五倍子水提取物对Pg LPS诱导单核细胞分泌IL-6的抑制作用

目的：研究百倍子水提取物对牙龈卟啉菌(Pg)内毒素(LPS)介导的人单核细胞分泌IL-6水平的影响。方法：采用健康人外周血分离培养的单核细胞以25μg/ml牙龈卟啉菌内毒素作为刺激因子，用放射免疫分析法(RIA)测定细胞培养上清中IL-6的水平，观察5种浓度瓦倍子水提取物对单核细胞分泌炎性细胞因子的影响，结果：五倍子水提取物可显著抑制牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞分泌IL-6的水平，其作用在一定范围内呈浓度依赖性。结论：五倍子水提取物能够显著抑制牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞分泌IL-6的水平，提示五倍子具有一定的抗炎作用，有助于对牙周病的防治。     

五倍子水提取物抑制内毒素诱导人牙龈成纤维细胞分泌IL-6

目的：研究不同浓度五倍子水提取物对内毒素(LPS)介导的人牙龈成纤维细胞(HGF)分泌IL-6水平的影响。方法：采用MTT比色法和放射免疫分析法(RIA)，测定五倍子水提取物对HGF增殖的影响；及对以25μg／mL内毒素作为刺激因子，HGF培养上清中IL-6水平的影响。结果：五倍子水提取物可显著抑制内毒素诱导HGF分泌IL-6水平，其作用在一定范围内呈浓度依赖性，同时当其浓度＞50μg／mL时，可抑制HGF增殖。结论：五倍子水提取物能够抑制内毒素诱导人牙龈成纤维细胞分泌IL-6的水平，浓度过高时对HGF增殖有影响，提示一定浓度(＜50μg／mL)的五倍子水提取物具有抗炎作用，有助于对牙周病的防治。     

五倍子水提取物对牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞CD14表达改变的影响

目的 :研究五倍子水提取物对牙龈卟啉菌内毒素 (PgLPS)诱导人单核细胞CD1 4表达改变的影响。方法 :采用人外周血分离培养的单核细胞 ,以 2 5 μg/mL内毒素作为刺激因子 ,观察五倍子水提取物对单核细胞CD1 4表达改变的影响 ,用流式细胞仪 (FCM )测定细胞膜表面CD1 4的表达。结果 :五倍子水提取物作用后 ,牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞膜表面CD1 4的表达的阳性细胞率从 6 9.9%± 2 .3 %下降至 4 5 .9%± 3 .7%。结论 :五倍子水提取物能够减少牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞膜表面CD1 4的表达 ,提示五倍子具有一定的抗炎作用 ,有助于对牙周病的防治。     

牙周优势菌内毒素对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：研究牙周优势菌牙龈卟啉菌、中间普氏菌、具核梭杆菌的内毒素对人牙周膜细胞（PDL细胞）增殖和碱性磷酸酶活性（ALP）的影响。方法：采用MTT比色试验及酶动力学方法，测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果：内毒素在10μg/mL、100μg/mL高浓度时，可显著抑制PDL细胞增殖，而在0.01μg/mL、0.1μg/mL低浓度时，则促进PDL细胞增殖；在10μg/mL、100μg/mL可呈浓度依赖性方式抑制PDL细胞ALP活性。结论：内毒素对牙周膜细胞的抑制作用主要和其浓度有关，不同来源内毒素差异并不显著；内毒素可能通过影响PDL细胞功能而影响牙周组织的代谢和修复过程。     

五倍子对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的抑制作用

目的：观察五倍子水提取物对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响。方法：通过应用荧光分光光度计检测荧光底物的降解测定酶活力。结果：浓度0.5g/L-1g/L的五倍子可以抑制50%的底物降解，4g/L的五倍子可抑制超过90%的底物降解。结论：五倍子水提取物可有效抑制牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性，其抑制作用可能会降低细菌生长及其毒力，减缓牙菌斑的形成。     

五倍子水提取物对LPS抑制人牙龈成纤维细胞DNA合成和对细胞周期改变的影响

目的：研究五倍子水提取物对内毒素(LPS)引起人牙龈成纤维细胞(HGF)DNA合成和细胞周期改变的影响。方法：采用健康人正常牙龈组织原代培养的牙龈成纤维细胞，以25μg／mL LPS作为刺激因子，用流式细胞仪技术观察20μg／mL五倍子水提取物对LPS引起HGF细胞周期改变的影响。结果：LPS作用后，DNA合成前期细胞比例(G1期)明显上升，而DNA合成期细胞比例(S期)及细胞增殖指数下降，五倍子可改善此现象。结论：五倍子水提取物可显著改善LPS抑制HGF增殖，提示五倍子对牙龈组织具有保护作用，有助于牙周病的防治。     

