乙醇保存异体神经移植实验研究

用６０％乙醇－３０℃保存的同种异体神经移植，修复在白鼠坐骨神经１５ｍｍ缺损。８周后，进行神经传导速度检测，小腿三头肌重量测定，形态学观察，结果接近自体神经移植，优于５０％和７５％乙醇保存的异体神经移植。     

大鼠坐骨神经-20℃川芎嗪玻璃化液保存对异体移植后神经再生的影响

目的：探讨不同时间段-20℃川芎嗪玻璃化液保存大鼠异体坐骨神经对异体移植后神经再生的影响．方法：-20℃川芎嗪玻璃化液（200mg／L川芎嗪）（A组）保存成年SD雄性大鼠坐骨神经,时间分别为1,2wk,然后选择成年Wistar雄性大鼠坐骨神经缺损模型作为受体,神经段复温后移植给受体,术后进行大体观察以及移植神经的大体、电生理、荧光逆行示踪、运动终板等检查;并分别与-20℃玻璃化液（不含川芎嗪）（B组）和-196℃川芎嗪玻璃化液（200mg／L川芎嗪）（C组）保存的坐骨神经进行比较．结果：保存1wk时-20℃川芎嗪玻璃化液组与-196℃川芎嗪玻璃化液组再生效果无差异,与-20℃玻璃化液组的差异有显著性（P〈0．01）;保存2wk以后3组中以-196℃川芎嗪玻璃化液组再生效果最好,-20℃川芎嗪玻璃化液组其次,-20℃玻璃化液组最差．结论：玻璃化保存液中加入川芎嗪可提高大鼠同种异体神经的保存温度值,-20℃时可保存大鼠周围神经1wk．     

深低温保存异体肌腱移植的研究进展

骨科临床实践中常应用肌腱移植来进行修复重建。自体肌腱移植是传统的方法，但肌腱来源有限，供腱处的形态功能可能受影响，而且扩大损伤范围，从而限制了其应用。人工肌腱组织相容性及其材料与受体肌腱愈合等问题，尚未完全解决。同种异体肌腱作为自体肌腱的替代，与自体肌腱有相同的结构和功能，而且来源广泛，特别是在多条或长距离肌腱缺损，而自体肌腱来源受限时，更显示出异体肌腱移植的优越性，经深低温冷冻处理后其抗原性大大降低，并可长期保存，已成为当前异体肌腱移植的主要处理方法。本文对近几年来深低温保存的同种异体肌腱的研究应用做一浅述。     

同种异体肌腱移植的实验研究

采用淋巴细胞毒试验,淋巴细胞转化试验及吞噬细胞功能实验等多项细胞免疫学指标测定,以及组织形态学观察与生物力学测定,比较深低温冷冻与深低温冷冻干燥两种不同处理方式对同种异体肌腱移植的差异,并综合评价各种移植的效果。结果显示：（１）深低温冷冻移植组及深低温冷冻干燥移植组的淋巴细胞死亡率、转人弦及吞噬细胞吞噬率均低于未经处理的同种异体移植组（Ｐ〈０．０５）,而与自体肌腱移植组差异无显著性（Ｐ〉０．０５）     

不同方法保存存猪软骨异种移植的实验研究

为了探索不同方法保存猪肩胛软骨对异种移植的影响，为临床应用提供科学依据。采用４种方法保存猪肩胛软骨，并按保存方法及保存时间分７组移植到日本大耳白兔背部皮下，每组５只动物，共３５只进行观察比较。①ｒ－射线辐射处理，４℃保存３个月为Ａ组，１个月为Ｂ组；②ｙ（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲液浸泡，４℃保存３个月为Ｃ组，１个月为Ｄ组；③深低温－８０℃保存３个月为Ｅ组，１个月为Ｆ组；④新鲜软骨为Ｇ组。移植术后每     

