一种快速定量检测炭疽杆菌方法的建立

目的：建立一种快速、准确、特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法：根据复合探针荧光定量分析原理，以炭疽杆菌染色体rpoB基因为靶序列，设计合成引物和探针，对炭疽杆菌进行实时定量聚合酶链反应（PCR）检测，并探讨荧光探针与淬灭探针用量及比例、镁子浓度、淬灭探针长度对定量结果的影响。结果：本法最适条件：荧光探针浓度300mmol/L、荧光探针与淬灭探针的比例为1／2，镁离子浓度为3mmol/L，淬灭探针长15个核苷酸，该法检测炭疽杆菌的灵敏度达10^3拷贝，能特异区分炭疽杆菌与其他蜡样杆菌。结论：复合探针荧光定量PCR技术能够快速准确、特异、敏感地对炭疽杆菌进行定量分析，可为临床诊断提供帮助。     

炭疽杆菌的研究进展

从生物学角度，就炭疽杆菌的生物学特点、抗原与毒素研究、实验诊断手段、疫苗及解毒剂的研究进展作简要综述。     

炭疽杆菌菌落标本的制备

目的:制备炭疽杆菌菌落标本,进一步对炭疽杆菌菌落进行形态学的观察。方法:漂浮法固定炭疽杆菌单个菌落,用稀释复红等染料染色,封片后镜下观察。结果:低倍镜下可见染色清晰,形态完整的炭疽杆菌菌落,边缘不整齐,呈卷发状,有小尾突起。结论:用甲醛固定后,采用漂浮法制备炭疽杆菌菌落标本具有安全、方便、可靠、无污染等特点。     

炭疽杆菌DNA探针现场应用效果评价

近年来随着分子生物学诊断技术的发展和应用，国外学者已将ＮＤＡ探针用于炭疽杆菌的检测，并证明其具有较高的敏感性和１新疆维吾尔自治区卫生防疫站（８３００１１）２新疆乌苏县卫生防疫站３中国预防医学科学院流研所特异性［１］。中国预防医学科学院流研所也研制了地...     

炭疽杆菌芽孢污染的消除技术及其应用

在已知病原微生物中,炭疽杆菌芽孢对理化因子的抵抗力较高,在环境中存活时间极长.日常医疗卫生机构常用的消毒方法,如巴氏消毒、煮沸消毒、酒精消毒、碘伏消毒、苯扎溴铵消毒、来苏尔消毒等方法,均不能将其杀灭.在自然界的土壤中,炭疽杆菌芽孢可以存活30年以上.因此,必须采用灭菌的剂量或高水平的消毒措施,才能达到消除污染的目的.现就2001年在美国发生的炭疽恐怖事件之后,实际应用的污染消除手段,以及最新研发的污染消除技术介绍如下.     

炭疽杆菌芽胞染色法的改进

芽胞是某些细菌在一定条件下形成的特殊结构 ,不同种类的细菌其芽胞的形态、染色和位置等有较大差异 ,因此直接观察细菌的芽胞可作为鉴定细菌的方法之一。常用的芽胞染色方法很多 ,但这些常规方法用于炭疽杆菌芽胞染色 ,效果总是不很满意。我们通过用微波多次加热菌液 ,对炭疽杆菌芽胞常规染色方法进行了改进 ,取得了较好的效果。1　材料和方法1 .1　材料　 1石碳酸复红染液 :取碱性复红酒精饱和溶液 1 0ml,加 5 %石碳酸水溶液 90 ml。 2 95 %酒精 ;3美兰染液 :取2 %美兰酒精饱和溶液 3 0 ml,加 0 .0 1 %KONa水溶液 1 0 0 ml。4炭疽杆菌…     

皮肤炭疽患者的护理

对12例皮肤炭疽患在治疗的同时，针对患的病情及特点制订详细的护理计划，严格的消毒隔离，加强对损伤皮肤的护理，保护新生皮肤，严格执行无菌操作，预防感染和交叉感染，保证了治疗的顺利进行，12例患经精心治疗护理，均痊愈出院。     

