淫羊藿苷通过Wnt/β-catenin信号通路抑制淀粉样蛋白Aβ 25-35所诱导的神经毒性

 目的 研究淫羊藿苷（icariin）对β-淀粉样蛋白（Aβ_25-35）所致的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株（PC12细胞）神经毒性的抑制作用和潜在机制。 方法 将PC12细胞分为正常对照组、Aβ_25-35损伤组、淫羊藿苷与Aβ_25-35共同给药组、淫羊藿苷单独给药组,然后考察淫羊藿苷对PC12细胞损伤的保护作用,以及淫羊藿苷对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用。结果 淫羊藿苷可以显著的抑制Aβ_25-35所诱导的PC12细胞神经毒性,提高细胞存活率,此外其还可以降低凋亡相关蛋白caspase-3和PARP的激活。机制研究发现,淫羊藿苷可以激活Wnt/β-catenin信号通路中的关键蛋白β-catenin的活性,抑制其磷酸化,并促进该蛋白向细胞核中的转运。此外,淫羊藿苷还可以通过调节不同的磷酸化位点来抑制GSK-3β信号蛋白的活化。结论 淫羊藿苷可显著抑制Aβ_25-35所致的PC12细胞的毒性作用,其潜在机制可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路来实现的。     

淫羊藿苷在阿尔茨海默病中的神经保护作用及机制研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种以认知功能障碍为主要特征的神经退行性疾病,目前尚缺乏有效治疗药物。根据中医理论与实验研究发现,补肾壮阳药淫羊藿对AD有一定治疗作用,而其有效成分淫羊藿苷可通过作用于多个靶点,在AD治疗中发挥重要作用。本文主要就近几年国内外研究的相关文献,对淫羊藿苷治疗AD的作用机制进行分析并阐述。     

淫羊藿苷抗糖尿病大鼠心肌线粒体氧化应激损伤作用研究

目的:研究淫羊藿苷对链脲佐菌素诱导的I型糖尿病大鼠心功能及心肌线粒体氧化应激的影响.方法:雄性SD大鼠,随机分成正常对照组、淫羊藿苷对照组、糖尿病模型组、淫羊藿苷低、高剂量(30,120mL·kg-1·d-1)组,各组大鼠饲养8周后,测体重、血糖、心功能、左心室质量、心肌胶原含量,分离心肌线粒体检测活性氧自由基(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:淫羊藿苷处理后抑制了糖尿病引起的体重下降,并且显著减少了糖尿病大鼠心室与体重比值,提高了左心室发展压、左心室内压最大上升和下降速率,降低了左室舒张末压.淫羊藿苷明显减少了糖尿病大鼠心肌胶原含量及心肌线粒体ROS水平;高剂量淫羊藿苷明显抑制了心肌线粒体MDA含量,增加了心肌线粒体SOD活性.结论:淫羊藿苷治疗糖尿病大鼠8周后,能显著改善糖尿病大鼠心功能,其机制可能与减轻心肌线粒体氧化应激损伤有关.     

淫羊藿苷对中动脉阻塞大鼠脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B表达的影响

目的:探讨淫羊藿苷对中动脉阻塞模型大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸激酶受体B(Trk B)表达的影响及其对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:本研究采用插线法制作大鼠中动脉阻塞模型(MCAO)。成年雄性SD大鼠被随机分为四组:假手术组;缺血再灌注组;淫羊藿苷高剂量组:100 mg/kg,淫羊藿苷中剂量组:50 mg/kg,淫羊藿苷低剂量组:25mg/kg和剂量为10 mg/kg的尼莫地平阳性对照组。观察淫羊藿苷对神经功能缺损评分和脑含水量的影响,运用蛋白质印迹法(Western Blot)检测BDNF蛋白和Trk B的表达;苏木精伊红(H&E)染色观察脑组织的形态学改变;并运用细胞凋亡检测(TUNEL法)的方法检测海马CA1区神经元的凋亡情况。结果:50mg/kg和100 mg/kg的淫羊藿苷均可改善MCAO大鼠神经损伤症状;降低其脑含水量;减轻脑缺血再灌注损伤的脑组织形态学改变及CA1区神经元凋亡;上调BDNF和Trk B的表达。其中100 mg/kg效果最为明显,而最低剂量25 mg/kg几乎为无效剂量。结论:淫羊藿苷对脑缺血再灌注具有保护作用,此作用可能是由上调BDNF与Trk B的表达引起的。     

