基于 NOD样受体热蛋白结构域 3/胱天蛋白酶 -1通路探讨鱼腥草注射液缓解脂多糖诱导的小鼠急性肺炎肺损伤的作用机制

目的探究鱼腥草注射液( HHI)对急性肺炎小鼠的保护作用及对 NOD样受体热蛋白结构域 3(NLRP3)/胱天蛋白酶 -1(caspase-1)通路的调控作用。方法 2019年 7月至 2020年 6月,将购自广东省医学实验动物中心的 90只 BALB/c雄性小鼠分为正常对照组、模型组、 HHI低( 10 mL/kg)及高( 30 mL/kg)剂量组、 NLRP3激动剂( DDC)组( 300 mg/kg)、 HHI+DDC组( 30 mL/ kg+300 mg/kg),每组 15只。除正常对照组外,其余各组均通过雾化吸入脂多糖( LPS)2.5 g/L建立急性肺炎模型。末次给药后检测支气管肺泡灌洗液( BALF)中白细胞介素 -6(IL-6)、肿瘤坏死因子( TNF-α)水平、中性粒细胞数目;取右肺,检测右肺湿重 /干重( W/D);左肺组织病理损伤情况,肺组织凋亡相关斑点样蛋白( ASC)mRNA及蛋白、 NLRP3 mRNA及蛋白、 TNF-α、IL-6、 caspase-1蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组小鼠出现肺泡破坏及炎性细胞浸润等病理损伤现象, W/D、IL-6［( 1 692.06±95.26)μg/L比( 569.91±50.89)μg/L］、 TNF-α［( 1 846.24±99.26)μg/L比( 506.99±55.48)μg/L］水平及中性粒细胞数目［(66.24±2.56)×106个/毫升比( 5.09±1.98)×106个/毫升］、肺组织 NLRP3 mRNA及蛋白( 1.01±0.13比 0.22±0.12)、 ASC mRNA及蛋白( 1.03±0.13比 0.29±0.11)、 caspase-1(1.06±0.14比 0.25±0.12)、 TNF-α、IL-6蛋白表达升高( P<0.05);与模型组相比, HHI低、高剂量组肺泡破坏及炎性细胞浸润等现象缓解, W/D、小鼠 BALF中炎性因子 IL-6［(1 069.13±75.12)μg/L、(889.02±65.13)μg/L比(1 692.06±95.26)μg/L］、 TNF-α［( 1 225.33±84.02)μg/L、(806.63±69.12)μg/L比( 1 846.24±99.26)μg/L］含量及中性粒细胞数目［(45.33±2.22)×106个/毫升、(22.63±2.02)×106个/毫升比( 66.24±2.56)×106个/毫升］、肺组织中 NLRP3 mRNA及蛋白( 0.83±0.11、0.52±0.12比 1.01±0.13)、 ASC mRNA及蛋白( 0.82±0.12、0.54±0.11比 1.03±0.13)、 caspase-1(0.80±0.15、0.59±0.12比 1.06±0.14)、 TNF-α、IL-6蛋白表达降低( P<0.05); DDC组小鼠上述指标与 HHI低、高剂量组相反( P<0.05)。结论 HHI可通过抑制 NLRP3/ caspase-1通路激活,改善肺炎小鼠炎症反应,缓解肺损伤。     

雷公藤内酯醇对大鼠脑局灶性缺血再灌注后脑组织肿瘤坏死因子-α含量变化的影响

目的　观察雷公藤内酯醇 (TL)是否通过降低脑组织内肿瘤坏死因子 (TNF α)含量而减少白细胞浸润 ,从而改善局灶性脑缺血再灌注所致的神经功能缺失。方法　大鼠ipTL 0 .2或 0 .4mg·kg- 1·d- 1,连续 4d。d 4给药前行右侧大脑中动脉缺血 1h再灌注 2 4h。行为观察行大鼠神经功能缺损评分 ;放射免疫法检测缺血再灌注侧大脑皮层TNF α含量。病理切片观察缺血再灌注侧脑微血管内附壁中性粒细胞计数。结果　与损伤模型组比较 ,TL处理组大脑皮质TNF α含量明显减少 ,神经功能受损程度明显改善。脑微血管内附壁中性粒细胞计数明显减少。结论　TL有抑制缺血再灌注脑组织内TNF α生成 ,降低其含量的作用 ,从而抑制白细胞浸润 ,改善受损的神经功能     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后不同时间E-选择素、P-选择素和细胞间粘附分子-1的表达

