机采血小板常温保存过程中代谢及体外功能变化的研究

目的 研究机采血小板常温保存过程中代谢及体外功能的变化规律。方法 通过对15U保存0～9d机采血小板的血气指标、葡萄糖、乳酸、乳酸脱氢酶、血小板膜表面CD62p表达率、凝血酶激活后CD62p再表达水平、血小板低渗休克反应进行系统监测,分析机采血小板体外保存过程中代谢指标与体外功能的关系。结果 血小板在体外保存9d的过程中,乳酸与H^＋逐渐堆积,pH值随之下降;血小板低渗休克反应在7d时开始明显下降;CD62p表达率随保存天数增加而逐渐增高,凝血酶激活后CD62p再表达率逐步下降;血气、葡萄糖、乳酸等代谢指标与血小板低渗休克反应、CD62p的表达率及再表达率具有显著相关性。结论 对代谢指标的监测可以间接反映血小板体外功能的变化,从而对血小板保存质量作出系统评价。     

机采血小板储存过程中5种miRNA前体的表达变化

目的分析机采血小板储存过程中表达量有明显升高的5个miRNA前体(pre-miRNA)表达谱,为研究机采血小板中miRNA的成熟及调节机制提供参考。方法分别提取不同储存时间(1、3、5 d)各2 m L机采血小板总RNA,以5S rRNA为内参照,采用实时荧光定量(qRT-PCR)法分别检测5个miRNA前体pre-miR-16、-96、-150、-155和-316的表达水平。结果以新鲜机采血小板0 d pre-miRNA表达水平为基准,pre-miR-16的相对表达量在1、3、5 d分别为0.98±0.08、0.96±0.11、0.92±0.14;pre-miR-96的相对表达量在1、3、5 d分别为0.97±0.08、0.98±0.09、0.94±0.12;pre-miR-150的相对表达量在1、3、5 d分别为0.95±0.09、0.91±0.06、0.93±0.15;pre-miR-155的相对表达量在1、3、5 d分别为0.97±0.12、0.95±0.08、0.95±0.10;pre-miR-326的相对表达量在1、3、5 d分别为0.98±0.08、0.96±0.12、0.86±0.18。相对于新鲜血小板,上述5种pre-miRNA在储存过程中表达量无明显改变(P0.05)。结论机采血小板储存过程中表达量明显升高的5个miRNA的pre-miRNA表达相对稳定,并未伴随miRNA表达改变而改变。     

机采血小板实验室保存期间的生化改变

目的探讨机采血小板在实验室内保存期间的生化改变及其意义。方法采用ROCHE cobas b221和OLYMPUS AU400测定血小板样本的pH值、PO2、PCO2、葡萄糖（GLU）浓度、乳酸脱氢酶（LDH）释放量。结果保存期间pH值由7.311（第1天）降至7.116（第5天）;PO2波动于106.7～119.5mmHg（1mmHg=0.133kPa）;PCO2波动于25.0～35.8mmHg;GLU浓度呈进行性下降,由18.8mmol/L降至15.2mmol/L;LDH浓度显著增加,由150mmol/L（第1天）增至259mmol/L（第5天）。结论血小板在保存期内,其生化参数会随着保存时间发生改变。而这些参数作为间接指标对机采血小板是否被细菌污染具有一定的指导意义。     

常温法与深低温法保存的机采血小板临床应用比较

机采血小板因具有浓度高 ,红细胞、白细胞污染少 ,疗效好等优点应用于临床 ,其保存方法有常温保存和深低温保存两种 ,笔者对这两种方法保存的血小板的临床疗效进行了比较 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　机采血小板的制备　用ＣＳ 30 0 0 ｐｌｕｓ血细胞分离机 (美国Ｂａｘｔｅｒ公司 )采集血小板。血小板数≥ 2 5× 10 11个 /治疗量 ,体积约 2 0 0ｍｌ。1 2　机采血小板的常温保存　 (2 2± 2 )℃ ,水平振摇 6 0次 /ｍｉｎ ,保存期 5ｄ。1 3　冰冻血小板的制备　机采血小板制作完成后 ,先置(2 2± 2 )℃ ,水平振摇 6 0次 /ｍｉｎ ,30ｍｉ…     