淫羊藿苷及其代谢产物在骨质疏松模型大鼠肾脏组织中的分布

目的:探索骨质疏松模型大鼠灌胃给予淫羊藿苷后淫羊藿苷及其代谢产物在肾脏中分布情况。方法:按118mg·kg-1灌胃给予骨质疏松模型大鼠淫羊藿苷单体,分别于40 min,1.5,2.5,4,12,24 h取出肾脏组织,经生物样品预处理后,采用HPLC测定肾脏中淫羊藿苷及其代谢产物(淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿素)的质量浓度,流动相0.4%乙酸水溶液(A)-甲醇(B)梯度洗脱(0~11 min,43%A;12~30 min,37%A;31~46 min,43%A),检测波长270 nm。结果:给药40 min后,在肾脏组织中检测到淫羊藿苷(0.017 5 mg·L-1)淫羊藿次苷Ⅰ(0.014 2 mg·L-1)及淫羊藿次苷Ⅱ(0.012 7 mg·L-1);给药2.5 h后,淫羊藿苷(0.134 3 mg·L-1)、淫羊藿次苷Ⅰ(0.080 4 mg·L-1)及淫羊藿次苷Ⅱ(0.102 4 mg·L-1)质量浓度均较高,24 h后基本消除;2.5 h检测到淫羊藿素(0.027 2 mg·L-1),4 h质量浓度较高(0.082 2 mg·L-1),24 h时仍存在(0.025 9 mg·L-1)。结论:淫羊藿苷在大鼠肾脏中分布较快,与其代谢产物共存于肾脏组织中,具有较高的质量浓度并能维持一定时间,提示其作用靶点可能为肾脏,与中医学理论认为淫羊藿归肝、肾经相符合。建立的HPLC简便、快速,为淫羊藿苷的体内研究提供参考。     

淫羊藿苷神经保护作用机制研究进展

淫羊藿苷是中药淫羊藿的主要活性成分,具有抗肿瘤、增强免疫、改善心脑血管、调节内分泌等多重药理学作用。近年来关于淫羊藿苷对中枢神经系统保护作用的研究日益增多,为了进一步推进淫羊藿苷对于防治中枢神经系统疾病的研究,本文结合近十年国内外对其保护神经元细胞的研究报道,系统地总结和陈述了淫羊藿苷发挥保护神经作用的几个途径,主要包括抗氧化应激、抑制炎症反应、影响单胺类递质及氨基酸类神经递质的释放、增加神经营养作用等几个方面,以及探讨了淫羊藿苷发挥神经保护作用的信号转导机制,为进一步推进淫羊藿苷的研究作出理论支持。     

离体大鼠肠道菌群对淫羊藿苷的代谢研究

目的：考察大鼠肠道菌群对淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的代谢情况，为研究淫羊藿苷的口服吸收机理打下基础。方法：将待测药物与新配制的大鼠肠内容物混悬液在37℃孵化，采用高效液相色谱法同时测定孵化前后溶液中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的浓度。结果：淫羊藿苷被肠道菌群迅速代谢成淫羊藿次苷Ⅱ，而淫羊藿次苷Ⅱ不被代谢。结论：研究淫羊藿次苷Ⅱ的吸收和代谢机理对于研究淫羊藿苷的口服吸收机理非常有必要。     

淫羊藿苷对阿尔茨海默病炎症模型大鼠神经细胞的保护作用

目的:用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)炎症模型大鼠,观察淫羊藿苷(Icariin ICA)对该模型大鼠学习记忆及超微结构的影响。方法:经八臂迷宫训练成功的45只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、淫羊藿苷30mg/kg组、淫羊藿苷120mg/kg组、双氯芬酸组10mg/kg组,采用侧脑室注射LPS(10μl)制作实验性AD炎症模型,并八臂迷宫测验并记录其数据。迷宫测验完成后断头取脑海马组织。应用电镜观察大鼠海马组织CA1区神经细胞超微结构变化,用SPSS统计学软件进行统计学分析。结果:⑴侧脑室注射LPS(10μl)后对大鼠一般情况观察出现了行为异常。⑵八臂迷宫测试系统分析结果:制模后与对照组相比,其它各组大鼠总记忆错误(TE)、参考记忆错误(RME)、工作记忆错误(WME)明显增多,用淫羊藿苷治疗后与模型组比较,淫羊藿苷120mg/kg组和双氯芬酸组10mg/kg组大鼠的TE、RME、WME均明显减少,淫羊藿苷30mg/kg组错误选择次数无统计学意义。超微结构观察示:对照组、海马组织线粒体比较规则,淫羊藿苷120mg/kg组、双氯芬酸组线粒体轻度受损,模型组海马神经细胞核固缩,核周隙扩张,甚至核膜结构不清,核形态极不规则。结论:侧脑室注射LPS(10μl)能成功复制AD炎症动物模型;淫羊藿苷120mg/kg组显著改善AD模型大鼠的学习记忆能力,淫羊藿苷对炎症模型大鼠海马超微结构有保护作用。     

