甲基叔丁基醚对细胞周期及细胞凋亡的影响

目的：探讨汽油添加剂甲基叔丁基醚（ＭＴＢＥ）对细胞周期和细胞凋亡的影响。方法 采用流式细胞仪检测ＭＴＢＥ对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞周期（染毒浓度分别为１、２、４μｌ／ｍｌ,染毒时间为２４ｈ）的影响;应用结晶紫染色法,通过检测Ｈｅｌａ细胞的存活情况,了解ＭＴＢＥ对细胞凋亡的影响。结果 流式细胞仪结果显示,ＭＴＢＥ可使ＮＩＨ／３Ｔ３细胞周期发生改变。表现为Ｓ期细胞减少,而处于Ｇ２＋Ｍ期的细胞增多,提示ＭＴＢ     

微囊藻毒素-LR对人肝癌HT17细胞周期及细胞凋亡的影响

目的 研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)对人肝癌HT17细胞周期、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 调整HT17细胞密度为1×104/孔,分别设终浓度为0(溶剂对照,0.1%DMSO)、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、2.0、5.0μmol/L的MC-LR染毒组和去铁敏(DFO,1 mmol/L)染毒组以及...     

硫酸铟对L929细胞周期及细胞凋亡的影响

目的探讨硫酸铟对小鼠成纤维细胞(L929)细胞周期和细胞凋亡的影响。方法用四氮唑蓝比色法(MTT),检测L929的存活情况;采用流式细胞仪检测硫酸铟对L929细胞周期、细胞凋亡(染毒浓度分别为1.5、3.0、4.5mmol/L,染毒时间为24h)的影响。结果硫酸铟可改变L929细胞周期及细胞凋亡率。细胞周期表现为S期细胞增多,而处于G1期的细胞减少,提示硫酸铟可能具有影响L929细胞周期的作用,进而抑制细胞增殖;硫酸铟可增加细胞凋亡率。结论硫酸铟可引起L929细胞毒性,细胞存活率呈浓度-时间依赖性下降;硫酸铟可影响细胞周期和诱导细胞凋亡。     

漆姑草水提物对K562细胞凋亡及细胞周期影响

目的 探讨漆姑草水提物(HSJ)对人白血病细胞株K562细胞凋亡及细胞周期影响。方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HSJ对K562细胞的增殖抑制作用;台盼蓝拒染法观察HSJ对细胞生长曲线影响;流式细胞仪检测HSJ对K562细胞凋亡影响;DNA倍体分析法检测HSJ对K562细胞周期时相影响。结果 HSJ对K562细胞增殖抑制率随剂量增加而增加,作用48 h半数抑制浓度(IC₅₀)为1.35 mg/mL; 1.0、2.0、4.0 mg/mL HSJ处理后,K562细胞凋亡率分别为(8.39±0.81)%、(8.88±1.12)%、(13.42±2.04)%,均高于对照组的(4.60±1.09)%(P<0.05);HSJ能够引起细胞周期进程的改变,与对照组比较,HSJ增加K562细胞中G2期细胞比例(P<0.05),降低S期时相细胞比例(P<0.05),降低增殖指数(PI)(P<0.05),HSJ将K562细胞阻滞于G2期。结论 HSJ对K562细胞具有增殖抑制作用,其机制与诱导细胞凋亡和阻滞K562细胞在G2期有关。     

重复加热对肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的探讨连续10d加热后残留的HepG2细胞的凋亡率改变及Bc l-2和Bax基因/蛋白的表达变化。方法HepG2细胞经43℃加热,每次80m in,2次/d,共10个循环后,检测其细胞凋亡率、Bc l-2和Bax基因/蛋白的表达。结果热处理前、后HepG2细胞的凋亡率分别为(9.0%±0.8%)、(5.8%±1.3%)(P<0.05);热处理后HepG2细胞的Bax基因/蛋白的表达无明显变化,但Bc l-2基因/蛋白的表达增强,且Bc l-2/Bax比值的增加。结论热处理后HepG2细胞的凋亡率降低与其Bc l-2基因/蛋白的强表达及Bc l-2/Bax比值的增加有关。     

氟化物对大鼠颅骨成骨细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响

目的 :研究氟化物对大鼠颅骨成骨细胞生长、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法 :应用酶消化法分离培养大鼠颅骨的成骨细胞 ;AlamarBlue摄入法检测细胞活性 ;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果 :氟化钠 (NaF)浓度为 0～ 2mmol L、2 4h对细胞活性无影响 ;浓度为 2mmol L时 ,S期细胞数增多 ,G0 G1 期和G2 M期细胞无明显改变。NaF浓度为 4mmol L时 ,细胞活性受抑制 ,S期细胞数明显增多 ,G2 M期细胞明显减少。NaF浓度为 2mmol L和 4mmol L时 ,凋亡百分率明显增加。结论 :过量氟化物可影响大鼠颅骨成骨细胞活性及细胞周期的分布 ,使细胞停滞于S期 ,并可诱导细胞凋亡     

