MiR-34b和miR-155在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:检测肺癌组织及癌旁正常组织中miR-34b和miR-155的表达水平及其与肺癌临床病理特征之间的关系。方法:收集50例非小细胞肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常肺组织标本,运用 Real-time PCR检测 miR-34b和miR-155在肺癌组织和癌旁正常肺组织中的表达情况,分析其表达与肺癌临床病理特征之间的关系。结果:Real-time PCR 检测显示在50例非小细胞肺癌组织中 miR-34b的表达显著低于癌旁正常肺组织(P=0.019),而miR-155的表达显著高于癌旁正常肺组织(P=0.000)。MiR-34b和miR-155的表达与淋巴结转移情况显著相关（P均＜0.05,miR-34b呈负相关,miR-155呈正相关）;与性别、年龄、病理类型及肿瘤分化程度无明显相关;miR-34b的表达与临床病理分期无显著相关,而miR-155表达与临床病理分期显著相关。结论:MiR-34b和miR-155的异常表达与非小细胞肺癌的发生发展相关,其可能成为肺癌的筛查、诊断及治疗的肿瘤标志物。     

miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨miR-19a和miR-19b在骨肉瘤组织及配对瘤旁组织中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法：收集32对骨肉瘤和配对的瘤旁组织,运用实时荧光定量PCR（qPCR）检测骨肉瘤组织及其瘤旁组织中miR-19a和miR-19b的表达,分析其与骨肉瘤临床病理特征的相关性及其临床意义。结果：qPCR结果显示骨肉瘤组织中miR-19a和miR-19b的平均表达量较瘤旁组织中均明显上调（P均 < 0.05）。二者的表达水平呈正相关（r=0.685,P=0.000）。miR-19a和miR-19b的表达与骨肉瘤病理分级之间存在正相关（r=0.478,P=0.027）;miR-19a的表达与临床分期呈正相关（r=0.365,P=0.031）且与预后相关。Cox回归多因素分析发现miR-19a可作为骨肉瘤患者预后的影响因子（P=0.037）。结论：miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中表达上调,在骨肉瘤的发生发展中可能发挥重要的作用,其中miR-19a可能作为骨肉瘤独立的预后标志物。     

miR-302b在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨miR-302b在人非小细胞肺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法:采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测65例非小细胞肺癌组织和52例癌旁组织miR-302b的表达,分析其与临床病理特征之间的关系。结果:miR-302b在非小细胞肺癌组织中的表达明显低于癌旁组织（P<0.05）。与患者淋巴转移以及分化程度明显相关（P<0.05）。结论:miR-302b在非小细胞肺癌中低表达,提示其可能发挥抑癌基因的功能。     

miR-363-3p和miR-5100在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨小分子RNA(microRNA)miR-363-3p 和miR-5100在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义.方法:利用荧光定量PCR的方法,检测肿瘤组织、癌旁组织及远离肿瘤的正常组织中致癌基因Myc的mRNA 和miR-363-3p、miR-5100的表达,然后分析miR-363-3p 和miR-5100与临床病理特征之间的相关性.结果:Myc在肿瘤组织中表达明显升高;miR-363-3p在肺癌组织中的表达明显低于正常组织(P<0.001),而在癌旁组织中的表达却远远高于正常组织(P<0.05);miR-5100在肺癌组织中的表达显著地高于正常组织(P<0.001),并且癌旁组织中的表达也高于正常组织(P<0.05).临床相关性分析显示,miR-363-3p的表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.001),miR-5100的表达与临床分期也呈正相关性(P<0.05).结论:miR-363-3p 和miR-5100可能参与了非小细胞肺癌早期的发生和转移,并可能作为早期诊断和预后的分子标志物.     

miR-224、miR-135a在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理的关系

目的：检测miR-224与miR-135a两种microRNA（miRNA）在非小细胞肺癌中的表达,探讨其与肺癌临床病理的关系。方法：采用Real time RT-PCR法对31例非小细胞肺癌组织及癌旁正常肺组织的miR-224与miR-135a进行定量分析,结果由2（-△△CT）处理,并分析与临床病理资料的关系。结果：相对内参U6,miR-224在非小细胞肺癌组织中表达量为4.2761±0.8731,在正常肺组织中的表达量为0.8967±0.2154,两者相比P〈0.05,miR-135a在非小细胞肺癌组织中表达量为0.3551±0.0985,在正常肺组织中的表达量为1.7443±0.3125,两者相比P〈0.05。miR-224与miR-135a的表达与非小细胞肺癌的临床分期、病理分级密切相关。结论：miR-224高表达及miR-135a低表达与非小细胞肺癌的临床分期、病理分级密切相关,miR-224有可能作为非小细胞肺癌的重要肿瘤标志物。     

