宫颈癌P53基因突变的检测

探讨抑癌基因Ｐ５３突变与宫颈癌发生发展之间的关系，并为该病的临床检测提供一种分子生物学方法。方法应用多边反应－单链构象多态性分析方法对宫颈癌及慢性宫颈炎组织中Ｐ５３基因５－６外显子的突变进行了检测。     

宫颈癌P53基因第6,7外显子突变的检测

（１）目的 探讨人宫颈癌Ｐ５３基因突变与临床病理特征的关系。（２）方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性酶切片断长度多态性分析（ＲＦＬＰ）技术,检测３４例宫颈癌第６,７外显子的突变。（３）结果 检出突变６例,突变与临床分期,病理学分级有关,而与年龄、组织学类型无关。（４）结论 Ｐ５３基因突变是宫颈癌发生的原因之一。     

P53基因与人类肿瘤

肿瘤是体细胞的遗传突变,连续的多步遗传变化是细胞癌变的中心问题O原癌基因突变、重排、易位和扩增成为细胞癌基因,具有转化致瘤潜能。抑癌基因阻遏转化致瘤,经过突变、重排、插入和缺失后丧失原有功能,导致肿瘤发生。PS。为涉及肿瘤演发的重要基因之一,具有抑癌和致癌的双重作用,P,3基因的研究已成为当前肿瘤分子生物学和分子遗传学的研究热点。IP53的生物学特点野生型P53基因位于人类染色体17P13和小鼠11号染色体,全长16～20kb,有11个外显子。其中不编码的外显子三距离其余外显子大约8～10kb,人P。。外显子正上游4O0hp处有…     

人类脑胶质瘤P53基因突变与预后的关系

目的　探讨P5 3突变在胶质瘤发生发展中的作用及其与临床病理特征和预后的关系。方法　利用聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 (PCR -SSCP)及LSAB免疫组化法对已明确诊断的 4 8例脑胶质瘤进行P5 3基因突变以及蛋白表达的检测。结果　 4 8例胶质瘤中 2 0例P5 3蛋白呈阳性表达 (4 1.7% )。在高级别的肿瘤 (Ⅲ、Ⅳ级 )中P5 3表达率明显高于低级别 (Ⅰ、Ⅱ级 )的肿瘤 (分别是 6 3.2 %、2 7.6 % ) (P <0 .0 5 )。PCR -SSCP检测发现 17例 (35 .4 % )呈现P5 3基因的单链构象多态性改变 ,均位于 5 - 8外显子 ,突变例数依次为 7(4 1.2 % )、1(5 .9% )、4 (2 3.5 % )、5 (2 9.4 % )。两种方法检测的符合率为 89.6 % (4 3/4 8)。在单因素分析中P5 3突变与预后相关 ,而在多因素分析中P5 3突变与预后无关 ,肿瘤的组织学分级与预后相关性显著。该基因的突变与患者年龄、肿瘤大小、性别无关 ,但与胶质瘤的恶性程度相关性显著。结论　胶质瘤中P5 3突变多发于第 5、7、8外显子 ,该基因的突变与胶质瘤的发生及恶性进展相关 ,与预后无关。     

鼻咽癌P53基因突变的研究

目的：探讨鼻咽癌Ｐ５３基因突变问题。方法：用聚合酶逻反应－－单链构象多态分析法对４０例鼻咽癌患者的Ｐ５３基因突变进行了分析探讨。结果：检测５．６．７．８四个外显子,发现３例突变,其中第６外显子１例,第７外显子１例,第８外显子１例,仅第５外显子无突变发生。结论：鼻咽癌Ｐ５３基因突变在四个保守区均有可能发生。     

肺癌患者P53基因突变的检测

应用多聚酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）研究技术，从分子生物学角度探讨Ｐ５３肿瘤抑制基因在肺癌中的突变情况。结果：①３６例肺癌中有１７例出现Ｐ５３基因突变，占４７％；其中鳞癌突变发生率为２９％（４／１４），腺癌为５０％（５／１０），小细胞肺癌为７３％（８／１１）；１例肺泡癌未发现突变。②突变集中在Ｐ５３基因的５第５、６和７个外显子，分别有６、３和３例肺癌在相应的外显子部位发生突变。③突变     

口腔粘膜癌变过程中p53基因突变与P53蛋白异常表达的关系

为探讨口腔粘膜鳞状细胞癌发生发展过程中，Ｐ５３基因突变与口腔粘膜癌前损害发生发展过程中Ｐ５３基因异常表达的关系，采用微波煮沸脱交联代替胰酶消化的ＡＢＰＡＰ染色法，对正常口腔粘膜至转移性口腔粘膜鳞状细胞癌全过程中组织的Ｐ５３蛋白染色及其染色阳性率与Ｐ５３基因突变的关系进行了对照研究。结果显示，正常口腔粘膜及口腔粘膜单纯性上皮增生组织中无Ｐ５３是性出现，而９０％（２７／３０）的口腔粘膜癌胶损害组织，６     

