基质金属蛋白酶抑制剂Marimastat抑制胃癌生长和转移的作用

目的:观察基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂Marimastat对人胃癌在裸鼠体内生长和转移的抑制作用。方法:人胃腺癌细胞株SGC-7901完整组织块裸鼠原位种植,建立类似于临床的胃癌转移模型。移植7 d后,治疗组开始腹腔内注射Mari-mastat,隔天1次,剂量为10、30、60 mg/kg,每个剂量组13只裸鼠,对照组13只裸鼠给予相同量的生理盐水,8周后处死动物,测量原位肿瘤大小,计算抑瘤率,免疫组织化学法检测肿瘤微血管密度(MVD)、MMP-9的表达率,并观察肿瘤转移情况。结果:对照组和治疗组Marimastat剂量为10、30、60mg/kg时,原位肿瘤质量分别为(1.63±0.53)、(0.71±0.28)、(0.33±0.17)、(0.14±0.09)g;抑瘤率分别为0、56.4％、79.8％、91.4％;MVD分别为(1.36±4.56)、(8.74±2.22)、(3.25±1.29)、(0.92±0.76);MMP-9的表达率分别为81.8％、38.5％、23.1％、0;腹膜转移率分别为81.8％、30.8％、15.4％、0;肝脏转移率分别为90.9％、38.5％、23.1％、0。治疗组与对照组相比,胃癌的生长和转移受到明显抑制(P<0.05),且与Marimastat的剂量呈正相关。结论:Marimastat对体内胃癌的生长及转移均有抑制作用。     

内皮抑素治疗人乳腺癌裸鼠模型的观察

目的探讨内皮抑素对乳腺癌细胞生长和转移的抑制作用。方法建立人乳腺癌裸鼠模型30只,随机分成3组,每组10只。接种乳腺癌细胞悬液后第1周于种植部位皮下注射内皮抑素,隔天1次,剂量分别为10.0mg/kg(治疗Ⅰ组)、20.0mg/kg(治疗Ⅱ组),对照组以PBS溶液代替,共用7周。第8周颈椎脱位处死裸鼠,完整剥离肿瘤,检测肿瘤体积、抑瘤率、肿瘤微血管密度(MVD)、癌细胞凋亡指数(AI)、肝肺转移情况。结果治疗Ⅱ组、治疗Ⅰ组、对照组的肿瘤体积分别为(4132.5±578.6)mm3、(18347.5±665.0)mm3、(43653.0±639.1)mm3;抑瘤率分别为91.3%、58.4%、0;MVD分别为1.8±0.4、4.6±0.9、9.6±1.2;AI分别为(12.4±4.9)%、(8.3±2.6)%、(3.2±0.8)%,以上各项数据组间差异均有显著性(P<0.05);肝(肺)转移率分别为0(0)、60%(50%)、90%(80%),治疗Ⅱ组肝肺转移率与对照组、治疗Ⅰ组比较,差异有显著性(P<0.05),而治疗Ⅰ组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论内皮抑素可能通过抗肿瘤血管生成、促肿瘤细胞凋亡作用,有效抑制了实验裸鼠乳腺癌细胞的生长和转移,并且其疗效与剂量相关。     

血管生成抑制剂TNP-47O抑制ACHN肾癌生长的实验研究

目的用ACHN肾癌细胞株建立肾癌动物模型,观察血管生成抑制剂TNP-470的抗肿瘤生长和转移效应.方法将ACHN肾癌细胞株2.0×106/0.2 ml接种于BALB/c裸鼠背部皮下,将16只裸鼠随机分为对照组和用药组,自第3天起分别给予溶剂(3%无水乙醇+97%生理盐水)0.2 ml和TNP-470(40 mg/kg),隔日给药.第31天断颈处死小鼠,测定两组皮下瘤重、体积、微血管密度(microvessel density,MVD)及肺转移率.结果两组皮下瘤重分别为(630.15±123.65)mg和(270.00±62.35)mg(P＜0.01),皮下瘤体积分别为(316.16±60.28)mm3和(126.50±45.12)mn3(P＜0.01).MVD计数(40倍视野)分别为12.00±3.78和5.65±2.31(P＜0.01).两组肺转移率分别为62.5%和0%(P＜0.05).结论血管生成抑制剂TNP-470通过抑制肿瘤血管生成而发挥抗瘤效应.     

