Wnt5a在哮喘小鼠肺组织中的异常高表达

目的探究WNT5a在小鼠支气管哮喘模型肺组织中的表达。方法将24只脱敏饮食3周的6周龄Balb/c小鼠随机分为2组:对照组和哮喘组。哮喘组小鼠在第0、14天分别腹腔注射0.2 ml致敏液[100μg OVA,100μl PBS,100μl Al(OH)3凝胶]致敏,于第21~30天1%OVA雾化。对照组小鼠在同时间给予同剂量的PBS。于最后1次处理后masson染色观察小鼠肺组织上皮下纤维化的情况,QT-PCR检测小鼠肺匀浆中Wnt5a、TGF-β1的分子表达,Western blot检测肺匀浆中Wnt5a的蛋白表达。结果哮喘组小鼠上皮下纤维化增多,TGF-β1表达增加;肺组织中Wnt5a较对照组表达增加。结论小鼠哮喘模型肺匀浆中Wnt5a在分子和蛋白水平表达较对照组明显增加,这可能和哮喘中气道重塑相关。     

Wnt5a在雌性小鼠胚胎生殖管道的时空表达

目的 探讨Wnt5a在早期雌性生殖管道发育过程中的表达。 方法 正常孕15.5d、17.5d、19.5d和21.5d的小鼠胚胎,PCR鉴定性别,取雌性胎鼠石蜡包埋,连续横断切片,每4张行1张HE染色,1张白片待用。HE染色后获取连续切片图像,根据雌性胚鼠生殖管道解剖走形,识别中肾旁管/子宫解剖定位。选取含有中段中肾旁管/子宫的白片,用SABC免疫组织化学方法,检测Wnt5a在不同发育时期雌性生殖管道的表达。 结果 获取含雌性生殖管道的鼠胚切片。同时检测到Wnt5a在孕15.5d到21.5d的雌性鼠胚中段中肾旁管/子宫上皮细胞、间质细胞均有表达,随着鼠胚发育,Wnt5a在间质细胞表达不断增强,差异在统计学上有极显著意义（P <0.01）。 结论 Wnt5a在雌性小鼠生殖管道形成过程中发挥作用,可能是诱导子宫发育及分化的关键因子。     

Wnt5a基因对肝癌细胞增殖及迁移能力的影响

目的探讨Wnt5a基因对人肝癌细胞MHCC97L生物学行为的影响。方法脂质体法介导Wnt5a表达及阴性对照质粒转染MHCC97L细胞;RT-PCR及Western blot法检测质粒DNA片段插入和Wnt5a蛋白的表达;借助生长曲线、平板克隆形成、细胞周期和划痕试验对转染细胞的生物学活性进行检测。结果 pcDNA3.1组细胞生长速度明显快于Wnt5a表达组细胞;pcDNA3.1组细胞克隆形成率明显高于Wnt5a表达组(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Wnt5a表达能抑制细胞由G1期→S期的进程;划痕试验显示,Wnt5a表达组较阴性对照组细胞迁移速度明显减慢,当加入Wnt5a抗体阻遏信号通路时,细胞迁移速度加快。结论 Wnt5a可抑制人肝癌细胞MHCC97L的增殖和迁移能力,在肿瘤生长过程中发挥肿瘤抑制基因样作用。     

肝细胞肝癌中Wnt5a、β-catenin 和 E-cadherin蛋白的表达及临床意义

目的初步探讨Wnt5 a、β-catenin和E-cadherin的表达与肝细胞肝癌（HCC）发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组化ABC及EnVision方法,检测30例HCC（包括10例尸检样本）癌旁、癌组织中Wnt5a、β-catenin和E-cadherin的表达,结合Ki-67进行统计学分析。结果对比于癌旁组织,83%（25/30）的HCC癌组织内Wnt5a蛋白低或缺失表达（P〈0.001）,其异常表达还相关于高的肿瘤分期（P=0.010）、高的Ki-67指数（P=0.013）,以及β-catenin（P=0.025）和E-cadherin（P=0.003）的膜下降表达。癌组织中β-catenin膜下降表达相关于E-cadherin的膜下降表达（P=0.047）。80%（24/30）HCC癌组织中E-cadherin膜下降表达,相关于高的肿瘤分期（P=0.048）、高的K i-67指数（P=0.042）和尸检组肿瘤转移的发生（P=0.033）。结论Wnt5a缺失表达是HCC进展中的频发事件,并相关于β-catenin和E-cadherin的异常表达。Wnt5a在HCC中发挥肿瘤抑制基因样的作用,该蛋白极可能是一个有用的HCC预后不良指标。     

