发展关系密切，可用于评估乳腺癌的预后。     

EphA2和E-cadherin在胃癌中的表达及其意义

目的:探讨EphA2与E-cadherin在胃癌组织中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测EphA2与E-cadherin蛋白在胃癌组织、癌旁组织和远癌胃组织中的表达情况，分析它们与胃癌临床病理特征之间的关系及两种蛋白间的相关性。结果:EphA2在胃癌组织中呈高表达(P＜0.01)，其高表达与胃癌的浸润深度、肿瘤TNM分期以及淋巴结转移有关(P＜0.05);E-cadherin在胃癌组织中呈低表达(P＜0.01)，其低表达与胃癌的浸润深度、肿瘤分化程度、肿瘤TNM分期以及淋巴结转移有关(P＜0.05);胃癌组织中EphA2和E-cadherin蛋白表达呈负相关(r=-0.602，P＜0.001)。结论:EphA2的高表达和E-cadherin的低表达与胃癌的发展和转移密切相关，EphA2可望作为胃癌治疗的新靶点。     

UbcH10在乳腺癌中的表达及意义

目的:探讨UbcH10在乳腺癌中的表达情况及意义.方法:分别运用Western Blot法和免疫组化染色在乳腺癌细胞系和乳腺癌组织芯片中检测UbcH10的表达;统计学分析UbeH10与乳腺癌组织学类型、分化程度、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)等之间的相关性.结果:UbcH10在MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s等乳腺癌细胞株中均呈阳性表达.在正常乳腺组织中,UbcH10的表达阳性率为0.00%(0/8);而在乳腺癌组织中,总体阳性率为61.25%(49/80,P<0.05),其中浸润性导管癌的阳性表达率为60.42%(29/48,P<0.05).人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-type 2,HER2)阴性和阳性组织中UbcH10的表达阳性率分别为46.67%和91.67%(P<0.05),HER2的表达水平与UbcH10表达呈正相关.UbcH10表达与组织级别、年龄、淋巴结转移、ER、PR、BCL2(B-cell CLL/lymphoma 2)、P53等无明显相关性.结论:UbcH10表达在正常乳腺组织和乳腺癌组织中存在明显差别,且其表达与HER2表达呈现正相关关系,可作为判断乳腺癌的潜在标记物,并有望成为乳腺癌靶向治疗中新的靶点.     

p19在睾丸肿瘤中的表达

目的研究p19抑癌基因在人睾丸肿瘤中的表达并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法对31例人睾丸肿瘤组织和20例人正常睾丸组织石蜡标本中p19的表达进行检测比较,并作统计学分析。结果31例睾丸肿瘤组织中p19无阳性表达。20例正常睾丸组织中p19阳性表达19例,阴性表达1例,阳性率95.5%。两组差异有显著性意义（P〈0.01）。结论p19抑癌基因表达缺失可能与睾丸肿瘤的发生发展密切相关。     

Pirh2 mRNA在原发性乳腺癌中的表达意义

目的探讨Pirh2mRNA在乳腺肿瘤组织中的表达及其与乳腺癌发生发展的关系。方法回顾性分析湘雅医院乳腺科近10年间收治的乳腺肿瘤患者的临床资料，其中包括Ⅰ，Ⅱ期乳腺癌87例，Ⅲ，Ⅳ期乳腺癌27例Pirh2mRNA的表达，并以纤维瘤组织10例和正常乳腺组织6例作为对照。结果Pirh2mRNA在乳腺癌组织中阳性表达率为43．9％（50／114），10例纤维瘤组织1例阳性，6例正常乳腺组织无表达。乳腺癌与纤维瘤和正常乳腺组织间的Pirh2mRNA表达均有差异显著性（P=0．004）。Ⅰ，Ⅱ期乳腺癌和Ⅲ，Ⅳ期乳腺癌中阳性率分别为37．9％（33／87）和63．0％（17／27），差异有显著性（P=0．022）。114例乳腺癌中5年内远处转移者60例，其PIrh2mRNA阳性率为63．3％（38／60）；无瘤生存≥5年者54例，其Pirh2mRNA阳性率为22．2％（12／54），两者有差异有显著性（P=0．000）。结论Pirh2mRNA在乳腺癌组织中呈较高表达，而在乳腺纤维瘤和正常组织中几乎不表达；在Ⅲ,Ⅳ期阳性表达明显高于Ⅰ,Ⅱ期乳腺癌。Pirh2mRNA可能与乳腺癌的发生发展有密切关系。     