雷帕霉素对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的探讨雷帕霉素对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及可能机制。方法建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分组后给予雷帕霉素常规剂量(1.5mg/kg.d-1)、低剂量(0.15mg/kg.d-1)、高剂量(4.5mg/kg.d-1)腹腔注射,对照组给予相同体积生理盐水。用药21d后处死动物,称量鼠重、瘤重,计算抑瘤率;CD34标记血管内皮细胞后行肿瘤微血管密度(MVD)计数;ELISA法检测血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平。结果与对照组比较,常规剂量雷帕霉素明显抑制了肿瘤生长,并降低了肿瘤MVD及血清VEGF水平(P<0.05),低剂量、高剂量组皮下移植瘤、MVD、VEGF水平均受到一定程度抑制,但是无统计学意义(P>0.05),实验中还发现高剂量组裸鼠体重明显下降(P<0.05)。结论常规剂量雷帕霉素可抑制肿瘤血管生成,从而抑制肿瘤生长,这为肝癌肝移植术后免疫抑制剂选择提供实验依据。     

三氧化二砷对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的作用机制

目的:探讨不同剂量As203对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及作用机制.方法:建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为实验组即As203低(1.0 mg/kg)中(2.5 mg/kg)高(5.0 mg/kg)剂量组、空白对照生理盐水组及阳性对照5-FU组(20 mg/kg),腹腔连续给药10 d,计算抑瘤率,检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规,观察用药前后裸鼠体重改变,实时定量RT-PCR检测移植瘤内caspase-3基因相对表达量.结果:低剂量As203组及5-FU组抑瘤率分别为60.6%和78.2%,与生理盐水组比较有统计学差异(P＜0.05),中高剂量组及5-FU组差异无统计学意义(P＞0.05).用药后低剂量As203组caspase-3的基因表达显著增高,与生理盐水组比较有统计学意义(P＜0.05),中高剂量组在数值上caspase-3表达增高,但无统计学差异(P＞0.05).各剂量组均出现白细胞抑制,但较5-FU组轻,肝肾功能未见异常.结论:低剂量As203表现出抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达有关;As203对肝肾无明显毒性.     

大黄素对裸鼠体内 K562 细胞移植瘤的抑制作用及其与调控Caspase3 和 Caspase9 表达的关系

目的 探讨大黄素对 K562 细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其与 Caspase3 和 Caspase9 表达变化的关系。方法 建立裸鼠 K562 细胞皮下移植瘤模型,随机分为大黄素低、中、高剂量 (25、50、100 mg/kg) 3 个实验组,以及模型组和羟基脲 (120 mg/kg) 阳性对照组,每组 5 只,ip 连续给药 12 d,测量各组裸鼠肿瘤体积,称取瘤体质量,计算抑瘤率。采用 HE 染色光镜和透射电镜观察肿瘤细胞的凋亡情况,应用 RT-PCR 检测肿瘤组织中 caspase-3 和 caspase-9 mRNA 表达水平。Western blotting 法检测肿瘤组织中 proCaspase3 和 proCaspase9 蛋白的表达。结果 大黄素低、中、高剂量组肿瘤相对体积 (RTV) 分别为 5.23±0.24、4.38±0.17、3.57±0.31;与模型组 (10.45±0.47) 相比,大黄素处理组肿瘤体积明显缩小,具有统计学意义 (〖WTBX〗P〖WTBZ〗＜0.01)。光镜和电镜结果表明大黄素能够诱导 K562 细胞发生明显的凋亡。RT-PCR 结果表明不同剂量的大黄素能够引起 caspase-3 和 caspase-9 mRNA 的表达上调且有剂量依赖性。与模型组相比,大黄素处理组的 proCaspase-3 和 proCaspase-9 蛋白均出现明显的下调。结论 大黄素能够明显抑制人 K562 细胞裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与激活 Caspase-3 和 Caspase-9 信号转导通路有关。     

