羊栖菜中褐藻糖胶的提取纯化研究

分别采用酸提法和水提法从羊栖菜中提取褐藻糖胶,然后分别采用乙醇分级沉淀法、CaCl2法、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、MgCl2法和酸法进行纯化。结果表明,酸提法提取效率高于水提法,但其特性粘度明显低于水提法褐藻糖胶。酸提法粗多糖宜采用乙醇分级沉淀法进行纯化,水提法粗多糖宜采用CaCl2法进行纯化。     

羊栖菜褐藻糖胶的分级纯化和结构分析

从浙江洞头产羊栖菜中提取得到的褐藻糖胶,经DEAESepharoseCL 6B柱层析得F1、F2和F33个组分,F3又经SepharoseCL 6B柱层析得F31、F32和F333个级分.经凝胶过滤色谱检测,F31、F32和F33为均一组分.化学组成分析表明,这5个级分均为岩藻糖、半乳糖和甘露糖等糖基组成的杂多糖,并含有硫酸酯、糖醛酸以及少量的蛋白质,相对分子质量范围为2.5×104～9.5×105.F33中氮的质量分数为2%,氨基酸分析和紫外扫描表明氮大部分可能来自核酸.F32的硫酸酯对碱基本稳定,表明大部分硫酸酯位于单糖残基的垂直位置.     

羊栖菜中褐藻糖胶的提取工艺

研究了从羊栖菜中提取褐藻糖胶的工艺 .采用高浓度醇溶液处理羊栖菜粉、稀酸提取、减压浓缩、乙醇分级沉淀和冷冻干燥等单元操作 ,可以获得褐藻糖胶产品 .通过正交试验 ,摸索在不同提取温度、提取时间和 pH值条件下粗褐藻糖胶产品的得率及岩藻糖的提取率     

羊栖菜褐藻糖胶寡糖组分分析及抗凝血活性

为研究褐藻糖胶中具有抗凝血活性的寡糖组分,从羊栖菜中分离纯化得到褐藻糖胶（命名为SFF）,通过高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法、化学法测定SFF的单糖组成、分子质量、理化性质。采用盐酸降解法降解SFF,并通过Bio-gel P4凝胶色谱柱对寡糖组分进行有效分离。采用活化部分凝血酶时间、凝血酶时间、凝血酶原时间评价寡糖组分的抗凝血活性,筛选高活性且低分子质量的寡糖组分,通过质谱法解析其结构,探究抗凝血SFF寡糖的结构特征。结果表明,SFF主要由岩藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖组成,物质的量比为67.11∶26.69∶2.54∶3.66。SFF分子质量较大为708 kDa,总糖、蛋白、硫酸基质量分数分别为56.44%、1.14%和26.22%。盐酸降解产物经凝胶色谱柱分离得到5 种寡糖组分P1～P5,这5 种寡糖组分均可延长活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）,其中P1、P2、P3对APTT的延长作用高于P4、P5,P3的延长作用尤为明显;对凝血酶时间和凝血酶原时间无延长作用。高抗凝血、低分子质量寡糖组分P3的质谱分析表明,P3是一种高纯度寡糖组分,主要由二硫酸化岩藻三糖组成。本实验筛选出一种具有良好抗凝血活性的高纯度寡糖组分,丰富了抗凝血褐藻糖胶寡糖的研究。     

海带中褐藻糖胶的组成分析

对海带中褐藻糖胶进行了紫外薄层色谱、气相色谱、氨基酸分析等方面的研究.结果表明褐藻糖胶是由鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、硫酸根及蛋白质构成的复合物.其中单糖的摩尔比为RhaFUcXylManGalGlU=0.411.723.750.9612.17.褐藻糖胶的葡萄糖醛酸、硫酸根及蛋白质的含量分别为6.2%、8.7%和4.1%.     