目的观察大鼠脑缺血再灌注(I/R)后不同时间P-选择素(P-selectin)、E-选择素(E-selectin)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达及中性粒细胞浸润脑组织的情况,探讨粘附分子在脑缺血再灌注损伤中的作用。方法采用Zea-Longa线栓法,建立大鼠局灶性脑缺血模型。缺血1 h后拔出栓线进行再灌注,假手术组除不插线外其余手术操作同模型组。分别于再灌注后4、8、12、24、48 h,将动物麻醉下处死,快速取出脑组织,采用HE染色的方法,观察缺血再灌注不同时间脑组织形态学变化;采用免疫组化方法观察再灌注不同时间脑组织中P-selectin、E-selectin和ICAM-1的阳性表达数及表达部位;采用免疫荧光双标法,观察P-selectin、E-selectin和ICAM-1的表达及其定位;采用流式细胞术定量检测P-selectin、E-selectin和ICAM-1的表达;采用生化法测定缺血侧脑组织中髓过氧化物酶(MPO)的活性,以反映白细胞浸润的情况。结果缺血再灌注后,缺血侧脑组织发生明显的病理学形态改变,并且随着再灌注时间的延长,病理学形态改变逐渐加重。缺血再灌注后P-selectin、E-selectin、ICAM-1共表达于血管内皮细胞,与假手术组〔P-selectin:(4.99±0.08)channel;E-selectin:(4.17±0.13)channel;ICAM-1:(4.17±0.13)channel〕相比,I/R 4 h〔(5.46±0.09)channel;(4.60±0.14)channel;(4.56±0.12)chan-nel〕、I/R 8 h〔(5.87±0.24)channel;(5.08±0.14)chan-nel;(5.41±0.22)channel〕、I/R 12 h〔(6.48±0.18)chan-nel;(5.72±0.18)channel;(5.66±0.16)channel〕、I/R 24 h〔(7.16±0.11)channel;(6.09±0.09)channel;(5.61±0.09)channel〕及I/R 48 h〔(5.82±0.28)channel;(5.37±0.25)channel;(5.27±0.16)channel〕各组均升高(P<0.01),且表达峰值出现在缺血再灌注后24 h左右。在缺血再灌注后4~24 h大鼠脑组织中P-selectin(r=0.975,P<0.01)、E-selectin(r=0.977,P<0.01)和ICAM-1(r=0.749,P<0.01)的表达增加具有时间依赖性。脑缺血再灌注后MPO活性明显升高,I/R 4 h组(0.107±0.015)U.g-1、I/R8 h组(0.202±0.010)U.g-1、I/R 12 h组(0.242±0.010)U.g-1、I/R 24 h组(0.273±0.006)U.g-1和I/R 48h组(0.294±0.006)U.g-1与假手术组(0.043±0.008)U.g-1相比,差异均具有显著性(P<0.01),其峰值出现在缺血再灌注后48 h左右。在缺血再灌注后4~48 h,MPO活性增高具有时间依赖性(r=0.982,P<0.01)。结论大鼠局灶性脑缺血再灌注后24 h粘附分子E-selectin、P-selectin和ICAM-1表达增加最明显,而MPO活性在脑缺血再灌注后48h增加最明显,E-selectin、P-selectin和ICAM-1上调共同参与炎症反应,介导白细胞浸润,引起缺血再灌注性脑损伤。     

G-CSF减轻大鼠下肢缺血再灌注致肺功能损伤的实验研究

目的研究重组粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠下肢缺血再灌注所致肺功能损伤的治疗作用.方法雄性SD大鼠随机分3组,手术组及给药组麻醉后开腹解剖腹主动脉,在肾动脉水平远端阻断120min,开放、再灌注120min;假手术组不阻断腹主动脉,余同手术组.3组均于术前经舌静脉注入伊文氏蓝(Evan'sbluedye)30mg/kg;给药组术前经尾静脉注入G-CSF20μg/kg,余二组给予生理盐水1ml.术后取肺组织测定丙二醛(malonyldialdehyde,MDA)及伊文氏蓝含量.结果给药组MDA含量为(1.71±0.34)nmol/mg,假手术组为(1.73±0.65)nmol/mg,均显著低于手术组(2.54±0.39)nmol/mg.给药组伊文氏蓝含量为(1.50±0.29)μg/mg,假手术组为(0.13±0.07)μg/mg,均显著低于手术组(3.07±1.18)μg/mg.结论G-CSF有减轻大鼠下肢缺血再灌注所致肺功能损伤的作用.     