五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响

目的：观察不同浓度及不同作用时间的五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响。方法：采用组织块法体外培养牙髓细胞，以不同浓度五倍子水提取物（1．25×10^3、2．5×10^3、5×10^3、10×10^3、20×10^3μg／L）和1×10^3μg／L内毒素作用于人牙髓细胞，用四唑盐比色试验（MTT法）检测细胞活性，采用单因素方差分析（完全随机设计）对实验数据进行统计学分析。结果：低浓度（1．25×10^3、2．5×10^3、5×10^3μg／L）五倍子水提取物能明显拮抗100μg／mL内毒素对细胞活性的抑制作用（P〈0．01），2．5×10^3μg／L五倍子水提取物拮抗1×10^3μg／L内毒素对细胞活性的抑制作用第3天开始明显增加，并呈时间依赖性。结论：低浓度五倍子水提取物能够拮抗内毒素对人牙髓细胞活性的抑制作用。     

五倍子水提取物对内毒素诱导人牙髓细胞分泌IL-6的影响

目的:观察不同浓度五倍子水提取物对内毒素诱导人牙髓细胞分泌IL-6的影响.方法:采用组织块法体外培养人牙髓细胞,以含不同浓度五倍子水提取物(1.25、2.5、5.10、20 μg/mL)、25μg/mL内毒素和20mL/L新生牛血清的DMEM培养基作用于第5代人牙髓细胞,用放射免疫法测定IL-6含量,采用单因素方差分析(完全随机设计)和t检验对实验数据进行统计学分析.结果:低浓度(1.25、2.5、5、10、20μg/mL)五倍子水提取物能明显抑制25μg/mL内毒素诱导人牙髓细胞分泌IL-6,这种抑制作用在一定范围内呈浓度依赖性.结论:低浓度五倍子水提取物具有抑制内毒素诱导人牙髓细胞分泌IL一6的作用.     

五倍子水提取物对LPS抑制PDLC的ALP活性的影响

目的：观察五倍子水提取物对LPS抑制牙周膜细胞(Periodontal ligament cell，PDLC)的ALP活性的影响。方法：本实验采用细胞培养技术和酶联免疫技术，对LPS抑制PDLC的ALP活性的影响进行观察。结果：100μg／mL LPS可显著抑制ALP活性。加入五倍子水提取物后，对LPS抑制ALP活性有拮抗作用，该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加，到10μg／mL时，达到峰值。另外，培养液中先加入不同浓度的五倍子水提取物溶液，培养24h后再加入LPS时(A组)，与LPS和五倍子水提取物溶液同时加入组(B组)相比，除对LPS抑制ALP活性有同样拮抗趋势外，A、B两组间比较，B组效果更佳。结论：五倍子水提取物对LPS抑制ALP活性具有保护作用。     

五倍子水提取物对内毒素损伤人牙髓细胞超微结构的影响

目的：观察五倍子水提取物对内毒素损伤人牙髓细胞超微结构的影响。方法：采用组织块法体外培养人牙髓细胞，以5μg／mL五倍子水提取物和100μg／mL内毒素分别或共同作用于第5代牙髓细胞，并设空白对照组，在透射电镜下观察细胞超微结构的改变。结果：100μg／mL内毒素对牙髓细胞超微结构有不同程度的损伤，加入5μg／mL五倍子水提取物后，牙髓细胞超微结构损伤明显减轻，细胞器结构基本恢复正常。结论：低浓度五倍子水提取物能够抑制内毒素对人牙髓细胞超微结构的损伤作用。     

五倍子对5种常见牙周细菌抑制作用的体外研究

目的：观察五倍子对5种常见牙周细菌的作用。方法：采用试管二倍稀释法，测定五倍子水提取物在体外厌氧环境对牙龈卟啉单胞菌，中间普氏菌，伴放线放线杆菌，具核俊杆菌和血链球菌的最小抑菌浓度（MIC），结果：五倍子对各实验细菌均有抑制作用。对牙周常见可疑致病菌牙龈卟啉单胞菌，伴放线放线杆菌，中间普错菌，具核梭杆菌的MIC值均为3．12％，对牙周有益菌血链球菌的MIC值则为12．5％，结论：浓度为3．12％的五倍子在不破坏牙周局部生态平衡的情况下可有效抑制牙周细菌的生长。     

