固相萃取-高效液相色谱法测定畜禽肉中四环素类抗生素残留

目的:建立采用固相萃取技术净化样品,高效液相色谱-紫外检测器同时测定畜禽肉中土霉素、四环素和金霉素3种四环素类抗生素残留的方法。方法:样品经过匀浆、旋涡、超声、离心后,取上清液经Wa-ters Oasis HLB萃取柱净化,净化液经氮吹仪浓缩后进样,色谱柱采用Agilent Eclipse XDB-C18 150×4.6 mm,5μm,流动相为(0.01 mol/L磷酸二氢钠∶乙腈∶甲醇=70∶20∶10,流速0.8 ml/min,检测波长为355 nm和270 nm,柱温30℃,进样量50μl进行检测。结果:样品平均回收率为82.0%～98.4%,RSD为0.8%～3.2%,线性范围为0.02μg/ml～10μg/ml,相关系数为0.99998～0.99999,最低检出浓度为土霉素0.4μg/kg,四环素0.4μg/kg,金霉素0.8μg/kg。结论:建立的方法用于同时测定畜禽肉中土霉素、四环素和金霉素3种四环素类抗生素残留灵敏度高,分离度好,回收率高,适合于日常检测工作。     

二维液相色谱法测定保健食品中V_A、V_(D3)、V_E的含量

目的建立了二维液相色谱法测定保健食品中VA、VD3、VE含量的方法。方法采用甲醇与乙醇超声直接提取样品,以Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为一维色谱柱,流速为0.5 ml/min;以poroshell 120(4.6 mm×100 mm,2.7μm)为二维色谱柱,流速为1.0 ml/min;采用波长切换方式检测(VA:325 nm;VD3:264 nm;VE:296 nm),以乙腈-甲醇-水为流动相,梯度洗脱,柱温为35℃。结果维生素A在0.21μg/ml~8.38μg/ml、维生素D3在0.04μg/ml~1.73μg/ml、维生素E在2.05μg/ml~81.84μg/ml线性关系良好,相关系数r均为1.000 0,平均回收率为95.6%~102.7%。结论本方法快速、准确、重现性好,适用于保健食品复合维生素片或软胶囊中VA、VD3、VE的测定。     

固相萃取-高效液相色谱法测定化妆品中氢醌和苯酚

目的建立固相萃取-高效液相色谱法测定化妆品中氢醌、苯酚的分析方法。方法化妆品样品经甲醇提取,提取液经水稀释、PEP固相萃取柱净化后,通过CAPCELL PAK C_(18)MGⅡ(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱进行分离,以水-甲醇(40∶60,V/V)作为流动相,进行等度洗脱,流速为1 ml/min,柱温为25℃,进样量为5μl,检测波长为280 nm。结果氢醌、苯酚在2μg/ml～50μg/ml内线性关系良好,相关系数均0.999,检出浓度分别为0.6μg/g和1.6μg/g,定量浓度分别为2μg/g和6μg/g,回收率分别为92.7%～96.3%和100.0%～100.3%,相对标准差分别为0.5%～0.6%和0.3%～0.4%。采用该方法对收集到的液相色谱法或气质色谱干扰严重样品20余批次进行测定,该法能有效除去化妆品中氢醌、苯酚测定的干扰成分。结论该法简便、快速,可用于基质复杂化妆品中氢醌、苯酚的测定。     

反相高效液相色谱法测定大鼠全血中虫草素含量

目的建立一种测定血液中虫草素含量的反相高效液相色谱法。方法大鼠全血0.4 ml,加入甲醇1.6 ml,4℃12000 r/min离心10 min,取上清液50℃氮气吹干,用0.15 ml甲醇复溶,12000 r/min离心15 min,取上清液10μl进样;色谱条件为ODS-SP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇∶水=27∶73为流动相;流速0.8 ml/min;柱温35℃;紫外检测波长259 nm;检测血中虫草素含量。结果虫草素浓度在0.1~5.0μg/ml范围内线性关系良好,相关系数为0.9998;浓度为0.2、1.0、5.0μg/ml时日内RSD(%)分别为5.38、0.63、2.95,日间RSD(%)分别为2.20、4.41、2.57;检出限(S/N=3)为0.05μg/ml;全血中浓度为0.1、0.8、1.5μg/ml时回收率为85%~102%。结论该反相高效液相色谱法灵敏度高,重复性好,能有效分离检测血中虫草素含量。     