三七总皂苷对心肌缺血再灌注中中性粒细胞核因子-κB活化及其粘附的影响

目的　研究三七总皂苷对心肌缺血 -再灌注时中性粒细胞 (PMN)内核因子 κB(NF κB)活性变化、细胞间粘附分子 (ICAM 1)表达及中性粒细胞粘附的影响。方法　新西兰兔 2 4只分为①缺血 -再灌注组 (I R) :结扎兔左冠状动脉前降支造成心肌缺血 4 5min后再开放 ;②三七总皂苷 (PNS)预处理组 (IR +PNS) :在心肌缺血前 10min静脉注射PNS(10 0mg·kg-1) ;③假手术对照组 (Sham) ;每组又分缺血前(0 )、再灌注后 30、6 0、90、12 0、2 4 0、36 0min时相点。用流式细胞仪检测中性粒细胞ICAM 1的表达 ,凝胶电泳迁移率分析检测NF κB的活性 ,测定中性粒细胞与脐静脉内皮细胞(EC 340 )的粘附率。结果　在缺血 -再灌注组中心肌再灌注 30min后NF κB活性开始增高 ,12 0min达到高峰 ,之后活性下降 ;中性粒细胞ICAM 1的表达在心肌再灌注 12 0min开始增高 ,并与并与中性粒细胞粘附率升高有相关性 ;在三七总皂苷预处理组 ,PNS能抑制NF κB的活化及中性粒细胞ICAM 1的表达和中性粒细胞粘附。结论　心肌缺血 -再灌注时刺激NF κB的活化 ,启动中性粒细胞ICAM 1的表达而参与缺血 -再灌注损伤的发生过程 ;三七总皂苷能抑制中性粒细胞内核因子 κB的活化 ,减少细胞间粘附分子表达及中性粒细胞粘附而起到心肌保护的作用     

异丙酚预处理通过上调 Caveolin?3增加缺血心肌细胞线粒体膜稳定性的机制研究

目的探讨异丙酚通过上调小窝蛋白 ?3(Caveolin?3)增加缺血心肌线粒体膜稳定性的机制。方法筛选健康 SD大鼠 36只,体质量范围为 250~300 g,采用随机数字表法分为 3组,每组 12只。 ①正常心肌细胞组:仅开胸不结扎; ②心肌缺血再灌注组:单纯给予以 5％葡萄糖稀释的脂肪乳,持续静脉滴注; ③缺血心肌细胞 +异丙酚预处理组:缺血前 10 min开始持续静脉滴注异丙酚 12 mg·kg-1·h-1,异丙酚用 5％葡萄糖稀释。通过蛋白质免疫印迹检测 Caveolin?3和细胞色素 C;通过荧光探针 DCFH? DA测定 ROS产生;通过阳离子染料 JC?1评估线粒体膜电位; caspase?3比色测定试剂盒测定心肌细胞 caspase?3活性。结果心肌缺血再灌注组 Caveolin?3蛋白活性(0.57±0.09)低于正常心肌细胞组(2.24±0.25)和缺血心肌细胞 +异丙酚预处理组(2.02±0.14)异丙酚改善心肌缺血诱导的 Caveolin?3下调(P＜0.05);心肌缺血再灌注组 DCF荧光强度(2.79±0.21)高于正常心肌细胞±0.12)缺血心肌细胞 +异丙酚预处理组心肌细胞 DCF荧光强度(1.23±0.14)低于心肌缺血再灌注组(P＜0.05);与正常心肌细胞组(1±0.06)相比,经受心肌缺血的心肌细胞显示出线粒体去极化降低(0.13±0.02),缺血心肌细胞 +异丙酚预处理组(1.00,.00,组(0.83±0.11)稳定了线粒体膜电位(P＜0.05)。正常心肌细胞组线粒体细胞色素 C为(1.00±0.08),心肌缺血再灌注组为(2.76±0.24),心肌缺血增加线粒体细胞色素 C释放到胞质溶胶中,缺血心肌细胞 +异丙酚预处理组(1.37±0.18)降低细胞色素 C释放(P＜0.05);心肌缺血再灌注组显示出 caspase?3和 caspase?9活性增加。与心肌缺血再灌注组相比,异丙酚降低了 caspase? 3和 caspase?9活性(P＜0.05)。结论异丙酚在心肌缺血下的保护作用取决于 Caveolin?3的上调,后者降低活性氧产生、增加线粒体膜电位、减少细胞凋亡和细胞色素 C释放。     