哮喘大鼠肺组织中Wnt5a/JNK信号通路相关分子表达增强

目的研究Wnt5a/JNK信号通路相关分子在哮喘大鼠肺组织中的表达。方法将实验大鼠随机分为正常组和哮喘组,成功复制哮喘模型后,通过HE染色观察气道病理改变,实时荧光定量PCR检测肺组织和血液中Wnt5a mRNA的表达,Western blot法检测肺组织中磷酸化的c-Jun(p-c-Jun),磷酸化的c-Jun N端激酶(JNK)蛋白的表达。结果与正常组相比,哮喘组支气管黏膜增厚,褶皱增多,管腔狭窄;气管和血管周围有炎细胞的浸润。气道壁与平滑肌层显著变厚。哮喘组大鼠肺组织和血液中Wnt5a mRNA与对照组比较表达上调,p-c-Jun,p-JNK蛋白表达增加。结论哮喘大鼠的Wnt5a、p-JNK、p-c-Jun表达增强。     

系统炎症指数与子痫前期患者胎盘免疫微环境及妊娠结局的关系

目的 探讨系统炎症指数（SII）与子痫前期患者胎盘免疫微环境及妊娠结局的关系。方法 回顾性分析2019年1月至2023年1月于沧州市人民医院就诊的162例子痫前期患者的临床资料,将其设为训练集。根据妊娠结局将训练集患者分为不良妊娠组（41例）和良好妊娠组（121例）。按照相同标准选择同期于沧州市人民医院就诊的54例子痫前期患者,设为验证集。分析SII与子痫前期患者胎盘免疫微环境的相关性。对比两组患者的临床资料,采用决策树、Gail绝对风险估算原理计算不良妊娠发生的绝对风险。结果 SII与子痫前期患者胎盘免疫微环境呈显著相关性。两组患者间的年龄、发病孕周、胎儿是否生长受限、舒张压、24h尿蛋白定量、SII差异有统计学意义（P<0.05）。决策树筛选出发病孕周、舒张压、24 h尿蛋白定量和SII 4个变量。不良妊娠组和良好妊娠组的不良妊娠发生风险概率值中位数分别为0.026%、0.223%,四分位数间距分别为0.132%、0.253%。验证结果显示,筛选出的4个危险因素可较好预测不良妊娠风险。结论 SII与子痫前期患者胎盘免疫微环境存在显著相关性,且SII可对患者妊娠结局进行有效预测...     

人C5a受体与麦芽糖结合蛋白融合基因在大肠杆菌中的表达

为获得高质量及定足的Ｃ５ａＲ，采用ＰＣＲ技术调整了Ｃ５ａＲ基因的开放阅读框架使之与麦芽糖结合蛋白的基因ＭａｌＥ阅读框架一致，缺失了Ｃ５ａＲｃＤＮＡ基因的起始密友了并增加了一个大肠杆菌偏性的终止密码，构建立了Ｃ５ａＲｃＤＮＡ和ＭａｌＥ融合的原核表达质粒Ｃ５ａＲ－ｐＭＡＬ－ｐ２。     

Wnt1和LGR5在颅脑创伤后应激性溃疡大鼠胃黏膜中的表达变化

目的:探讨颅脑创伤后应激性溃疡大鼠胃黏膜中Wnt1和LGR5的表达变化,进而研究其与颅脑创伤后应激性溃疡的相关性.方法:健康7周龄成年雄性SD大鼠30只,随机分为3组:假手术(sham)组、轻度创伤性脑损伤(mTBI)组和重度创伤性脑损伤(sTBI)组,每组10只.用电子皮质损伤撞击仪打击分别致mTBI及sTBI,造模...     

