Th17/Treg细胞在支气管哮喘患者外周血中的表达

目的:探讨Th17/调节性T细胞(Treg细胞)在支气管哮喘患者外周血中的表达及意义。方法:收集30例正常对照组,30例确诊支气管哮喘患者(哮喘组)在急性发作期及缓解期外周血,分别检测Th17/Treg细胞的表达情况。结果:支气管哮喘患者急性发作期间Th17较正常对照组明显升高,而Treg细胞比例明显下降,支气管哮喘缓解期上述异常指标均趋于正常,但比正常对照组仍有明显改变(P<0.05)。Th17、Th17/Treg与支气管哮喘患者ACQ评分呈正相关(P<0.05),Treg与ACQ评分呈负相关(P<0.05),但Th17和Treg之间无明显相关性(P>0.05)。结论:在支气管哮喘患者体内的存在Th17及Treg细胞的平衡失调,可能参与疾病的进展,成为免疫调节治疗的靶点。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对肥胖型哮喘小鼠气道 炎症和Treg/Th17免疫平衡的影响

目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对肥胖型哮喘小鼠调节性T淋巴细胞/辅助性T淋巴细胞17（Treg/Th17）免疫失衡的调节作用,为EGCG治疗肥胖型哮喘提供依据。方法：40只C57BL/6J小鼠分为正常对照组（采用正常饲料喂养）、肥胖组（采用高脂饲料喂养）、肥胖型哮喘组[采用高脂饲料喂养的同时给予卵白蛋白（OVA）致敏和激发,制备肥胖型哮喘模型],EGCG干预组（在OVA激发前1 h给予20 mg·kg^-1EGCG腹腔注射）和地塞米松干预组（在OVA激发前1 h给予2 mg·kg^-1地塞米松腹腔注射）,每组8只。采用无创肺功能仪测定各组小鼠的增强呼气间歇（Penh）值;HE染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现,HE染色切片半定量方法进行小鼠气道炎症评分; ELISA法检测各组小鼠血清中脂联素、瘦素和支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素17A （IL-17A）水平;流式细胞术检测各组小鼠脾组织中Th17和Treg百分比。结果：肥胖组小鼠体质量高于正常对照组（P<0.05）,为正常对照组小鼠平均体质量的1.67倍。与正常对照组比较,肥胖型哮喘组小鼠Penh值和气道炎症评分均升高（P<0.05）,血清中瘦素水平升高（P<0.05）,BALF中IL-17A水平升高（P<0.05）,IL-10水平降低（P<0.05）,脾组织中Th17百分比升高（P<0.05）,Treg百分比降低（P<0.05）。与肥胖型哮喘组比较,EGCG干预组小鼠Penh值和气道炎症评分均降低（P<0.05）,血清中瘦素水平降低（P<0.05）,BALF中IL-17A水平降低（P<0.05）,BALF中IL-10水平升高（P<0.05）,脾组织中Th17百分比降低（P<0.05）,脾组织中Treg百分比升高（P<0.05）。结论：在肥胖型哮喘小鼠中存在Treg/Th17免疫失衡,EGCG能够抑制肥胖型哮喘小鼠的气道炎症及气道高反应性,能够改善Treg/Th17免疫失衡。     