瑞芬太尼预处理对心力衰竭大鼠心肌的保护作用

目的探讨瑞芬太尼预处理对阿霉素心衰大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的作用。方法 60只成年♂SD大鼠(250±20)g,尾静脉注射阿霉素2μg·g-1,每周1次,共6周,制成阿霉素心衰大鼠模型。随机将阿霉素心衰大鼠分为6组:对照组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IPC组)、10μg·L-1瑞芬太尼预处理组(RPC 1组)、30μg·L-1瑞芬太尼预处理组(RPC 2组)、60μg·L-1瑞芬太尼预处理组(RPC 3组)。采用Langendorff离体大鼠心肌灌注模型。除Sham组为持续灌注165 min外,所有心脏予以30 min缺血,90 min再灌注。IPC组在缺血前结扎左冠状动脉5 min,松开5 min,共3个循环。RPC组在缺血前给予含浓度分别为10、30、60μg·L-1的瑞芬太尼的K-H液灌注5 min后改用不含瑞芬太尼的K-H液灌注5 min,共3个循环。记录各组心脏在平衡末、再灌5 min、再灌30 min、再灌90 min时的心率(HR)、左室发展压(LVDP)和左室压力升高或降低最大速率(±dp/dtmax)、冠脉流量(CF)并测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性。再灌末TTC法计算心肌缺血梗死区(IS/AAR)。Western blot半定量检测p-Akt和总Akt的含量。结果平衡灌注末各组间心功能指标(基础值)差异未见统计学意义(P>0.05)。再灌5、30、90 min时,RPC 2组和RPC 3组的LVDP、±dp/dtmax、CF较I/R组高,LDH值较I/R组低(P<0.05)。灌注结束后,见RPC 2组、RPC 3组的IS/AAR较I/R小,p-Akt表达水平升高(P<0.05),而IPC组和RPC 1组的各项指标较I/R组无差异。结论 RPC在一定程度上减轻阿霉素心衰大鼠心肌缺血/再灌注损伤,而缺血预处理对阿霉素心衰大鼠心肌缺血/再灌注损伤无明显保护作用。     

银杏叶提取物抗鼠肾缺血再灌注损伤及对P选择素表达的影响

目的 :探讨银杏叶提取物保护大鼠肾脏缺血再灌注损伤作用与机理。方法 :SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、银杏叶提取物组。通过HE染色观察肾组织损伤和中性粒细胞浸润 ,免疫组织化学方法观察P选择素的表达情况。结果 :与假手术组相比 ,缺血再灌注组肾小管上皮细胞呈明显的缺血性改变 ,P选择素表达明显增强 (P <0 .0 1) ,肾小球内中性粒细胞增加明显 (P <0 .0 0 1) ;银杏叶提取物组比缺血再灌注组肾小管上皮细胞缺血性改变减轻 ,P选择素表达减少 (P <0 .0 1) ,肾小球内中性粒细胞较缺血再灌注组减少 (P <0 .0 0 1)。结论 :银杏叶提取物减轻大鼠肾缺血再灌注损伤 ,减少P选择素表达及中性粒细胞浸润     

苯环利定对兔急性脑缺血损伤的保护作用——脑脊液中β-内啡肽免疫活性分析

结扎兔双侧椎动脉和颈总动脉,导致急性脑缺血。缺血30min后重新开放双侧颈总动脉,使再灌注。脑缺血30min再灌注2h后,脑脊液中β—内啡肽免疫活性物质含量比缺血前增加1.01±0.52mg/L。icv苯环利定20μg/kg组,脑脊液中β—内啡肽免疫活性物质含量比缺血前增加0.36±0.32mg/L。icv苯环利定80μg/kg组,脑脊液中β—内啡肽免疫活性物质含量比缺血前下降0.19±0.44mg/L。提示苯环利定能抑制脑缺血后脑内β—内啡肽释放,减轻脑缺血性神经损伤。     