同种异体肌腱移植修复拇长伸肌腱自发性断裂

目的探讨应用同种异体肌腱修复拇长伸肌腱自发性断裂的临床效果。方法对8例拇长伸肌腱自发性断裂的患者采用同种异体肌腱移植修复断裂缺损的肌腱。结果术后随访3个月~2年,未见肌腱粘连和再次断裂。结论应用同种异体肌腱移植修复拇长伸肌腱自发性断裂,是一种操作简便、损伤小、疗效可靠的良好方法。     

保存方法对同种异体肋软骨移植的影响

[目的]探讨不同保存方法对同种异体肋软骨移植的影响。[方法]对40只家兔肋软骨进行Go^60照射、酒精浸泡、冷冻及中药试剂浸泡四种方法处理后，植入不同家兔鼻背部；12周后取出，进行吸收率和组织学观察。[结果]放射组肋软骨的平均吸收率最低(11．7％)，酒精组最高(23．68％)；移植后的组织反应，中药组最弱，酒精组最强。[结论]同种异体肋软骨移植后组织学的改变与吸收程度无正相相关联系。传统的冷冻、酒精浸泡同种异体肋软骨并非最理想的保存方法。     

屈肌腱移植的实验形态学研究

屈肌腱移植的实验形态学研究Ａｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｆｌｅｘｏｒｄｉｇｉｔａｌｔｅｎｄｏｎ张正治，刘正津（第三军医大学基础部解剖学教研室）６３００３８本项研究通过不同肌腱移植的动物实验、滑液对无滑膜肌腱作用...     

同种异体肌腱移植的免疫学实验研究

目的：比较几种肌腱移植材料的免疫学特点。方法：采用淋巴细胞毒试验、淋巴细胞转化试验及吞噬细胞功能试验测定多项细胞免疫学指标。结果：深低温冷冻、深低温冷冻干燥同种异体体肌腱的淋巴细胞死亡率,转 和吞噬细胞臃的均低于未经处理的同种异体肌腱,而与自体肌腱无显著性差异。结论;深低温冷冻干燥或不干燥同种异体肌腱的免疫学特点与自体肌腱基本相同,可广泛用于临床。     

同种异体肌腱移植的实验研究

采用淋巴细胞毒试验、淋巴细胞转化试验及吞噬细胞功能实验等多项细胞免疫学指标测定 ,以及组织形态学观察与生物力学测定 ,比较深低温冷冻与深低温冷冻干燥两种不同处理方式对同种异体肌腱移植的差异 ,并综合评价各种移植的效果。结果显示 :①深低温冷冻移植组及深低温冷冻干燥移植组的淋巴细胞死亡率、转化率及吞噬细胞吞噬率均低于未经处理的同种异体移植组 (P <0 .0 5) ,而与自体肌腱移植组差异无显著性 (P >0 .0 5) ;②深低温冷冻移植组、深低温冷冻干燥移植组及自体肌腱移植组肌腱无明显坏死 ,但腱周出现轻度粘连和结合部膨大 ,未经处理的同种异体肌腱移植组肌腱变性坏死 ;③光镜、电镜下未经处理的异体肌腱移植组肌腱腱束变性坏死 ,而深低温冷冻移植组与冷冻干燥移植组则无明显差别。上述结果表明 ,深低温冷冻干燥或冷冻但未经干燥的同种异体肌腱在免疫学、生物力学、形态学方面的表现与自体肌腱移植结果基本相同 ,而未经处理的异体肌腱因免疫排斥反应大 ,移植后易变性坏死     