调节性T细胞/Th 17在支气管哮喘小鼠气道炎症过程中的变化

目的 通过观察支气管哮喘小鼠模型T淋巴细胞亚群调节性细胞(Treg)、Th17的变化,探讨淋巴细胞亚群Treg和Th17在哮喘发病中的作用.方法 采用卵清蛋白致敏方法 建立支气管哮喘小鼠模型,Balb/c小鼠16只随机分为正常对照组和哮喘组各8只.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测小鼠肺泡灌-洗液(BALF)、血清中白细胞介素-10(1L-10)、白细胞介素17(IL-17)水平;HE染色评价各组小鼠气道炎症程度;采用流式细胞仪检测各组Treg、Th17细胞占CD4+细胞百分率情况.结果 哮喘组淋巴细胞亚群CD_4+~CD_(25)+~Foxp_3~+细胞占CD_4~+细胞百分率显著低于正常对照组(P<0.01);CD_4+IL-17~+细胞占CD_4~+细胞百分率显著高于正常对照组(P<0.01).CD_4~+CD_(25)~+Foxp_3~+细胞/CD_4~+IL-17细胞比值与嗜酸粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数呈负相关(r=-0.894,-0.957,-0.886;P均<0.01).结论 Treg/Th17在小鼠哮喘模型中存在失衡表达,提示Treg/Th17失衡参与了哮喘的发病过程,是对哮喘发病免疫机制的重要补充.     

血红素加氧酶-1对哮喘小鼠Treg细胞和Th17细胞平衡的影响

目的：探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对哮喘小鼠Treg细胞和Th17细胞平衡的影响,阐述HO-1的免疫调节作用。方法60只雌性BALB/c小鼠按数字表法随机分为正常组、哮喘组、高铁氯化血红素(Hemin)组、锡-原卟啉(SnPP)组、Hemin+siRNA scramble组和Hemin+siRNA HO-1组,每组10只。通过注射和雾化吸入鸡卵蛋白(OVA)制备哮喘模型,正常组以生理盐水代替致敏液。Hemin组和SnPP组分别腹腔注射Hemin或SnPP 75μmol/kg,Hemin+siRNA scramble组和Hemin+siRNA HO-1组分别在腹腔注射Hemin前转染pSicoR-GFP-siRNA scramble或pSicoR-GFP-siRNA HO-1。末次激发后24 h内,Western blot和比色法分别检测各组小鼠肺部组织中HO-1蛋白表达和HO-1活性;HE染色观察肺部组织病理变化;流式细胞术检测外周血中Treg细胞、Th17细胞占CD4+T细胞的百分比,ELISA法检测血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-10、IL-17的水平。结果与正常组相比,哮喘组小鼠肺部HO-1表达和活性有所增加,炎性反应明显,Treg/CD4+T细胞的百分比和IL-10水平显著降低,Th17/CD4+T细胞的百分比和IL-17水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与哮喘组相比,Hemin组明显增加HO-1表达和活性,减少肺部组织炎性反应,增加Treg/CD4+T细胞的百分比和IL-10水平,降低Th17/CD4+T细胞的百分比和IL-17水平,而SnPP组没有明显变化。与Hemin组相比,Hemin+siRNA HOv1组肺部组织中HO-1表达和活性降低,炎性反应增加,Treg/CD4+T细胞的百分比和IL-10水平降低,Th17/CD4+T细胞的百分比和IL-17水平增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论增加HO-1的表达和活性能够明显改善哮喘小鼠炎性反应,增加Treg细胞的数目并促进IL-10的产生,同时抑制Th17细胞的表达及IL-17的产生。     

活体供肾移植后外周血Treg、Th17及Th17/Treg比值的变化研究

目的 检测活体肾移植受者外周血调节性T细胞(Treg)和辅助性T淋巴细胞17(Th17)的比例,探寻肾移植术后外周血Treg细胞、Th17细胞及Th17/Treg比值的动态变化规律.方法 采用前瞻性研究方法,用流式细胞术分别检测活体肾移植受者术前和术后1、2、3周及术后1、2、3、4、5、6个月的外周血Treg细胞、Th17细胞比例.结果 Treg细胞比例在术后第2周明显下降(P＜0.05),术后2个月降至最低,较术前相比下降68.6％ (P ＜0.05),术后6个月恢复至术前水平.Th17细胞比例在术后1周至3周明显升高(P＜0.05),术后1个月恢复至术前水平.移植后第1周Th 17/Treg细胞比值明显升高(P＜0.05),持续至术后3个月,术后6个月恢复至术前水平.术后使用环孢素的受者Treg细胞比例在术后2个月最低,下降67.1％ (P ＜0.05);术后使用他克莫司的受者Treg细胞比例在术后3周最低,下降80.8％(P ＜0.05),均在术后3个月开始缓慢上升.CD3+T细胞比例在术后1周降低(P＜0.05),术后3周恢复至术前水平.结论 活体肾移植术后免疫细胞处于动态变化.术后2周到5个月Treg细胞比例均明显降低,其中以术后2个月最低.Th17/Treg细胞比值在术后1周到3个月均明显升高.他克莫司和环孢素对肾移植术后Treg细胞都有抑制作用.     

