重组人肝再生增强因子对肝纤维化大鼠基质分解素—1基因表达的影响

为了解重组人肝再生增强因子（hALR）对肝纤维化大鼠基质分解素－1（MMP3）基因表达的影响,建立CCl4中毒性及人血白蛋白免疫损伤性两种大鼠肝纤维化模型,模型完成后予不同剂量hALR治疗,在不同的时间点留取大鼠肝组织标本,提取总RNA,用逆转录定量聚合酶链反应（RT－PCR）测定MMP3的基因表达。结果在两种模型中hALR治疗组大鼠肝组织MMP3的基因表达水平在治疗过程中的不同阶段均明显高于模型组;高剂量hALR组大鼠肝组织基质分解素－1的基因表达水平均明显高于低剂量组,提示hALR可增强肝纤维化大鼠MMP3的基因表达。     

重组人肝再生增强因子可预防免疫损伤性肝纤维化的形成

观察重组人肝再生增强因子（ｒｈＡＬＲ）对免疫 务性肝纤维化的预防作用。建立人血白蛋白免疫损伤性大鼠肝纤维化模型。在造模的同时子ｒｈＡＬＲ腹腔注射。观察大鼠存活率,观察大鼠存活率,血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ水平,肝组织胶原蛋白含量及肝脏病理学改变。结果：ｒｈＡＬＲ可提高人血白蛋白损伤生肝纤维化大鼠存活率氏肝纤维化大 ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ水平,病理检查显示ｒｈＡＬＲ有明显减轻大鼠肝纤维化形成的作用;     

血清层粘蛋白和透明质酸测定对肝纤维化的诊断价值

血清层粘蛋白和透明质酸测定对肝纤维化的诊断价值曹娜英陈秀玲蔡雨萍吴建新孟宪镛肝纤维化是细胞外基质合成和降解失衡所致，层粘蛋白（ＬＮ）和透明质酸（ＨＡ）为近几年研究较多的两种细胞外基质，测定其血清含量可作为肝纤维化的检测指标〔１～５〕。本研究通过检测４...     

重组人肝再生增强因子可抑制肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的基因表达

在培养的肝星状细胞系中加入不同浓度的重组人肝再生增强因子(hALR),于不同的时间点收集细胞,提取总RNA,用逆转录定量PCR方法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原的基因表达水平.结果表明,高(0.2ng/L)、中(0.02 ng/L)、低(0.002ng/L)浓度的hALR 3组肝星状细胞Ⅰ型胶原基因表达水平在8、24、48、72h 4个时间点均明显低于对照组;大剂量组较中、低剂量组Ⅰ型胶原基因表达水平亦明显为低.中、低剂量hALR组肝星状细胞Ⅲ型胶原基因表达水平在24、48、72h 3个时间点明显低于对照组;大剂量hALR组肝星状细胞Ⅲ型胶原基因表达水平在8、24、48、72h 4个时间点均明显低于对照组,较中、小剂量组亦显著降低. 提示重组人肝再生增强因子对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达有明显的抑制作用.     

肝再生增强因子研究进展

肝再生增强因子是一种新的肽类肝细胞辅助丝裂原，能促进肝再生。其同源基因广泛存在于各种生物体中。本文从肝再生增强因子的基因克隆与分子结构、组织分布与分泌方式、受体分布与信号转导和生物活性等方面进行综述，以加深对肝再生机制的了解。     

重组人肝再生增强因子对肝星状细胞基质分解素-1及其抑制因子基因表达的调节

肝再生增强因子(ALR)是Hagiya等[1]1994年从新生大鼠肝组织中克隆的一种理化性质与肝刺激物( HSS)相似的促肝细胞增殖因子.新近,我国学者克隆了大鼠ALR的人类同源分子[2],并通过构建原核表达载体,获高效表达菌株,进而获得重组hALR.初步研究表明hALR对四氯化碳中毒性及①免疫损伤性大鼠肝纤维化均有明显的防治作用[3、4].本文拟通过观察hALR对肝星状细胞基质分解素-1( MMP3 )及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP1) 基因表达的影响,从细胞外基质降解代谢的角度探讨hALR抗肝纤维化的机制.     