全身振动训练对骨质疏松大鼠股骨生物力学与Wnt3a蛋白表达的影响

目的 探讨全身振动训练对股骨组织生物力学与Wnt3a蛋白表达的影响.方法 取雌性SD大鼠48只,随机分为假手术组、骨质疏松组与全身振动组,每组16只.采用Micro-CT检测骨形态计量学参数,三点弯实验检测骨结构力学参数与材料力学参数,Western blotting检测Wnt3a、β-catenin蛋白表达量,qRT...     

骨关节炎患者免疫炎症关键蛋白表达谱变化及中医药的干预研究

目的:通过对骨关节炎(OA)免疫炎症关键蛋白表达谱的筛选及验证,探讨中医药对其的干预作用.方法:应用Raybiotech抗体芯片检测10例OA患者(OA组)、10例健康对照者(Control组)血清中关键蛋白的表达,应用酶联免疫吸附(ELISA)测定其关键蛋白的表达;选取30例治疗前后OA患者,分为新风胶囊(XFC)联...     

miR-129-5p调控Wnt5a抑制胆囊癌细胞增殖和转移能力的机制研究

目的 研究微小RNA-129-5p(miR-129-5p)靶向调控Wnt5a抑制胆囊癌细胞增殖和转移能力的作用及机制。方法 采用RT-PCR检测胆囊癌细胞NOZ、SGC-996、GBC-SD和正常胆管上皮细胞系HIBEpic中miR-129-5p的表达水平。选择miR-129-5p表达较低的胆囊癌细胞进行miR-129-5p mimic转染,分为对照组(NC组)和miR-129-5p过表达组(miR-129-5p mimic组),采用MTT实验检测各组细胞的增殖能力,Transwell实验检测各组细胞的转移能力。Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-129-5p对Wnt5a基因的靶向调控作用。RT-PCR检测胆囊癌细胞NOZ、SGC-996、GBC-SD及NC组、miR-129-5p mimic组中Wnt5a mRNA的表达水平。胆囊癌细胞分为NC组、miR-129-5p mimic组、miR-129-5p过表达与Wnt5a敲减质粒共转染组(miR-129-5p mimic+sh-Wnt5a组)和miR-129-5p过表达与Wnt5a过表达质粒共转染组(...     

糖化血红蛋白在糖尿病前期及糖尿病患者中的风险值研究

目的 探讨糖尿病前期及糖尿病诊断中,糖化血红蛋白的风险值.方法 本次选取高危糖尿病和为明确糖尿病而行糖尿病筛查者100例,均测定HbAlc,并行口服葡萄糖耐量试验,按糖耐量正常组、糖尿病组、空腹血糖受损组、空腹血糖受损且糖耐量异常组、糖尿病异常组划分,对比风险值.结果 本组选取病例中,糖耐量正常组18例,糖尿病组61例,空腹血糖受损组2例,空腹血糖受损且糖耐量异常组3例,糖尿病异常组16例.临床及试验资料见表现1.HbMc对糖尿病的诊断切点为6.45％,特异性为0 824,敏感性为0 795,曲线下面积为0872.HbAlc对糖尿病前期诊断的切点为5.85％,特异性为0.532,敏感性为0.584,曲线下面积为0.586.糖尿病依据HbAlc≥6.45％诊断时,为21％漏诊率,应用空腹血糖≥7.0％诊断时,为12％漏诊率.结论 FPG和HbAlc合用,可使糖尿病诊断和筛查敏感性提高,漏诊率降低,为临床实际操作提供条件,HbAlc在糖尿病前期诊断中不适用.在对餐后2h空腹血糖进行筛查时,对FPG和HbAlc检测,可使漏诊率降低.     

