iNOS对兔角膜碱烧伤后新生血管形成的影响

目的　探讨ｉＮＯＳ对兔角膜碱烧伤后新生血管形成的影响。方法　选用健康大白兔３０只建立角膜碱烧伤后新生血管模型,随机均分为两组。实验组、对照组分别予以选择性ｉＮＯＳ抑制剂氨基胍液与缓冲液滴右眼。观察并比较两组碱烧伤后第４天、第７天、第１４天角膜新生血管生长情况及ｉＮＯＳ和ＶＥＧＦ蛋白的表达。结果　实验组角膜新生血管面积、ｉＮＯＳ和ＶＥＧＦ蛋白的ＩＯＤ值均较对照组显著性降低（均为Ｐ＜０．０５）。伤后第４天、第７天、第１４天实验组和对照组角膜新生血管面积分别为（５０１８±１．６０）ｍｍ２、（８６．５３±２．２７）ｍｍ２、（１０８．３１±２．０１）ｍｍ２和（７０．０４±２．８５）ｍｍ２、（１１６．３４±２．０２）ｍｍ２、（１５１．４０±０５８）ｍｍ２;伤后第４天、第７天、第１４天实验组和对照组ＶＥＧＦ蛋白的ＩＯＤ值分别为６４１０．５１±１５６．１６、４３９５．１８±１６５．０７、３５６６．２７±２３６．４８和１３０９２．５３±１５９．４２、１０６８２．３０±２５３．６５、８５８２．３５±３７１．１６;ｉＮＯＳ蛋白的ＩＯＤ值分别为６５６６．０９±１９４．５６、４５２８．０３±１８１．１５、３４７２．６２±１３１．８７和１２６１８．６０±１９６．６３、１０４３８．６８±１７６．８９、８１１０．６８±２０９．１９。且ｉＮＯＳ和ＶＥＧＦ表达呈正相关（ｒ＝０９９８,Ｐ＜０．０５）。结论　ｉＮＯＳ和ＶＥＧＦ可能参与了角膜新生血管的形成过程。氨基胍可通过选择性抑制ｉＮＯＳ的产生来降低ＶＥＧＦ的表达,进而抑制角膜新生血管的生长。     

早期糖尿病鼠视网膜HIF1α及VEGF表达的意义

目的 探讨缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在早期糖尿病大鼠视网膜上的表达及意义.方法 用链尿佐菌素（streptozotocin,STZ）腹腔注射制作大鼠早期糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）模型.于模型建立后1个月处死大鼠,取眼球做石蜡切片及视网膜铺片.用免疫组化法检测HIF-1α及VEGF在视网膜的表达.用胰酶消化视网膜并行PAS视网膜血管染色,观察管视网膜血管形态变化.结果 早期糖尿病大鼠视网膜的HIF-1α可能由高浓度血糖诱导,从而上调VEGF的表达.结论 HIF1α和VEGF在糖尿病视网膜新生血管的发生过程中可能起着重要的作用.     

早期糖尿病小鼠血清和视网膜VEGF的表达及意义

目的探讨非肥胖性糖尿病小鼠血清和视网膜血管内皮生长因子（VEGF）的表达及二者之间的关系。方法非肥胖性糖尿病小鼠随机分为正常对照组（2、4、6、8、12周组，n=20）和糖尿病组（2、4、6、8、12周组，n=20），每组取4只小鼠摘除眼球取血并分离视网膜。ELISA方法检测血清及视网膜VEGF的表达。结果与正常对照组相比，糖尿病组血清及视网膜VEGF表达水平明显增高。结论糖尿病早期血清及视网膜VEGF表达增高，二者呈正相关，血清VEGF含量可作为判定糖尿病视网膜病变（DR）程度的参考指标。糖尿病早期视网膜VEGF的表达与多种因素有关。     

糖尿病大鼠视网膜组织中iNOS的表达及细胞凋亡的研究

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在糖尿病大鼠视网膜组织中的表达及其对细胞凋亡的影响。方法:建立糖尿病大鼠动物模型,分别在成模后第1,3,6mo时测定大鼠视网膜组织细胞凋亡指数(AI)和iNOS表达水平。结果:(1)与正常对照组(NC)相比,iNOS表达在糖尿病各组均升高,6mo时明显增强(P<0.05);(2)视网膜细胞凋亡情况:与正常对照组(NC)相比,糖尿病模型1mo时细胞凋亡指数差异无统计学意义,3,6mo时则明显升高(P<0.05)。结论:iNOS在糖尿病大鼠视网膜组织中的表达增强,推断iNOS在糖尿病视网膜病变(retinopathy of diabetes,DR)的发病机制中起一定作用。     