不同肝病患者血清中肝再生增强因子水平的检测及意义

目的 建立血清肝再生增强因子（ALR）的酶联免疫检测方法，了解不同肝病患者血清中ALR水平及其意义。方法 利用ALR的酶联免疫方法检测不同肝病患者外周血清中ALR水平。结果 所建立的ALR酶联免疫方法其最低检测到的ALR浓度为0.1μg/L，在10ng/ml范围内抗体与ALR的反应呈良好的线性关系，与TGF－α，EGF等其它促肝细胞增殖因子无任何交叉反应。重型肝炎患者血清中ALR水平最高，急性肝炎次之，两者均非常显著高于正常人，慢性肝炎，肝炎后肝硬变，原发性肝癌和肝外疾病患者（P＜0.05和P＜0.01)；慢性肝炎和肝炎后肝硬变患者血清中ALR水平亦明显高于正常人（P＜0.05)；原发性肝癌和肝外疾病患者血清ALR水平与正常人无明显差异（P＞0.05)。结论 ALR酶联免疫检测方法对于不同肝病患者血清中ALR的检测具有良好的特异性和敏感性；肝病患者血清ALR的增多可能与肝损害及肝脏的再生有密切关系。     

重组人肝再生增强因子可抑制肝星状细胞I、Ⅲ型胶原的基因表达

在培养在肝星状细胞系中加入不同浓度的重组人肝再生增强因子（hALR）,于不同的时间点收集细胞,提取总RNA,用逆转录定量PCR方法测定I、Ⅲ型胶原的基因表达水平。结果表明,高（0.2ng/L）、中（0.02ng/L）、低(0.002ng/L）浓度的hALR3组肝星状细胞I型胶原基因表达水平在3、24、48、72h4个时间点均明显低于对照组;大剂量组较中、低剂量组I型胶原基因表达水平亦明显为低。中、低剂量hALR组肝星状细胞Ⅲ型胶原基因表达水平在24、48、72h3个时间点明显低于对照组;大剂量hALR组肝星状细胞Ⅲ型胶原基因表达水平在8、24、48、72h4个时间点均明显低于对照组,,较中、小剂量组亦显著降低。提示重组人肝再生增强因子对肝星状细胞I、Ⅲ型胶原基因表达有明显的抑制作用。     

大鼠肝再生增强因子的基因克隆

目的 克隆大鼠再生增强因子（ALR）编码序列,并在原核细胞表达。方法 按文献报道大鼠再生增强因子核苷酸序列合成引物,从2周龄大鼠肝组织提取RNA,利用RT－PCR扩增大鼠肝再生增强因子基因编码区;将PCR扩增片断亚克隆到pBV221质粒,构建原核表达重组载体,导入到大肠杆菌后热诱导表达目的的蛋白。结果 从大鼠肝脏的RNA中扩增到长约400bp的ALRcDNA编码区基因,序列分析表明与文献报道一致;重组克隆经热诱导表面出分子量约15kD大小的蛋白质,与预期值一致。结论 从2周龄大鼠肝组织中成功克隆再生增强因子基因,并获得了原核细胞高效表达。     