超高效液相色谱法测定肉制品中喹乙醇

目的:建立超高效液相色谱测定肉制品中喹乙醇的方法。方法:采用5%甲醇作为提取液,OasisHLB固相萃取小柱净化进行样品前处理,超高效液相色谱-紫外检测器测定。色谱柱XTerra Ms C18 3.5μm×2.1 mm×100 mm,流速:0.3 ml/min,流动相:甲醇∶水=10∶90,柱温30℃,检测波长260 nm,进样量:10μl。结果:喹乙醇方法检出限0.04 mg/kg,在0 mg/L～10.0 mg/L范围内呈良好线性关系,相关系数r=0.9992。方法平均回收率为85.9%,RSD为4.2%。结论:本方法适用于肉制品中喹乙醇的测定。     

高效液相色谱-荧光检测法分析血浆中ALA的含量

目的建立血浆中δ-氨基-γ-酮戊酸(ALA)含量的高效液相色谱-荧光检测方法。方法将血浆样品与乙酰丙酮工作液(乙酰丙酮-乙醇-水,15∶10∶75,V/V)和10%甲醛溶液在沸水浴中反应10 min后,置于冰水浴中充分冷却。经微孔滤膜过滤后以C18柱为分析柱进行高效液相色谱测定。色谱分析以甲醇-水-乙酸(1 000∶1 000∶2,V/V)为流动相,流速为0.6 ml/min;荧光检测器的激发波长为370 nm,发射波长为460 nm,柱温为40℃。结果 ALA浓度为5μg/L~100μg/L时,与色谱峰面积之间呈良好的线性关系。本方法的最低检出限为0.5μg/L,定量限为2.0μg/L,多次重复测定结果的RSD为0.35%(n=6),不同浓度的平均加标回收率为86.56%~100.09%。结论所建立的血浆中ALA含量的高效液相色谱-荧光检测法,简便、准确,可用于血浆中ALA含量的测定,为生物样品中ALA低浓度水平的检测提供了新的途径。     

TSK凝胶色谱系统测定头孢呋辛酯片的高分子聚合物

目的建立TSK凝胶色谱系统测定头孢呋辛酯片中高分子聚合物的方法。方法采用HPLC法,色谱柱为TSK-gel G2000 SWXL(7.8 mm×300 mm),以水-甲醇(10∶90,V/V)为流动相,流速为0.5 ml/min,检测波长为278 nm,进样体积为20μl。结果高分子聚合物峰与头孢呋辛酯峰能有效分离,辅料无干扰,头孢呋辛酯主成分的线性范围为10.44μg/ml~1 471.37μg/ml(r=0.999 8);供试品溶液的浓度为0.312 mg/ml~1.561 mg/ml时,与聚合物峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8);检出限为3.13μg/ml,定量限为10.44μg/ml;方法的精密度良好(RSD=0.15%);样品测定的重复性(RSD=0.51%)与重现性较好(RSD=0);供试品溶液室温放置不稳定,故需临用新制,配制后低温放置。结论该方法简便、快速、灵敏度高、重现性好,克服了传统聚合物检测方法分析时间长,无法检测脂溶性样品的缺点。可用于头孢呋辛酯片及其他脂溶性抗生素中高分子聚合物的检测。     