早发型重度子痫前期患者胎盘组织Wnt信号通路抑制因子SFRP4基因甲基化水平及其差异表达

目的 探究早发型重度子痫前期（EOSPE）患者胎盘组织Wnt信号通路抑制因子SFRP4基因甲基化水平及其差异表达。方法 回顾性分析海口市第四人民医院2017年1月至2022年1月收治的具有完整资料的EOSPE病例80例,EOPE病例70例,经1∶1倾向性匹配评分后最终纳入研究EOSPE和EOPE病例各41例。定量PCR和免疫组化检测41例EOSPE孕妇和41例EOPE孕妇胎盘中SFRP4的mRNA和蛋白的表达情况,并采用甲基化特异性PCR(MSPCR)检测SFRP4甲基化情况。并同时使用RT-qPCR和免疫组化检测Wnt信号通路下游Wnt1和Wnt2的mRNA和蛋白表达。构建过表达SFRP4慢病毒转染滋养细胞HTR-8细胞,CCK-8、划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测过表达SFRP4的HTR-8细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果 EOSPE组胎盘中的SFRP4的mRNA和蛋白表达均显著高于EOPE组,而EOSPE组胎盘组织的SFRF4甲基化率显著低于EOPE组（17.14%vs 63.33%,P=0.000）,SFRF4蛋白表达水平与其启动子区域的甲基化程度呈负相关（r=-0...     

2型糖尿病免疫炎症的初步探讨

目的:检测2型糖尿病患者外周血Th1/Th2淋巴细胞及血清高敏c-反应蛋白(hs-CRP)的水平,以探讨免疫炎症与2型糖尿病的关系.方法:运用三色荧光标记法流式细胞术检测外周血中Th1/Th2淋巴细胞,用ELISA法测定hs-crp.结果:①2型糖尿病患者Th1数,Th1/Th2比值与正常对照组相比明显降低(P＜0.01),Th2数与正常对照组无明显差异.2型糖尿病患者外周血Th1淋巴细胞和HbA1c呈负相关关系(r=-0.688,P＜0.01).②2型糖尿病患者血清hs-CRP与正常对照组相比明显升高(P＜0.05).糖尿病患者血清hs-CRP浓度与胰岛素敏感性指数呈显著负相关(r=-0.38,P＜0.01),与甘油三酯(r=0.33,P＜0.05)、体重指数(r=0.42,P＜0.05)和空腹血糖(r=0.46,P＜0.05)有正相关关系.结论:2型糖尿病患者存在Th1/Th2淋巴细胞的失衡,血清hs-CRP水平与胰岛素抵抗程度有显著正相关,免疫炎症可能参与了2型糖尿病的发病.     

Wnt2在乳腺癌组织及患者血清中的表达及意义

目的 检测乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7)、乳腺癌患者组织中Wnt2的表达,同时检测乳腺癌患者血清中Wnt2及CA-153表达量,并对二者的相关性进行分析.方法 采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7中Wnt2 mRNA及蛋白水平;采用免疫组织化学对5例配对的癌旁组织、9例乳腺原位癌及9例侵袭性乳腺癌进行检测;同时采用ELISA检测15例健康成年女性、30例乳腺癌患者血清中Wnt2蛋白水平;电化学发光技术检测CA-153水平,并收集完整的病理资料与血清中Wnt2蛋白水平比较分析.结果 Wnt2在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7中未见表达;在乳腺癌组织上皮及间质细胞中呈高表达,而在配对的癌旁组织呈不表达或弱表达状态;30例乳腺癌患者血清中Wnt2及CA-153平均表达量显著高于健康成年女性(P＜0.05),且Wnt2表达水平与CA-153呈正相关.结论 血清Wnt2可与CA-153同时作为乳腺癌筛查的血清学辅助指标,有助于提高乳腺癌检出的灵敏度.     