血管内皮生长因子在氧诱导小鼠新生血管中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在小鼠视网膜新生血管中的表达及意义。方法对新生c57BL／6N小鼠高氧后相对低氧饲养，诱导产生视网膜新生血管。在出生后12d、17d摘除眼球，应用RT-PCR，Western Blot以及视网膜血管荧光灌注造影技术检测全视网膜VEGF mRNA、蛋白表达水平以及视网膜新生血管的发生程度。结果视网膜血管造影显示高氧造成血管发育受限，相对低氧后产生新生血管。伴随新生血管的发生，VEGF mRNA升高2．3倍；VEGF蛋白含量也升高7．3倍。结论VEGF表达改变与新生血管发生成正相关，其升高也是造成病理性视网膜新生血管发生的机制之一。减少内源性VEGF表达可能成为治疗视网膜新生血管的新方法。     

Cyr61和VEGF在高氧诱导鼠视网膜新生血管中的表达

目的研究富含半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich 61,Cyr61)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在高氧诱导鼠视网膜新生血管(retinal neovascularization,RNV)中的表达情况,探讨二者在RNV形成过程中所起的作用。方法取C57BL/6J小鼠100只,随机分为高氧组和对照组,每组各50只。采用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR法分别检测视网膜Cyr61、VEGF蛋白及mRNA的表达情况。结果高氧组Cyr61、VEGF蛋白呈强阳性表达,主要定位于神经节细胞层、内丛状层、外丛状层和突破视网膜内界膜的新生血管。高氧组与对照组比较,视网膜Cyr61、VEGF蛋白及mRNA表达显著增高,均有统计学意义(tCyr61蛋白=5.35、tVEGF蛋白=6.56、tCyr61 mRNA=4.67、tVEGF mRNA=7.15,均为P<0.05),且Cyr61与VEGF表达呈正相关(r蛋白=0.83、rmRNA=0.95,均为P<0.05)。结论 Cyr61-VEGF信号途径在视网膜新生血管形成的过程中可能具有潜在功能。     

早期糖尿病大鼠视网膜中MMP-3和VEGF表达的意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在早期糖尿病大鼠视网膜的表达及其意义。方法:制备类似人类Ⅱ型糖尿病大鼠动物模型,12wk取眼球、应用免疫组化Envision法检测VEGF和MMP-3在视网膜的表达。结果:MMP-3和VEGF在正常视网膜的染色均为阴性,而在糖尿病大鼠视网膜的内界膜均呈阳性染色反应;VEGF还在视网膜内核层有散在的弱阳性表达。结论:MMP-3和VEGF可能在糖尿病视网膜新生血管的发生过程中起重要作用,且二者之间存在协同关系。     

MMP-2和VEGF在视网膜新生血管中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和血管内皮生长因子（VEGF）在视网膜新生血管中的表达及意义。方法取C57BL/6J小鼠60只,随机分为高氧组和正常组,各30只。以高浓度氧诱导小鼠建立视网膜新生血管模型。采用ADP酶视网膜铺片、苏木精-伊红染色及免疫组织化学法分别观察视网膜血管的改变、计数视网膜新生血管内皮细胞数并检测MMP-2、VEGF蛋白的表达。结果高氧组视网膜可见大量新生血管形成;突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数为（33.51±2.55）个,与对照组相比差异有统计学意义（t=9.345,P〈0.05）。高氧组与对照组比较,MMP-2、VEGF蛋白在神经节细胞层、内丛状层、内核层和突破视网膜内界膜的新生血管中高表达,且二者表达呈正相关（r=0.825,P〈0.05）。结论MMP-2、VEGF共同促进视网膜新生血管的形成,且二者可能具有协同作用。     