肝细胞癌组织中lncRNA H19、miR-200a表达变化与临床预后的相关性分析

目的:观察肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中lncRNA H19、miR-200a表达情况,并探讨其与HCC患者临床病理特征及预后的关系。方法:选取57例HCC患者经手术切取的HCC组织和相应癌旁组织（≥癌灶边缘5 cm）,以及60例因肝血管瘤行手术切除的周围正常肝组织。采用qRT-PCR法检测组织中lncRNA H19和miR-200a表达水平;分析其与HCC患者临床病理特征及5年总生存率（overall survival,OS）的关系。结果:HCC组织中lncRNA H19表达水平明显高于癌旁组织和正常肝组织（P＜0.05）;HCC组织中miR-200a表达水平显著低于癌旁组织和正常肝组织（P＜0.05）。HCC组织中lncRNA H19、miR-200a表达与HCC患者分化程度、TNM分期、AFP值及是否侵袭转移有关（P＜0.05）。HCC组织中lncRNA H19表达与miR-200a表达呈负相关（P＜0.05）。HCC患者lncRNA H19低表达5年OS明显高于高表达（P＜0.05）;HCC患者miR-200a高表达5年OS显著高于低表达（P＜0.05）。分化程度、TNM分期、lncRNA H19及miR-200a表达均是影响HCC患者预后的独立危险因素（P均＜0.05）。结论:HCC组织中lncRNA H19表达上调、miR-200a表达下调,二者异常表达与病情程度及5年OS关系密切,可能相互作用参与HCC发展。     

miR-141和lncRNA-H19在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:检测宫颈癌组织中微小RNA-141（miR-141）与长链非编码RNA-H19（lncRNA-H19）表达情况，并探究其临床意义。方法:选取2013年9月至2014年12月本院确诊收治的宫颈癌患者62例，取宫颈癌组织及癌旁组织；取血清检测肿瘤指标鳞状细胞癌抗原（SCCA）。利用实时定量PCR（qRT-PCR）法检测宫颈癌及癌旁组织中miR-141、lncRNA-H19表达情况，采用全自动化学发光免疫分析仪检测患者血清SCCA水平。结果:与癌旁组织相比，宫颈癌组织中miR-141和lncRNA-H19表达水平显著升高；宫颈癌组织中miR-141表达与患者临床分期、血清SCCA水平显著相关；宫颈癌组织中lncRNA-H19表达与患者有无淋巴结转移、血清SCCA水平显著相关；Pearson分析发现，宫颈癌组织中miR-141和lncRNA-H19表达水平显著正相关；miR-141低表达患者3年总生存率为37.50%，显著高于miR-141高表达者的8.00%；lncRNA-H19低表达患者3年总生存率为41.67%，显著高于lncRNA-H19高表达者的13.16%。结论:miR-141和lncRNA-H19在宫颈癌组织中的表达显著升高，与宫颈癌疾病严重程度有关，可能作为判断宫颈癌患者预后的生物指标。     

miR-520a在结肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨miR-520a在结肠腺瘤性息肉、结肠癌及癌旁组织中的表达变化,并分析miR-520a在结肠癌中的表达与临床病理特征的关系。方法:采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测30例结肠腺瘤组织和55例结肠癌及其癌旁组织中miR-520a的表达,分析结肠癌中miR-520a的表达与临床病理特征之间的关系。结果:miR-520a在结肠癌组织中的表达明显低于结肠腺瘤,而结肠腺瘤中的表达明显低于癌旁组织（P＜0.05）。在结肠癌中,miR-520a的表达与肿瘤分化程度、淋巴转移、TNM分期、远处转移均显著相关（P＜0.05）。结论:miR-520a在结肠癌中低表达,提示其可能发挥抑癌基因的功能。     

肺癌miR-146a表达及其对细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)在肺癌组织和细胞中的表达和甲基化状态,及其对A549细胞增殖、侵袭、迁移的影响及可能机制。方法收集2018年1月至2019年4月在我院行根治性手术的非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织,实时荧光定量PCR(QPCR)和甲基化特异性PCR(MSP)检测miR-146a的表达水平和甲基化状态,并分析甲基化状态与肺癌临床病理特征的关系。采用5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-AZA-2’-dC)处理A549细胞(处理组),MTT、Transwell实验和划痕实验检测处理组细胞增殖、侵袭和迁移活性。采用Western blotting检测Notch1和发状分裂相关增强子1(Hes-1)蛋白表达。结果肺癌组织和A549细胞中miR-146a表达量分别为0.63±0.28、0.85±0.11,均低于癌旁正常组织和BEAS-2B细胞(P<0.05)。MSP检测显示肺癌组织miR-146a甲基化率为62.5%(50/80),高于癌旁组织(P<0.05);miR-146a甲基化状态与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。处理组细胞miR-146a表达水平为2.15±0.48,高于空白对照组(P<0.05);处理组细胞增殖、侵袭和迁移活性均低于空白对照组(P<0.05)。处理组Notch1蛋白和Hes-1蛋白表达水平分别为0.24±0.05和0.22±0.06,均低于空白对照组(P<0.05)。结论启动子异常甲基化导致在肺癌组织和细胞中miR-146a表达量降低,可能通过减弱对Notch1/Hes-1信号通路的抑制作用,促进肺癌细胞增殖、侵袭和转移,miR-146a有望成为肺癌新的生物治疗靶点。     