五倍子水提取物对牙龈卟啉菌膜泡抑制牙周膜成纤维细胞生物活性的影响

目的:探讨五倍子水提取物对牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalisPg)膜泡(extracellular vesicles ECV)抑制牙周膜成纤维细胞生物活性的影响。方法:采用体外培养的人牙周膜成纤维细胞,用3H-TdR掺入方法,检测ECV对人牙周膜成纤维细胞DNA合成的影响,以及中药五倍子提取物对ECV这一生物活性的阻断作用。结果:细胞培养物中加入50μg/mLECV时,人牙周膜成纤维细胞DNA的合成受到明显抑制,与空白对照组相比P<0.01。当同时加入各浓度五倍子水提取物时其DNA合成量明显增加,与ECV组相比均(P<0.05),且随五倍子水提取物浓度升高,DNA的合成量也随之增高,并呈一定浓度依赖性。结论:适宜浓度的五倍子提取物可有效地阻断ECV的这种生物活性作用,从而可推测其对牙周病的发生、发展能起到一定的阻断作用。     

富组蛋白中和牙周可疑致病菌内毒素作用的实验研究

目的：研究人腮腺唾液富组蛋白对牙周可疑致病菌内毒素的中和作用。方法：采用改良Ｗｅｓｔｐｈａｌ热酚水法提取并纯化牙龈卟啉菌（４７－Ａ株）和具核酸杆菌（临床分离株）的内毒素,用鲎试验试管法观察ＨＲＰ－５对这两株细菌的内毒素的中和作用。结果：在本实验条件下,ＨＲＰ－５（１０μｇ／ｍｌ）能轻度抑制大肠杆菌、牙龈卟啉菌及具核酸杆菌的内毒素（１ｎｇ／ｍｌ）的鲎活性。结论：相同浓度的ＨＲＰ－５对需氧的大肠杆菌和     

表没食子儿茶素没食子酸酯对牙龈卟啉单胞菌细菌毒力抑制作用的体外研究

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin?3?gallate,EGCG)对牙龈卟啉单胞菌(Por?phyromonas gingivalis,P.gingivalis)体外抑菌活性及EGCG对P.gingivalis诱导人牙龈成纤维细胞(human gingi?val fibroblasts,HGFs)表达基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的抑制作用。方法采用微量稀释法分析EGCG对P.gingivalis浮游菌和生物膜的抑制作用。扫描电镜检测EGCG作用下P.gingivalis生物膜微观结构的变化。特异性人工合成显色多肽底物评价EGCG对牙龈素精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(argi?nine gingipain,Rgp)和赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(lysine gingipain,Kgp)蛋白水解活性的影响。P.gingi?valis刺激HGFs,与EGCG共培养,ELISA检测MMP?1和MMP?2的蛋白分泌水平,qRT?PCR检测MMP?1及MMP?2 mRNA的表达。结果EGCG对P.gingivalis浮游菌的最低抑菌浓度为62.5μg/mL,最低杀菌浓度为500μg/mL。EGCG可抑制P.gingivalis生物膜形成,并对成熟生物膜具有清除作用,且抑制成熟生物膜的代谢活性。10μg/mL及50μg/mL EGCG可有效抑制牙龈素的水解活性(P<0.05)。此外,50μg/mL EGCG对P.gingivalis刺激HGFs表达及分泌MMP?1、MMP?2均有抑制作用(P<0.05)。结论EGCG对P.gingivalis有抑菌作用,且可抑制HGFs表达MMPs。     

牙龈卟啉菌内毒素的化学组成和结构分析

作者采用牙龈卟啉菌４７Ａ－１株与大肠杆菌Ｏ＿（５５）４４３３６株，进行了内毒素活性、化学组成及其结构关系等研究和比较。结果：牙龈卟啉菌４７Ａ－１株精制内毒素含有５５．０％糖类、３６．０％脂类、１．６％蛋白质和０．３％磷，但不含２－酮－３－脱氧－Ｄ－甘露糖－辛酮糖酸（ＫＤＯ）。该内毒素在电镜下呈圆形和末端膨大的短杆状结构，其超微结构与光滑型大肠杆菌内毒素有所不同，但与粗糙型大肠杆菌内毒素相似。该内毒素的红外光谱与大肠杆菌Ｏ＿（５５）４４３３６株内毒素极其相似，表明两者为同型结构物。研究结果证实，牙龈卟啉菌内毒素具有细菌内毒素的基本特征。     