三氧化二砷对支气管哮喘小鼠Th17细胞的影响

目的 观察三氧化二砷（ATO）对支气管哮喘小鼠Th 17细胞和IL-17的影响.方法 30只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和ATO组.末次激发24小时后,测定气道肺阻力,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,细胞分类计数,流式细胞仪检测脾脏Th17细胞阳性率.ATO干预20小时后,检测培养上清液及BALF中IL-17及IL-4水平.结果 ①哮喘组BALF中各类炎症细胞均明显高于对照组（P＜0.05）,而ATO组明显低于哮喘组（P＜0.01）.②哮喘组肺阻力、脾脏CD4＋T细胞总数、Th17细胞阳性率、BALF中IL-17及IL-4均明显高于对照组,而ATO组上述指标均明显低于哮喘组（P＜0.05）.③ATO干预组培养上清液中IL-17、IL-4含量显著低于原液组（P＜0.01）.④Th17细胞阳性率、IL-17含量均与中性粒细胞数量呈显著正相关（P＜0.05）.结论 ATO能够抑制Th17细胞、IL-17的表达,减轻哮喘小鼠气道炎症及高反应性.     

糖皮质激素对支气管哮喘小鼠Th17细胞的调节作用

目的 探讨地塞米松对支气管哮喘小鼠辅助性T细胞(Th)17表达的影响.方法 36只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和地塞米松组,每组12只.建立哮喘小鼠模型;采用肺功能仪测定气道呼气阻力(Re);HE染色观察肺组织炎症改变;收集BALF进行细胞计数;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺匀浆中IL-17和IL-23水平;流式细胞术检测脾脏单个核细胞中Th17细胞比例.结果 地塞米松组Re及气道炎症较哮喘组明显减轻;哮喘组IL-17和IL-23水平明显高于对照组,地塞米松组明显低于哮喘组;哮喘组Th17细胞显著高于对照组,地塞米松组则明显低于哮喘组.结论 地塞米松可下调哮喘小鼠中Th17细胞数量及相关细胞因子IL-17和IL-23水平,减轻哮喘小鼠的气道炎症.     

胃癌患者Th17/Treg细胞失衡的研究

目的 检测Th17和Treg细胞在胃癌患者外周血中的分布,探讨Th17/Treg细胞免疫平衡与胃癌发生发展的关系。方法 选取2010年7月—2011年9月河北医科大学第四医院住院的胃癌患者45例作为病例组,另选取同期本院健康体检者20例作为对照组。取受试者外周血5 ml,分离单个核细胞,采用流式细胞分析技术检测CD+4CD+25Foxp3+和CD+4IL-17+细胞的表达,以产生IL-17的CD+4T为Th17细胞,以CD+4CD+25Foxp3+细胞为Treg细胞,检测Th17和Treg细胞的数量和比例。结果 流式细胞术检测结果显示,病例组外周血Th17细胞比例、Treg细胞比例、Th17/Treg均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组中,外周血Th17细胞比例与Treg细胞比例呈正相关（r=0.64,P=0.003）;病例组中,外周血Th17细胞比例与Treg细胞比例无直线相关性（r=0.12,P=0.490）。多元线性回归分析结果显示,Th17细胞比例升高与TNM分期（P=0.002）、淋巴结转移（P=0.017）有关;Treg细胞比例升高与TNM分期（P=0.034）、分化程度（P=0.015）有关;Th17/Treg升高与淋巴结转移有关（P=0.036）。结论 胃癌患者Th17、Treg细胞比例及Th17/Treg明显增高,并与患者TNM分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度有关,提示胃癌患者存在Th17/Treg细胞免疫平衡失调,这种失调可能促进了胃癌的进展。     