高效液相色谱法测定人体血浆中的头孢噻利浓度

目的:建立高效液相-紫外(HPLC-UV)法测定人血浆中头孢噻利的浓度。方法:血浆样品经高氯酸沉淀蛋白处理后,用阿司匹林作为内标进行HPLC-UV检测;色谱柱采用Diamonsil C18(5μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱;流动相为:乙腈+20 mmol/L醋酸铵(8+92,v/v),用冰醋酸调pH至5.20;检测波长为254 nm;结果:在选定的色谱条件下,头孢噻利与血液中的杂质分离良好。头孢噻利在血浆中的线性范围为0.2μg/ml～50.0μg/ml,最低检测浓度(LLOQ)为0.2μg/ml,日内和日间的精密度(RSD)均小于10%,准确度为96%～102%,提取回收率均大于80%。结论:该方法经考察符合生物样品的测定要求,可应用于人血浆中头孢噻利浓度的测定和药代动力学研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中的氨基甲酸酯类农药

目的建立血浆中8种氨基甲酸酯类农药(灭多威、抗蚜威、速灭威、残杀威、克百威、甲萘威、异丙威、仲丁威)同时测定的方法。方法血浆用4℃~8℃冷藏的75%乙腈沉淀蛋白后,用高效液相色谱-串联质谱法(HPLCMS/MS)进行测定,外标法定量,其中色谱柱采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为甲醇-5 mmol/L乙酸铵溶液,梯度淋洗,采用电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式监测。结果样品中氨基甲酸酯类农药的线性范围为20μg/L~800μg/L,相关系数(r)0.999 0,样品的最低定量浓度20μg/L。当添加浓度水平为20μg/L、200μg/L、800μg/L时,回收率为60.0%~105.9%;低、高2种浓度水平的日内相对标准偏差(RSD)为1.7%~5.0%。结论该方法样品前处理简便,灵敏度高,线性关系良好,准确度高,非常适合氨基甲酸酯类农药中毒事件中生物样品的应急检测。     

HPLC法测定双黄连合剂中黄芩苷含量

目的建立测定双黄连合剂中有效成分黄芩苷含量的有效方法。方法色谱柱为Waters C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1,v/v/v),流速1.00 ml/min,进样量10μl,检测波长274 nm,柱温30℃。结果黄芩苷在53.295~532.950μg/ml(r=0.999 0)考察的线性范围内,线性关系良好,黄芩苷成分平均回收率95.35%(RSD=1.0%),符合含量测定要求。结论采用高效液相色谱法测定双黄连合剂中的黄芩苷成分,结果准确,方法操作简便,可将此方法用于双黄连合剂质量控制。     

高效液相色谱法测定早餐谷物中的烟酸和烟酰胺

目的建立高效液相色谱法同时测定早餐谷物中烟酸和烟酰胺含量的方法。方法样品经人工胃液在37℃水浴中放置过夜提取,放至室温,摇匀,离心,取上清液用0.45μm滤膜过滤,采用DIKMA Spursil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以1-癸烷磺酸钠溶液(1.22 g→850 ml)-乙腈-磷酸(850∶150∶1,V/V)为流动相,柱温为30℃,体积流速为1.0 ml/min,进样量为20μl,通过二极管阵列检测器进行检测,检测波长为261 nm。结果烟酸和烟酰胺均在1μg/ml~100μg/ml时呈现良好的线性关系(r0.999),平均加标回收率为98.5%~102.6%,相对标准偏差(RSD)为2.3%~4.2%,方法的检出限分别为0.23 mg/kg、0.28 mg/kg。结论该方法操作简便,重现性良好,测定结果准确、可靠,可用于早餐谷物中烟酸和烟酰胺含量的同时测定。     

人血浆中维生素K_1和维生素K_1-2,3环氧化物含量的检测

目的建立同时检测人血浆中维生素K1和维生素K1-2,3环氧化物的HPLC方法。方法色谱条件:C18柱(150 mm×4.6 mm),无水乙醇-石油醚(95∶5)为流动相,检测波长254 nm,流速1.5 ml/min,柱温30℃,同时检测人血浆中维生素K1和维生素K1-2,3环氧化物。结果维生素K1的标准曲线y=10 636.5x+569.3,线性范围20~200μg/ml,r=0.9998;维生素K1-2,3环氧化物的标准曲线y=8965.2x-796.2,线性范围5~40μg/ml,r=0.9991。结论该方法灵敏度高、精密度好、简便,维生素K1和维生素K1-2,3环氧化物经1个月冷冻保存和4℃放置24 h稳定性较好,可用于人血浆的生素K1和维生素K1-2,3环氧化物含量同时测定。     

