解毒化淤颗粒对急性肝衰竭小鼠肝细胞Caspase-3mRNA表达的影响

目的 探讨解毒化瘀颗粒抑制急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡的作用及可能的机制.方法 将昆明小鼠随机分为空白组、模型组、解毒化淤颗粒组、安宫牛黄丸组、乳果糖组,用D-GalN+LPS腹腔注射构建急性肝衰竭的小鼠模型,观察各组小鼠存活率,SYBR荧光实时定量PCR法检测肝细胞内天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3 mRNA)的表达.结果 成模后48 h存活率解毒化淤颗粒组高于其他药物组;促凋亡因子Caspase-3在解毒化淤颗粒组肝组织中表达量低,而在其他药物干预组及模型组中则高表达.结论 急性肝衰竭中Caspase-3表达与肝细胞凋亡程度有相关性,解毒化淤颗粒能下调内毒素肝损伤肝细胞Caspase-3表达并抑制其凋亡效应,降低肝衰竭小鼠死亡率,提示解毒化淤颗粒抑制肝细胞凋亡有可能是其防治急性肝衰竭的机制之一.     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭小鼠Fas相关死亡结构域蛋白表达的影响

目的：通过急性肝衰竭动物模型研究解毒化瘀颗粒对肝细胞凋亡的影响。方法：使用D-GalN联合LPS一次性腹腔注射制备急性肝衰竭的小鼠模型,观察解毒化瘀颗粒干预后小鼠肝细胞凋亡（TUNEL法）的情况以及FADDmRNA（SYBR荧光实时定量PCR法）的表达。结果：解毒化瘀颗粒组干预后肝细胞凋亡指数减少,与模型组及各药物干预组比较,差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。FADD在解毒化瘀颗粒组肝组织中表达量低,而在其他药物干预组及模型组中则差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）,含量明显升高。结论：解毒化瘀颗粒能提高肝衰竭小鼠的存活率,通过降低急性肝衰竭肝细胞的FADD表达拮抗凋亡效应是其主要作用机制。     

解毒化瘀颗粒影响急性肝衰竭大鼠肝细胞周期的实验研究

目的:明确解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠肝细胞有丝分裂指数和增殖指数的影响,为深入研究奠定基础。方法:以D-氨基半乳糖(D-Gal N)联合内毒素脂多糖(LPS)构建急性肝衰竭大鼠模型,在造模后6 h、24 h、48 h每组抽取6只大鼠采取标本,进行肝细胞有丝分裂指数和增殖指数检测。结果:急性肝衰竭大鼠经解毒化瘀颗粒干预治疗后,肝细胞在造模后24 h、48 h有丝分裂指数和增殖指数明显提高,与模型对照组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:解毒化瘀颗粒可促进急性肝衰竭大鼠肝细胞增殖与分裂,其机制与提高肝细胞在S期DNA复制有关。     

大承气汤对急性肝衰竭大鼠FADD介导的肝细胞凋亡作用研究

目的: 研究大承气汤对急性肝衰竭大鼠Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)介导肝细胞凋亡的干预作用。方法: 40只大鼠随机分为4组,分为正常对照组(A组),急性肝衰竭造模组(B组),大承气汤低剂量治疗组(C组),大承气汤高剂量治疗组(D组),每组各10只。C,D组大鼠于造模前2 d分别灌胃不同剂量大承气汤2 mL,A,B组予同等剂量生理盐水灌胃,继而B,C,D组大鼠均采用皮下注射硫代乙酰胺完成急性肝衰竭动物模型,造模完成后继续予药物灌胃3 d,处死所有大鼠,进行肿瘤坏死因子测定,进行肝脏病理学,FADD,肿瘤坏死因子受体1(TNFR1),Caspase-8免疫组化及肝脏组织细胞凋亡检测。结果: 硫代乙酰胺可引起急性肝衰竭并有广泛的肝细胞凋亡,同时可见FADD,TNFR1,Caspase-8蛋白在肝细胞中强表达;与模型组比较,大承气汤各组肝组织衰竭减轻,肝细胞凋亡率降低,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量下降,FADD,TNFR1,Caspase-8在肝细胞中的表达降低。高剂量组治疗效果更好。结论: 大承气汤可防治肝细胞凋亡,其作用机制可能与抑制FADD介导的肝细胞凋亡有关。     