代谢综合征与Th17/Treg细胞及其相关细胞因子研究概述

代谢综合征的发生是复杂的遗传与环境因素相互作用的结果。其发病机制尚未完全明确,近年研究发现适应性免疫及固有性免疫介导的炎症反应机制在代谢综合征的发生、发展中起一定的作用,不同亚群的淋巴细胞及其细胞因子参与代谢综合征组分的发生与发展,其中Th17细胞及调节性T细胞与代谢综合征的关系已受到关注,并取得了一定的研究成果,开辟了代谢综合征的免疫治疗这个全新的领域。     

68例支气管哮喘患者中Th17和Treg联合检测的临床意义

目的检测支气管哮喘患者外周血中Th17和Treg细胞比例的变化,探讨其在支气管哮喘发生、发展中的作用。方法收集2011年1～6月该院呼吸内科诊治的支气管哮喘患者68例,哮喘患者分为稳定期组(n=34)和发作期组(n=34),另取健康体检者20例(对照组)。用流式细胞仪检测Th17和Treg细胞的表达百分比。结果对照组、稳定期组和发作期组CD4+IL-17+Th17细胞的比例分别为(1.32±0.41)%、(5.64±1.23)%和(8.87±2.18)%,CD4+CD25+Treg细胞的比例分别为(3.47±1.33)%、(1.86±0.76)%和(0.81±0.52)%,Th17/Treg比值分别为(0.38±0.12)%、(3.03±0.94)%和(10.95±2.36)%。Th17细胞比例和Th17/Treg比值在稳定期组和发作期组均显著高于对照组(P<0.01),发作期组又高于稳定期组(P<0.01)。Treg细胞比例在稳定期组和发作期组均显著低于对照组(P<0.05),发作期组又高于稳定期组(P<0.01)。相关性分析显示,Th17细胞比例与Tregs细胞呈负相关(r=-0.437,P<0.05)。结论支气管哮喘患者中存在Th17细胞的升高和Treg细胞的降低,调控Th17/Treg细胞的失衡,可能成为支气管哮喘治疗的新思路。     

Coexistence of Th1/Th2 and Th17/Treg imbalances in patients with allergic asthma

Background  Recent recognition is that Th2 response is insufficient to fully explain the aetiology of asthma. Other CD4⁺ T cells subsets might play a role in asthma. We investigated the relative abundance and activities of Th1, Th2, Th17 and CD4⁺CD25⁺ Treg cells in patients with allergic asthma.

Methods  Twenty-two patients with mild asthma, 17 patients with moderate to severe asthma and 20 healthy donors were enrolled. All patients were allergic to house dust mites. Plasma total IgE, pulmonary function and Asthma Control Questionnaire were assessed. The proportions of peripheral blood Th1, Th2, Th17 and CD4⁺CD25⁺ Treg cells were determined by flow cytometry. The expression of cytokines in plasma and in the culture supernatant of peripheral blood mononuclear cells was determined by enzyme linked, immunosorbent assay.

Results  The frequency of blood Th2 cells and IL-4 levels in plasma and culture supernatant of peripheral blood mononuclear cells were increased in all patients with allergic asthma. The frequency of Th17 cells and the plasma and culture supernatant levels of IL-17 were increased, whereas the frequency of CD4⁺CD25⁺ Treg cells and plasma IL-10 levels were decreased in patients with moderate to severe asthma. Dermatophagoides pteronyssinus specific IgE levels were positively correlated with the percentage of blood Th2 cells and plasma IL-4 levels. Forced expiratory volume in the first second was negatively correlated with the frequency of Th17 cells and plasma IL-17 levels, and positively correlated with the frequency of Treg cells. However, mean Asthma Control Questionnaire scores were positively correlated with the frequency of Th17 cells and plasma IL-17 levels, and negatively correlated with the frequency of Treg cells.