炭疽杆菌感染及诊断

炭疽芽胞杆菌 (Ｂ ａｎｔｈｒａｃｉｓ)简称炭疽杆菌 ,是引起人、畜共患急性传染病———炭疽 (Ａｎｔｈｒａｘ)的病原菌。该菌主要引起皮肤炭疽、肺炭疽或肠炭疽 ,均可并发败血症。炭疽杆菌于 184 9年由德国兽医师Ｐｏｌｌｅｎｄｅｒ首先发现 ,1876年郭霍氏 (Ｒ Ｋｏｃｈ)获得     

炭疽杆菌菌落标本的制备

目的：制备炭疽杆菌菌落标本，进一步对炭疽杆菌菌落进行形态学的观察。方法：漂浮法固定炭疽杆菌单个菌落，用稀释复红等染料染色，封片后镜下观察。结果：低倍镜下可见染色清晰，形态完整的炭疽杆菌菌落，边缘不整齐，呈卷发状，有小尾突起。结论：用甲醛固定后，采用漂浮法制备炭疽杆菌菌落标本具有安全、方便、可靠、无污染等特点。     

1例糖尿病足合并产气荚膜杆菌病人的护理

目前,全世界糖尿病病人中有15.5%的病人发生糖尿病足。而糖尿病足合并产气荚膜杆菌感染所致的气性坏疽在临床中极少见,它是一种危害严重的急性特异性感染甚至危及病人生命。创伤性坏疽若早期不能及时诊断并进行有效治疗,其伤侧肢体致残、毁损率高,病死率可达20%～40%。     

地高辛标记炭疽杆菌DNA探针的研究

本文介绍了试用地高辛标记，将炭疽芽孢杆菌的ＰＸＤ１和ＰＸＤ２两质粒上分别扩增到２９０ｂｐ和２８８ｂｐ基因片断制成非放射性标记探针，利用菌落原位杂交方法进行检测，表明两探针的敏感性、特异性均良好，提示该两探针将能为基层工作提供更准确、快速的炭疽杆菌检验技术。     

炭疽芽孢杆菌特异性基因序列双重TaqMan聚合酶链反应快速检测体系的建立

目的 以炭疽芽孢杆菌的主基因和致病毒素基因pagA特异性序列为检测标志，建立高敏感、高特异的荧光双重实时TaqMan聚合酶链反应快速检测体系。方法 根据炭疽杆菌主基因组特异性序列（Gs）和特异的毒力岛pagA基因序列（Pag）设计引物及探针，通过构建目的质粒获得标准模板，利用TaqMan标记探针和便携式Smartcycle实时聚合酶链反应检测平台探讨该检测体系的检测敏感性和特异性。结果该体系炭疽芽孢杆菌的检测敏感度为10^2拷贝每反应体系，与其他蜡样杆菌群细菌未出现非特异性扩增，具有较高的特异性。整个反应在1h内完成，适合于实验室或野外环境下炭疽芽孢杆菌的快速检测。结论 本研究建立的双重TaqMan实时聚合酶链反应检测体系可作为炭疽芽孢杆菌快速、准确、特异、敏感的检测手段。     

在沙土中保存15年后的炭疽杆菌芽胞特征研究

在沙土中保存１５年后的炭疽杆菌芽孢特征研究中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所（１０２２０６）梁旭东，马凤琴，俞东征炭疽杆菌芽孢具有在外环境中长期生存的能力，但这种能力的研究报告很少。为此，我们对新疆自治区喀什地区卫生防疫站１９８２年从５７１份不...     

炭疽芽孢杆菌基因芯片探针的制备

目的制备炭疽芽孢杆菌(BA)基因芯片探针,应用于BA基因芯片的检测。方法采用PCR方法,以BA疫苗株A16R基因组DNA为模板,扩增pXO1质粒上的8个特异性片段,连接至pMD19-T Simple载体,构建分别包含8个探针序列的重组质粒,以其为PCR扩增模板获取探针DNA。结果基因测序证明,成功获得BA的3个探针。结论 BA基因探针的成功获取,为炭疽芽孢杆菌基因芯片的制备奠定了基础。     