Modified vitrification method for cryopreservation of human ovarian tissues

Background Vitrification is a prospective technology in ovarian tissue cryopreservation, but it is still in an initial stage. This study was conducted to investigate a modified vitrification protocol for human ovarian tissue, which can be used as an alternative to preserve fertility for young women with cancer who have to undergo cytotoxic therapy and sterilization. Methods Ovarian tissue samples were collected from 15 patients and randomly allocated to groups of fresh, vitrification, and conventional slow freezing. A modified carrierless vitrification method was applied. The proportion of morphologically intact follicles in fresh ovarian tissues was compared with that in warmed/thawed tissues. The initial growth of the follicles and the concentrations of estradiol and progesterone were detected to determine the viability and endocrine function of the cryopreserved tissues. Results The proportion of morphologically intact primordial follicles in the fresh group （97.6%） was significantly higher than that in the other two groups （vitrification group 80.3% and slow-freezing group 72.6%, P〈0.001）. In both the vitrification and slow-freezing groups, estradiol and progesterone were secreted continuously during 2-week culture in vitro, the proportion of primary follicles were both significantly increased compared to the fresh group. No statistically significant differences existed between the two groups after cryopreservation in the proportion of both primordial and primary follicles, and the concentrations of estradiol and progesterone （P〉0.05）. Conclusion The modified vitrification method for cryopreservation of human ovarian tissues is effective, simple, and inexpensive.     

卵巢组织冷冻保存

卵巢组织冻存移植技术是近年来新兴的生育力保护技术,不仅可保护患者生育力,还可以保护卵巢内分泌功能。无需卵巢刺激,不延迟后续抗癌治疗,一次可冻存成千上万个卵泡,移植后可实现自然妊娠,是青春期女童和无法延迟抗癌治疗年轻女性的唯一生育力保护方法。2019年美国生殖医学学会声称卵巢组织冻存移植技术不再是试验性技术。     

富含血小板血浆冰冻保存及保存效果的研究

目的：研究不同因素对冰冻保存富含血小板血浆（Cryo-PRP)在血库批量制备的整个过程中的质量和特性的影响,优化建立Cryo-PRP的批量制备技术。方法：对冰冻PRP制备的整个过程中的产品包括献血者外周血,ACD抗凝全血,新鲜富含血小板血浆（FPRP）,5％,MDSO富含血小板血浆（MPV）（DMSO－PRP）及－85℃冰冻保存2d后37℃水浴解冻后的Cryo-PRP检测其血小板计数（PLT）,血小板平均体积（MPV）,血小板分布宽度（PDW）,pH,乳酸脱氢酶（LDH）和乳酸的变化,并进行细菌污染监测。结果：（1）制备PRP可以获得全血中70％的血小板;（2）与ACD全血相比FPRP血小板群体发生了改变;（3）冰冻／复温过程中部分血小板膜的完整性受到损害不可避免。（4）在新鲜冰冻血小板制作,保存到临床应用整个过程中血小板代谢不活跃,基本处于休眠状态,有利于其长期保存。（5）冰冻血小板内未见细菌污染和繁殖。结论：冰冻保存PRP能够长期,大量,有效,安全地保存大量宝贵血小板资源,解决目前血小板供不应求的局面。     

两种冷冻载体对人胚胎玻璃化冷冻效果的影响

目的探讨不同载体对人早期胚胎玻璃化冷冻复苏的效果。方法采用半封闭式载体冷冻复苏胚胎的患者共265个周期,采用封闭式载体冷冻复苏胚胎的患者共136个周期,均采用玻璃化冷冻办法冷冻体外精-胚胎移植第3日的可利用胚胎,观察胚胎复苏和临床妊娠情况。结果半封闭式麦管冷冻复苏胚胎的患者移植周期258个,取消周期7个;复苏率、临床妊娠率和种植率分别为96．88％、48．44％和32．20％。封闭式麦管冷冻复苏胚胎的患者移植周期132个,取消周期4个;复苏率、临床妊娠率和种植率分别为95．31％、47．72％和32．28％。、两组患者的平均年龄、不孕年限、不孕类型、不孕原因、体外受精或卵胞质内单精子注射（IVF／ICSI）构成比以及胚胎复苏率、移植胚胎数、临床妊娠率和种植率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 封闭式冷冻载体能获得与半封闭式载体同样的冷冻效果,同时能避免胚胎受病原微生物的交叉污染,是冷冻人早期胚胎的理想方法。     