海带中褐藻糖胶LPS-B的分离纯化与分析

海带中的褐藻糖胶经离子交换纤维素层析得到了4种亚组分:LPS-A、LPS-B、LPS-C、LPS-D,并用凝胶介质对其中的一种主要组分(LPS-B)进行进一步的分离纯化,最终得到两种均一多糖(PB-1和PB-21),高效凝胶过滤色谱法(HPGPC)测定分子量。结果表明,PB-1的Mw=5.64×105,Mn=2.97×105,分散度D=1.89;PB-21的Mw=3.54×104,Mn=2.46×104,分散度D=1.44。红外光谱分析表明,所得的两种均一多糖具有多糖的红外吸收峰,且都不含有糖醛酸。     

羊栖菜褐藻糖胶的结构表征及其抗氧化活性

为研究羊栖菜褐藻糖胶的结构及其抗氧化活性,以羊栖菜为原料,经CaCl₂溶液提取、DEAE-Sepharose fast flow分离纯化得到褐藻糖胶组分SFP-2。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、化学法、高效液相法(HPLC)以及傅里叶变换红外光谱法(IR)对多糖的纯度、分子量、理化性质、单糖组成以及官能团进行测定,并通过测定DPPH自由基清除活性、超氧阴离子清除活性、ABTS⁺自由基清除活性、亚硝酸盐清除活性和还原力,对多糖的体外抗氧化活性进行了评价。结果表明,SFP-2分子量均一,为707.0 kDa;总糖含量为66.9%,蛋白含量为3.1%,硫酸基含量为21.2%,不含糖醛酸;SFP-2主要由岩藻糖和半乳糖构成,还含有少量的甘露糖和氨基葡萄糖;红外光谱显示,SFP-2具有硫酸化多糖常见官能团的特征吸收峰;上述结果表明SFP-2是一种不含糖醛酸的硫酸化岩藻聚糖。SFP-2具有良好的清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS⁺自由基、亚硝酸盐活性,其EC₅₀分别为8.94、8.30、16.04、9.87 mg/mL,且具有一定的还原能力。因此,SFP-2是一种不含糖醛酸的,抗氧化活性良好的羊栖菜褐藻糖胶。     

羊栖菜褐藻糖胶的抗凝血和促血管内皮细胞生长活性研究

采用乙醇分级沉淀法对酸提法从羊栖菜中提取的粗糖进行纯化得到褐藻糖胶。采用体外凝血试验tAPTTt、TTt、PT评价了褐藻糖胶体外抗凝血活性和MTT染色法检测褐藻糖胶对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)生长的促进作用。结果表明t,APTTt、TT分别在不同浓度与对照组出现显著差异,而tPT未出现显著差异。在10μg/mL～200μg/mL浓度范围内,人脐静脉血管内皮细胞增殖数量有大幅度提高,对人脐静脉血管内皮细胞增殖具有明显促进作用,说明褐藻糖胶是促人脐静脉血管内皮细胞生长的活性物质。     

羊栖菜褐藻糖胶对AAPH诱导的斑马鱼氧化应激模型的保护作用

目的:探究羊栖菜褐藻糖胶（SFPS）对2, 2-偶氮二（2-甲基丙基咪）二盐酸盐（AAPH）诱导氧化应激斑马鱼模型的保护作用。方法:通过检测SFPS对2, 2'-联氮-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）及1, 1-二苯基-2-苦基肼（DPPH）自由基的清除能力,来评价及验证SFPS的体外抗氧化能力,优化AAPH诱导斑马鱼氧化应激模型,并分别以三个表型指标胚胎存活率、卵黄囊大小和心跳速率以及斑马鱼体内细胞死亡率和活性氧（ROS）生成率来评价SFPS的体内抗氧化活性。结果:SFPS主要由75.30%±1.77%的总糖、21.39%±1.07%的硫酸根,1.78%±0.19%的蛋白质以及1.47%±0.02%的多酚组成,对DPPH、ABTS自由基清除的IC₅₀值分别为0.59、0.69 mg/mL。此外,SFPS在50~200 μg/mL范围内对斑马鱼胚胎无毒性,并对AAPH诱导引起的斑马鱼氧化损伤起到保护作用,且呈剂量依赖型。其中,在最优浓度200 μg/mL显著提高斑马鱼胚胎存活率（100%,P<0.05）, 显著降低心跳速率（101.37%,P<0.05）和卵黄囊大小（111.80%,P<0.05）,对斑马鱼体内细胞死亡和活性氧生成的抑制率最高分别可达70.55%和50.68%。结论:SFPS具有较强的体外抗氧化作用,并对AAPH诱导氧化损伤的斑马鱼表现出优越的体内抗氧化能力及氧化损伤修复能力,这表明SFPS作为天然抗氧化剂在保健食品及化妆品领域具有广泛应用前景。     