姜黄素对大鼠碱烧伤角膜新生血管的抑制作用

目的:探讨姜黄素(curcumin)对大鼠角膜新生血管(corne-al neovascularization,CNV)形成的影响及CNV形成过程中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide syn-thesis,iNOS)的表达情况。方法:以碱烧伤建立角膜新生血管模型,采用裂隙灯照相、免疫组化和RT-PCR等方法分别检测使用姜黄素前后各时期角膜组织中VEGF和iNOS的表达情况,并进行统计学分析。结果:姜黄素结膜下注射组角膜新生血管面积明显减少(t值分别为4.453,4.440,3.887,4.718,3.585,P<0.05);免疫组化染色,VEGF和iNOS在正常角膜上皮基底细胞有弱表达,新生血管对照组表达明显增强,其表达主要分布在新生血管形成区域和上皮全层;结膜下注射组表达明显减少;VEGF mRNA和蛋白表达一致。结论:姜黄素可以有效抑制角膜新生血管的发生,其机制与降低角膜新生血管VEGF和iNOS有关。     

氨基胍对氧诱导的视网膜病变小鼠视网膜神经细胞的保护作用

目的探讨氨基胍(aminoguanidine,AG)对氧诱导的视网膜病变小鼠视网膜神经细胞的保护作用。方法 7d龄C57BL/6J小鼠80只随机分成4组:A组(正常对照组)、B组(单纯高氧组)、C组(高氧生理盐水组)、D组(高氧AG治疗组),每组20只。B组、C组、D组乳鼠置于含体积分数75%氧的氧箱中饲养12d后放于正常空气中饲养至第17天;A组一直在正常空气中饲养。D组于第7天开始腹腔注射AG(100mg·kg-1)每天1次直至第17天,C组注射等量的生理盐水。4组分别于饲养后第14天和第17天随机处死10只取视网膜做HE染色观察细胞形态、免疫组织化学染色观察诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)的表达情况、TUNEL染色观察细胞凋亡情况。结果 iNOS阳性细胞主要表达于视网膜内核层和神经节细胞层,且B组14d(23.00±2.07)明显强于17d(12.20±1.97),B组与A组(0.00±0.00)比较差异有统计学意义(P<0.05),D组(10.13±1.59、4.93±1.03)与B组、C组(23.00±2.20、12.00±2.23)比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TUNEL染色凋亡细胞主要位于视网膜内核层,B组14d(29.40±4.25)明显多于17d(7.73±1.57);B组凋亡细胞数明显多于A组(0.00±0.00)(P<0.05),D组(10.73±1.62、4.33±1.04)明显少于B组和C组(28.66±4.38、8.13±1.30),差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 AG可抑制氧诱导的视网膜病变小鼠视网膜神经细胞凋亡,并可能与iNOS有关。     

氧诱导小鼠视网膜新生血管的实验研究

目的 制作氧诱导视网膜新生血管的小鼠动物模型并了解其视网膜血管内皮生长因子(VEGF)的变化.方法将出生后第7 d的C57BL/6J小鼠置于75%的高氧环境中5 d,再置于普通空气中5 d.在空气中饲养的小鼠为对照组.两组进行视网膜铺片,ADPase染色,组织切片染色,ELISA测定视网膜VEGF蛋白含量.结果实验组新生血管形成率为100%,对照组未见新生血管.实验组小鼠生后第17 d时突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数目达(46.7±11.1)个,对照组不足2个.第12 d实验组视网膜VEGF蛋白水平比对照组下降,第17 d比对照组升高. 结论该动物模型是研究早产儿视网膜病变(ROP)发病机制及治疗的合适模型.VEGF是造成视网膜新生血管发生的主要机制之一.     

HIF在兔角膜碱烧伤后CNV生成中的作用研究

目的研究缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)以及诱导性一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在角膜碱烧伤后角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)形成中的作用及机制。方法 建立兔CNV动物模型,将其随机分为对照组和3个实验组,对照组结膜下注射生理盐水,实验组注射不同剂量的三氧化二砷。观察兔CNV的生长情况,并记录CNV的生长面积。用免疫组织化学方法检测兔角膜HIF、iNOS以及VEGF的表达。结果 对照组6 d、12 d、15 d、21 d、28 d CNV的面积分别为:(53.86±20.60)mm2、(87.21±25.80)mm2、(128.31±40.10)mm2、(114.42±29.40)mm2、(78.15±35.13)mm2。各实验组CNV面积均小于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。免疫组织化学方法检测角膜HIF-1α、iNOS及VEGF蛋白的表达:VEGF表达集中在角膜上皮下基质,存在于血管内皮细胞、炎性细胞胞浆内,呈深黄色。在7 d有较高表达,14 d达到高峰,28 d时明显降低,且对照组明显高于实验组,各实验组的表达随三氧化二砷剂量的增加而减少。蛋白的表达与CNV面积呈正相关。结论 角膜碱烧伤后CNV的形成可能与HIF-1α有关。三氧化二砷通过抑制HIF-1α和iNOS、VEGF表达而抑制兔CNV的形成。     