解毒化瘀颗粒对术后肝衰竭大鼠肝细胞再生的促进作用

目的 探讨解毒化瘀颗粒对大部分肝切除肝衰竭大鼠肝细胞再生的的促进作用.方法 健康SPF级Wistar大鼠300只随机分为6组:假手术组50只、对照组50只、解毒化瘀颗粒组50只、解毒组50只、化瘀组50只、祛痰组50只.采用85％肝叶切除术构建大鼠肝衰竭模型,秤取肝脏重量,计算肝再生指数,使用流式细胞仪进行检测,每份样品检测104个细胞,应用DNA细胞周期分布软件计算出肝细胞增殖指数.结果 在术后48h之后解毒化瘀颗粒组存活率显著优于对照组(P＜0.05);解毒化瘀颗粒组在72h、168h时肝脏再生指数与对照组比较有统计学差异(P＜0.05);解毒化瘀颗粒组PI峰值出现在术后24h、48h,与对照组有显著性差异(P＜0.05).结论 解毒化瘀颗粒可促进肝细胞再生,提高术后肝衰竭大鼠存活率.     

内毒素肝损伤中FADD mRNA表达及凉血化瘀方的影响

目的研究凋亡调节基因相关死亡区蛋白(FADD)mRNA在内毒素肝损伤中的表达与肝细胞凋亡的关系,以及凉血化瘀方对其的影响.方法腹腔注射内毒素脂多糖于D-氨基半乳糖致敏小鼠造成暴发性肝衰竭模型,用逆转录-聚合酶链反应半定量分析FADD mRNA表达情况,同时观察药物的影响作用.结果造模3h模型组和治疗组肝组织中FADD mRNA表达分别为110%、100%,至6h模型组的表达增加(124%),治疗组表达下调(81%).结论凉血化瘀方抑制肝细胞凋亡的作用,可能与其下调FADD mRNA表达有关.     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭小鼠肝细胞FLIP蛋白表达影响的研究

目的:探讨解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡及凋亡抑制蛋白FLIP的影响,进而揭示其治疗肝衰竭的分子机制。方法:将昆明小鼠随机分为空白组、模型组、解毒化瘀颗粒组、安宫牛黄丸组、乳果糖组,用D-GalN+LPS腹腔注射构建急性肝衰竭的小鼠模型,观察各组小鼠存活率;HE染色法和TUNEL法观察肝组织的病理变化及检测肝细胞凋亡情况;免疫组化法检测FLIP蛋白在肝组织中表达。结果:成模后48h存活率解毒化瘀颗粒组高于其他药物组;肝组织HE染色镜下所见的坏死细胞以点状坏死为主,程度比模型组及其它药物干预组轻微;TUNEL法检测结果显示:解毒化瘀颗粒组肝细胞凋亡指数明显减少,与其余药物干预组及模型组比较有显著性差异(P<0.01或P<0.05);免疫组织化学染色结果显示:凋亡抑制蛋白FLIP在解毒化瘀颗粒组肝组织中表达量明显升高,而在其他药物干预组及模型组中则呈低表达(P<0.01或P<0.05)。结论:解毒化瘀颗粒能上调内毒素肝衰竭模型肝细胞浆中FLIP的表达,并发挥抑制凋亡效应。提示阻断FADD凋亡信号传递,有可能是解毒化瘀颗粒防治急性肝衰竭的机制之一。     