甲氧雌二醇对大肠癌肝转移抑制作用的实验研究

目的研究血管生成抑制剂甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol,2-ME)对大肠癌肝转移的抑制作用。方法将人大肠癌低分化腺癌细胞株LS174T注射入裸鼠的脾脏后,将脾脏切除,建立类似于临床的大肠癌肝癌转移裸鼠模型。建模后第3周开始分组治疗,注射PBS 100 mg/kg(对照组)2、-ME50 mg/kg、2-ME100 mg/kg、2-ME150mg/kg(治疗组)。第7周处死动物,测量肝脏转移肿瘤瘤重、肿瘤微血管密度(Microvessel Density,MVD)、抑瘤率、肿瘤细胞的凋亡指数(apoptotic index,AI)。结果肝脏转移肿瘤瘤重分别为1.28±0.31 g、0.72±0.18 g、0.48±0.12 g、0.21±0.08 g;MVD分别为17.5±5.8、9.1±2.7、3.3±1.3、0.85±0.6;抑瘤率分别为0%、43.8%、62.5%、83.6%;AI分别为4.56±2.71、7.21±4.25、17.35±4.78、20.15±5.34。治疗组与对照组相比,组间大肠癌肝转移的抑制作用有显著性差异(P<0.05),且抑制作用与2-ME有剂量相关性。结论2-ME通过抗肿瘤血管生成,并诱导大肠癌细胞的凋亡,对体内大肠癌生长具有强烈的抑制作用。     

NS-398对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成的影响

目的探讨NS-398对裸鼠胃癌移植瘤血管生成的影响.方法12只裸鼠随机分为2组,以人胃癌细胞株SGC7901建立荷瘤裸鼠动物模型.治疗组于接种第2 d开始给予10 mg/kg NS-398腹腔注射,隔d给药;对照组隔d腹腔注射同体积PBS,连续20 d,观察抑瘤率,应用免疫组织化学技术检测2组肿瘤组织环氧合酶-2(COX-2)、VEGF表达及微血管密度(MVD).结果NS-398抑瘤率达88.7%,COX-2、VEGF及MVD在治疗组分别为2.6±0.8,2.3±1.2和21.2±4.8,显著低于对照组的5.0±0.6,5.8±0.4和41.3±2.6(P均＜0.05).结论NS-398可能通过抑制COX-2、减少VEGF的表达抑制裸鼠胃癌移植瘤血管生成.     

As2O3对裸鼠移植肿瘤生长及血管生成的抑制作用

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌裸鼠皮下移植瘤微血管新生以及血管内皮生长因子受体-1（Fit-1）表达的抑制作用。方法：对30只裸鼠采用人胃腺癌SGC7901细胞建立皮下移植瘤模型,分为两个治疗组（2.5mg／kg组和5mg／kg组）和对照组,每组10只,2.5mg／kg组和5mg／kg组给予As2O3腹腔注射治疗,连续10d。对照组注射生理盐水测定肿瘤重量、抑瘤率,以判定As2O3抑制肿瘤生长的效果;荧光免疫测定CD31并计算微血管密度（MVD）;荧光免疫激光共聚焦测定Fit-1的表达。结果：2.5mg／kg组,5mg／kg组的抑瘤率按质量计算分别为29.08％和52.17％,As2O3治疗后瘤组织中MVD明显减少,与对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）;5mg／kg组瘤块中MVD明显少于2.5mg／kg组者（P〈0.01）。治疗组Flt-1表达显著低于对照组;5mg／kg组瘤块中Fit-1明显少于2.5mg／kg组者（P〈0.01）。结论：用As2O3单剂治疗能明显抑制人胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,As2O3治疗可显著减少肿瘤组织MVD,抑制肿瘤血管新生;抑制Flt-1的表达可能是As2O3抗肿瘤咀管新生的机制之一。     

重组人血管抑素对荷人CNE-1鼻咽癌裸鼠抑制作用的初步研究

目的:观察重组人血管抑素(recombinant human angiostatin, rhAGN)对荷人CNE-1鼻咽癌皮下移植瘤生长的抑制作用。方法:建立CNE-1鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤模型,皮下注射不同剂量rhAGN,治疗30d后,观察肿瘤体积和重量变化,计算其抑瘤率。结果:rhAGN处理剂量为50mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)和200mg/(kg·d)时,肿瘤体积分别为(4961±384)mm~3、(2449±276)mm~3和(488±52)mm~3,与对照组相比,治疗组的体积和重量明显减小(P<0.01,P<0.001);其抑瘤率分别为32.3％、64.0％和83.2％。结论:rhAGN能显著抑制CNE-1鼻咽癌移植瘤的生长,且作用呈剂量依赖性。     