HPLC法测定氯硝柳胺乙醇胺盐微乳含量

目的建立高效液相色谱-紫外检测器法测定氯硝柳胺乙醇胺盐微乳含量的方法。方法样品经甲醇稀释破乳后过滤,取续滤液,测定其中药物的含量。采用Zorbax Eclipse plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-水(1∶9,V/V,磷酸调节p H值至3.5)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为333 nm,柱温为30℃,进样量为10μl,用外标法对有效成分进行定量分析。结果氯硝柳胺乙醇胺盐的分离情况良好,在质量浓度为10μg/ml~100μg/ml时与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),低、中、高3种质量浓度的平均回收率分别为101.46%、99.79%、98.79%,相对标准偏差(RSD)分别为0.71%、0.42%、0.44%(n=3),3批载药微乳的平均含量为0.48 mg/ml。结论该方法准确,便捷,专属性好,适用于氯硝柳胺乙醇胺盐微乳的含量测定。     

亲水作用色谱法同时测定保健品中的硫酸软骨素和氨基葡萄糖

目的建立亲水作用色谱结合PDA检测器同时测定保健品中硫酸软骨素和氨基葡萄糖的高效液相色谱法。方法采用Waters Xbridge HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-10 mmol/L乙酸铵(95∶5,V/V)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃,检测波长为192 nm,进样体积为5μl。结果在上述色谱条件下,硫酸软骨素和氨基葡萄糖在10μg/ml~200μg/ml内线性关系良好,硫酸软骨素和氨基葡萄糖的检出限均为3.0μg/ml,回收率分别为94.18%、93.45%。混合溶液在48 h内稳定。结论本方法经方法学检验,灵敏度和专属性高,稳定可靠,适用于同时测定保健品中的硫酸软骨素和氨基葡萄糖。     

HPLC法测定宫颈癌患者血浆顺铂浓度的研究

目的建立一种便捷、准确测定宫颈癌化疗患者血浆中顺铂(Cisplatin,DDP)浓度的高效液相色谱测定法(HPLC),为实时监测血浆顺铂浓度及制定化疗方案提供实验依据。方法取500μL待检者血浆,先将血浆样本经甲醇沉淀蛋白,取上清液经二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)衍生,再由三氯甲烷萃取。色谱柱为Ultimate Acclaim120C18(5μm,4.6mm×250mm),流动相为甲醇∶水=75∶25;流速为1.0mL/min;紫外检测波长为254nm;柱温35℃;进样量20μL。结果血浆顺铂浓度检测的线性范围为0.2~10mg/L(r=0.9995),最低检测限为0.057mg/L(S/N=3),相对回收率为100.8%±3.6%,日内和日间RSD均10%。结论该方法处理过程简便、快速,重复性好,可用于宫颈癌化疗患者血浆顺铂浓度测定和顺铂药物动力学研究。     

高效液相色谱法同时测定果蔬中绿原酸、表儿茶素、白藜芦醇

目的 建立同时测定果蔬中绿原酸、表儿茶素和白藜芦醇含量的高效液相色谱法。方法 根据文献报道和现行国家标准,对新鲜果蔬类样品中的绿原酸、表儿茶素和白藜芦醇的提取、净化和色谱条件进行优化研究。样品经甲醇超声提取后,提取液加入无水硫酸钠、C18固相吸附剂进行净化,涡旋离心后过膜,上清液供HPLC分析。色谱柱为InertSustain C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.2%冰乙酸水溶液,梯度洗脱,柱温为30℃,流速为0.8 ml/min,二极管阵列检测器检测。结果 绿原酸、表儿茶素和白藜芦醇线性范围分别为2.00μg/ml～20.0μg/ml(r=0.999 4)、20.0μg/ml～200μg/ml(r=0.999 3)、0.500μg/ml～5.00μg/ml(r=0.999 3),加标回收率为87.2%～99.4%。结论 该方法具有较高的重现性和灵敏度,各项指标均能满足国内外法规的要求,可用于果蔬中绿原酸、表儿茶素和白藜芦醇的同时测定。     