二氧化碳气腹对肝硬变大鼠肝功能影响的实验研究

目的探讨CO2气腹对肝硬变大鼠肝功能的影响及可能机理.方法制作大鼠肝硬变模型,闭合法建立不同压力、不同持续时间的气腹,于术前、术后1d、7d采取静脉血检测肝功能,采取门静脉血测内毒素含量.取肝组织匀浆测自由基、NO、NOS的含量.HE及免疫组化的方法观察肝组织学变化.结果(1)气腹压力越高,持续时间越长,ALT、AST则越高,1.33kPa(10mmHg),2h、1d组分别为135.75±19.79iU/L、370.50±44.70 iU/L,显著高于术前及假气腹组(P＜0.01);白蛋白在第7d有下降趋势,但无显著差异.(2)气腹压力越高,持续时间越长,内毒素水平越高,最高可达5.11±0.26 EU/ml,显著高于术前及假气腹组(P＜0.01).(3)MDA、NO、NOS水平随压力的升高、时间的延长而升高.NO、NOS的变化与内毒素变化成正相关(r=0.561、0.572,P＜0.05);ALT、AST的变化与内毒素变化成正相关(r=0.406、0.441,P＜0.05).(4)HE及免疫组化观察显示气腹压力越高、持续时间越长则iNOS表达越多,肝组织损害越重.结论肝硬变条件下,CO2气腹对肝功能的损害与内毒素、NO的异常升高有关.     

干扰花生四烯酸代谢的药物对实验性肝损伤的影响

目的：研究干扰花生四烯酸（ＡＡ）代谢的药物对实验性肝损伤的影响，探讨ＡＡ代谢与肝损伤的关系。方法：选择四氯化碳（ＣＣｌ４）、醋氨酚、卡介苗加细菌脂多糖所致的小鼠肝损伤模型，以血清谷丙转氨酶（ＡＬＴ）、肝脏丙二醛（ＭＤＡ） 和谷胱甘肽（ＧＳＨ） 水平为观察生化指标，同时光镜下观察组织病理学改变。结果：影响ＡＡ代谢的磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２） 抑制剂氯喹，环氧酶（ＣＯ） 抑制剂阿司匹林，环氧酶及脂氧酶（ＬＯ）双酶抑制剂氟灭酸对上述三种实验性肝损伤均无明显影响。而脂氧酶抑制剂黄芩甙和白三烯（ＬＴｓ） 受体拮抗剂ＧＬ３ 对实验性肝损伤有明显的保护作用。结论：上述结果提示ＡＡ 代谢ＬＯ途径产物如ＬＴｓ 可能在肝损中起着重要作用。     

肝纤维化大鼠血清四种糖苷酶的变化及意义

目的：探讨肝纤维化模型大鼠血清四种糖苷酶（β－NAG、BDGP、NAGS、AFU）活性的变化及其与传统的血清纤维化指标、肝组织病理学变化的相关性，为肝纤维化的非创伤性诊断提供新的简便的血清指标。方法：用CCL皮下注射法诱导SD大鼠肝纤维化模型，观察大鼠血清肝纤维化指标、四种糖苷酶活性以及肝脏组织病理学的变化。结果：肝纤维化模型大鼠血清β－NAG、BDGP水平明显增加，其敏感性分别为82．4％、47．1％，特异性分别为80．8％、70．0％，准确率分别为81．5％、55．6％，并与PCⅢ、CⅣ、HA的增加及肝纤维化程度正相关，而血清NAGS、AFU水平无显著变化。结论：CCL4诱导的肝纤维化大鼠血清β－NAG、BDGP活性明显增加，其检测有助于肝纤维化的无创诊断，并为临床应用提供了可靠的实验依据。     