SGC-7901/HCPT裸鼠皮下移植瘤的建立和鉴定

目的:建立多药耐药人胃癌细胞裸鼠移植瘤模型并探讨移植瘤的耐药特性。方法:将人胃癌细胞株SGC-7901和耐药细胞株SGC-7901/HCPT分别接种于裸小鼠左侧背部皮下和右侧背部皮下,在SPF级动物合格环境下饲养,观察肿瘤细胞成瘤情况,用MTT法比较移植瘤细胞对羟基喜树碱的敏感性及免疫组化测定其耐药基因TOPO-Ⅰ表达的变化。结果:SGC-7901和SGC-7901/HCPT裸小鼠移植成瘤率为100%,无自行消退现象。MTT法测定SGC-7901/HCPT和SGC-7901/HCPT/nude的IC50分别为4.686μg/mL和4.381μg/mL,与移植前细胞比较,差异无统计学意义。耐药基因TOPO-Ⅰ表达分别为2.964±0.162和2.953±0.172,差异无著性意义。结论:以SGC-7901/HCPT细胞建立的裸鼠皮下耐药移植瘤模型,仍保持体外的耐药活性和基因表型,为耐药机制和逆转的研究提供了良好的动物模型。     

胃安宁颗粒对肿瘤血管VEGF Ki-67表达影响的实验研究

目的：观察胃安宁颗粒对SGC-7901荷瘤裸鼠血管VEGF、Ki-67表达的影响。方法：将裸鼠皮下接种胃癌SGC-7901细胞后随机分为对照组、阳性药组及胃安宁颗粒大、中、小剂量组,用药后分别计算瘤重系数,并将肿瘤组织进行免疫组织化学染色,检测VEGF、Ki-67表达的情况。结果：胃安宁颗粒大、中剂量均能明显降低荷瘤裸鼠瘤重和瘤重系数（P〈0.05～0.001）,免疫组织化学染色显示,应用胃安宁颗粒后肿瘤组织VEGF、Ki-67的表达有所下降。结论：胃安宁颗粒可能通过抑制VEGF、Ki-67的表达起到抑制肿瘤血管生成的作用,从而达到抗肿瘤的目的。     

奥曲肽抑制胃癌侵袭和转移的实验研究

目的　通过体外及体内实验 ,研究生长抑素类似物奥曲肽对胃癌侵袭和转移的影响 ,并初步探讨其作用机制。方法　选用改良的BoydenChamber膜侵袭系统 ,观察奥曲肽对胃癌细胞迁移和侵袭的影响 ;建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型 ,给予奥曲肽皮下注射治疗 8周后 ,观察胃癌转移情况 ;免疫细胞化学染色检测奥曲肽对胃癌细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响 ;用明胶酶法及RT PCR法了解奥曲肽是否下调胃癌细胞MMP 2表达及MMP 2mRNA的表达。结果　经奥曲肽作用后 ,体外培养的胃癌细胞的趋化细胞数 (5 0± 4 )或侵袭细胞数 (30± 3)均明显低于对照组 (10 7± 11,5 6± 5 ,均P <0 0 1)。奥曲肽明显降低裸鼠人胃癌移植瘤的转移 ,其肿瘤血管的形成数亦明显低于对照组。此外 ,奥曲肽降低胃癌细胞VEGF的表达 ,明显下调MMP 2mRNA的表达 ,导致MMP 2的合成减少。结论　奥曲肽能有效抑制胃癌侵袭和转移。其作用机制可能与降低胃癌细胞运动能力、抑制MMP 2表达及肿瘤血管形成有关     

蜂毒素对胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其部分机制

目的 研究蜂毒素对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法 建立人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤模型,采用抑瘤率指标评价蜂毒素对荷瘤小鼠的抑瘤作用,采用脏器指数、中性红法测定腹腔巨噬细胞吞噬功能,改良的四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测自然杀伤(NK)细胞活性,ELISA法测定血清...     

多烯磷脂酰胆碱对奥沙利铂治疗人胃癌裸鼠模型效果影响及其机制

目的 探讨人胃癌裸鼠模型中不同剂量多烯磷脂酰胆碱(易善复)对奥沙利铂治疗效果的影响及其机制.方法 将人胃癌细胞SGC-7901接种于裸鼠皮下,建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型.随机分为6组:葡萄糖对照组、奥沙利铂组、易善复组及高、中、低剂量易善复联合奥沙利铂组.连续给药2周,停药24 h后处死裸鼠,称取瘤质量,计算抑瘤率,并检测用药后裸鼠的血常规及肝肾功能,检测瘤组织中超氧化物歧化酶(SOD)含量,流式细胞仪测定细胞周期,免疫组化法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、错配切除修复蛋白1(ERCC-1)和谷胱甘肽巯基转移酶(GST-π)的表达.结果 与对照组比较,奥沙利铂有明显抑制肿瘤生长的作用,易善复不能抑制肿瘤生长,各剂量易善复联合奥沙利铂组可抑制肿瘤生长,但与奥沙利铂组比较抑瘤率低;各剂量易善复联合奥沙利铂组随易善复浓度升高,SOD水平升高,caspase-3、ERCC-1和GST-π的表达下降.结论 易善复对奥沙利铂化疗疗效有拮抗作用,且呈剂量依赖性,可能与调节caspase-3、ERCC-1和GST-π表达有关.     