高密度脂蛋白预处理对缺血再灌注大鼠肺组织的影响

目的 探讨高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)预处理对缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)大鼠肺组织的影响.方法 将24只SD大鼠随机分成3组:假手术组(SO)、缺血再灌注损伤组(I/R组)和缺血再灌注高密度脂蛋白预处理组(H/IPC组).建立大鼠肺脏缺血再灌注模型,并检测各组PH、PaO2、PaCO2、肺湿/干重比值(wet-to-dry weight ratio,W/D)、支气管肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中白细胞(White blood cell,WBC)计数、测定髓过氧化酶(myeloperoxidase,MPO)水平,并观察肺组织病理变化.结果 ①HDL改善大鼠换气功能,升高PaO2和降低PaCO2;②HDL降低肺组织湿/干重比值(W/D)和髓过氧化酶(MPO)的活性(P<0.05),降低肺泡灌洗液中WBC数量;③病理形态学显示,HDL预处理组大鼠在肺水肿及肺组织内中性粒细胞浸润的程度均低于I/R所致损伤组.结论 经90 min缺血,180 min再灌后,HDL预处理能减轻I/R所致PaO2的降低、血管通透性增高,中性粒细胞浸润,减轻I/R大鼠肺组织损伤.     

Intravenous aspirin at reperfusion does not reduce infarct size in the dog with a residual critical stenosis.

Platelet-related events being associated with the increment of infarct size at reperfusion in the presence of a residual stenosis, we tested in dogs whether intravenous aspirin (ASA) could limit infarct size. The left anterior descending coronary artery was occluded for 90 min and reperfused for 6 h in the presence of a residual critical stenosis. Controls received saline, and treated groups were given 2, 6, or 12 mg/kg ASA, i.v., 5 min before reperfusion. Infarct size did not differ significantly between groups (control, 43.80+/-6.28%; ASA, 2 mg/kg: 41.07+/-7.78%; ASA, 6 mg/kg: 37.55+/-3.44%; ASA, 12 mg/kg: 29.40+/-5.41%), as well as transmural collateral blood flow and [111In]-platelet accumulation in the infarcted myocardium (2.5-3.6 x 10(5) platelets/g). However, myocardial neutrophil accumulation was significantly reduced (p < 0.05) in groups given 6 (15.0+/-2.6 x 10(6)/g tissue) and 12 mg/kg (18.4 +/-3.8) ASA, but not in the 2-mg/kg group (21.0+/-5.2), as compared with control group (32.0+/-7.2). Ex vivo platelet aggregation to collagen was abolished during reperfusion in all treated groups (p < 0.05). Transcardiac arteriovenous differences in 6-keto-PGF1alpha were reduced significantly 1 h after reperfusion in groups given 6 or 12 mg/kg ASA (94.7+/-13.1 and 71.7+/-19.2 pg/ml, respectively) but not in the 2-mg/kg group (178.3+/-78.2 pg/ml), as compared with control (405.4+/-171.6 pg/ml). ASA-insensitive platelet activation at the site of stenosis or inhibition by ASA of prostacyclin production by jeopardized myocardium may explain the observed lack of benefit of ASA.     

参麦注射液对肺缺血-再灌注损伤时Fas/FasL表达的影响

目的:探讨参麦注射液对肺缺血-再灌注损伤(PIRI)时Fas/FasL配体(Fas/FasL)表达的影响。方法:采用在体兔单肺原位缺血-再灌注模型。实验兔30只,随机分为假手术对照组(sham,n=10)、肺缺血-再灌注组(I-R,n=10)和肺缺血-再灌注加参麦注射液组(SM,n=10)。分别于再灌注3h取左肺组织,观察Fas/FasLmRNA定位表达、凋亡指数(AI)、肺组织湿干重比(W/D)、肺损伤组织学定量评价指标(IQA)及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果:SM组Fas/FasLmRNA在肺小动脉内(外)膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及肺支气管上皮呈弱阳性表达,明显低于I-R组(P<0.05);AI、W/D和IQA值显著低于I-R组(P<0.01和P<0.05);肺组织形态学异常改变程度减轻。结论:参麦注射液可下调肺组织Fas/FasLmRNA的表达而减轻细胞凋亡,对PIRI发挥积极的防治作用。     