Experimental Study on the Cryopreservation of LLC-PK1 Epithelial Cells with Hypoxic UW Solution

The effects of oxygen partial pressure on cryopreservation of the cells with organ preservation solution were explored. Hypoxic UW solution was made by purging the UW solution with argon. The pig proximal tubule epithelial cells （LLC-PK1 cells） were cryopreserved in hypoxic UW solution （Ar-UW group） or standard UW solution （UW group） at 4℃ for 48 h. Trypan blue staining and LDH detection were performed to evaluate the injury of the cells. The results showed that the oxygen partial pressure in Ar-UW group was significantly declined from 242±6 mmHg to 83±10 mmHg. After cryopreservation at 4℃ for 48 h, LDH leakage rate and Trypan blue-stained rate in Ar-UW group were （11.3±3.4）% and （10.5±4.7）%, respectively, which were significantly lower than in UW group [（49.5±6.9）% and （47.6±9.3）% respectively, both P〈0.01]. It was concluded that lower oxygen partial pressure of UW solution was more beneficial to the cryopreservation of LLC.     

EDS-40玻璃化冻存小鼠卵母细胞的研究

目的设计研究玻璃化液EDS一40对冻贮小鼠卵母细胞的效果。方法①按随机分组原则，分为实验组和对照组，实验组（a）采用自行设计的EDS一40玻璃化液进行玻璃化冷冻（其配方为：40％乙二醇＋18％葡聚糖），对照组（b）采用国际上已证实效果较好的EFS-40J~璃化溶液进行玻璃化冷冻，对照组（c）采用以PROH为基础的程序冷冻液进行程序冷冻。首先对EDS一40和EFS-40玻璃化溶液，行玻璃化测试；再随机选用小鼠卵母细胞，在室温25℃下分别加入EDS-40和EFS．40玻璃化溶液，玻璃化后装管并迅速投入液氮中。对照组（c）置于程序冷冻仪中进行程序化冷冻。各组均冻存2mo-3mo后，在25℃的水浴中复温后，用培养液反复洗涤后移入培养孔板培养，观察卵母细胞的成活率。将成活的卵母细胞行体外受精，观察其受精率。结果①两种玻璃化溶液能达到玻璃化效果；②EDS一40、EFS一40及对照组冷冻复温后的存活率依次为：79．34％、67．94％、56．34％；⑤EDS一40、EFS-40及对照组冻卵的受精率分别：79．17％、66．29％、51．25％。结论①EDS一40可以用来玻璃化冷冻小鼠卵母细胞；②EDS一40较EFS一40玻璃化溶液冻存小鼠卵母细胞效果更好；③玻璃化技术比传统冷冻法效果更好。     

胎儿卵巢组织培养与冷冻保存

对人胎儿卵巢的组织培养、冷冻保存后再复苏培养,以观察胎儿卵巢培养前后的形态学变化、培养时雌激素产生的能力以及冷冻保存对胎儿卵巢形态发育及内分泌功能的影响。结果表明:在体外培养条件下,胎儿卵巢的卵泡不仅可以维持培养前的良好形态,而且能够进一步发育成熟;培养时具有雌二醇分泌能力。冷冻保存对胎儿卵巢的卵泡发育和雌二醇分泌功能没有明显影响。提示:将中期引产胎儿卵巢冻存起来,建立“胎儿卵巢库”,可解决临床卵巢移植的供需矛盾。     

冷冻保存软骨移植的实验研究

本实验采用低温冷冻异体兔胎软骨移植，实验组和新鲜软骨移植对照组。每组各移植软骨１２０块，于植入后１５、３０、６０、９０、１２０ｄ取出软骨标本，进行肉眼观察，光镜和电镜检查，免疫组化检查，结果冻存软骨无吸收和再生，亦无坏死，排异反应轻，对照组有不同程度的增长，部分出现钙化，边缘灶性坏死，本实验对软骨的冻存在临床应用上有着重要的意义。