VEGF165表达载体的构建及其对人胃癌生长的作用

目的构建血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF165）真核表达载体,研究其对胃癌生成的作用. 方法用DNA重组方法,将编码VEGF165的全长cDNA克隆于pcDNA3载体中,构建VEGF165 mRNA真核表达载体;用阳性脂质体介导的基因转染技术,将重组体转入人胃癌细胞（SGC-7901）省系;观察转染细胞的细胞周期、增殖能力及致瘤生长情况等生物学指标. 结果斑点杂交、间接免疫荧光等分析显示,正义VEGF基因转染技术可使VEGF的表达得到明显地加强. 与未转染细胞相比,转染细胞的G2/M期细胞增加(0.44)而S期细胞减少(0.17),克隆形成率(9.0%)明显高于未转染细胞(4.0%). 瘤细胞接种裸鼠后33 d,过表达VEGF人胃癌细胞所致的移植瘤体积（2351±638) mm3明显大于未转染细胞所致的移植瘤体积（1534±363) mm3. 结论 VEGF可以通过加强肿瘤组织血管生成而促进肿瘤的生长,另外,VEGF的表达可能与细胞增殖能力有关.     

藤蟾方对荷人胃源性SGC-7901细胞裸鼠免疫功能和PCNA蛋白表达的影响

目的：探讨藤蟾方对裸鼠体内人胃源性SGC-7901细胞的抑瘤作用及对宿主免疫功能和增殖细胞抗原（PCNA）蛋白表达的影响。方法：通过体内实验,观察藤蟾方的抑瘤作用,用脾指数、胸腺指数初步检测藤蟾方的免疫调节作用,用PowerVisionTM二步法检测PCNA蛋白表达水平。结果：给药30天后,藤蟾方组和5．氟脲嘧啶组抑瘤率分别为32．56％、49．9％,同时两组对PCNA表达也有一定程度的影响。结论：藤蟾方对裸鼠体内人胃源性SGC-7901细胞具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制肿瘤组织的PCNA蛋白表达有关。     

人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型的建立和改进

目的：建立人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型。方法：用人胃癌细胞SGC-7901悬液接种于裸鼠皮下，形成稳定传代的皮下移植瘤。将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆肌层，观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化等生物学特性。结果：肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特点，人胃癌裸鼠原位移植模型成瘤率为100％(20／20)，肝脏转移率为45％(9／20)。结论：人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似，为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型。     

重组人生长激素对裸鼠胃癌移植瘤生长及血清VEGF浓度的影响

目的:研究重组人生长激素(rhGH)对裸鼠人胃癌移植瘤生长及血清VEGF水平的影响。方法:取60只雄性裸鼠进行实验,通过免疫细胞化学染色法检测胃癌细胞株SGC-7901及MKN-45生长激素受体(GHR)的表达状况,将GHR阳性表达的胃癌细胞株SGC-7901及GHR阴性表达的胃癌细胞株MKN-45分别接种于4只裸鼠皮下,制作裸鼠胃癌皮下移植瘤模型,3周后取出移植瘤制成组织匀浆,接种于剩余52只裸鼠。依据接种细胞种类不同分为移植瘤GHR阳性表达和GHR阴性表达裸鼠,不同GHR表达的裸鼠进一步分为对照组(C组:予0.9%NaCl,0.2 ml.d-1)、rhGH低剂量组(L组:予rhGH0.5 U.kg-1.d-1)、rhGH高剂量组(H组:予rhGH2.5 U.kg-1.d-1),连续给药14 d,观察并记录各组裸鼠体重和肿瘤体积变化,酶联免疫吸附法测定血清VEGF含量。结果:SGC-7901为GHR阳性表达的人胃癌细胞株,MKN-45为GHR阴性表达的人胃癌细胞株。对于接种GHR阳性表达的人胃癌细胞株的裸鼠,rhGH给药组皮下移植瘤体积较对照组增大(P<0.05),且H组促增长效应显著(P<0.05),3组...