右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及补体3蛋白的影响

目的：探讨右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及对补体3（C3）蛋白的影响。方法：sD雄性大鼠45只,随机分为3组（n=15）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I／R组）、右美托咪定预处理组（DEX组）。DEX组自缺血前2h持续静脉输注右美托咪定5mL·kg^-1（用0．9％氯化钠注射液将右美托咪定稀释为1gg·mL^-1）直到结扎心脏冠状动脉左前降支前停止,输注时间为2h;Sham组72．I／R组在相同的时间内按照5mL·kg^-1速率输注等量0．9％氯化钠注射液。再灌注120min时,取心脏组织,测定心肌梗死面积,用蛋白质印迹法（Westernblot）测定心肌组织中c3蛋白的表达。结果：与Sham组比较,I／R组和DEX组的心肌梗死面积、C3蛋白表达明显升高（P〈0．05）;与I／R组比较,DEX组的心肌梗死面积和C3蛋白表达明显降低（P〈0．05）。结论：右美托咪定预处理能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与减少补体3蛋白表达有关。     

灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注损伤后胶质原纤维酸性蛋白和NOS的影响

目的:研究灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注(I-R)损伤后胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法:实验分为5组,即假手术、I-R、MgSO4及灯盏花素高、低剂量组。采用线栓法复制脑I-R损伤模型大鼠,观察灯盏花素对模型大鼠GFAP和NOS的作用。结果:与假手术组比较,I-R组大鼠GFAP免疫染色呈强阳性,血清中NOS和诱导型NOS(iNOS)活性显著增强(P<0.01)。与I-R组比较,灯盏花素高、低剂量组大鼠GFAP免疫染色则呈阳性-弱阳性改变,灯盏花素高剂量组大鼠iNOS显著降低(P<0.01)。结论:灯盏花素对I-R损伤模型大鼠有保护作用,其机制可能与抑制GFAP和NOS表达等作用有关。     

外源性磷酸肌酸预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的研究外源性磷酸肌酸(CP)预处理对大鼠心肌缺血-再灌注(I-R)损伤的保护作用。方法健康雄性SD大鼠30只,随机均分为三组:假手术(S)组、I-R组和CP预处理组(CP组)。I-R、CP预处理组结扎冠状动脉左前降支30 min,再灌注120 min制备心肌I-R损伤模型。缺血前30 min,CP组经腹腔注射CP 10 ml/kg。于再灌注120 min时处死大鼠,测定心肌三磷酸腺苷(ATP)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活性,光学显微镜和透射电镜下观察心肌组织结构变化及线粒体水肿情况。结果 CP组心肌组织中ATP含量、SOD活性显著高于I-R组[(2.76±0.98)μmol/mg vs.(1.65±0.84)μmol/mg、(42.47±2.16)U/mg vs.(49.56±3.28)U/mg](P<0.05)。I-R组心肌组织明显水肿、出血和坏死;CP组心肌组织结构及线粒体变化较I-R组明显减轻。结论外源性CP对大鼠心肌I-R损伤具有明显保护作用。     

人参茎叶皂苷预适应对自发性高血压大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究人参茎叶皂苷(GSLS)预适应对自发性高血压大鼠(SHR)心肌缺血再灌注损伤(I-R)的保护作用及可能机制。方法SHR于I-R造模前每日1次灌胃给予GSLS50和100mg.kg-1,连续3周,于缺血40min和再灌注30min内测定大鼠血压、心功能和心脏血流动力学指标,生化方法测定心肌ATPase酶、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和NO含量,镉血红素饱和法测定心肌和肝脏金属硫蛋白(MT)含量,免疫组化方法测定细胞热休克蛋白70(HSP70)表达。结果GSLS50和100mg.kg-1预适应组显著改善I-R损伤SHR的心率、左室内压峰值和左室内压最大变化速率(±dp/dtmax),明显提高心肌ATPase活性,减少LDH漏出,提高心肌SOD活性,增加NO含量,降低MDA含量,增加心肌和肝脏MT含量,增加心肌HSP70阳性细胞百分数。结论GSLS预适应对心肌I-R损伤具有保护作用,其作用机制与改善SHR心肌舒缩功能,改善心肌代谢,增强抗氧化活性和诱导内源性心肌保护物质的释放有关。     

Sufentanil limits the myocardial infarct size by preservation of the phosphorylated connexin 43

