铜绿假单胞菌产抗菌代谢产物发酵条件的优化

以分离的铜绿假单胞菌作为实验菌株,以对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑制效果及菌体干重为评价指标,采用单因素实验、正交实验优化铜绿假单胞菌产抗菌物质的培养基组分和发酵条件。结果表明:优化的培养基组分为黄豆粉2.5 g·L~(-1)、大豆蛋白胨10 g·L~(-1)、磷酸氢二钠10 g·L~(-1),优化的发酵条件为接种量2%、初始pH值7、发酵时间96 h。     

沼泽红假单胞菌对活性大红废水处理的研究

研究了驯化后的光合细菌N菌株—沼泽红假单胞菌的生长细胞在不同条件下对活性大红的脱色处理效果。结果表明,沼泽红假单胞菌具有较高的细胞活性,并对活性大红具有较强的脱色处理能力。在活性大红浓度为100mg/L时,该菌株生长细胞脱色的最佳条件为:温度30℃,pH值为7,光照厌氧条件下的脱色效率远远高于光照好氧条件下的脱色效率,脱色效率达到80.2%,活性大红作为该菌株唯一的碳源和能源,脱色效率与细胞浓度呈极显著相关,细菌脱色效率保持在较恒定的水平。     

假单胞菌脂肪酶手性拆分研究进展

脂肪酶是一种重要的工业用酶,本文从酶源角度综述了假单胞菌脂肪酶在拆分手性醇和酯等精细化学品中的应用,通过分子模拟解释其选择性并通过定向进化提高其选择性。由于假单胞菌脂肪酶天然耐有机溶剂的特性,可用于非水相生物催化。随着生物和化学领域的不断交叉,将进一步推动假单胞菌脂肪酶的开发和应用。     

铜绿假单胞菌注射液体外抗肿瘤生物活性检测方法的建立

目的建立铜绿假单胞菌注射液(Pseudomonas aeruginosa,PA-MSHA)体外抗肿瘤生物活性检测方法。方法将系列稀释的PA-MSHA在体外直接作用于人肝癌细胞BEL-7402,光学显微镜下观察细胞的生长状态;MTT比色法检测其对细胞增殖水平的影响;对10批PA-MSHA成品分别检测3次,以半数抑制浓度(IC50)为指标,计算批内和批间变异系数(CV),验证方法的精密性。结果随着PA-MSHA稀释度的降低,光镜下贴壁的BEL-7402细胞数量逐渐减少,细胞皱缩并破碎;MTT比色结果显示,随着PA-MSHA稀释度的降低,孔内颜色逐渐变浅,BEL-7402细胞增殖抑制率逐渐升高,呈一定的剂量-效应关系;10批PA-MSHA成品3次检测的IC50值范围为(3.584～7.778)×108个/ml,批内变异系数为4.58%～24.17%,批间变异系数15.08%～16.95%,总变异系数为15.81%,均符合细胞实验变异系数应小于30%的标准;PA-MSHA成品经该方法检测后,得到的IC50值在(3.109～7.383)×108个/ml范围内时,表明成品的生物活性合格。结论建立了PA-MSHA体外抗肿瘤生物活性检测方法,该方法稳定性好、精密性高,而且具有操作简便、节约成本和时间等优点,可用于对PA-MSHA以及其他类似细菌类生物制品的体外生物活性研究。     

沼泽红假单胞菌处理HMX研究

研究了驯化后的沼泽红假单胞菌(rhodopseudomonas palustris)生长细胞在不同条件下对奥克托今(HMX)的降解效果。结果表明,沼泽红假单胞菌具有较高的细胞活性,并对HMX具有较强的降解能力。在HMX质量浓度为130mg/L时,该菌株生长细胞降解的最佳条件为:温度25℃,pH值7;光照厌氧条件下的降解效率远远高于光照好氧条件下的降解效率,降解效率达到85.7%;HMX作为该菌株唯一的碳源和能源,降解效率与细胞浓度呈极显著相关,细菌降解效率保持在较恒定的水平。     