淫羊藿苷对三氯化铝诱导痴呆大鼠模型脑内胆碱能系统的影响

目的 观察淫羊藿苷(icariin,Ica)对三氯化铝(AlCl3)诱导的痴呆大鼠模型脑内胆碱能系统的影响.方法 通过饮用1.6g,L AlCl3溶液诱导大鼠的痴呆模型,Ica灌胃3月后免疫组化法检测鼠脑海马内乙酰胆碱酯酶(ACHE)、胆碱乙酰转移酶(CHAT)表达,并通过B12000图像处理软件半定量分析;化学法检测大鼠大脑皮层及海马组织中AChE活性.结果 Ica连续灌胃给药3个月后,与AICl3诱导的痴呆大鼠模型对照组比较,Ica可以降低海马内AChE表达,减少AChE活性,抑制ChAT表达下降.结论 Ica对AlCl3,诱导痴呆大鼠模型学习记忆保护作用的机制可能与促进大鼠脑内胆碱能神经功能恢复有关.     

离体大鼠肠道菌群对淫羊藿苷的代谢研究

目的：考察大鼠肠道茵群对淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的代谢情况。为研究淫羊藿苷的口服吸收机理打下基础。方法：将待测药物与新配制的大鼠肠内容物混悬液在37℃孵化,采用高效液相色谱法同时测定孵化前后溶液中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的浓度。结果：淫羊藿苷被肠道菌群迅速代谢成淫羊藿次苷Ⅱ,而淫羊藿次苷Ⅱ不被代谢。结论：研究淫羊藿次苷Ⅱ的吸收和代谢机理对于研究淫羊藿苷的口服吸收机理非常有必要。     

大孔树脂同时分离纯化淫羊藿中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的工艺优选

目的： 建立大孔树脂同时分离纯化淫羊藿中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的工艺条件。 方法： 以淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的吸附容量、洗脱率为评价指标,通过静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号,采用单因素试验优选淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的吸附和洗脱条件。 结果： 选用DM301型大孔吸附树脂,最佳吸附条件为上样液质量浓度7.45 g·L^-1,上样液流速3 BV·h^-1;淫羊藿苷洗脱条件为加45%乙醇4 BV以1.5 BV·h^-1的流速进行洗脱;淫羊藿次苷Ⅱ洗脱条件为加60%乙醇5 BV以1.5 BV·h^-1的流速进行洗脱;淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ纯度分别达56.23%,67.41%。 结论： 建立的工艺条件可同时分离纯化淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ,且稳定性好、收率较高、生产成本低,适宜于规模化生产推广。     

淫羊藿及其提取物在血管性痴呆作用机制的研究进展

血管性痴呆的临床表现多样,病因复杂,临床治疗难度较大。中医药是治疗血管性痴呆的重要手段之一,近年来越来越多的研究表明,淫羊藿及其提取物可用于血管性痴呆的治疗。淫羊藿苷能促进脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的分泌,降低转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的合成,从而促进损伤神经元的修复和新血管的形成,对保护神经功能发挥积极作用。淫羊藿可通过促进乙酰胆碱、单胺类神经递质的分泌,以发挥改善学习、记忆、认知功能的作用。淫羊藿提取物具有良好的抗氧化作用,有助于降低神经组织的自由基损伤,还能调节炎症因子的分泌,抑制神经炎性反应,对神经功能发挥保护作用。淫羊藿苷可调节β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)通路的多个环节,降低Aβ沉积引起的脑损伤。此外,淫羊藿苷可通过调节核因子红系2相关因子1(nuclear factor erythroid-2 related...     