宫颈癌人乳头状瘤病毒感染与P53蛋白表达的关系

采用聚合酶链反应对４９例宫颈癌组织石膜包埋标本中人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６、１１、１６、１８型ＤＮＡ进行检测，并与本组研组增报导的同标本中Ｐ５３蛋白检测结果进行比较。结果表明：①ＨＰＶ－ＤＮＡ的检出（８７．７６％０分别与ＨＰＶ６、１１、１８－ＤＮＡ的检出（２７．５２％、３６．７３％、３８．７８％）相比有显著性差异（Ｐ〈０．００１）。②ＨＰＶ各型间有交叉感染，单独ＨＰＶ１６感染与各型间交叉感染相比有     

广西地区胃癌与P53基因突变关系的初步研究

用聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术检测８例胃癌及１例正常胃组织Ｐ５３基因有２４９密码子点突变，结果未发现异常，提示Ｐ５３基因第７外显子第２４９密码子点突变不是本地区胃癌Ｐ５３基因突变的常见类型。     

p53基因突变与人食管癌转移的关系研究

目的：探讨ｐ５３基因突变与人食管癌淋巴结转移的关系。方法：采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）结合银染技术,对４７例食管瘤组织中ｐ５３ 基因第５～８外显子进行了突变分析。结果：４７例食管癌标本中,ｐ５３基因第５～８外显子出现突变者２０例,其突变率为４２．６％;其中２２例伴有淋巴结转移的原发癌中１３例出现了突变（５９．１％）,其与无淋巴结转移组（２８．０％,７／２５）相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：ｐ５３基因突变与人食管癌的转移可能关系密切。     

胸水P_(53)基因测序在肺癌诊断中价值的探讨

目的 :评价胸水P53基因测序在肺癌诊断中的价值。方法 :对 46例肺癌合并胸腔积液患者的活检组织标本、胸水标本进行P53基因测序 ,并用 30例非癌性胸水标本作对照。结果 :在 46例肺癌合并胸腔积液患者中 ,活检组织P53基因突变率为41 30 % ,胸水P53基因突变率为 32 6 0 % (P >0 0 5 ) ,而非癌性胸水P53基因突变率仅为 3 33% (P <0 0 0 5 )。结论 :胸水P53基因测序对于肺癌的诊断 ,恶性胸腔积液的鉴别诊断有一定的辅助诊断价值     

食管鳞状细胞癌P53蛋白表达和基因突变与预后的关系

目的 检测食管鳞癌P53蛋白表达和基因突变状况与临床病理及预后的关系。方法 采用免疫组织化学(LSAB法)检测222例食管鳞癌P53蛋白表达；用聚合酶链反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)检测55例食管鳞癌P53基因突变，并进行生存分析。结果 食管鳞癌P53蛋白表达阳性率为51．80％，与组织学分级(P=0．001)、TNM分期(P=0．005)、肿瘤浸润深度(P=0．000)、淋巴结转移(P=0．035)有关；P53蛋白阳性表达患者预后差于不表达者(P=0．0190)，特别是TNMⅡ期患者(P=0．0084)。食管鳞癌P53基因大多数变异位于外显子5—8，其中变异热点在密码子24l和282位，P53基因第5，6，7，8，10外显子突变率分别为14．5％、1．8％、5．5％、18．2％、1．8％，总突变率为41．80％。P53基因突变阳性组与阴性组间患者生存时间有显著性差异(P=0．0417)。P53蛋白表达与P53基因突变符合率为82．14％。结论 P53蛋白的过量表达及基因突变，可以作为判断食管鳞癌生物学行为和预后的指标。     

用镭射激光捕获技术研究LEC鼠P53基因突变和肝癌发生的关系

目的 研究P53基因突变与原发性肝癌发生发展的关系。方法 利用LEC鼠（long evan cinnamon）作为肝癌的动物模型。选取15周,37周,101周的LEC鼠15,14和10只,正常对照SD大鼠15只,取出肝脏组织进行切片。切片一部份用于GST-P免疫组化（immunohistochemistry,IHC）染色,另一部份利用镭射激光捕获技术（laser capture microdissection,LCM）定位切割,进行P53基因外显子5,6/7,8突变的分析。结果37周龄LEC鼠和101周龄LEC鼠GST-P阳性率高于对照组（P〈0.005）,15周龄LEC鼠GST-P阳性率与对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。P53基因在GST-P表达阳性肝炎组有3例突变（3/11）,GST-P表达阳性肝癌组有10例发生突变（10/15）,肝癌组显著高于肝炎组（P〈0.05）。结论 P53的突变发生在肝癌形成的早期阶段,随着发展过程,突变率明显增高。GST-P虽然特异性不强,但是不失为一种灵敏的判断肝损伤的指标。     