解毒化瘀颗粒抑制急性肝衰竭大鼠肝线粒体通透性转换的实验研究

目的:明确解毒化瘀颗粒在急性肝衰竭动物实验中的治疗作用及是否可抑制急性肝衰竭大鼠肝线粒体通透性转换。方法:采用D氨基半乳糖联合内毒素脂多糖构建急性肝衰竭大鼠模型,解毒化瘀颗粒干预治疗,成模后24 h收集各组大鼠标本,同时观察各组大鼠48 h存活率,全自动生化仪检测血清ALT、AST含量,分光光度仪检测肝线粒体在520 nm处吸光度的变化来测定PT孔开放情况,Western Bolt检测肝线粒体与胞质细胞色素C蛋白含量,测定Caspase-3蛋白活性情况。结果:解毒化瘀颗粒可提高急性肝衰竭大鼠48 h存活率,降低血清ALT、AST含量,抑制肝线粒体PT孔开放,提高线粒体细胞色素C含量,降低细胞质细胞色素C含量,抑制下游Caspase-3蛋白活性。结论:解毒化瘀颗粒可抑制急性肝衰竭大鼠肝线粒体通透性转换,抗急性肝衰竭肝细胞凋亡。     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠血清代谢物谱的影响

目的:从代谢物的角度来探讨解毒化瘀颗粒治疗急性肝衰竭(acute hepatic failure,AHF)大鼠可能的作用机制。方法:将18只大鼠随分为正常组、模型组和治疗组,每组各6只,治疗组予解毒化瘀颗粒进行灌胃,其余予等体积生理盐水替代中药进行灌胃,采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)的代谢组学方法对大鼠血浆样本进行检测,结合质谱信息和公共数据库检索对检测到的代谢物进行鉴定,用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)分析正常组、模型组和治疗组之间的差异代谢物。结果:在模型组(急性肝衰竭组)大鼠与治疗组(解毒化瘀颗粒组)大鼠血清中检测出10种比较有差异的特异性代谢产物(VIP 1,P 0. 05),包括焦谷氨酸、谷胱甘肽、酪氨酸、磷脂酰胆碱、氧化型谷胱甘肽、脱氧鸟苷、甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、3-羟基-2-氨基苯甲酸、黄素单核苷酸。结论:解毒化瘀颗粒可能通过调整谷胱甘肽、胆汁酸、核苷酸类、蛋白质类等物质的代谢,使急性肝衰竭大鼠内环境趋向于平衡,从而发挥其整体治疗作用。     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠细胞因子及肝组织的影响

目的:从炎症因子角度探讨解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠免疫网络的细胞因子调节作用和对肝组织的影响。方法:取Wistar大鼠120只,取正常组20只,其余大鼠采用D-氨基半乳糖(D-Gal N)+脂多糖(LPS)联合制备大鼠急性肝衰竭模型,造模成功的大鼠分别分为模型组,解毒化瘀颗粒低、中、高剂量组(9.1,28.76,57.55 g·kg~(-1)),E5531组(内毒素拮抗剂,10 mg·kg~(-1)),每组20只,造模前5 d开始ig给药,正常组与模型组均给予等量蒸馏水,2次/天,造模后给药48 h后处死大鼠,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),IL~(-1)0水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理组织学改变。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6水平明显升高,IL~(-1)0水平明显降低(P0.05),模型组大鼠肝组织明显的炎性细胞浸润,病理损伤较为明显;与模型组比较,解毒化瘀颗粒低、中、高剂量组TNF-α,IL-6水平及显著降低,IL~(-1)0水平表达升高(P0.05),肝组织病理结果提示解毒化瘀颗粒低、中、高剂量组的肝组织损伤程度均较模型组减轻,有显著性差异(P0.05)。结论:解毒化瘀颗粒通过减少促炎因子的水平、抑制促炎因子表达,提高抗炎因子的水平及表达来改善患者全身炎症反应、保护肝细胞功能,解毒化瘀颗粒拮抗急性肝衰竭大鼠的作用机制之一。     