非小细胞肺癌血清miR-191的表达及意义

目的:探讨血清miR-191对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的诊断价值及临床特征。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测65例非小细胞肺癌患者血清和65例健康人血清中miR-191的表达量,分析血清miR-191的表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系,通过绘制ROC曲线分析其诊断非小细胞肺癌的价值。结果:非小细胞肺癌患者血清miR-191相对表达水平高于正常对照组(P＜0.05),其表达与临床分期、病理类型及淋巴结转移显著相关（P＜0.05）,而与性别、年龄及吸烟史无相关性(P＞0.05);miR-191的ROC曲线下面积AUC=0.951,其诊断非小细胞肺癌的灵敏度为87.3%,特异度为92.3%。结论:血清miR-191测定的诊断性能较高,有望作为诊断非小细胞肺癌的潜在分子标志物。     

Expression levels of microRNA-145 and microRNA-10b are associated with metastasis in non-small cell lung cancer

Although metastasis remains the overwhelming cause of death for patients with non-small cell lung cancer (NSCLC), the underlying mechanisms of metastasis remain unknown. Accumulating evidence suggests that microRNAs (miRNAs) are key players in the regulation of tumor cell invasion and metastasis. Expression of miR-9, miR-10b, miR-145, and miR-155, 4 miRNAs previously shown to play roles in metastasis in other tumor types, was compared in lymph node (LN)-positive NSCLC versus LN-negative NSCLC. Expression of miR-145 was significantly lower in LN-positive NSCLC (P < 0.05), while expression of miR-10b was significantly higher (P < 0.05). Expression of both miR-145 and miR-10b was correlated with lymph node metastasis in NSCLC (both Ps < 0.001). In addition, miR-10b facilitated the migration and invasion of lung cancer cell line A549, while miR-145 suppressed the migration and invasion capacity of A549 in vitro. These results suggest that miR-10b and miR-145 may act as an oncogene or tumor suppressor gene, respectively, in NSCLC metastasis.     

miR-21和PDCD4在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨微小核糖核酸21（miR-21）和程序性细胞死亡因子4（programmed cell death 4,PDCD4）在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法:应用Real-time PCR法检测61例NSCLC组织及61例对应癌旁肺组织中miR-21、PDCD4的表达,分析二者表达的相关性及其与临床病理特征和预后的关系。结果:同癌旁正常组织相比,NSCLC组织中miR-21 mRNA表达明显上调（88.52%,P=0.000）,PDCD4 mRNA表达明显下调（83.61%,P=0.000）。两者表达呈负相关（r＝0．044,P＜0.05）。中晚期（Ⅲ-Ⅳ期）肺癌组织中miR-21 mRNA表达高于早期（Ⅰ-Ⅱ期）（P＜0.05）。PDCD4 mRNA 表达与NSCLC的分化程度、临床分期及淋巴转移相关（P＜0.05）。Kaplan-Meier 生存分析显示miR-21高表达患者较低表达患者总生存期明显缩短（P=0.007）,相反,PDCD4高表达的患者较低表达患者具有较长的总生存期(P=0.003)。     

miR-138-5p在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨微小RNA-138-5p（miR-138-5p）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测102例NSCLC组织和98例癌旁组织中miRNA-138-5p表达， 分析miRNA-138-5p表达与NSCLC临床病理特征（性别、年龄、TNM分期、肿瘤直径和淋巴结转移）的关系；Kaplan-Miere法绘制生存曲线，差异行Log-rank检验；Cox回归模型分析影响总生存（OS）的因素。结果 QPCR检测结果显示，NSCLC组织中miR-138-5p表达水平为0.42±0.11，显著低于癌旁组织的1.03±0.28，差异具有统计学意义 （P＜0.05）。miR-138-5p表达与TNM分期、肿瘤直径及淋巴结转移均有关（P＜0.05）。miR-138-5p高表达者的中位OS＞36个月，显著高于低表达者的26个月，差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox单因素分析显示除miR-138-5p表达外，淋巴结转移、肿瘤直径和TNM分期也与OS有关（P＜0.05）。结论 miR-138-5p在NSCLC中表达下调，其表达与NSCLC发生发展、预后有关， miR-138-5p可作为NSCLC诊断和预后预测新的靶点。     