河蚬糖蛋白对人肝癌细胞凋亡的影响

目的 探讨河蚬中提取的糖蛋白(CFp-a)的体外抗癌作用。方法 体外培养人肝癌细胞BEL7404，利用透射电镜、体外细胞毒性试验(MTT)法、流式细胞仪观察CFp-a在体外对BEL7404细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。结果 CFp-a在体外具有抑制BEL7404细胞增殖的作用。透射电镜观察到CFp-a处理细胞产生凋亡形态学改变。在DNA直方图上观察到典型的亚“G1”峰。CFp-a对细胞周期中的G1-S和G2-M期两个检查点均有影响。结论 从河蚬中提取的糖蛋白CFp-a对BEL7404细胞具有明显诱导BEL7404细胞凋亡作用。     

甲基硒酸对乳腺癌细胞体外凋亡和细胞周期的影响

目的:观察甲基硒酸(MSA)对乳腺癌细胞系MCF-7凋亡和细胞周期的影响。方法:以不同浓度的MSA作用乳腺癌细胞系MCF-7,在不同时间内,观察不同浓度MSA对乳腺癌细胞凋亡率和细胞周期的影响。流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:①MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡,随着药物浓度及作用时间的增加,乳腺癌细胞凋亡率逐渐增加。②MSA可改变乳腺癌的细胞周期,将乳腺癌细胞周期阻断在G1期,并且减少S期细胞的比例。结论:MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡、调控乳腺癌细胞周期。MSA有望成为预防和治疗乳腺癌的一种新方法。     

穿心莲内酯对人宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的研究穿心莲内酯对人宫颈癌Si Ha细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响及潜在机制。方法采用0、20、40和80μmol·L~(-1)的穿心莲内酯处理Si Ha细胞,其中0μmol·L~(-1)的穿心莲内酯组为对照组;通过MTS法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-3活化率,PI单染法检测细胞周期分布,蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达水平。结果与对照组相比,20μmol·L~(-1)穿心莲内酯处理SiHa细胞24 h、48 h、72 h和96 h及40、80μmol·L~(-1)穿心莲内酯处理24 h、48 h、72 h和96 h后的存活率均明显降低(P0. 05);与对照组相比,20、40、80μmol·L~(-1)穿心莲内酯组细胞凋亡率、Caspase-3活化率及G0/G1期细胞比例升高,而活化的β-catenin、Cyclin D1及C-myc表达水平降低(P0. 05)。结论穿心莲内酯具有抑制人宫颈癌SiHa细胞增殖、促进凋亡及细胞周期的阻滞作用,该作用与Wnt/β-catenin信号通路的激活受阻有关。     

碘对成纤维细胞细胞周期及凋亡的影响

目的研究不同浓度碘对成纤维细胞(HSF)增殖及凋亡的影响。方法使用碘离子(终浓度为0～10000μg/L)染毒1×104个/ml的成纤维细胞悬液。于4、12、24、48h后测定细胞增殖活性;于24、48h后测定细胞周期及凋亡,计算细胞增殖指数和细胞凋亡率。结果染毒24h,碘离子浓度≤7000μg/L时具有促进成纤维细胞增殖和抑制细胞凋亡的作用;碘离子浓度7000μg/L时可抑制成纤维细胞的增殖活性和促进成纤维细胞凋亡。染毒48h,碘离子浓度≤3000μg/L具有促进成纤维细胞增殖和抑制细胞凋亡的作用;碘离子浓度≥7000μg/L可抑制成纤维细胞的增殖活性和促进成纤维细胞凋亡。结论碘对成纤维细胞的细胞增殖和凋亡具有双向效应。     

松花粉对砷中毒小鼠大脑皮质细胞凋亡相关因子和蛋白的影响

目的 探讨松花粉缓解砷中毒小鼠大脑皮质细胞凋亡的机制.方法 雌性昆明小鼠随机分为对照组(饮用蒸馏水)、干预组(NaAsO2:5 μg/g;松花粉:1 g/kg)、NaAsO2组(NaAsO2:5μg/g),每组8只.每天1次,连续45 d,运用ELISA方法和Western Blot技术检测小鼠大脑皮质细胞凋亡相关因子...     