假单胞菌QLD-9的分离鉴定及其对喹啉的生物降解

[方法]采用富集培养法从受杂环类污染的土壤中分离喹啉降解菌株。[结果]分离得到1株以喹啉为唯一氮源、葡萄糖为碳源生长的QLD-9菌株,经16S rDNA鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.),该菌株能在48 h内将300 mg/L的喹啉降解99.9%以上,对600 mg/L以内喹啉具有良好的降解效果。[结论]QLD-9菌株对环境中喹啉的生物修复具有很好的应用潜力。     

铜绿假单胞菌RhlR抗血清制备

目的在原核系统中表达铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)PAO1的调控蛋白RhlR,制备兔抗RhlR抗血清。方法构建重组表达载体pGEX-4T-1-rhlR和pET-22b-rhlR并转化至大肠埃希菌BL21感受态细胞中,IPTG诱导表达GST-RhlR和His-RhlR蛋白,经GST或Ni~(2+)亲和层析纯化重组蛋白。将His-RhlR蛋白免疫新西兰大白兔,制备RhlR抗血清,GST-RhlR蛋白包被ELISA板,检测效价。结果构建的表达载体pGEX-4T-1-rhlR和pET-22b-rhlR经双酶切及测序鉴定证明构建正确;构建的工程菌表达的目的蛋白His-RhlR和GST-RhlR相对分子质量分别为29 000和54 000,表达量均约占菌体总蛋白的85%,纯度大于90%。制备的RhlR抗血清效价可达1∶80 000。结论获得高效价的RhlR抗血清,为PA中rhl调控系统的研究奠定基础。     

箬竹叶提取物对烟草病原真菌的抑制作用

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法,对选用无水乙醇、冰乙酸和蒸馏水混合溶剂浸提所得的箬竹叶粗提物以及依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行液-液萃取所得的萃取物进行了抑菌活性测试。结果表明:箬竹叶粗提物对烟草链格孢菌和烟草疫霉菌菌丝生长均具有抑制活性,其对两种真菌抑制的EC50值分别为3.98mg·mL-1和0.88mg·mL-1、EC90值分别为7.33mg·mL-1和1.73mg·mL-1;对烟草链格孢菌孢子萌发抑制的EC50值和EC90值分别为4.68mg·mL-1和9.09mg·mL-1。2mg·mL-1的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物和萃余水相对烟草链格孢菌菌丝生长的抑制率分别为31.27%、36.18%、6.06%和-7.05%;对烟草疫霉菌菌丝生长的抑制率分别为56.82%、81.53%、12.32%和-18.10%。乙酸乙酯萃取物对烟草链格孢菌和烟草疫霉菌菌丝生长的抑制活性明显高于箬竹叶粗提物,其对两种真菌抑制的EC50值分别为2.99mg·mL-1和0.80mg·mL-1、EC90值分别为5.41mg·mL-1和2.83mg·mL-1。乙酸乙酯萃取物对烟草链格孢菌孢子萌发抑制的EC50值和EC90值分别为1.03mg·mL-1和3.54mg·mL-1。     

铜绿假单胞菌次生代谢产物的研究进展

铜绿假单胞菌可产生多种具有活性的次生代谢产物。综述了铜绿假单胞菌次生代谢产物的种类、提取方法、合成方法、作用机制及用途,指出了研究中存在的问题,展望了未来的发展方向,拟为铜绿假单胞菌次生代谢产物的科学研究提供参考。     

沼泽红假单胞菌降解TNT废水的研究

本文研究了外加氮源对沼泽红假单胞菌降解TNT的影响,利用4因素3水平L9(43)的正交实验研究了该菌种对TNT废水的降解特性.结果表明:在最佳外加氮源KNO3浓度为0.1g/L时,沼泽红假单胞菌降解TNT的最优组合为:TNT浓度=50mg/L,温度=30℃,pH=7,接种量=108个/ml.     