替加环素治疗小鼠脓毒症肺损伤的作用及其对Wnt5a与Syndecan-1的影响

目的 探讨替加环素治疗小鼠脓毒症肺损伤的作用及其对无翅型MMTV整合位点家族成员5a(Wnt5a)与多配体蛋白聚糖1(Syndecan-1)的影响.方法 30只成年雄性BABL/c小鼠随机分为假手术组、模型组和替加环素组,每组10只.采用盲肠结扎穿孔手术对模型组和替加环素组制备脓毒症模型,假手术组术中仅翻动盲肠,但不结扎穿孔.造模3 h后对替加环素组小鼠腹腔注射6.25 mg/kg替加环素,其余两组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水.24 h后处死小鼠并取肺组织.进行苏木精-伊红(HE)染色,记录病理评分;电镜下观察肺血管内皮细胞的病理变化;计算肺湿/干质量比值(W/D);免疫组织化学染色法及Western-blot检测肺组织中Wnt5a与Synde-can-1的表达.结果 假手术组小鼠肺泡壁正常,肺泡内无出血,炎症细胞浸润较少.模型组小鼠可见肺泡壁结构破坏,肺泡内有出血,并且可见大量炎症细胞浸润.与模型组比较,替加环素组肺肺部病理损伤减轻.假手术组和替加环素组肺损伤病理评分均低于模型组(P＜0.05).假手术组小鼠肺血管内皮细胞内空泡较少,线粒体无明显肿胀,并且基膜完整.模型组肺血管内皮细胞肿胀,细胞内空泡增加,可见线粒体肿胀,基膜和内皮细胞分离.替加环素可以改善脓毒症小鼠的肺血管内细胞病理变化.假手术组和替加环素组W/D、Wnt5a及Syndecan-1免疫组化检测平均光密度值和蛋白相对表达量均低于模型组(P＜0.05).结论 替加环素对脓毒症肺损伤有一定保护作用,并且可以下调Wnt5a和Syndecan-1的表达.     

强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞微小RNA的差异表达及其与免疫炎症反应的相关性

目的 检测强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miRNA)的表达及其与免疫炎症反应的关系。方法 选取AS患者(AS组)及健康志愿者(对照组),每组15例。利用高通量测序技术筛选PBMC中miRNA表达,利用实时定量PCR检测6个差异表达miRNA水平,ELISA检测外周血细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-17、 IL-23表达,Spearman法分析差异miRNA与疾病活动、免疫炎症指标的相关性。结果 与对照组相比,AS患者组共有44个miRNA差异表达,其中有22个上调,22个下调(差异倍数≥1);其中miR-1-3p、 miR-133a-5p表达明显上调,miR-127-5p、 miR-345-3p、 miR-136-3p表达明显下调;且AS患者TNF-α、 IL-1β、 IL-17、 IL-23表达明显升高,miR-1-3p与TNF-α、 C反应蛋白(CRP)、 Bath强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)呈正相关,miR-133a-5p与TNF-α呈正相关,miR-127-5p与红细胞沉降率(ESR)...     

类风湿性关节炎患者的血清脂蛋白a水平与炎症指标相关性分析

目的 通过对类风湿性关节炎(RA)患者组与对照组(正常健康者)脂蛋白a(Lp-a)与脂代谢水平的比较,分析RA患者血清中的Lp-a水平与系统性炎症进展的风险相关性.方法 选取30例RA患者(血清类风湿因子阳性)与30例正常健康者,年龄为25～80岁,性别分布相同,采集血样并检测其脂代谢水平(Lp-a、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C))与炎症反应指标(肿瘤坏死因子α(TN F-α)、白细胞介素6(IL-6)和C反应蛋白(CRP)),对数据进行统计学分析.结果 与对照组比较,RA患者组的血清Lp-a水平显著增高(P＜0.001),HDL-C水平显著降低(P＜0.05),而TC、TG、LDL-C与VLDL-C水平则无明显变化,差异均无统计学意义(P＞0.05).同时,RA患者组的TNF-α、IL-6及CRP水平较对照组均显著增高(P＜0.05),且TNF-α与Lp-a水平的升高有相关性(r=0.753,P＜0.001).结论 RA患者常伴有高水平的Lp-a,且Lp-a水平的升高与RA患者的全身性炎症反应增强具有相关性,Lp-a水平可作为RA患者的风险评价指标.     

冠心病miR-196a表达水平及其与炎症因子、预后的相关性分析

目的 探讨微小核糖核酸-196a(microRNA-196a,miR-196a)表达水平与冠心病患者炎症因子及发病1年内不良结局的相关性.方法 选取我院2017年10月至2020年5月收治的冠心病患者94例作为冠心病组,其中稳定型心绞痛41例,急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)53...