酸枣仁汤对小鼠试验性急性肝衰竭的影响

目的：研究酸枣仁汤对小鼠试验性急性肝衰竭的影响。方法：雄性昆明小鼠,给予D-半乳糖胺(D-Gal-N)和脂多糖(LPS)同时腹腔注射,制备小鼠急性肝衰竭模型；并于造模前2 h,治疗组分别给予相应药物灌胃,正常、模型组给予蒸馏水灌胃。比较各组小鼠的24 h存活率,血清转氨酶水平,肝脏组织病理学改变,血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的水平,肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶［NOS包括总一氧化氮(T-NOS)和诱生型一氧化氮(iNOS)］的水平。结果：D-Gal-N/LPS可以导致小鼠急性肝衰竭；酸枣仁汤可以提高小鼠存活率,减轻肝脏病变程度,降低血清转氨酶活性及TNF-α,IL-1β的浓度,增加肝脏组织中SOD,GR的活性,降低NOS的活性及MDA,NO的浓度。结论：酸枣仁汤可减轻D-Gal-N/LPS所致的急性肝衰竭,提高小鼠的存活率,其作用机制可能与它影响睡眠从而影响炎性细胞因子(如TNF-α,IL-1)的释放和机体氧化能力的改变有关。     

原发性肝癌和肝硬化患者触珠蛋白测定的临床意义

目的　探讨原发性肝癌和肝硬化患者血清触珠蛋白水平测定的临床意义及其机制。方法　血清触珠蛋白测定采用速率散射比浊法 (RatenNephemometry)。结果　各肝病组血清触珠蛋白水平都明显低于正常对照组 (P <0 .0 1 ) ,其中肝癌和肝硬化组下降最为明显 ,但肝硬化腹水合并感染患者触珠蛋白水平却明显升高 (P <0 .0 1 )。结论　肝病患者触珠蛋白下降的原因可能和肝实质的广泛受损、肝脏合成触珠蛋白功能低下以及溶血有关 ,血清触珠蛋白水平的升高对诊断肝硬化腹水继发感染有一定价值     

扶正化瘀中药治疗肝纤维化大鼠的实验研究

目的研究扶正化瘀中药治疗肝纤维化的作用。方法采用四氯化碳花生油皮下注射结合高脂饲料、酒水饮料复合因素诱导大鼠肝纤维化模型,以大黄虫丸为对照,观察扶正化瘀中药对肝纤维化大鼠的一般情况、肝脾质量、肝功能、肝组织病理形态学的影响。结果扶正化瘀中药可显著改善肝纤维化大鼠的一般情况,抑制肝脾增大,显著改善肝功能,明显减轻肝细胞损害、肝脏脂肪变性和胶原纤维增生的程度。结论扶正化瘀中药有较好的保护肝细胞,改善肝功能,阻止肝纤维化进展甚或逆转肝纤维化病理改变的作用。     

黄连解毒汤对脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤治疗作用及机制

目的 研究黄连解毒汤对脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤的作用及作用机制。方法 雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和黄连解毒汤低、中、高剂量（50、100、150 mg/kg）组,每组8只。连续ig黄连解毒汤3 d,末次给药2 h后,ip脂多糖（10 mg/kg）建立急性肾损伤模型。检测血清中肌酐和尿素氮水平;苏木素-伊红（HE）和高碘酸-席夫（PAS）染色检测肾组织病理变化;免疫组化法检测肾组织B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）表达;TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡情况;Western blotting检测肾组织磷酸酯酶与张力蛋白同源物（phosphatase and tensin homolog,PTEN）、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、p-PI3K和p-Akt蛋白表达。结果 黄连解毒汤明显降低急性肾损伤小鼠血清中尿素氮及肌酐水平（P<0.0...     