两株假单胞菌对烷烃的摄取和降解

根据细菌在油水混合体系中的分布差异,从江苏油田附近污染的土样中筛选得到了两株对烷烃具有降解能力的假单胞菌Pseudomonas sp. A和Pseudomonas sp. B. 在以煤油为唯一碳源的培养基中,Pseudomonas sp. A的生长量较低,菌体主要聚集在油相中,菌体细胞呈亲油性,生长几乎不受生物表面活性剂抑制剂EDTA的影响,菌体的生长对培养基的表面张力的降低幅度较小;而Pseudomonas sp. B则表现相反的性质. 说明两菌株对烷烃具有不同的摄取机制,Pseudomonas sp. A是以直接接触烷烃的方式摄取,而Pseudomonas sp. B则是通过产生生物表面活性剂对烷烃进行乳化后再摄取.     

红假单胞菌浮选脱硫影响因素研究

采用微生物预处理-浮选联合工艺流程,利用红假单胞菌对高硫煤进行微生物-浮选脱硫实验,重点考察了预处理时间、矿浆浓度、pH值和细菌浓度等因素对浮选脱硫效果的影响．研究结果表明,微生物-浮选脱硫是一种高效的脱硫方法,红假单胞菌是一种有效的浮选脱硫菌种,其预处理时间、体系的pH值、矿浆浓度和细菌浓度等因素对脱硫效果有着显著的影响。     

铝絮凝剂絮凝沼泽红假单胞菌研究

研究了4种不同铝絮凝剂Al2(SO4)3、明矾、AlCl3和聚合氯化铝(PAC)絮凝沉降沼泽红假单胞菌细胞的效果.结果表明,PAC的絮凝性能最好,在0.01 mol·L-1的较低浓度下可以将100%的沼泽红假单胞菌细胞絮凝沉降.进一步研究显示,对于不同铝絮凝剂,在pH值为6～9时,随pH值的降低,沼泽红假单胞菌细胞的絮凝沉降效率逐步提高,其中仍然是PAC的絮凝效果最好.为从培养物中收集沼泽红假单胞菌细胞的产业化生产奠定了重要的基础.     

细胞污染物浅黄假单胞菌的鉴定及处理

目的鉴定实验中导致细胞污染的病原微生物,筛选消除该类病原微生物的抗生素药物。方法收集污染细胞上清,离心沉淀后提取核酸,使用细菌鉴定用的16S rDNA通用引物进行PCR扩增,回收产物后连接至pMD-18T载体,筛选阳性菌落测序,通过序列比对确定细胞污染物的类别,根据病原物的类别进一步筛选抗生素并摸索合适的抗生素使用浓度,以期达到消除病原物且不影响细胞正常生长的目的。结果 16S rDNA测序结果表明,细胞受到支原体和浅黄假单胞菌双重感染。抗生素处理结果表明,10μg/m L环丙沙星、10μg/m L美罗培南和10μg/m L新诺明联用可消除浅黄假单胞菌的污染,但处理后的细胞生长机能变差,需要在正常培养条件下培养并传代2次以上才会恢复正常。结论环丙沙星、美罗培南和新诺明联用能很好地消除浅黄假单胞菌对实验细胞的污染。     

26株铜绿假单胞菌对常用抗菌药物敏感性的体外研究

目的了解院内感染铜绿假单胞茵的耐药性变化情况,为临床诊治提供参考。方法收集2005年至2007年我院各科临床标本,分离培养铜绿假单胞茵并做药敏鉴定,分析其耐药性的变化。结果共检出26株铜绿假单胞茵。进行抗生素的耐药性检测,亚胺培南和哌拉西林、环丙沙星等抗生素的具有较强的抗菌作用,氨苄西林和头孢曲松为甚,其耐药率高达96.15%和84.62%。结论要加强对铜绿假单胞茵的耐药性检测并合理使用抗生素以延缓耐药菌株增加。     