酒精性肝纤维化基质降解机制的研究

为揭示酒精性肝病（ALD）肝纤维化基质降解的病理机制，28例ALD肝穿刺组织按其纤维化程度分为3组，应用原位杂交技术分别检测各组肝组织内基质金属蛋白酶－1（MMP－1）、基质金属蛋白酶－2（MMP－2）、膜型基质金属蛋白酶－1（MT1－MMP） mRNA和基质金属蛋白酶抑制酶－1（TIMP－1） mRNA的表达。结果发现，MMP－1、MMP－2、MT1－MMP和TIMP－1 mRNA阳性细胞主要位于纤维化的中央静脉、窦周及汇管区等部位周围，且MMP－2和MT1－MMP mRNA的表达细胞有重叠，MMP－2、MT1－MMP和TIMP－1 mRNA表达阳性细胞数随肝纤维化程度的加重而增多，而MMP－1 mRNA表达阳性细胞数减少，且以纤维化中期变化为著；MMP－1、MMP－2、MT1－MMP和TIMP－1 mRNA表达阳性细胞主要为肝窦壁细胞，少数肝细胞亦呈阳性表达，提示MMP－1养活和TIMP－1增多可能是ALD肝纤维化过程中细胞外基质（ECM）沉积、尤其是Ⅰ型胶原过量沉积的病理机制之一；MMP－2和MT1－MMP在基质降解过程中可能有协同作用，其表达增多可能对ALD时中央静脉纤维化、肝窦血管化起一定促进作用；肝窦壁细胞（肝星状细胞等）为肝组织内MMP－1、MMP－2、MT1－MMP和TIMP－1的主要产生细胞。     

国产聚四氟乙烯膜对牙周膜细胞生长及实验性牙周组织再生的影响

通过对国产膨体聚四氟乙烯（e-PTFE)膜对牙周膜细胞（PDLC）生长以及对牙周组织再生（GTR）与牙周骨质再生的影响。探讨该膜的临床应用前景,结果发现PDLC可以在e-PTFE膜上良好的生长、膜对细胞无毒性及抑制作用。扫描电镜观察到细胞与膜附着紧密,在动物实验中,组织学观察发现e-PTFE膜特殊的孔隙结构对牙槽骨缺损的愈合有保护和促进的作用。如果膜的冠向边缘封闭得好,对结合上皮的根向迁移有一定的抑制作用,有利于新生牙槽骨及牙骨质的修复再生和新附着的建立,不失为一种前景看好的替代产品。     

门静脉动脉化对实验性梗阻性黄疸大鼠肝脏再生的影响

为探讨门静脉动脉化重建肝血流后对肝脏再生的影响 ,作者建立了门静脉动脉化重建肝脏血流加行半肝切除 (43 % )的梗阻性黄疸大鼠实验模型 ,分别在术后 3天和 10天取出肝脏烘干称重、光镜下计数进入有丝分裂期的肝细胞和分离肝细胞进行流式细胞仪分析 ,以观察肝脏再生的情况。结果显示 ,实验组术后 3天和10天测定的肝脏干重与对照组比较无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;进入有丝分裂期的肝细胞计数与对照组比较无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;流式细胞仪测得的进入G2 和M期的肝细胞与对照组比较无显著性差异 (P >0 0 5 )。提示行门静脉动脉化重建肝血流不影响肝脏的再生     

rhIL-11联合rhG-CSF和CTX动员小鼠外周造血干/祖细胞的实验研究

为研究rhIL 11联合rhG CSF和CTX对C5 7BL/ 6小鼠外周造血干细胞的动员作用 ,将 48只C5 7BL/ 6小鼠随机分为 4组 ,3组d0给予一次腹腔注射 2 0 0mg/kg的CTX ,其中 2组d1d15分别皮下注射rhIL 11、rhIL 11加rhG CSF ,观察不同时间外周血白细胞、血小板计数、CD34 细胞比例、CFU GM、CFU MK及CFU E的数量变化。结果发现 ,rhIL 11或联合rhG CSF可明显促进CTX骨髓抑制小鼠外周血血小板和白细胞的恢复、提高外周血CD34 细胞比例及三系造血细胞集落数量。证明rhIL 11具有外周血造血干细胞动员作用 ,而与rhG CSF和CTX联合动员效果更佳。     

胎儿肝脏中抑制HL—60细胞生长的低分子抑制物的研究

在胎儿肝脏中存在着丰富的精氨酸酶以及一类分子量<10000dal 的抑制物,它们对 HL-60细胞有明显的细胞毒性作用。然而,与精氨酸酶不同的是,这类低分子抑制物对HL-60细胞比对人骨髓 CFU-GM 有更强的抑制细胞生长的作用。