深低温保存单采血小板凋亡相关miRNA的差异表达

目的了解单采血小板在深低温保存过程中凋亡相关microRNA(miRNA)的表达改变。方法应用miRNA微孔板芯片技术分析-80℃保存不同时间单采血小板凋亡相关miRNA表达谱的差异,同时利用qRT-PCR技术验证该结果的准确性;采用生物信息学软件预测差异表达miRNA可能的靶基因。结果与新鲜单采血小板相比,凋亡相关miRNA表达谱在血小板-80℃保存5 d时无明显变化、保存7 d时仅有2种明显上调变化的miRNA:miR-216和miR-296。选择表达谱中miR-216 miR-296 miR-7和miR-16共4种miRNA做qRT-PCR验证:以新鲜血小板表达水平为基准值1,-80℃保存5、7 d后miR-216的相对表达量分别为1.81±0.21和2.88±0.23,miR-296的相对表达量分别为2.27±0.20和3.85±0.17,miR-7的相对表达量分别为0.89±0.06和0.76±0.03,miR-16的相对表达量分别为1.12±0.35和1.40±0.32,miR-216和miR-296在7 d保存过程中表达上调(P0.05),miR-7和miR-16的表达未发生明显变化(P0.05)。结论短期(7 d)深低温保存单采血小板凋亡相关miRNA的表达谱接近新鲜单采血小板。     

冰冻保存机采血小板超微结构的改变与体外回收率的观察

对各种原因所致的血小板减少和临床出血,输注血小板是特异的治疗方法之一,近年来临床输用血小板需要量急骤增加,但新鲜血小板室温保存时间短,而且存在细菌污染的危险性,尤其使战备储血及特殊血型和自身输血的应用受限,因此,血小板输注应用的进展要求体外长期储血.     

-80℃保存机采浓缩血小板的临床应用

血小板的体外保存始终是输血医学的一道难题。浓缩血小板在22℃恒温条件下,用振荡或旋转式保存的最长保存期不超过5天。另外血小板保存严格的温、湿度条件也是细菌繁殖的最适条件,易发生污染而导致严重输注事故的发生。因此,许多血站均采用临床需要时临时制备的方式,向临床提供血小板。然而血小板无论是手工分离还是机器采集,整个程序从预约献血员、体检、两次化验到采集制备,通常需要6～8小时。     

浓缩血小板的制备和保存过程中血小板表面组织因子的表达

目的 本研究旨在评估输血用浓缩血小板(platelet concentrate,PC)制备和储存过程中表面凝血主要激活因子——组织因子(tissue factor,TF)的表达.方法 在制备当天和储存至4 d的同时,通过流式细胞术分析健康的献血员全血和PC来源血小板的TF,同时分析经典的血小板活化标记物,即纤维蛋白原,...     

机采血小板悬液在保存过程中凝血因子Ⅷ、Ⅸ生物活性的变化

为了研究机采血小板悬液22℃振荡保存不同时间的凝血因子Ⅷ、Ⅸ生物活性的变化,采用SYSMEXCA-1500型全自动血凝仪对用CS-3000plus血细胞分离机采集的18份血小板悬液于22℃振荡保存条件下,测定0、12、24、48、72、96、120小时7个时间段的FⅧ∶C和FⅨ∶C的活性。结果表明:机采血小板FⅧ∶C在0时活性为(100.51±44.02)%,保存12-120小时,其活性衰减了10%-40%;FⅨ∶C在0时活性为(120.93±20.50)%,保存24-120小时,其活性衰减了10%-35%。结论:机采血小板悬液于22℃振荡保存时凝血因子Ⅷ、Ⅸ仍保持有较高的生物学活性。     