褐藻糖胶的生物活性研究进展

褐藻糖胶是指含有相当数量岩藻糖和硫酸基的多糖,它是褐藻的主要活性成分,具有抗凝血、抗血栓、抗肿瘤、抗病毒、降血酯等多种生理功能,综述了褐藻糖胶在生物活性及其构效关系方面的研究进展。     

羊栖菜多糖的提取工艺研究

为了开发利用羊栖菜资源,对羊栖菜中多糖的提取工艺进行了研究。对羊栖菜多糖提取工艺中的参数:提取介质、料液比、提取温度、提取时间、pH值、提取次数、醇沉倍数分别进行了单因素试验,并且在单因素实验的基础上,通过对其中3个主要影响因子(温度、料液比、时间)进行正交试验,以及比较几种粗多糖脱蛋白和脱色方法,最终确定了羊栖菜多糖的最佳提取工艺,即:pH=3.0、浸提温度85℃、料液比1∶30、浸提时间5h、提取次数2次、3倍体积醇沉、大孔树脂脱色、酶解与Sevag法结合除蛋白。     

羊栖菜高活性膳食纤维提取工艺的研究

采用酶处理及化学的方法研究了酶解、消化、漂白和活化等工艺条件对提取羊栖菜膳食纤维的影响,筛选出提取膳食纤维的最佳工艺条件。试验结果表明,在该工艺条件下,羊栖菜膳食纤维的产率为26.7%,颜色为类白色,膳食纤维含量为66.22%,钙含量7.72%,膨胀力152mL/g,持水力3490%。     

羊硒菜提取物的体外抗氧化活性研究

对羊硒菜提取物的体外抗氧化活性进行研究,比较不同溶剂提取物的抗氧化和自由基清除活性.采用层析方法将羊硒菜甲醇提取物分成6部分,即F1组分～F6组分.利用还原力、Fe2+螯合和低密度脂蛋白(LDL)氧化的方法研究F2组分的抗氧化特性,试验结果表明:羊硒菜甲醇提取物具有较强的抗氧化和自由基清除活性.与其它组分相比,F2组分具有较强的抗氧化能力,当其质量浓度为0.5mg/mL时,抗氧化活性达到73.6%,对DPPH自由基的EC50达到16.4μg/mL,强于BHT.在质量浓度0.025～0.15 mg/mL范围,F2组分具有一定的还原能力和较弱的Fe2+离子螯合能力,能够有效抑制Cu2+引发的LDL氧化.     

鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯提取工艺及纯化研究

研究利用热水浸提法,复合酶解法提取鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯的最佳工艺参数及纯化工艺.结果表明:在pH为6,时间为5 h,温度为98℃,料液比为15的条件下浸提,鼠尾藻岩藻聚糖硫酸酯提取率为3.15%,总硫酸根质量分数为0.87%;采用复合酶解法提取岩藻聚糖硫酸酯最佳条件为:复合酶添加量为1.7%,pH为5.5,时间为1h,温度为45℃,在该条件下鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯提取率为3.6%,总硫酸根质量分数为1.1%,岩藻聚糖硫酸酯经DEAE-52阴离子纤维素变换层析分级得到F1、F2,F3,F4,F5五个组分,硫酸根含量分别为0、3.94%、6.57%、12.60%、38.08%.将含有硫酸根的组分F2、F3、F4、F5分别经Sephadex G-200凝胶柱层析分级纯化后得到f1、f2、f3、f4、f5、f6六个级分,其中f2、f4为大分子质量凝聚体,f1、f3、f5、f6相对分子质量分别为:4.05×104、7.13×104、1.325×105、7.99×104.     