Mdm2和 P53蛋白在宫颈病变中的表达及临床意义

目的探讨鼠双微体2（Mdm2）蛋白和P53蛋白在宫颈病变中的表达及其相关性的研究。方法应用免疫组化方法检测Mdm2和P53蛋白在62例宫颈鳞癌,20例宫颈上皮内瘤变（ cervical intraepithelial neoplasia,CIN）,12例慢性宫颈炎中的表达。结果宫颈鳞癌组织中 Mdm2和P53蛋白阳性表达率显著高于CIN组和慢性宫颈炎组（P＜0．05）,Mdm2和P53蛋白在 CIN组和慢性宫颈炎组中的阳性表达均无统计学意义（ P＞0．05）;宫颈鳞癌中Mdm2蛋白的阳性表达与病理分级、临床分期、淋巴结转移密切相关（ P ＜0．05）, P53的阳性表达与临床分期密切相关（ P ＜0．05）;Mdm2和P53在宫颈鳞癌中的表达无相关关系（P＞005）。结论Mdm2和P53在宫颈鳞癌发生和发展中起重要作用;Mdm2可能作为判断宫颈鳞癌预后的指标。     

鼻咽癌组织中P16基因缺失突变的分析

目的探讨p16基因缺失突变在鼻咽癌中的发生情况与临床意义。方法采用多重PCR分析法,对157例鼻咽癌标本及47例治疗后病理阴性组织标本P16基因突变情况进行了检测。结果鼻咽癌组织中P16基因第2外显子的缺失率高于疗后病理阴性组织,统计学上有显著差异性（P〈0.000）,P16基因第2外显子的缺失与鼻咽癌的临床分期、性别、年龄统计学上无显著差异（χ2值分别为1.726、0.582、0.196,P〉0.05）,P16基因第2外显子的缺失率不足3年生存组高于超过3年生存组,统计学上有显著差异性（χ2=14.12,P〈0.000）。结论P16基因第2外显子缺失可能与鼻咽癌的发生发展预后有关,与临床分期、性别、年龄无关,可作为预后评价指标。     

大肠癌细胞对化疗药物的敏感性与p53基因突变的相关性研究

目的研究大肠癌细胞对化疗药物的敏感性与p53基因突变的相关性.方法用MTT比色法检测20位大肠癌患者的癌细胞对化疗药物的敏感性,并用PCR-SSCP技术分析其癌细胞的p53基因突变.结果大肠癌细胞对5-Fu[IR=(54.7±14.1)%]比对MMC[IR=(43.9±10.8)%]及ADM[IR=(43.9±9.4)%]更敏感(P＜0.05),但对DDP有耐药性[IR=(25.9±12.8)%,P＜0.01].p53基因的突变率为45%(9/20).癌细胞对MMC和ADM的敏感性与p53基因突变呈正相关(rmmc=0.589,rabm=0.624,P＜0.005).结论化疗药物MMC和ADM对大肠癌的作用依赖于p53基因的状态,而大肠癌对5-Fu和DDP的敏感性却与p53基因突变无关.     

检测P53在宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测P53在宫颈癌中的表达,探讨P53在宫颈癌发生发展中所起的作用。评估其作为肿瘤标志物及临床预后指标的价值。方法收集宫颈鳞状上皮癌石蜡包埋标本51例、慢性宫颈炎石蜡包埋标本21例,另收集子宫肌瘤全宫术后正常宫颈组织石蜡包埋标本13例作为正常对照组,采用免疫组化检测三组中的P53的蛋白表达,分析P53在宫颈癌中的蛋白表达强度与病理分级、淋巴转移、病理分型等的关系,分析P53与宫颈癌发生发展的关系。结果P53在正常对照组中的表达分别为12例阴性(-)、1例弱阳性( ),阳性表达率为7.69%;在慢性宫颈炎中18例阴性(-)、3例弱阳性( ),阳性表达率为14.29%;51例宫颈癌组织中共为43例阳性,阳性表达率为84.31%,分别为8例阴性(-)、17例弱阳性( )、12例阳性( )、14例强阳性( )。P53在宫颈癌组织中表达显著性均高于炎症组和对照组(P<0.01),P53的表达量与病理分级呈明显正相关(P<0.01),与病理分型、淋巴转移无明显关系(P>0.05)。结论P53与宫颈癌的发生发展密切相关。