淫羊藿苷对大鼠颈总动脉内膜损伤后骨桥蛋白表达的影响

目的:研究淫羊藿苷对大鼠颈动脉内膜损伤后新生内膜内骨桥蛋白表达的影响.方法:取大鼠42只,随机分为正常对照组6只,模型组和淫羊藿苷高、低剂量组( 120,60 mg· kg -1)各12只.后3组建立鼠颈动脉球囊损伤术后狭窄模型,淫羊藿苷组术前6d开始给予淫羊藿苷灌胃至实验结束;模型对照组以等体积生理盐水灌胃.术后14d和28 d分批处死动物.取各组实验动物颈动脉损伤段,常规石蜡切片,免疫组织化学S-ABC法检测骨桥蛋白(OPN)的表达;RT-PCR检测OPN mRNA的表达.结果:在球囊损伤后14,28 d时,淫羊藿苷高、低剂量组OPN mRNA的表达14 d时为(0.58±0.01),(0.42±0.02),28 d时为(0.28±0.02),(0.33±0.03),明显低于模型组14 d(0.71 ±0.02),28 d(0.62±0.01);高、低剂量组之间无明显差异.淫羊藿苷高、低剂量OPN蛋白表达量14 d时为(20.21±3.67),(32.53±12.16),28 d时为(26.14±4.64),(24.16±11.35),明显低于模型组14 d(71.24±13.25),28 d(46.13±12.31),均P＜0.01.结论:淫羊藿苷在动脉损伤后可调控OPN的表达,抑制平滑肌细胞的迁移,从而减轻球囊损伤后新生内膜的增生.     

淫羊藿苷和淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响

目的 研究淫羊藿苷及淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探讨雌激素受体(ER)与其作用机制的关系.方法 用不同浓度的淫羊藿苷和淫羊藿素处理雌激素受体呈阳性的乳腺癌T47D细胞系后,MTT法检测T47D细胞增殖,流式细胞术检测T47D细胞周期的变化,Western blotting法检测T47D细胞ERα和ERβ蛋白表达.结果 淫羊藿苷和淫羊藿素浓度为1×10-9～1×10-6 mol/L,能显著促进T47D细胞增殖,且该作用可被雌激素受体拮抗剂ICI 182.780(1×10-6 mol/L)所拮抗.与对照组相比,淫羊藿苷和淫羊藿素1×10-7 mol/L使S期T47D细胞比例明显增加,增殖指数显著升高,但该作用可被ICI 182.780抑制.淫羊藿苷和淫羊藿素1×10-7 mol/L还可显著增加ERα、ERβ蛋白表达(P＜0.01).结论 淫羊藿苷和淫羊藿素均可显著促进T47D细胞增殖,该作用可能是通过上调胞内ERα、ERβ蛋白表达介导的.     

淫羊藿苷的稳定性及其影响因素

目的：分析测定淫羊藿苷在不同条件下的稳定性及其影响因素。方法：采用紫外-可见分光光度法在200~600 nm扫描,测定不同条件下对淫羊藿苷结构的影响。结果：在微酸性、微碱性和中性条件下,淫羊藿苷可保持结构稳定。在pH<2和pH>10 时,结构发生明显变化;淫羊藿苷热稳定性较好,在100 ℃长时间加热其仍可以稳定存在;能与过渡金属离子Cu²⁺,Fe³⁺,Al³⁺形成络合物,对淫羊藿苷的氧化起到了诱导催化作用从而对其结构有明显的影响。结论：紫外-可见光谱法能够初步考察不同条件下对淫羊藿苷稳定性的影响,为淫羊藿苷的提取、制剂和衍生物制备等提供重要信息。     

淫羊藿苷对维生素D缺乏大鼠肾上腺皮质维生素D轴及VDR蛋白表达的影响

目的:观察淫羊藿苷对维生素D缺乏大鼠肾上腺皮质维生素D轴的影响。方法:选用60只雄性SD大鼠,随机分为:正常组;模型组(生理盐水4.0 mL·kg~(-1)·d~(-1)灌胃);淫羊藿苷高剂量组(120 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃);淫羊藿苷中剂量组(60 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃);淫羊藿苷低剂量组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃);维生素D组(30ng·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)。造模1月后,药物干预2月,酶联免疫法(ELISA法)检测血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3。免疫组化检测VDR蛋白表达。Real-Time PCR法检测肾上腺皮质维生素D受体(VDR)、25-羟维生素D_3-24-羟基化酶(CYP24A1)、25-羟维生素D1α-羟化酶(CYP27B1)mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3含量下降(P0.05);淫羊藿苷干预后血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3含量均上升(P0.05)。免疫组化显示,与正常组比较,模型组VDR蛋白表达下降(P0.05);经淫羊藿苷干预后,表达上升(P0.05)。Real-Time PCR显示,经淫羊藿苷干预后,表达量上调(P0.05),除VDRmRNA外,CYP24A1mRNA与CYP27B1mRNA变化趋势均与维生素D组表现一致。模型组基因表达均高于正常组(P0.05),Real-Time PCR检测结果与免疫组化检测的蛋白表达不完全一致。结论:淫羊藿苷可能调节维生素D轴促进VDR蛋白表达改善维生素D缺乏。     