双歧杆菌WPG对肝癌H22细胞的抑制作用研究

目的研究双歧杆菌完整肽聚糖（WPG）对小鼠肝癌细胞株H22的影响。方法采用MTT法检测双歧杆菌WPG对肝癌细胞株H22、人肝脏上皮细胞株的杀伤作用;观察WPG对荷瘤小鼠生存期的影响、抑瘤率及淋巴细胞转化率;对WPG作用后的肝癌细胞株H22进行形态学观察。结果双歧杆菌WPG在体外对肝癌细胞株H22具有显著的选择性杀伤作用;小鼠体内注射WPG明显抑制小鼠肝癌H22细胞的生长,提高淋巴细胞转化率;WPG作用后的H22细胞在透射电镜下凋亡现象明显。结论双歧杆菌的WPG对肝癌细胞株H22具有抑制作用。     

壬基酚对体外培养大鼠睾丸支持细胞凋亡影响的研究

目的探讨壬基酚对大鼠睾丸支持细胞的影响及其作用机制.方法建立体外培养大鼠睾丸支持细胞以及混合培养支持细胞和生精细胞体系,以不同浓度的壬基酚(分别为0.2μg/L、1.0 μg/L、3.0 μg/L、5.0 μg/L)作用于支持细胞和混合培养的支持细胞和生精细胞,采用MTT法测定支持细胞的活性,流式细胞仪测定支持细胞的凋亡率,RT-PCR法测定混合培养的支持细胞和生精细胞中Fas和FasL mRNA表达量的变化.结果随着壬基酚作用剂量的增大和作用时间的延长支持细胞的活性下降,且支持细胞的凋亡率随着壬基酚浓度的增大而提高;混合培养的支持细胞和生精细胞中Fas和FasL mRNA表达量均明显提高.结论壬基酚可引起支持细胞凋亡,进而通过Fas/FasL系统启动生精细胞凋亡.     

输精管结扎对大鼠生精细胞凋亡的影响

目的:研究输精管结扎对大鼠曲细精管生精细胞凋亡的影响及其机制。方法:将大鼠输精管结扎,1～10周后利用免疫组化法检测曲细精管生精细胞Bax和Bcl-2的表达情况,并应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术检测生精细胞的凋亡数目。结果:免疫组化法显示结扎后大鼠生精细胞Bcl-2的表达同假手术组比较无明显差异,而Bax的表达明显升高。结扎后不同时期组与同期假手术组比较,TUNEL法显示生精细胞凋亡数前者均高于后者(P<0.05)。结论:输精管结扎会导致大鼠曲细精管生精细胞凋亡数增加。     

热应激蛋白70在苯致小鼠骨髓细胞凋亡中的作用

目的 探讨苯是否可导致细胞凋亡和热应激蛋白70（HSP70）在这一过程中的作用。方法 取小鼠骨髓细胞，体外33℃，5%CO2孵箱中孵育过夜后，随机分为；普通组，以不同渡（0，2，10mmol/L)的苯染毒2h；热应激组，细胞40℃受热1h,33℃恢复1h，再以不同浓度（0，2，10mmol/L)的苯染毒2h，同时分别设立不染毒细胞组用以观察HSP70表达，采用Western blot和流式细胞术检测HSP70表达水平和小鼠骨髓细胞凋亡程度。结果 热应激后HSP70表达增加；热应激组细胞除0剂量染毒组外，其他剂量组细胞发生凋亡百分比均高于普通组。结论 热应激后细胞HSP70的增加不能抑制苯所致小鼠骨髓细胞凋亡的发生。     

二月桂酸二丁基锡对雄性大鼠肝细胞凋亡的作用

目的探讨二月桂酸二丁基锡(DBTD)对雄性大鼠肝细胞凋亡的作用。方法将雄性Wister大鼠随机分为对照组和3个不同剂量(5、10和20 mg/kg)的DBTD组。染毒组用色拉油配制成不同浓度的DBTD溶液,根据大鼠不同体重进行灌胃;对照组给予等量的色拉油;连续染毒8 w。在末次染毒结束后24 h(禁食12 h),股动脉取血后处死。以流式细胞术、细胞原位TUNEL法检测肝细胞凋亡率。结果染毒组大鼠随剂量的加大肝细胞DNA总损伤率明显提高(低:52.4%,中:81.4%,高:87.7%),与对照组(8.9%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同剂量组肝细胞各时相的细胞百分数发生变化:G0/G1期细胞百分数明显增加,G2/M期和S期细胞百分数明显减少,凋亡指数(AI)峰所占比例增加,染毒组与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 DBTD可使雄性大鼠肝细胞DNA损伤率升高和DNA合成受抑制,使肝细胞出现G0/G1期阻滞,进入S期和G2/M期细胞数量减少,有丝分裂延迟,表明DBTD对大鼠肝细胞有凋亡作用。     