海带岩藻多糖的分离与部分性质研究

研究了海带岩藻多糖的提取、影响因子及其纯化 ,岩藻多糖的分离最适条件为 :温度80℃ ,浸提时间 10h。经浓缩后 ,再用终 φ(乙醇 ) =60 %醇析获得粗品。岩藻粗糖经DEAE 纤维素的纯化后得FuⅠ、FuⅡ、FuⅢ、FuⅣ 4个组分 ,其硫酸根质量分数依次为 7 2 % ,1 95 % ,2 6 0 %和 17 2 %。同时对其红外光谱性质作了研究。     

海带中岩藻多糖的分离纯化与结构分析

通过DEAE-纤维素和凝胶过滤色谱反复柱层析,采用苯酚-硫酸法和高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)检测,从提取的海带岩藻多糖中得到了均一多糖TC-1,并结合多种分析手段：包括糖组成分析、甲基化分析、红外光谱(IR)分析等对其化学结构进行测定。结果表明：TC-1重均相对分子质量(Mw)为3.7×105,主要由岩藻糖构成,此外还伴有少量的木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的结构复杂的硫酸酯多糖。其中岩藻糖糖基以1,4-、1,3-连接方式存在;木糖以1,3-连接方式存在;甘露糖以1,3-、1,6-连接方式存在;葡萄糖以1,3,4-、1,2,4,6-连接方式存在;半乳糖以1,6-、1,3,6-、1,3,4,6-连接方式存在。     

羊栖菜多糖提取分离及其清除自由基的活性研究

为研究羊栖菜中多糖的提取分离及其对羟自由基(·OH)的清除活性,以及超声波时间、温度、时间、固液比对羊栖菜多糖提取的影响。采用L16(45)正交试验,得到超声波辅助水浴提取法提取羊栖菜多糖的最佳工艺条件为固液比1:40(m/V)、超声波时间20min、温度100℃、水浴时间150min,在此条件下,羊栖菜多糖提取率为6.60%。采用Fenton 体系研究羊栖菜多糖对·OH 的清除作用,得到其清除能力随其质量浓度的增大而增大,在多糖质量浓度为0.05～0.50mg/ml 范围内线性关系良好,脱蛋白多糖对·OH 清除率的线性相关系数R=0.9959,0.50g/L 脱蛋白多糖对·OH 清除率为42.2%。     

羊栖菜多糖的提取纯化及功能活性研究进展

羊栖菜是一种重要的经济藻类, 主要分布在我国浙江、福建等地。羊栖菜含有丰富的多糖, 主要包括褐藻胶、褐藻多糖硫酸脂以及褐藻淀粉等, 是一种可溶于水的酸性多糖, 具有良好生物活性。羊栖菜多糖的制备可以通过水提醇沉、酸提、酶提及超声波辅助等提取方法获得, 然而不同提取方法制备的多糖得率、结构及功能活性不尽相同。目前对羊栖菜多糖的药理活性研究主要集中在抗肿瘤、抗氧化、降血糖、抗衰老、调节肠道菌群、抗病毒等方面, 提示羊栖菜多糖在医药领域有着良好的前景。本文就国内外羊栖菜多糖的提取纯化及功能活性研究进行了系统的归纳和总结, 旨在为羊栖菜多糖的靶向功能提取纯化研究提供参考。     

小米多酚的分离纯化及其组分分析

使用AB-8大孔树脂对提取的小米多酚分离纯化,对其静态与动态吸附和解吸动力学进行研究,通过计算得出AB-8大孔树脂对小米多酚的吸附量为（12.70±0.95）mg/g,吸附率为（42.10±0.98）%,解吸率为（80.63±0.73）%,洗脱率为（84.00±1.22）%,纯化后多酚纯度由31.80%提高到72.80%。采用化学鉴定法、红外光谱法、紫外-可见光谱法、液相色谱-质谱联用法对纯化后的小米多酚进行组分分析,并初步推断出小米多酚中可能含有黄酮类物质,主要含有的化合物可能为羟基咖啡酸、氯化矢车菊素-3-O-半乳糖苷和对香豆酰苹果酸,且这三种物质均为谷物中最为常见的多酚类化合物。