淫羊藿苷元在大鼠体内的血浆动力学和组织分布研究

目的 研究淫羊藿中的主要活性成分淫羊藿苷元在大鼠体内的血浆动力学和组织分布特征,为黄酮类天然药物的开发提供依据.方法 应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定大鼠血浆及组织中游离淫羊藿苷元(淫羊藿苷元原型)和总淫羊藿苷元(淫羊藿苷元原型及其二相代谢产物的总和)的浓度,并应用WinNonlin 7.0软件非...     

淫羊藿苷对精索静脉曲张模型大鼠附睾氧化应激水平的影响

目的探讨淫羊藿苷对精索静脉曲张模型大鼠附睾氧化应激水平的影响。方法将40只青春期雄性SD大鼠随机分为对照组、实验性精索静脉曲张(EV)组、淫羊藿苷(ICA)组。EV模型的建立采用左肾静脉部分结扎法。ICA组给予淫羊蕾苷治疗。HE染色观察各组大鼠附睾显微结构变化;比色法测定附睾组织内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果与对照组比较,EV组大鼠附睾SOD活力和GSH-Px活力显著下降(P均0.05),MDA含量显著升高(P0.05);与EV组比较,ICA组大鼠附睾组织SOD活力和GSH-Px活力显著升高(P均0.05),MDA含量降低(P0.05)。EV组附睾显微结构明显异常,ICA组附睾上皮显微结构损害明显减轻。结论淫羊藿苷可拮抗精索静脉曲张所致的氧化应激损伤。     

淫羊藿苷对雷公藤多苷模型小鼠睾丸病理损伤的影响

目的:探讨淫羊藿苷对雷公藤多苷模型小鼠睾丸病理损伤的影响.方法:应用雷公藤多苷所致的睾丸生精障碍小鼠模型,观察淫羊藿苷对小鼠睾丸病理形态学的影响.结果:模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤;淫羊藿苷治疗组小鼠睾丸生精小管管壁较厚,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,基底面至腔面可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞,细胞增殖旺盛,可见到较多分裂期细胞,腔内可见成熟精子,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好.结论:淫羊藿苷具有拮抗雷公藤多苷睾丸病理损伤的作用.     

不同光强对柔毛淫羊藿生长特性和淫羊藿酮醇苷含量的影响

目的:分析不同光照强度(以下简称光强)对柔毛淫羊藿(“贵同柔毛1号”品种)生长、光合特性及有效成分含量的影响,为确定适宜的栽培生产措施提供参考。方法:设置L1[(36.4±5.0)μmol·m^–2·s^–1]、L2[(91.0±5.0)μmol·m^–2·s^–1]、L3[(145.6±5.0)μmol·m^–2·s^–1]和L4[(200.2±5.0)μmol·m^–2·s^–1]4种光强,连续处理40 d,分别在10、20、30、40 d测定生长发育指标(分枝数、叶片数),于第40天测定处理期间同期萌发且已经成熟的叶片的光合生理指标[净光合速率(P_n)、蒸腾速率(T_r)、气孔导度(G_s)和胞间CO₂浓度(C_i)]及淫羊藿黄酮醇苷类成分(朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷)含量。结果:生长指标方面,随着光强从L1增大至L4,总分枝数及总叶片数显著增加,快速增加期出现在20~40 d,其中,L1~L3处理均在30 d时增幅最高,分别为48.52%、70.00%和83.53%,L4处理下在20 d达到最高增幅165.00%,约为L3处理的2倍;光合生理指标方面,叶绿素含量整体呈小幅下降趋势,P_n、T_r、G_s整体呈上升趋势,C_i整体呈下降趋势;药用成分方面,淫羊藿黄酮醇苷类成分质量分数先增加后基本持平,L3处理下达到最高,为(61.49±1.00)mg·g^–1。结论:柔毛淫羊藿在强光下的分枝数增加、P_n增加和淫羊藿黄酮醇苷类成分含量增加的趋势和其他淫羊藿属物种一致,但对更高光强的适应性和耐受性显著高于其他物种。