环状RNA矮小相关转录因子1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨胃癌组织中环状RNA矮小相关转录因子1(circRUNX1)的表达及其与临床病理特征和患者预后的关系。方法:收集上海交通大学附属第一人民医院胃肠外科2015年4月至2018年12月接受首次胃癌根治术的35例胃癌患者的胃癌组织(研究组)及癌旁正常组织(对照组),利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检...     

人类RUNX3基因对胃癌分化及预后影响的再评价

目的研究人类Runt相关转录因子基因3(RUNX3)蛋白在胃癌组织中的表达特征,探讨该蛋白表达与胃癌分化类型等临床病理特征及其预后的关系。方法用免疫组织化学方法(免疫组化)和Western印迹技术,检测66例胃癌原发灶组织中RUNX3蛋白的表达,并研究该蛋白表达与患者长期生存率的关系。结果(1)免疫组化染色结果提示,所测胃癌组织中,RUNX3蛋白表达阳性率为60.6%(40/66),且阳性颗粒定位于细胞浆;Western印迹结果显示,RUNX3蛋白在肿瘤中的表达明显高于癌旁非肿瘤组织;(2)RUNX3蛋白表达与肿瘤组织分化程度(P=0.025)和Lauren分型(P=0.034)密切相关,而与TNM分期无关(P=0.085);(3)肿瘤组织RUNX3蛋白表达和无表达组胃癌患者的中位生存期分别为2187d和2478d,差异有统计学意义(P=0.016)。结论RUNX3表达异常可影响胃癌分化,且RUNX3表达与患者预后呈明显负相关关系。该基因作为典型抑癌基因的价值,及其在胃癌发生发展不同阶段中所发挥的作用有待进一步探讨。     

人RUNT相关转录因子3、细胞周期素在胰腺癌组织中mRNA水平的表达及其与临床病理因素的关系

目的 探讨人RUNT相关转录因子3(RUNX3)、细胞周期素(Cyclin D1)基因在胰腺癌组织和癌旁组织中mRNA表达水平与临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测RUNX3、Cyclin D1基因在42例胰腺癌组织及其癌旁组织中mRNA表达水平,并分析RUNX3、Cyclin D1基因mRNA表达与临床病理因素的关系.结果 (1)RUNX3基因在42例胰腺癌组织中mRNA表达量相对值为:0.2469±0.0708;相应癌旁组织中相对值为:0.7091±0.1764,两者差异有统计学意义(t=15.7036,P＜0.01).(2) RUNX3基因mRNA表达水平在分化程度、淋巴结转移、临床分期等病理因素的差异有统计学意义(P＜0.05),而与性别、年龄等因素无明显相关(P＞0.05).(3) Cyclin D1基因在42例胰腺癌组织中mRNA表达量相对值为:0.7769±0.1456;相应癌旁组织中相对值为:0.2860±0.1224,两者差异有统计学意义(t=18.9158,P＜0.01).(4) Cyclin D1基因mRNA表达水平在分化程度、淋巴结转移、临床分期等病理因素的差异有统计学意义(P＜0.05),而与性别、年龄等因素无明显相关(P＞0.05).(5)胰腺癌中RUNX3基因的mRNA表达抑制与Cyclin D1基因的过表达呈明显相关(r=-0.320,P＜0.05).结论 RUNX3基因在胰腺癌组织中mRNA 表达抑制,Cyclin D1基因在胰腺癌组织中mRNA过表达,RUNX3表达抑制或缺失及Cyclin D1过表达与胰腺癌的发生、发展有关.     