血小板机采过程中年龄依赖性骨代谢变化分析

目的了解柠檬酸盐抗凝剂（ACD-A）对机采血小板献血员骨骼代谢的影响。方法比较37名健康男性机采血小板献血员[平均年龄（31．9±6．4）岁]机采前、后及不同年龄组血清骨代谢生化指标，包括：（1）骨生成指标：骨钙素（OC）、骨特异性碱性磷酸酶（B-ALP）；（2）骨吸收指标：Ⅰ型胶原蛋白C端片段（CTX）；（3）全段甲状旁腺素（i-PTH）的变化和相互关系。结果i-PTH、OC、CTX水平分别由采前的（44．4±20．4）pg／ml、（22．9±8．5）ng／ml、（2．6±1．3）nmol／L上升到采后的（129．2±49．1）pg／ml、（29．8±11．7）ng／ml和（3．9±1．7）nmol／L；而B—ALP水平则由采前的（20．5±5．2）U／L下降到采后的（18．0±5．0）U／L。同时机采后CTX／OC比值亦由0．12±0．04上升到0．13±0．03。相关分析表明，无论机采前或后血清CTX与OC水平间变化均呈显著相关（r=0．62，0．89，P〈0．01）。不同年龄组的数据比较显示，A组（21～30岁）采后CTX增幅明显大于B组（31～40）岁，P=0．02。而其他指标未见显著性差异。结论机采过程中柠檬酸盐抗凝剂（ACD-A）的应用在男性献血者中可引起以骨吸收增强为主的骨转换的提高，此现象存在着年龄依赖性。     

不同血液保存液对机采血小板捐献者的影响分析

随着成分输血的发展,机采血小板因为制品纯度高,临床效果佳,经输血传播疾病的概率及副作用小,所以临床需求量大幅增加.在保障机采血小板临床供应方面,不仅要从献血者招募上多下功夫,更要选择优质血液保存液以减少献血反应.我们通过观察机采血小板的318例献血反应,发现献血反应发生率与使用的血液保存液有关,报告如下.     

影响献血者捐献机采血小板的相关因素分析

目的分析广州市全血献血者中参加单采血小板捐献的人群特征分析,研究单采血小板献血者的人群特征和对应招募策略。方法以2015年在广州血液中心全血献血者为研究对象,使用SPSS软件对性别、年龄、受教育程度、献血地点、献血状态进行描述、卡方检验和逻辑回归。结果 36岁以上、大专或以上学历的重复全血献血者更可能捐献机采血小板。年龄、受教育程度、献血地点、献血状态都是捐献机采血小板的相关因素。这些因素可能与全血献血者对单采血小板捐献的关注度、知识和愿望有关。结论从全血献血者中招募单采献血者时,建议宣传工作可重点选在固定献血点和高校发动资深重复献血者。     

浓缩血小板保存过程中补体含量的变化

浓缩血小板在制备与保存时易造成血小板的活化与损伤。我们对浓缩血小板保存过程中的补体含量进行了测定,探讨补体级联反应的激活在血小板活化中的作用与意义。一、材料和方法１浓缩血小板制备：采用富含血小板血浆（ＰＲＰ）法,于血小板保存箱内保存５天,并于保存前...     