Sufentanil, with a potent analgesia effect, has been wildly used in anesthesia and analgesia, especially for the cardiovascular surgeries. The aim of the study was to evaluate whether sufentanil provides cardioprotection and the effect of connexin 43 on the cardiac infarct size reduction. Sufentanil post-conditioning (bolus injection at 0.1, 0.3, 1, 3, 10 μg/kg) or ischemic post-conditioning (3 cycles of a 10s reperfusion alternating with a 10s ischemia) was induced in an intact rat heart model of ischemia-reperfusion injury. Both ischemic and sufentanil post-conditioning reduced the myocardial infarct size compared with control group. The infarct size limitation of sufentanil was dose-dependent, 1 μg/kg has the optimal effect and increasing dosage could not afford further cardioprotection. Connexin 43 underwent dephosphorylation in response to ischemia-reperfusion measured by Western blot at the anterior myocardium tissues of left ventricle while sufentanil preserved the phosphorylation of connexin 43. The results demonstrated that sufentanil limits myocardial infarct size which is similar with ischemic post-conditioning at the dosage of 1 μg/kg. Preservation of phosphorylation of connexin 43 plays an important role in the cardioprotection of ischemic and sufentanil post-conditioning.     

nmhaFGF对大鼠肾脏缺血-再灌注ET-1和NO的影响

目的 探讨不同浓度非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)对肾脏缺血-再灌注(I-R)损伤后内皮素1(ET-1)和一氧化氮(NO)含量的影响.方法 成年SD大鼠35只随机分为假手术(切除左肾,暴露右肾)(SA)组和4个模型组(切除左肾,右肾动静脉夹闭60 min).建模后5 min经舌静脉注射nmhaFGF 10 μg/kg(A组)、20μg/kg(B组)、40μg/kg(C组)或生理盐水1.5 ml(D组).术后24 h处死,放射免疫及生化方法检测肾组织和血浆ET-1和NO含量.结果 B组皮质和外髓ET-1含量明显低于D组(P<0.05),C组肾皮质、外髓、内髓和血清中ET-1含量都明显低于D组(P<0.01);B、C组肾组织中NO含量明显高于D组(P<0.05).结论 nmhaFGF可以通过降低ET-1和升高NO水平减轻大鼠肾脏I-R损伤.     

Tolerance and sensitization to stimulant and depressant effects of nicotine in intracranial self-stimulation in the rat

Nicotine is thought to be an important factor in addiction to tobacco but its psychopharmacological properties are still uncertain. In the present study, rats were trained to operate a pedal to obtain threshold-current, variable-interval hypothalmic stimulation. Response rates were printed out at 10min intervals to provide a continuous record of facilitatory or depressant effects by injected nicotine. Responding was enhanced in all rats but this depended on dose, time after injection, and previous exposure to the drug. In the first 10min after injection, responding by drug-naive rats was either unaffected (40-130mg/kg s.c., as base) or strongly depressed (400μg/kg). This phase was followed by prolonged (>50min) dose-dependent facilitation. Higher doses (1.3mg/kg) caused prostration. Chronic exposure to nicotine (400μg/kg x 10 at 2-5 day intervals) reduced the initial depressant effect; it also augmented subsequent responding, but only in the early minutes after injection; the latter finding indicates that apparent sensitization to chronic nicotine may depend primarily on tolerance to its depressant effects, rather than on receptor upregulation. Stimulant and depressant effects of nicotine were prevented by pretreatment with the centrally acting antagonist, mecamylamine (2.0mg/kg s.c.), but not by the peripheral antagonist, hexamethonium (1.0mg/kg s.c.) or by the muscarinic receptor antagonist, hyoscine (scopolamine; 100-300μg/kg s.c.). Self-stimulation was unaffected by mecamylamine alone. Thus the inhibitory action of nicotine is unlikely to be due to depolarization block, peripheral activity or muscarinic activity. Its facilitatory and depressant effects appear to be narrowly time- and dose-specific, thus accounting for divergent findings in many studies.     

尿苷三磷酸对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的机制初探

目的观察验证尿苷三磷酸（UTP）对在体大鼠脑缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法线栓法制备大鼠中脑缺血再灌注（MCAO）损伤模型。UTP试剂在大鼠大脑中动脉（MCA）缺血30 min后以微量输注泵通过大鼠尾静脉持续给药,输注速度为5 ml/（kg.min）。再灌注24 h后测量大鼠脑含水量以及神经损伤行为学评分（NDS）。通过离体大鼠颈动脉环张力法测定UTP对去氧肾上腺素（PE）预收缩颈动脉环张力的影响。结果比较10、30、90μg/kg UTP组,发现UTP对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用具有剂量依赖效应,90μg/kgUTP组的保护作用最明显。离体血管张力测定结果表明,UTP可以显著降低PE诱发的血管张力。结论UTP对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,这种作用可能与梗塞部位的血管扩张有关。