Conclusions  Imbalances in Th1/Th2 and Th17/Treg were found in patients with allergic asthma. Furthermore, elevated Th17 cell responses, the absence of Tregs and an imbalance in Th17/Treg levels were associated with moderate to severe asthma. 

     

宫颈癌患者外周血及组织中Th17细胞、Treg细胞表达及Th17/Treg失衡的研究

目的 探讨宫颈癌患者外周血及组织中Th17细胞、Treg细胞表达及Th 17/Treg失衡的意义.方法 分别选取同期53例宫颈癌、25例CIN和25例子宫全切患者作为研究对象,采用流式细胞仪检测外周血和宫颈组织中Th17细胞、Treg细胞表达.结果 宫颈癌组、CIN组外周血中Th17细胞、Treg细胞表达及Th 17/Treg均显著高于对照组（P＜0.05）.外周血Th17细胞表达与FIGO分期呈正相关（P＜0.05）,Treg细胞表达与分化程度呈负相关（P＜0.05）.组织中Th 17/Treg与FIGO分期呈负相关（P＜0.05）.结论 宫颈癌患者外周血和组织中Th17细胞和Treg细胞表达均显著升高,Th17/Treg失衡在宫颈癌发生发展过程中起重要促进作用.     

Th17/Treg imbalance in malignant pleural effusion

Both T helper IL-17-producing cells (Th17 cells) and regulatory T cells (Tregs) have been found to be increased in malignant pleural effusion (MPE). However, the possible imbalance between Th17 cells and Tregs, as well as the association of Th17/Treg and Th1/Th2 cells in MPE remains to be elucidated. The objective of the present study was to investigate the distribution of Th17 cells in relation to Tregs, as well as Th1/Th2 balance in MPE. The number of Th17, Tregs, Th1, and Th2 cells in MPE and peripheral blood was determined by using flow cytometry. The relationship among the number of Th17, Tregs, Th1, and Th2 cells was explored. It was found that the number of Th17, Tregs, Th1, and Th2 cells was all increased in MPE as compared with the corresponding peripheral blood. The number of Th17 cells was correlated negatively with Tregs in MPE, but not in blood. Th17 cells and Th17/Treg ratio were positively, and Tregs were negatively, correlated with Th1 cells, but not with either Th2 cells or Th1/Th2 ratio in MPE. This study supports earlier data that both Th17 cells and Treg are present at higher frequencies in MPE than in the autologous blood. For the first time, we show that Th17/Treg imbalance exists in MPE.     