小分子干扰RNA沉默人结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响

目的 观察小于扰RNA(siRNA)沉默结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响,以及细胞增殖、侵袭及迁移能力等生物学行为的变化.方法 利用脂质体lipofectamineTM 2000将siRNA稳定转染结直肠癌HT-29细胞,实验分为干扰组、阴性对照组、空白对照组;应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)与Western blot技术检测TCF21与Kiss-1基因mRNA与蛋白的表达水平,分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell小室法检测干扰前后细胞增殖、侵袭与迁移能力的变化.结果 siRNA干扰后成功沉默了HT-29细胞TCF21基因的表达,Kiss-1基因mRNA的表达量为0.58 ±0.02,较对照组的1.00±0.00明显降低(P＜0.05),蛋白表达量为0.3491±0.0009,与对照组比较(0.8485 ±0.0016)亦出现明显下降(P＜0.05),同时细胞增殖、侵袭及迁移能力均明显增强(P＜0.01).结论 沉默TCF21基因的表达可以下调结直肠癌细胞Kiss-1基因的表达水平,并导致相应生物学行为的变化,因此TC F21基因可能是Kiss-1基因的上游调控因子.     

胃癌组织中Runx3基因启动子甲基化及其蛋白的表达

目的探讨胃癌组织中Runx3基因启动子甲基化与其蛋白表达的相关性，并分析Runx3基因异常甲基化与胃癌临床病理因素的关系。方法分别采用甲基化特异性聚合酶链反应技术及免疫组织化学方法检测40例胃癌及其配对正常胃黏膜组织中Runx3基因启动子区的甲基化状态和Runx3蛋白表达。结果胃癌组织中Runx3基因启动子区甲基化发生频率（55．0％）明显高于正常胃黏膜组织（12．5％）（P〈0．01）；胃癌组织中Runx3蛋白表达阳性率（37．5％）明显低于正常胃黏膜组织（100％）（P〈0．05）；Runx3基因甲基化与肿瘤的组织分化程度、淋巴结转移数目及TNM分期密切相关（P〈0．05，P〈0．01）。结论启动子区高甲基化是胃癌组织中Runx3基因表达失活的主要机制，有望成为胃癌分子诊断和病期评估的标志之一。     

Runt相关转录因子2与基因基质金属蛋白酶3的表达与乳腺癌侵袭性的关系#br#

背景与目的：Runt相关转录因子2（RUNX2）与其靶基因基质金属蛋白酶3（MMP-3）在乳腺癌组织中高表达并均与肿瘤转移有关,但RUNX2能否通过调节MMP-3基因转录影响乳腺癌细胞的侵袭能力尚不清楚。本研究通过生物信息学方法分析乳腺癌组织中RUNX2及MMP-3 mRNA水平间相关性,并在乳腺癌细胞中观察RUNX2表达水平对MMP-3基因转录水平以及对细胞侵袭能力的影响。 方法：通过cBioPortal数据库获取1 092例乳腺癌患者组织中RUNX2和MMP-3基因的mRNA表达数据及相关生存资料,分析患者RUNX2及MMP-3 mRNA水平间相关性;根据RUNX2及MMP-3 mRNA水平中位数,将患者分为RUNX2及MMP-3高表达组和低表达组,用Kaplan-Meier Plotter分别分析RUNX2和MMP-3表达水平与患者无远处转移生存率（DMFS）的关系;在乳腺癌细胞MDA-MB-231与BT-549细胞中分别转染RUNX2 siRNA及RUNX2过表达质粒,qRT-PCR、Western blot检测RUNX2、MMP-3 mRNA及蛋白质表达水平;生物信息学软件预测MMP-3启动子上RUNX2潜在的结合位点,并采用ChIP-PCR与双荧光素酶报告系统进行体外验证;在MDA-MB-231及BT-549细胞中转染RUNX2过表达质粒及MMP-3 siRNA,Transwell实验观察RUNX2及MMP-3表达水平与乳腺癌细胞侵袭能力间关系。 结果：在乳腺癌组织中,MMP-3与RUNX2的mRNA水平呈正相关（r=0.304 2,P<0.000 1）;高表达RUNX2或高表达MMP-3乳腺癌患者的DMFS明显低于各自低表达患者（P=0.034、P=0.013）;在乳腺癌MDA-MB-231中,下调RUNX2表达后,MMP-3基因mRNA转录水平及蛋白质水平均明显降低,在MDA-MB-231及BT-549细胞中上调RUNX2表达可增加MMP-3 mRNA转录水平及蛋白质水平（均P<0.05）。生物信息学分析结果显示,MMP-3启动子序列中可能存在RUNX2结合位点（5''-ACCACA-3''）,ChIP-PCR与双荧光素酶报告系统实验进一步证实RUNX2可直接与MMP-3基因启动子区结合。RUNX2过表达后乳腺癌MDA-MB-231及BT-549细胞侵袭能力明显增强,该作用可以被同时下调MMP-3水平所取消（均P<0.05）。 结论：RUNX2可能通过调节MMP-3基因转录增强乳腺癌细胞侵袭能力,RUNX2与MMP-3高表达乳腺癌患者预后较差。RUNX2有望成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