TSK凝胶色谱系统测定头孢妥仑匹酯中高分子聚合物

目的采用TSK凝胶色谱柱对头孢妥仑匹酯中的高分子聚合物进行测定。方法高效液相色谱法,以TSK-gel G2000 SW_(XL)(7.8 mm×300 mm)为色谱柱,流动相为水-甲醇(5∶95,V/V),流速为0.7 ml/min,检测波长为230 nm,进样体积为20μl。结果高分子聚合物峰与主成分头孢妥仑匹酯峰能够有效分离,头孢妥仑匹酯主成分的线性范围为5.35μg/ml~1 694.00μg/ml(r=0.998 5),在该范围内,供试品溶液浓度与聚合物峰面积呈良好线性关系(r=0.999 6);定量限为0.54μg/ml,检测限为0.16μg/ml;方法的精密度良好(RSD=0.21%);样品测定的重复性较好(RSD=0.62%)。结论该方法简便,快速,灵敏度高,重复性好,可用于头孢妥仑匹酯及其他脂溶性抗生素中高分子聚合物的检测。     

高效液相色谱法测定鸡蛋中PC和PE含量研究

[目的]建立高效液相色谱-紫外检测器测定蛋黄中磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)含量的方法。[方法]采用Zorbax XDB C18(150 mm×4.6 mm×5μm)色谱柱,以乙腈∶甲醇∶异丙醇=10∶80∶10(v/v)为流动相,流速1.0ml/min,柱温35℃,UV 208 nm的色谱系统。[结果]蛋黄中PC的平均回收率为86.4%;PE的平均回收率为88.0%,PC的RSD为3.4%(n=6);PE的RSD为2.8%(n=6),PC的线性范围0.050~0.40 mg/ml(r=0.9990);PE的线性范围0.050~0.40 mg/ml(r=0.9991)。[结论]建立的方法用于蛋黄中PC、PE含量的测定,操作简便、快速。     

免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-HPLC法检测茶叶中黄曲霉毒素

目的建立免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-高效液相色谱(HPLC)-荧光法测定茶叶中黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检测方法。方法样品经甲醇-水(7∶3,V/V)提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过免疫亲和色谱柱纯化,以甲醇-水(45∶55,V/V)为流动相洗脱,Cloversil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,采用光化学衍生器衍生,荧光检测器在激发波长360 nm、发射波长440 nm处测定。结果 AFB1、AFG1在0.50μg/L~20μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.50μg/kg,AFB2、AFG2在0.15μg/L~6.0μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.20μg/kg,其相关系数均0.999 2,回收率为82.6%~94.4%,相对标准偏差10%。结论该方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点,适用于测定茶叶中的黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2。     

空气中丙烯酰胺的高效液相色谱法研究

目的通过实验,建立了高效液相色谱法测定工作场所空气中丙烯酰胺含量的测定方法。方法样品经吸收液采集后,用高效液相色谱分析,外标法定量。本法采用ODS-3反相色谱柱(4.6 mm×150 mm),波长为200 nm,流动相为甲醇-水(5∶95,V/V),流速为1.000 ml/min,进行等梯度洗脱,保留时间为3.376 min。结果丙烯酰胺的浓度为0.0μg/ml~2.0μg/ml时,线性关系良好,线性方程为y=4.425×10-6x-0.008,相关系数(r)为1.0。本法的检出限为9.9×10-5μg/ml,加标回收率为98.1%~100.0%,RSD为0.08%~0.30%。结论本法样品无需处理,直接进样,出峰快、方便快捷、灵敏度高、线性范围宽、重复性好、定性定量准确,适合工作场所空气中丙烯酰胺的测定。