氢醌诱导L-02肝细胞凋亡的研究

目的探讨氢醌(HQ)对体外培养L-02肝细胞凋亡(apoptosis)的影响和HQ毒性作用的分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度HQ(0,5,10,20,40,80,160和320μmol/L)作用24 h后L-02肝细胞的相对存活率;采用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测HQ染毒后的细胞凋亡状况。结果HQ在0~80μmol/L的染毒剂量范围内,对L-02肝细胞的存活率没有明显的影响(P>0.05),当HQ染毒剂量超过160μmol/L时,L-02肝细胞的存活率则明显地下降(P<0.01)。10,20,40,80,160和320μmol/L组L-02肝细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯状条带,并且随着HQ染毒剂量增加而渐趋明显。流式细胞术检测显示,HQ各染毒剂量组(5,10,20,40,80,160和320μmol/L)作用24 h后均可引起L-02肝细胞的调亡,并呈现出一定的剂量—反应关系;此外,还可出现明显的亚二倍体峰。结论HQ在体外能够诱导L-02肝细胞发生凋亡。     

Bcl-2基因转染对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响

目的　探讨Bcl-2基因转染对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响。方法　采用小鼠颈部心脏移植模型 ,随机分为 3组 :对照组、移植组、Bcl-2组。分别于术后第 1、3、5、7d各取 4只移植心脏 ,原位末端标记 (TUNEL)法染色检测心肌细胞凋亡 ,以心肌细胞凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数 (apoptosisindex ,AI)。用免疫组化方法观察Bcl -2的表达情况。结果　移植组心肌细胞于术后第 1d即已出现凋亡 ,第 3d明显增加 ,第 7d达高峰。Bcl-2组术后第 1d心肌细胞即表达Bcl -2 ,第 3d表达明显增加 ,第 5d达高峰 ,第 7d仍维持高峰状态。Bcl -2组各时间点心肌细胞凋亡指数明显小于对应的移植组(P <0 0 1)。结论　Bcl -2基因转染对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡有显著抑制作用     

去甲斑蝥素联合ABT-737对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究去甲斑蝥素（norcantharidin,NCTD）联合ABT-737对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测NCTD单药或联合ABT-737对宫颈癌细胞株HeLa、SiHa增殖的影响;采用流式细胞术分析NCTD联合ABT-737对宫颈癌细胞凋亡的影响。结果：NCTD单药能够显著抑制宫颈癌细胞株HeLa、SiHa的增殖,抑制作用呈剂量依赖性。NCTD与ABT-737联用后抑制作用明显增强。1 μmol/L ABT、60 μmol/L NCTD及两药联用诱导HeLa细胞的凋亡率分别为（31.65±7.75）%、（40.34±14.52）%和（63.03±10.90）%,诱导SiHa细胞的凋亡率分别为（9.76±0.04）%、（22.04±3.03）%和（58.36±2.31）%。NCTD、ABT两药联合的促凋亡作用比单药显著增强（P＜0.05）。结论：NCTD单药在体外能够明显抑制宫颈癌细胞HeLa、SiHa的增殖,与ABT-737联用后抑制增殖和促凋亡作用更加显著。     

镉对小鼠心肌细胞和肝细胞DNA的损伤

[目的]了解镉体内染毒对小鼠心肌细胞、肝细胞DNA的损伤情况。[方法]用氯化镉腹腔注射小鼠染毒,剂量为1mg(/kg·d)。分别在染毒的第5、10、15天处死小鼠,分离心肌细胞、肝细胞,通过单细胞凝胶电泳技术,测定镉对心肌细胞和肝细胞DNA损伤情况(彗星细胞数和彗尾长度)。[结果]镉在染毒的第5、10、15天与对照组比较,彗尾长度与受损细胞数目均有显著差别,P<0.05;且随着染毒天数的增加,心肌细胞和肝细胞的彗星细胞数目增多、彗尾细胞百分率升高、彗尾长度增加;在染毒第10天,心肌细胞彗星细胞数目及彗尾长度均高于肝细胞,说明心肌细胞较肝细胞更易受到损伤,但是随着镉染毒浓度的增加,在染镉第15天,肝细胞受损情况比心肌细胞严重。[结论]镉可以造成心肌细胞和肝细胞DNA损伤。