转录信号传导子和激活子3在人胃癌组织中的表达及意义

目的探讨人胃癌中转录信号传导子和激活子3（STAT3）的表达情况，分析其表达与胃癌临床病理因素的关系。方法应用固定化蛋白质印迹法（Westernblot）检测42例胃癌组织、转移淋巴结及邻近的正常胃粘膜中STAT3蛋白的表达。结果胃癌组织中STAT3蛋白表达水平明显高于正常胃粘膜，平均为正常胃粘膜中的2.14倍（P＜0.05）；低分化胃癌STAT3蛋白表达水平高于高分化胃癌［分别为正常胃粘膜的(2.44±2.99)倍和(1.03±0.88)倍,P＜0.05］；Ⅲ、IV期胃癌STAT3蛋白表达水平高于I、II期胃癌［分别为正常胃粘膜的(2.59±3.22)倍和(1.24±0.92)倍,P＜0.05］；有淋巴结转移的胃癌STAT3蛋白表达水平高于无淋巴结转移胃癌［分别为正常胃粘膜的(2.55±3.12)倍和(1.11±0.82)倍,P＜0.05］；转移淋巴结STAT3蛋白表达水平高于阴性淋巴结。结论STAT3过表达可能在胃癌的发生、发展过程中发挥重要作用，其表达与胃癌组织学分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关。     

人表皮生长因子受体家族在胃癌中表达的临床意义

目的探讨人表皮生长因子受体（HER）家族成员[HERl（EGFR）、HER2、HER3和HER4]在胃癌患者中的表达情况及其与预后的关系。方法回顾性分析2006年1月至2006年12月江苏省肿瘤医院胃肿瘤诊疗中心收治的161例胃癌患者的临床资料,应用免疫组织化学方法判断HER家族成员的表达情况,并对其表达与患者预后情况进行分析。结果161例患者中,HERl高表达者74例（46．0％）;HER2高表达者17例（10．6％）;HER3高表达者90例（55．9％）,HER4高表达者110例（68．3％）。单因素分析显示：HER2高表达与肿瘤Lauren分型有关（P〈0．05）;HER3高表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、肿瘤分期和神经脉管侵犯及预后有关（P〈O．05）;HER4高表达与肿瘤浸润深度和远处转移及肿瘤分期有关（P〈O．05）。HER2-HER3协同高表达与患者预后有关（P=0．023）。多因素分析显示：肿瘤分期和HER3高表达是影响胃癌预后的因素（P〈0．05）。结论HER3有可能成为评价胃癌预后的独立因素。