化瘀丸对小鼠Lewis肺癌生长及血栓形成相关因子的干预作用

目的:观察以益气活血解毒为治法的化瘀丸对肿瘤生长及血栓形成相关因子的影响。方法:建立小鼠Lewis肺癌动物模型,造模后24 h随机分组并开始给药,实验分为5组:模型组(无菌水10 mL.kg-1 ig,0.9%NaCl 10 mL.kg-1 ip,1次/d)、低分子肝素组(无菌水10 mL.kg-1 ig,低分子肝素注射液100 u.kg-1 i,p)、环磷酰胺(CTX)组[无菌水10 mL.kg-1 ig,CTX50 mg.kg-1(1,61,1,16 d)ip,1次/d]、化瘀丸组(化瘀丸4 g.kg-1 ig,0.9%NaCl 10 mL.kg-1 ip,1次/d)、空白对照组(无菌水10 mL.kg-1 ig,0.9%NaCl 10 mL.kg-1 ip,1次/d),给药12 d或19 d。定期观察各组小鼠体重及肿瘤生长情况,接种后132,0 d处死小鼠,检测瘤重、肺转移数,酶联免疫法(ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、P-选择素(P-selectin)、内皮素-1(ET-1)水平。结果:化瘀丸组小鼠瘤重显著低于模型组(P<0.01),抑瘤率分别为34.97%(13 d)和31.52%(20 d),肺转移抑制率为83.25%(20 d)。20 d化瘀丸组小鼠血清ET-1水平低于模型组(P<0.05),P-selectin,ET-1水平低于低分子肝素组(P<0.05),并显著低于CTX组(P<0.01)。结论:化瘀丸作用于Lewis肺癌荷瘤小鼠,具有一定抗肿瘤生长的作用,并能降低荷瘤小鼠异常升高的血栓形成相关因子水平。     

委陵菜对四氯化碳致小鼠肝损伤保护作用

目的 :研究委陵菜对四氯化碳 (CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 :用委陵菜给小鼠灌胃 7天 ,观察对四氯化碳致小鼠肝损伤所引起血清谷丙转氨酶和谷草转免酶升高、肝脂质过氧化物含量的影响。结果 :委陵菜能明显降低模型组的血清转氨酶、肝脂质过氧化物含量。结论 :委陵菜对小鼠肝脏的化学损伤有保护作用     

生脉散调节大鼠慢性肝衰竭内毒素血症的机理研究

目的：探讨生脉散调节慢性肝衰竭大鼠内毒素血症的作用机理。方法：CCL4腹腔注射法建立大鼠慢性肝衰竭模型,在此基础上以LPS攻击以建立慢性肝衰竭内毒素血症模型,用生脉散治疗并与对照组比较。取造模后2h时间点,检测大鼠血清LPS（内毒素）与细胞因子如TNF-a,IL-6,ICAM-1水平。结果：2h后生脉散可减低慢性肝衰竭内毒素血症大鼠血清LPS、TNFα、IL-6,ICAM-1水平,差异有统计学意义（P〈0.001）。结论：慢性肝衰竭状态下,可存在不同程度的内毒素血症,并引起细胞因子水平变化,生脉散通过调节内毒素及细胞因子水平是其起到治疗作用的重要原因。     

健脾化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎的临床疗效及对细胞周期蛋白E表达的影响

目的:观察健脾化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变(PLGC)病人的疗效以及对细胞周期蛋白E(Cyclin E protein)表达的影响.方法:60例患者随机分为治疗组和对照组各30例.另设10例健康对照组.对照组采用胃复春片,4片/次,3次/d.治疗组采用健脾化瘀解毒方治疗,常规水煎服分3次服用,1剂/d.疗程均为24周.观察两组的临床疗效、胃镜、病理及幽门螺杆菌(HP)的改变;测定Cyclin E蛋白的表达量.结果:治疗组总有效率93.33％,对照组总有效率86.67％,差异不明显;治疗组胃镜总有效率(80.00)优于对照组(60.00％)(P＜0.05);治疗组病理疗效总有效率(76.67％)优于对照组(60.00％)(P＜0.05);治疗组HP根除率(68.18％)明显优于对照组(21.05％)(P＜0.05);两组治疗后Cyclin E蛋白的表达均降低,治疗组降低更显著(P＜0.01).结论:健脾化瘀解毒法能提高CAG胃镜及病理疗效,HP根除率高;健脾化瘀解毒法能调节Cyclin E蛋白的表达,从而阻止胃癌前病变发展.