芳香烃受体通过介导Th17/Treg分化调控蟑螂过敏原诱导的哮喘

探讨芳香烃受体（AhR）是否能够通过介导肺内Th17/Treg细胞的分化来调控蟑螂过敏原（CRE）诱导的哮喘。方法 通过蟑螂过敏原激发和致敏,建立哮喘小鼠模型。部分哮喘小鼠给予 AhR 激动剂（TCDD）(10 μg/kg)或 AhR 拮抗剂（CH223191）（10 mg/kg）刺激。实验小鼠分为4组：对照组、哮喘组（CRE）、AhR激活组（CRE+TCDD）及AhR拮抗组（CRE+TCDD+CH223191）。通过RT-PCR检测哮喘小鼠肺内AhR及其下游Cyp1a1和Cyp1b1基因的表达;免疫组化染色观察哮喘小鼠肺内炎症变化;酶联免疫吸附试验（ELISA）监测炎症细胞因子的表达;采用流式细胞术检测肺及纵膈淋巴结中Treg的表达。结果 TCDD和CH223191能够调控哮喘小鼠肺内AhR及其下游基因Cyp1a1和Cyp1b1的表达（P<0.002）;AhR激活后肺内炎症细胞及粘液分泌较CRE组减少,促炎因子IL-4、IL-13和Th17A表达减少（P<0.001）,而抑炎因子IL-10、IL-22和TGFβ1表达增加（P<0.001）,而拮抗AhR后逆转了这一现象,且与CRE组无统计学差异（P>0.05）;AhR激活后肺及纵膈淋巴结中Treg细胞及其转录因子FOXP3表达明显增加（P<0.001）,Th17细胞转录因子RORγt基因表达水平明显降低（P<0.001）,而拮抗AhR后,与激活组相比,肺及纵膈淋巴结中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞及其转录因子FOXP3表达减少（P<0.001）,RORγt基因表达水平增加（P<0.001）;与CRE组相比,差别无统计学意义（P>0.05）。结论 AhR通过介导Th17/Treg细胞分化来调控哮喘小鼠肺部炎症。     

颅内动脉瘤破裂患者手术前后Th17/Treg的变化

目的 评价Th17/Treg细胞平衡在颅内动脉瘤破裂患者手术前后的变化与意义.方法 收集73例动脉瘤破裂患者,比较术前、术后24、72 h及1周的Th细胞及胞内细胞因子介素-17(IL-17)、Treg及细胞因子介素-10(IL-10)的百分含量;并以未破裂的62例动脉瘤患者及65例健康志愿者作为标本对照.分析动脉瘤破裂患者出院时NIHSS、ADL及住院天数与Th17/Treg细胞平衡、细胞因子的相关性.结果 破裂与未破裂动脉瘤患者的Th17及IL-17均显著高于健康志愿者,且破裂组显著高于未破裂组;而Treg及TGF-β1显著低于健康志愿者,且破裂组显著低于未破裂组(均为P<0.05).与术前比较,动脉瘤破裂患者术后24 h的Th17及IL-17含量均显著升高,而Treg及TGF-β1均显著较低(P<0.05);术后72 h,动脉瘤破裂患者Th17及IL-17含量较术后24 h均回落,而Treg及TGF-β1上升(P<0.05);术后1周,动脉瘤破裂患者Th17及IL-17含量较术后72 h均明显回落,Treg和TGF-β1较术后72 h显著上升(P<0.05).动脉瘤破裂患者Th17、IL-17与NIHSS、住院天数呈正相关性,而与ADL呈负相关性;Treg、TGF-β1与NIHSS、住院天数呈负相关性,而与ADL呈正相关性(P<0.05).结论 Th17过亢及Treg不足是颅内动脉瘤全身免疫炎症反应的重要特征,且与患者的预后密切相关,检测两者及其细胞因子有助于评估动脉瘤破裂患者的预后.     

姬松茸多糖对哮喘模型小鼠气道炎症和Th2类细胞因子水平的影响

[目的]探讨姬松茸多糖对哮喘模型小鼠气道炎症和Th2类细胞因子水平的影响.[方法]取雌性Balb/c小鼠40只,随机分为正常对照组、哮喘模型组和姬松茸多糖小、大剂量组,姬松茸多糖小、大剂量组分别灌胃给予姬松茸多糖200,400mg/kg.采用酶联免疫吸附法和蛋白质印迹法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4,IL-5,IL-13含量,并观察BALF中炎症细胞计数和肺组织病理学改变.[结果]与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数及IL-4,IL-5,IL-13水平均明显升高(P<0.05).与哮喘模型组比较,姬松茸多糖小、大剂量组BALF中炎症细胞计数及IL-4,IL-5,IL-13水平均明显降低(P<0.05).姬松茸多糖可明显减轻哮喘模型小鼠肺组织病理学改变.[结论]姬松茸多糖具有抗哮喘作用,其机制可能与下调Th2炎症细胞因子、减少炎症细胞浸润有关.