TEG技术在血小板保存过程中功能评价的应用研究

本研究旨在通过血栓弹力图（thmmbelastography，TEG）技术探讨血小板保存过程中功能的变化。随机选择各项指标均符合国家标准的单供者机采血小板12个单位并在（22±2）℃条件下振荡保存。分别在保存1、2、3、4、5天检测血栓弹力图参数，包括反应时间（R）、凝血时间（K）、α角（ANG）和最大振幅（MA），同时检测血小板计数、平均血小板体积、低渗休克反应（HSR）水平、CD62p阳性率及凝血酶激活CD62p再表达率的变化，综合评价血小板保存过程中体外功能的变化情况。结果显示：平均血小板体积随保存时间延长而轻度增大，但无统计学差异（p〉0．05）；血小板膜表面CD62p表达率随保存时间延长而显著升高（P〈0．01）；凝血酶激活后CD62p再表达率随保存时间的延长而显著下降（p〈0．01）；血小板低渗休克反应水平在1-5天无明显变化（P〉0.05）；R值随保存时间延长而明显延长（P〈0．01），K值无明显变化（P〉0.05），α角虽呈轻度下降趋势，但无显著差异（P〉0．05）；MA值在保存1-4天无显著变化，保存5天时仅有轻度下降（P〈0．05）。结论：虽然血小板随保存时间延长激活率明显升高，但反映血小板综合凝血功能的最大振幅（MA值）和HSR水平在整个保存期内并无显著变化，说明保存期末的血小板仍然具有良好的止血功能；血栓弹力图参数MA值可以作为一项重要指标用于血小板保存过程中的功能评价。     

新生大鼠缺氧缺血性脑病中miRNA表达谱的改变及分析

目的 通过基因芯片检测新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)模型中差异性表达miRNA,构建HIE中miRNA及其靶基因调控网络。方法 将7 d龄新生SD大鼠12只随机分为HIE组及假手术对照组,每组6只。采用Rice法建立新生大鼠HIE模型,造模24 h取新生大鼠海马组织,基因芯片检测HIE组和假手术对照组海马组织中差异性表达的miRNA,采用生物信息软件分析相关miRNA调控的靶基因及信号通路。结果 筛选出差异性表达的miRNA共22个,其中表达上调9个(mmu-miR-215-5p, mmu-miR-1249-3p, mmu-miR-3072-5p, mmu-miR-324-3p, mmu-miR-690,mmu-miR-874-5p, 11＿10767,11＿10888,13＿12928＿star)、表达下调共13个(mmu-miR-141-3p, mmu-miR-182-5p, mmu-miR-183-5p, mmu-miR-190a-3p, mmu-miR-200a-3p, mmu-miR-200b-3p, mmu-miR-200c-3p, mmu-miR-429-3p, mmu...     

机采血小板过程引发献血者骨代谢平衡变化的分析

目的探讨机采血小板过程中献血者骨代谢平衡改变的特点。方法应用骨标志物图示分析法(bonemarker plot)对35名机采血小板捐献者采集前、后血骨代谢特异性标志物(骨吸收指标:Ⅰ型胶原蛋白C端肽,carboxy-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX;骨形成指标:骨钙素,osteocalcin,OC)的水平变化进行分析。结果采集后2检测指标均显著高于采集前(P<0.05),β-CTX和OC的平均升幅分别为(64.5±47.1)%和(34.7±25.2)%。bone marker plot分析显示采集后骨转换水平大幅升高(P<0.05);骨平衡向骨吸收增强方向偏移(P=0.01)。结论机采血小板过程对献血者骨代谢平衡的影响的特点为以骨吸收增强为主的骨转换速率的提高。     

miRNA在妊娠相关并发症中表达情况的研究

正微小核糖核酸(miRNA)是非编码单链RNA,它参与调控细胞凋亡、增殖、分化、个体发育等多个生命活动~([1]),是通过与mRNA的3′非编码区(3′UTR)互补配对结合,引导沉默复合体(RISC)降解靶mRNA,而与靶mRNA不完全互补的miRNA则在蛋白质翻译水平上抑制其表达。miRNA作为近年热点,多数研究主要集中于miRNA在肿瘤方面的研究。有文献     

机采血小板在骨髓移植中应用的1例报告

在对患者进行自体骨髓移植治疗中，我们应用美国百特公司CS-3000plus血细胞分离机采集浓缩血小板，配合临床对1例“急性早幼粒细胞白血病M3a”患者进行输注，疗效良好。现报告如下。