肺特异性X蛋白角蛋白19及癌胚抗原基因在非小细胞肺癌淋巴结微转移中的比较

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA、角蛋白19(CK19)mRNA和癌胚抗原(CEA)mRNA的表达及与NSCLC淋巴结转移和分期的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测56例NSCLC患者的肺癌组织和103枚区域性淋巴结的LUNX mRNA、CK19 mRNA和CEA mRNA的表达情况.对所有淋巴结做常规病理切片并行HE染色,观察转移情况.结果 (1)LUNX mRNA、CK19 mRNA和CEA mRNA在肺癌患者淋巴结中的表达明显高于肺良性病变者(P＜0.05).(2)与常规病理学方法检查淋巴结相比,RT-PCR技术的敏感性显著增高(P＜0.05).(3)LUNX mRNA、CK19 mRNA在淋巴结中的阳性表达率与肺癌病理类型之间无明显相关性(P＞0.05),但CEA mRNA在肺腺癌组织中的表达明显增高(P＜0.05).(4)区域淋巴结中,LUNX mRNA表达的阳性率随TNM分期的升高而增加(P＜0.05).结论 LUNX mRNA与CK19mRNA均可作为RT-PCR检测肺癌患者区域性淋巴结微转移的分子标志物;在特异性和敏感性上,LUNX mRNA优于CK19 mRNA.采用RT-PCR方法,有利于早期诊断肺癌转移.     

非小细胞肺癌血浆miR-223、miR-93和miR-218的表达及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者血浆miR-223、miR-93和miR-218水平,分析三者与NSCLC患者临床病理学特征的关系。方法 收集本院收治85例NSCLC患者未经治疗前的血浆标本（NSCLC组）,采用实时定量RT-PCR（qRT-PCR）法检测血浆中miR-223、miR-93和miR-218水平,收集NSCLC患者的临床病理学参数,比较三者不同水平的临床病理参数并分析三者间的关系,采用受试者工作特征曲线（ROC）评价血浆miR 223、miR 93和miR 218水平检测在NSCLC诊断中的临床价值。同时选取同期的90例健康体检者的血浆标本作对照（对照组）。结果 NSCLC组的血浆miR-223和miR-93水平高于对照组,miR-218水平低于对照组,差异均有统计学意义（P均＜0.05）;miR-223水平与TNM分期、肿瘤大小有关,miR-93水平与组织学类型、淋巴结转移有关,miR-218水平与肿瘤大小、分化程度有关,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）;NSCLC患者血浆中miR-223水平与miR-93呈正相关（r=0.411）,miR-223、miR-93分别与miR-218呈负相关（r=-0.361,r=-0.451）,差异均有统计学意义（P＜0.05）;血浆miR-223、miR-93和miR-218诊断NSCLC的AUC、灵敏度和特异度分别为0.926、95.2％和87.1％,0.912、88.4％和92.5％,0.941、92.7％和84.4％,均高于CEA的0.774、75.1％和66.2％,且miR-223、miR-93和miR-218联合诊断的效能高于单独检测。结论 NSCLC患者血浆中miR-223和miR-93呈高表达,miR-218呈低表达,与临床病理学参数有关,且在NSCLC诊断中有一定的价值,可用于辅助NSCLC的诊断和病情评估。     

miR-601靶向调控MMP-17抑制非小细胞肺癌的迁移和侵袭CSCD

目的探讨miR-601对非小细胞肺癌(NSCLC)迁移和侵袭能力的影响并探讨其可能的作用机制。方法RT-qPCR检测NSCLC组织中miR-601的表达,并分析表达水平与癌细胞侵袭和淋巴结转移的相关性。将miR-601 mimics瞬时转染A549细胞或H1299细胞,Transwell实验检测其对两种细胞迁移和侵袭能力的影响。生物信息学预测miR-601相关靶基因,采用双荧光素酶实验进行靶基因验证。检测miR-601的靶基因对A549细胞或H1299细胞迁移及侵袭能力的影响。结果miR-601在NSCLC组织中表达明显降低(P<0.001),且降低水平与癌细胞的浸润(P<0.007)及淋巴结转移(P<0.011)密切相关。瞬时转染miR-601 mimics能明显抑制A549细胞或H1299细胞的迁移及侵袭能力。生物信息学及荧光素酶报告实验提示MMP-17是miR-601的靶基因。MMP-17能促进A549细胞或H1299细胞的迁移和侵袭,但其促进迁移侵袭的能力可被miR-601抑制。结论miR-601通过靶向调控MMP-17而抑制非小细胞肺癌的迁移和侵袭。