VEGF、NO在角膜碱烧伤新生血管形成中的影响

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)、一氧化氮(nitric oxide,NO)对角膜碱烧伤新生血管形成的影响。方法40只兔制作角膜新生血管模型,观察角膜碱烧伤后不同时期的角膜新生血管生长情况,检测角膜VEGF的表达和NO的含量,与应用一氧化氮合成酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-l-argininemethyl ester,L-NAME)组相比较。结果VEGF的表达及NO含量在伤后即迅速升高,至高峰后逐渐下降,L-NAME组的角膜新生血管面积和VEGF表达及NO的含量在伤后同期均较碱烧伤组显著下降(P<0.01,P<0.05)。烧伤后第4d、7d、14d碱烧伤组和L-NAME组的角膜新生血管面积分别为(20.93±0.65)mm2、(29.73±1.78)mm2、(48.72±2.62)mm2和(16.70±0.64)mm2、(21.87±0.97)mm2、(34.74±1.47)mm2;烧伤后第1d、4d、7d、14d2组VEGF面密度值分别为0·0812±0.0025、0.1029±0.0044、0.0764±0·0023、0.0172±0.0008和0.0516±0·0026、0.0823±0.0019、0.0363±0.0015、0·0169±0·0005;2组NO含量分别为(6.58±0.07)μmol·gprot-1、(6.90±0.03)μmol·gprot-1、(6·41±0.03)μmol·gprot-1、(6.04±0.05)μmol·gprot-1和(6.44±0.06)μmol·gprot-1、(6.61±0·05)μmol·gprot-1、(6.21±0.02)μmol·gprot-1、(5.95±0.03)μmol·gprot-1;且VEGF表达和NO含量变化呈显著正相关(r=0.962,P<0.01)。结论VEGF和NO均可能参与了角膜新生血管的形成过程;L-NAME可通过抑制NO的产生而降低VEGF的表达,从而抑制角膜新生血管的生长。     

核转录因子-κB在氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠中的表达

目的　探讨氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠视网膜中核转录因子（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ,ＮＦ）-κＢ蛋白的表达变化及意义。方法　７２只出生后７ｄ的Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠随机分为实验组（３６只）和对照组（３６只）,实验组与母鼠一起放入氧气含量为体积分数７５％的饲养箱中饲养,出生后１２ｄ回到正常大气环境中;对照组小鼠始终在正常大气环境中饲养。分别于出生后１２ｄ、１４ｄ、１７ｄ时处死小鼠,荧光素灌注后行视网膜铺片观察血管分布及形态,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测视网膜中血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的蛋白表达变化,免疫组织化学染色检测眼球中ＮＦ-κＢ的表达变化。结果　视网膜铺片检查结果可见,实验组小鼠出生后１４ｄ开始出现视网膜新生血管,面积为每眼（０. ０６±０．１２）ｍｍ２;生后１７ｄ达到高峰,面积为每眼（１．７９±０．０２）ｍｍ２（χ２＝２０．１１２,Ｐ＜０．０１）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测结果显示,实验组ＶＥＧＦ表达不断增强,在生后１７ｄ时表达达到高峰,为０．８３±０．０５。免疫组织化学染色结果显示,实验组生后１２ｄＮＦ-κＢ阳性细胞计数为（１２．３２±１. ０４）个?ｍｍ－２,１４ｄ时为（１９．１６±１．０２）个?ｍｍ－２,生后１７ｄ阳性表达较１２ｄ和１４ｄ时均高,为（２８. ６０±０．５２）个?ｍｍ－２（χ２ ＝１３. １０２,Ｐ＜０．０５;χ２＝２０．１３２,Ｐ＜０．０１）。结论　ＮＦ-κＢ在氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠视网膜中表达明显升高,其趋势与ＶＥＧＦ的变化相同,ＮＦ-κＢ参与了缺氧状态下视网膜新生血管形成的调控过程。     

一氧化氮与血管生成的研究进展

一氧化氮(NO)是一种重要的信使分子和生物活性物质,参与调节机体的一系列生理活动以及新生血管生成等病理过程.本文就NO及其合成酶(NOS)在血管生成中的作用做一简要综述.     

