氨基酸发酵过程中的染菌问题及防治

对于纯种培养来说,做好发酵染菌工作是重中之重,本文主要从空气系统、环境因素、设备因素、操作因素、种子因素五方面入手,系统地分析了造成发酵染菌的因素及防治措施。     

肌苷生产菌301菌株的研究

我们以7171-9-1菌为出发菌株,经选育得到一个新菌株——枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)301。该菌株经中型扩大试验,已在新市味精厂和佳木斯前进制药厂试生产中应用,现报道如下。     

利用肌苷发酵废液生产酵母的研究

本课题筛选了适宜在肌苷发酵废液中生长的酵母菌,从中选出了生长量最大的ＣＦ菌。并对利用肌苷发酵废液生产该酵母的条件进行了初步研究。     

肌苷产生菌缺失核苷水解酶活性突变株选育及其发酵生产试验

以枯草芽孢杆菌ＪＳＩＭ－１０１９为出发菌株,经物理、化学诱变剂连续处理,获得一株缺失核苷水解酶活性的突变株ＪＳＩＭ－Ｂ－１９８。该突变株不能降解肌苷,应用于发酵生产中,肌苷产量显著增加。在２００００升发酵罐中,连续１０罐批,平均产肌苷８．３８ｇ／Ｌ,对糖转化率２１．９８％,发酵周期５０ｈ￣６０ｈ,该菌株遗传性能稳定,已在工业生产中应用。     

利用肌苷发酵废液生产单细胞蛋白的研究

我国在利用微生物降解酒精废液、造纸厂废液和味精厂废液等方面已有许多报道,但是,利用肌苷发酵废液作为底物进行单细胞生产还未见报道。同时,提取肌苷后的发酵废液,其营养成份仍很丰富,其中,还原糖含量约为2％,总氮含量为300mg/L～400mg/L,以及一些无机盐。COD值高达186276mg/L。目前,一般肌苷生产厂都将废液排放掉,这不仅严重地污染了环境,而且造成很大的浪费。有鉴于此,本课题进行了菌种的筛选和驯化以及工艺方面的试验。     

利用淀粉直接发酵生产肌苷菌株的构建

以肌苷生产菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TF_2为受体菌,利用质粒DNA的原生质体转化法,将携带糖化型α-淀粉酶基因的重组质粒pBX96导入肌苷产生菌TF_2中,转化频率为5.7×10^(-6),获得一株能以淀粉为碳源生产肌苷的转化子T140(pBX96),该工程菌株能在以淀粉为碳源的培养基上平均积累肌苷4.64g/L,经过92代,质粒自发丢失率为0.78％。培养48h后,工程菌株的糖化型α—淀粉酶活力为受体菌的7.79倍。并对工程菌株TI40(pBX96)的发酵条件做了初步摸索。     

发酵过程中的防染菌防治研究

发酵是生物体对有机物的一种分解过程,是人类接触较早的化学生物反应之一。随着化学生物技术的不断发展与进步,发酵应用的领域越来越广泛,涉及生物工业、化学工业和食品工业。染菌是发酵过程中出现的严重问题,染菌率不断升高会导致生产成本不断增加,降低企业的生产水平,还会给环境造成极大的污染,威胁社会与环境的和谐发展。本文主要从加强染菌的管理和监督、染菌的有效处理和严格控制发酵操作环节三个方面,研究发酵过程中防染菌的防治措施。     

腺嘌呤对枯草杆菌GMI—971发酵生产肌苷的影响

培养基中腺嘌呤含量对腺嘌呤缺陷型的枯草杆菌GMI－971发酵产肌苷有显著影响。在拟定条件下,腺嘌呤浓度在150mg／L时摇瓶肌苷产量最高。对不同来源的四种酵母粉分别添加腺嘌呤,当其含量增加至l50ml／L时,肌苷产量也最高。     

肌苷发酵过程中后期的代谢流节点分析

应用代谢流分析方法,实验测定副产物的积累速率,将数据输入计算机,应用MArllAB软件计算肌苷发酵中后期代谢流分布。通过分析代谢网络中重要的节点,提出了优化肌苷生物合成途径的建议。     

肌苷产生菌中降低核苷水解酶的研究

本研究以枯草杆菌肌苷产生菌ＳＤ９４０１（Ａｄｅˉ＋Ｔｈｉˉ＋Ｈｉｓˉ＋８—ＡＧｒ＋６－ＭＰｒ）为出发菌株,经紫外线和硫酸二乙酯诱变,在以肌苷为唯一碳源的补充培养基上筛选到一株核苷水解酶缺失菌株。实验结果表明这一突变株积累比亲株高３０％左右的肌苷,平均达到２６．８９ｍｇ／ｍｌ,最高到２８．０３ｍｇ／ｍｌ。且发酵液中未测出次黄嘌呤。     

肌苷产生菌枯草芽孢杆菌Bs菌株的选育和发酵条件

1．用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)腺嘌呤营养缺陷型(ade-)No 18经1次亚硝基胍(MNNG)。诱变处理及2次单菌落分离,获得了能利用酶法制造葡萄糖3次结晶母液,发酵生产肌苷的变异菌株B,。在适宜条件下,摇瓶肌苷产量在7.0克／升以上。 2．不同来源的酵母粉及其在培养基中的含量,对肌苷产量均有显著影响。在所试验的酵母粉中,以北京光华木材厂生产的圆酵母最好,在种子和发酵培养基中的逢合用量分别为1.0一1.4％和1.2一1.4％。 3．在发酵过程中,次黄嘌呤的积聚和肌苷积聚有着明显的消长关系。4．枯草芽孢杆菌B4菌株具有很强的分段合成肌苷的能力,当添加0．3％次黄嘌呤时,可获得高于对照93．3％的肌苷产量,但转化率以添加0．1％次黄嘌呤时为最高。     

肌苷和鸟苷生产菌中嘌呤核苷合成途径三段基因序列的分析

为了研究肌苷和鸟苷生产菌中与产苷有关的嘌呤核苷合成途径的遗传背景,选择了pur操纵子的启动子序列、编码SAMP合成酶的purA基因和编码GMP合成酶的guaA基因,设计合适的引物,分别从野生菌、一株肌苷低产菌和肌苷鸟苷高产菌中扩增出相应片段,经克隆和测序后,对它们进行比较和分析。分析结果表明两株生产菌的purA基因发生了1个碱基缺失,导致阅读框发生移码突变;而鸟苷高产菌在pur操纵子的启动子部分和操纵子抑制蛋白结合区域发生了近10％的突变,可能影响整个操纵子的表达调控。