内蒙古地区炭疽芽胞杆菌基因单核苷酸多态性研究

目的研究内蒙古地区炭疽芽胞杆菌基因单核苷酸多态性(SNP)特征。方法选择内蒙古地区不同分离年代、地点和来源的22株炭疽芽胞杆菌,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法扩增染色体上的13个SNP位点,进行聚类分析。结果使用的13个SNP位点中8个位点相同,5个位点存在多态性。通过聚类分析,22株炭疽芽胞杆菌可分为4个群,属于A.Br.Aust94亚群和A.Br.008/009亚群的菌株各有1株,A.Br.Ames亚群和A.Br.001/002亚群菌株占大多数。结论内蒙古地区炭疽芽胞杆菌基因SNP位点具有遗传稳定性,目前5个SNP位点可作为内蒙古地区炭疽杆菌荚膜质粒SNP位点基因分型的指标,A.Br.Ames亚群和A.Br.001/002亚群是内蒙古地区优势亚群。     

脑膜炎奈瑟菌W135菌群和炭疽芽胞杆菌

由于国际旅游业的发展 ,自 2 0 0 1年 1月以来 ,一种十分少见的脑膜炎双球菌Ｗ13 5菌群引起的化脓性脑脊髓膜炎在很多国家和地区广为流行 ,而自 2 0 0 1年美国“9 11”恐怖事件后 ,有关以炭疽杆菌为生物恐怖活动工具的报道一时甚嚣尘上。鉴于这两种菌医院检验科的同行接触不多     

一起疑似炭疽疫苗菌株毒力恢复事件中炭疽芽孢杆菌的毒力鉴定与分析

目的 对某校疑似炭疽疫苗菌株毒力恢复事件（事件）中,教学实验使用的炭疽芽孢杆菌毒力及其环境污染情况进行鉴定和调查,为合理处理该事件提供参考依据。 方法 调查事件发生的情况、采集实验用培养物、冻存菌株和实验室环境样本。 对实验用培养物进行噬菌体裂解和青霉素敏感试验鉴定;选取炭疽芽孢杆菌的rpoB基因和毒力相关的pagA和capC基因,应用TaqMan荧光探针法对采集样本进行检测。 结果 实验用培养物的噬菌体裂解试验显示有明显的噬菌斑,青霉素敏感试验显示在青霉素纸片周围有明显的抑菌环,并且培养物和冻存菌株rpoB和pagA基因检测为阳性,capC基因检测为阴性;教学场所的环境样本rpoB、pagA和capC基因检测均为阴性。 结论 该事件中实验用培养物和冻存菌株均为缺少capC基因的减毒炭疽芽孢杆菌,未发现毒力恢复情况;教学场所中无炭疽芽孢杆菌的污染。      

产气荚膜杆菌致创口深部感染2例报道

产气荚膜杆菌感染所致气性坏疽是一种危害严重的急性特异性传染病,该菌广泛存在于泥土和人、畜粪便中,易经伤口侵入并导致感染。产气荚膜杆菌在机体生长繁殖迅速并可释放大量毒素与溶组织酶,使气性坏疽患者病情发展较快,感染严重者必要时需尽快截肢,如果不予治疗几天内就会死亡。本文从2例因房屋倒塌所致外伤患者深部伤口分泌物中分离到产气荚膜杆菌,现报道如下。     

炭疽高发地区土壤样本中常见芽胞杆菌的分离及鉴定

目的 通过分离鉴定炭疽可疑污染土壤样本的芽胞杆菌,评价消毒效果和了解监测地区土壤中的芽胞杆菌分布情况。 方法 采集炭疽监测点土壤样本60份,对炭疽芽胞杆菌和其他芽胞杆菌进行分离培养和聚合酶链反应扩增鉴定。 结果 在可疑污染土壤样本中未分离到炭疽芽胞杆菌;从分离到的48个单克隆菌落中扩增到33个目的片段,经测序和blast比对,确定得到地衣芽胞杆菌13株,枯草芽胞杆菌8株,短小芽胞杆菌扩增11株,蜡样芽胞杆菌扩增到1株,巨大芽胞杆菌引物和环状芽胞杆菌引物特异性不好。 结论 本研究提示该监测点炭疽疫情消毒效果可信,但需要进一步研究验证;几种芽胞杆菌在土壤中广泛存在,在炭疽监测工作中进行病原体分离时需要加以鉴别,可通过特异基因扩增来辅助检验。