一氧化氮在早产儿视网膜病变中的作用

目的 研究一氧化氮(NO)在早产儿视网膜病变(ROP)中的作用及其与血管内皮生长因子(VEGF)的相互关系.方法 建立高浓度氧诱导的SD新生鼠ROP模型,腹腔分别注射结构型一氧化氮合酶(cNOS)抑制剂L-NNA 150mg/(kg·d)和诱导型NOS(iNOS)抑制剂L-NIL 25 mg/(kg·d).一段时间后,取新生鼠眼球制备切片计数视网膜新生血管内皮细胞数,Western blot法检测VEGF.结果 氧气组视网膜cNOS活力较空气组显著增高(P＜0.05),iNOS活力明显降低(P＜0.05).L-NNA治疗组与对照组比较,视网膜新生血管内皮细胞数显著减少(P＜0.05),VEGF在高氧期表达增加60.38%,相对低氧期表达减少17.97%,以上指标L-NIL治疗组与对照组差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 抑制cNOS产生的NO能减少后者引起的血管活性以及细胞毒性效应,从而减轻对血管内皮细胞的损伤,并且能下调视网膜VEGF的表达.     

脂联素对小鼠氧诱导视网膜病变的保护作用

目的：观察脂联素对C57BL/6J小鼠氧诱导视网膜病变的影响。

方法：将新生C57BL/6J小鼠随机分为3组,分别为常氧对照组、生理盐水注射氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)组和脂联素注射OIR组。将后两组小鼠于生后第7d(P7)至P12置于体积分数75%±2%高氧氧箱中以诱导OIR模型。脂联素注射OIR模型组在P7～P15每天接受腹腔注射重组鼠脂联素蛋白(3.0μg/g),生理盐水注射OIR组则于上述相同时间点注射同等剂量的生理盐水。三组小鼠均于P17时取右眼行视网膜铺片和Lectin染色,观察视网膜中央无血管区及病理性新生血管的情况; 取左眼行视网膜切片和HE染色,观察视网膜组织病理学变化; 应用Western-blot测定左眼视网膜组织中iNOS、nNOS、eNOS的表达; 取右眼视网膜组织定量检测ROS/RNS含量以及NO水平。

结果：脂联素注射OIR组小鼠视网膜中央无血管区面积较生理盐水注射OIR组明显减少(t=7.304,P<0.01),病理性新生血管数目明显减少(t=2.654,P<0.01); 脂联素注射OIR组小鼠视网膜组织ROS含量较生理盐水注射组明显降低(t=13.349,P<0.01); 脂联素注射OIR组小鼠视网膜组织NO含量明显高于生理盐水注射组(t=3.023,P<0.01),iNOS表达明显低于生理盐水注射组(t=5.112,P<0.01),eNOS表达明显高于生理盐水注射组(t=7.421,P<0.01),nNOS的表达无统计学差异(t=1.074,P>0.01)。

结论：脂联素可以通过激活内源性eNOS促进生理性NO生成,同时又能抑制ROS/RNS的产生,在OIR进程中发挥视网膜血管的保护作用。     

CCR7/p-ERK1/2/VEGF signaling promotes retinal neovascularization in a mouse model of oxygen-induced retinopathy