游离和固定化恶臭假单胞菌对含酚废水的处理

采用恶臭假单胞菌,以活性炭纤维为载体,以聚乙烯醇(PVA)为包埋剂制成固定化恶臭假单胞菌,对含酚废水的降解效果进行研究。与游离恶臭假单胞菌相比,固定化恶臭假单胞菌小球的运行周期长,对苯酚的降解效果好。讨论了外部环境因素包括苯酚的初始质量浓度、pH和温度对固定化恶臭假单胞菌降解苯酚效果的影响。结果表明,随着苯酚质量浓度的增加,固定化恶臭假单胞菌对苯酚具有良好的降解效果;当苯酚初始质量浓度大于200 mg/L时,固定化恶臭假单胞菌降解苯酚的效果远远优越于游离态的;固定化恶臭假单胞菌对高质量浓度的苯酚、pH和温度的变化表现出了较好的耐受力;当pH为7～9,温度在30～35℃,固定化恶臭假单胞菌对苯酚的降解效果达到93%。     

假单胞菌代谢尼古丁研究进展

假单胞菌和节杆菌是两种最重要的尼古丁降解菌,目前节杆菌降解尼古丁的代谢途径、代谢相关基因和酶学机制都已经研究清楚,但是对假单胞菌降解尼古丁的研究尚不完善。本文将主要针对假单胞菌,从目前分离到的假单胞菌属微生物的菌株种类、代谢途径、代谢相关基因和酶学机制等方面阐述假单胞菌属微生物降解尼古丁的研究进展。     

5种植物精油对植物病原真菌的抑菌活性

[目的]植物精油用作农药具有对人畜安全、对环境友好、生物活性多样等特点,可克服化学农药的局限性,具有开发潜力。研究5种植物精油对10种重要农作物病原真菌的抑菌活性,以期为其在农药领域的开发利用提供依据。[方法]采用生长速率法测定植物精油对病原菌的抑菌活性。[结果]南丰蜜橘精油和胜红蓟精油对供试病原菌表现出较高的抑制活性,精油体积分数为1 mL/L时,对10种植物病原真菌的抑制率分别为77.27%~100%和63.54%~100%。南丰蜜橘精油和胜红蓟精油对10种植物病原真菌菌丝的EC50值分别为0.2316~0.5653、0.0573~0.1943 mL/L。[结论]南丰蜜橘精油和胜红蓟精油对供试植物病原真菌的抑制活性好,具有开发应用前景。     

应用噬菌体法检测实验动物中的绿脓假单胞菌

作者应用噬菌体法检测实验动物中的绿脓假单胞菌,在453份动物粪便中查到绿脓菌148份(32.67%),其中包括77份 SPF 和 CL 小鼠粪便中查到17份(22.1%),206份 CV 小鼠粪便中查到79份(38.4%),20份 CV 家兔粪便中查到9份(45%),73份 CV 豚鼠粪便中查到13份(17.8%),77份 CV 仓鼠中查到30份(39%),而用培养法检出绿脓菌仅为12/453(2.65%)。结果表明噬菌体法检出率高,并具特异性高、方法简便、可靠的优点。     

大蓟提取物对植物病原真菌的抑菌活性成分研究

[目的]大蓟有广泛的生物活性,具有生物农药的开发潜力。确定其中抗植物病原菌的主要活性成分,以期为其在农药领域的开发利用提供依据。[方法]通过溶剂提取法提取,用生长速率法测定提取物对5种植物病原真菌的抑菌活性,并用柱层析法分离活性物质。[结果]在质量浓度50 g/L时石油醚提取物对石榴枯萎病菌的抑菌活性最高,抑制率达100%,EC50值为5.1 g/L;从中分离出一个三萜类单体化合物,经鉴定为3β,21β-dihydroxyl-20(30)-en-taraxastane。[结论]大蓟对植物病原真菌有良好的抑菌活性,所分离到的单体化合物为大蓟中的主要抑菌活性成分。