1,8-桉叶油素对三种牙周致病菌的抑菌作用研究

目的:测定1,8-桉叶油素对几种常见的牙周致病菌包括牙龈卟啉单胞菌、伴放线聚集杆菌、中间普氏菌的抑菌效果。方法:采用二倍稀释法测定1,8-桉叶油素牙龈卟啉单胞菌、伴放线聚集杆菌、中间普氏菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC),利用BHI血平板稀释培养法测定最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration, MBC)。采用结晶紫染色法检测1,8-桉叶油素对牙龈卟啉单胞菌、伴放线聚集杆菌、中间普氏菌的生物膜形成的影响。结果:1,8-桉叶油素对牙龈卟啉单胞菌的MIC为31.25μL/mL,伴放线聚集杆菌MIC为15.63μL/mL,中间普氏菌MIC为7.81μL/mL;1,8-桉叶油素对3种牙周致病菌的MBC均为125μL/mL。1,8-桉叶油素能抑制牙龈卟啉单胞菌、伴放线聚集杆菌、中间普氏菌生物膜的形成。结论:1,8-桉叶油素在体外对3种牙周致病菌均具有较好的抑菌作用。     

五倍子水提取物抑制LPS对牙周膜细胞附着牙骨质片表面的影响

目的观察五倍子水提取物对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着的影响。方法采用细胞培养技术,细胞计数法及扫描电镜进行观察。结果加入五倍子水提取物溶液后,对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面的附着有明显拮抗作用,该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加,到10μg/mL时,达到峰值。另外,培养液中先加入不同浓度的五倍子水提取物溶液,培养24h后再加入LPS时(A组),与LPS和五倍子水提取物溶液同时加入组(B组)相比,除对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着有同样拮抗趋势外,当五倍子水提取物浓度为10μg/mL、20μg/mL时,A组的细胞附着数明显高于B组。扫描电镜显示,A组与B组牙骨质片表面细胞数量较多,细胞形态丰满,细胞胞突伸展明显,并相互交织成栅栏状、网状结构,部分细胞呈叠层生长,其中A组效果更明显。结论五倍子水提取物对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着有拮抗和保护作用。     

中间普氏菌和脆弱类杆菌内毒素对人牙周膜细胞增殖和超微结构的影响

目的：观察中间普氏菌和脆弱类杆菌的内毒素对人牙周膜细胞增殖和超微结构的影响。方法：体外培养人牙周膜细胞，MTT法测定中间普氏菌和脆弱类杆菌的内毒素对人牙周膜细胞增殖的影响，找出显效浓度，并应用透射电镜技术观察该浓度下两种内毒素对人牙周膜细胞超微结构的影响。结果：两种内毒素在10μg/mL浓度时即能显著抑制人牙周膜细胞的增殖，该抑制作用随内毒素浓度增高而增大。10μg/mL浓度的内毒素使人牙周膜细胞的线粒体、内质网、高尔基氏体肿胀，溶酶体增多，核质浓集；甚至造成部分细胞死亡。结论：中间普氏菌和脆弱类村 的内毒素可对人牙周膜细胞产生毒害作用，二者之间无明显差异。     

黄芩对5种常见牙周细菌抑制作用的体外研究

目的：观察黄芩对5种常见牙周细菌的作用。方法：采用试管两倍稀释法测定黄芩甲醇提取物在体外厌氧环境对牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌、血链球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果：黄芩对各实验菌株均有抑制作用，对牙周常见可疑致病菌牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌的MIC值为5g／L、MBC值为20g／L，对牙周有益菌血链球菌的MIC值为40g/L、MBC值为40g/L，结论：浓度为5g/L的黄芩在不破坏牙周局部生态平衡的情况下可有效抑制牙周可疑致病菌的生长。     

葡萄籽原花青素对牙龈卟啉单胞菌内毒素的影响

目的探讨葡萄籽原花青素对牙龈卟啉单胞菌内毒素的影响。方法采用二倍稀释法测定葡萄籽原花青素对牙龈卟啉单胞菌的最小抑菌浓度(MIC);采用鲎试验测定低于MIC 6个浓度的葡萄籽原花青素对牙龈卟啉单胞菌内毒素含量的影响。采用SPSS17.0软件包进行组间比较。结果葡萄籽原花青素对牙龈卟啉单胞菌的MIC为0.8 mg/mL;在0.05~0.4 mg/mL范围内,随着葡萄籽原花青素浓度的升高,对释放内毒素的抑制作用逐渐增强（P<0.05、0.01）。结论葡萄籽原花青素对牙龈卟啉单胞菌内毒素的释放具有抑制作用。