AIM: To investigate the role of CCR7/p-ERK1/2/VEGF signaling in the mouse model of oxygen-induced retinopathy (OIR). METHODS: Neonatal C57BL/6J mice were evenly randomized into four groups: normoxia, OIR, OIR control (treated with scramble siRNA), and OIR treated (treated with CCR7 siRNA). Normoxia group was not specially handled. Postnatal day 7 (P7) mice in the OIR group were exposed to 75%±5% oxygen for 5d (P7-P12) and then maintained under normoxic conditions for 5d (P12-P17). Mice in the OIR control and OIR treated groups were given injections of scramble or CCR7 siRNA plasmid on P12 before returning to normoxic conditions for 5d (P12-P17). Retina samples were collected from all mice on P17, stained with adenosine diphosphatase (ADPase), and retinal neovascularization (RNV) was assessed. Retinas were also stained with hematoxylin and eosin (H&E) for RNV quantitation. The distribution and expression of CCR7, p-ERK1/2 and vascular endothelial growth factor (VEGF) were assessed via immunohistochemistry, Western blot, and quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). RESULTS: High oxygen promoted retinal neovascularization (P<0.05) and increased the number of endothelial nuclei in new vessels extending from the retina to the vitreous body; CCR7 promoted this process (P<0.05). CCR7 and VEGF mRNA were expressed at higher levels in the OIR and OIR control groups than in the normoxia and OIR treated groups. CCR7, p-ERK1/2, and VEGF protein were expressed in the retinas of mice in the OIR and OIR control groups. Intravitreal injection of CCR7 siRNA significantly reduced CCR7, p-ERK1/2, and VEGF expression in the OIR mouse model (all P<0.05). CCR7 significantly enhanced the neovascularization and non-perfusion areas in the OIR group (P<0.05). CCR7 siRNA significantly reduced levels of p-ERK1/2 and VEGF as compared to OIR controls (P<0.05). CONCLUSION: These results suggest that CCR7/p-ERK 1/2/VEGF signaling plays an important role in OIR. CCR7 may be a potential target for the prevention and treatment of retinopathy of prematurity.     

高氧诱导小鼠视网膜病变模型中血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子的表达及意义

目的 研究高氧诱导小鼠视网膜病变模型中血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)的表达和意义,并探讨两者在视网膜新生血管形成过程中的作用.方法 对照实验研究.对新生C57BL-6N系小鼠给予高氧后,置相对低氧环境中饲养,诱导产生视网膜新生血管.在小鼠生后第12、14及17天摘除眼球,通过逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法及荧光素灌注造影,分别检测不同时间点全视网膜新生血管组织对VEGF与PEDF的mRNA和蛋白质的表达水平的差异,并观察视网膜新生血管的分布与形态变化,通过血管内皮细胞计数对新生血管进行量化.应用SPSS11.5统计学软件,采用析因设计方差分析,分别比较实验组与对照组mRNA与蛋白质表达水平的差异,以P<0.05作为差异有统计学意义.结果 在高氧环境中(出生第12天小鼠),OIR模型鼠VEGF蛋白质表达A值(0.47±0.12)较正常鼠(1.81±050)下降,PEDF蛋白质表达A值(5.35±0.94)较正常鼠(0.68±0.17)明显升高;而相对低氧环境中(出生第14和17天小鼠),VEGF蛋白质表达A值(2.15±0.46,5.49±0.97)较正常鼠(0.90±0.05,0.88±0.91)明显升高,PEDF蛋白质表达A值(2.07±0.35,1.37±0.48)较正常鼠(2.62±0.68,5.30±0.59)明显下降,尤以第17天下降显著.对不同时间点VEGF和PEDF蛋白质表达水平进行析因方差分析,结果显示各时间点的VEGF蛋白质表达水平差异有统计学意义(F=70.450,P=0.000),各时间点的PEDF蛋白质表达水平差异有统计学意义(F=160.237,P=0.000).出生第12、14及17天小鼠视网膜VEGF蛋白质的表达与正常对照组比较,差异有统计学意义(P=0.009,0.010,0.000),PEDF蛋白质的表达差异也有统计学意义(P=0.002,0.046,0.000);出生第12、14及17天小鼠视网膜VEGF mRNA的表达与正常对照组比较,差异有统计学意义(P=0.001,0.000,0.001),PEDF mRNA的表达差异也有统计学意义(P=0.000,0.001,0.000).伴随着视网膜组织的缺氧,出现了VEGF蛋白质表达水平升高和PEDF蛋白质表达水平降低,导致视网膜组织中VEGF与PEDF蛋白质表达失衡;VEGF与PEDF的mRNA表达亦发生类似变化,且较蛋白质改变提前发生.上述改变均伴随着同期视网膜新生血管的发生、发展及其严重程度而逐渐加重.结论 VEGF和PEDF的mRNA和蛋白质表达失衡可能足造成视网膜新生血管发生的机制之一.(中华眼科杂志,2008,44:734-740)