广东地区TTV感染情况及基因分型

目的 调查广东地区ＴＴ病毒（ＴＴＶ）感染流行情况和基因分型。方法 选取ＴＴＶＯＲＦ１的保守序列作内外引物,Ⅰ型、Ⅱ型同源性极高的序列ｎｔ２４６４～ｎｔ２５２０作包被探针,异源性大于５０％的序列ｎｔ２１２５～ｎｔ２１５９作显色探针Ⅰ和显色探针Ⅱ,采用微板核酸杂交－ＥＬＩＳＡ技术对２８０例肝功能损害的肝炎患者血清进行ＴＴＶ检测及ＴＴＶ基因分型研究。结果 检测出４４例ＴＴＶ阳性患者,检出率为１５．７１％     

TTV与其它肝炎病混合感染及其基因型的研究

研究TTV与其它肝炎病混合感染对肝脏病变的影响及本地区TTVDNA的基因型。选TTV ORF1的保守序列作内外引物,采用微板核酸杂交－ELISA方法检测患者血清TTVDNA并对检测结果和临床资料进行统计学分析。选取异源性大于50％的序列作显色探针Ⅰ和显色探针Ⅱ,进行分型研究。学生、非甲－非戊型肝炎、慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清TTV阳性率分别为3．3％、14．3％、12％、16％。TTV阳性和TTV阴性的慢性乙型肝炎及肝硬化患者,在年龄、性别、ALT和TBil之间无显著差异（P＞0．05）。本地区流行的TTV可分为两个主要的基因型,即I型（66．75）、Ⅱ型（25％）,部分存在混合感染（8．3％）。TTV可能与HBV、HCV有类似的传播途径,故常重叠感染。TTV与乙型肝炎及肝硬化混合感染后不影响两者的肝脏病变。TTV不是本地区非甲－非戊型肝炎的主要病因。     

深圳地区乙型肝炎病毒DNA基因分型与临床的关系

目的检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA并进行基因分型。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV DNA后，用不同的探针，利用微板杂交法将其分为6个亚型。结果150例HBV DNA阳性病人中，B型50例、C型36例．D型13例、F型3例和A型1例，没有发现E型。另有47例为混合型，其中以B、D型(18例)、C、D型(20例)为主，分别占混合型的38．30％与42．6％。受检病人中，B型感染者丙氨酸氨基转移酶水平明显增高；B型感染者比C型感染者抗HBe阳性率高，分别为64．0％和30．5％，而C型感染者比B型感染者乙型肝炎e抗原阳性率高，分别为47．2％和22．0％；年龄、性别与基因型关系不明显。结论深圳地区HBV基因亚型以B型为主，C型次之，其他较少。基因型与肝炎程度有一定关系。     

经输血传播病毒(TTV)在血液透析患者中感染状况及基因分析

目的 研究我国血液透析患者人群中经输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染及基因变异状况。方法 设计特异性引物采用半巢式ＰＣＲ方法对北京市２所综合性大医院５０例血液透析患者血清标本进行ＴＴＶ ＤＮＡ的检测并将产物克隆及序列分析。结果 经过半巢式ＰＣＲ检测，血透患者ＴＴＶ ＤＮＡ阳性率为１４％。对其中４例标本中分离出的ＴＴＶ ２７０个碱基核酸片段序列分析表明：基因同源性为９９．１％￣１００％，推测的编码氨基酸序     

用微板核酸杂交—ELISA技术检测不同人群TTV感染状况

目的 用微板核酸杂交—ELISA技术检测皖北地区不同人群TTV感染情况。方法 用PCR法将病人血清标本中的TTV DNA扩增后,与两条特异性探针夹心杂交,通过酶联显色检测血清标本中的TTV DNA并进行分型。结果 TTV DNA在学生、血透患者、肝病患者中的阳性率分别为3.3％、16.7％和13.5％,前者与后两者比较差异均有显著性(P<0.05)。14例NA～NE肝炎的TTV DNA阳性率为14.3％。本地区流行的TTV可分为两个主要基因型,其中以Ⅰ型为主(66.7％),Ⅱ型次之(25％),少部分存在混合感染(8.3％)。结论 安徽省皖北地区一般人群、血透患者和肝病患者中均存在TTV感染,后两者为TTV感染的高危人群。TTV不是本地区NA～NE肝炎的主要病因。安徽省皖北地区流行的TTV的基因型以Ⅰ为主。     

TTV的研究概况

在肝炎病原学诊断过程中,人们一直在寻找非甲—非戊型肝炎的病因。1995年报道发现ＨＧＶ/ＧＢＶ-Ｃ〔1,2〕,越来越多的研究表明,该病毒可能不是原因未明的非甲-非戊型肝炎的主要病原〔3,4〕,1997年12月日本学者Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等报道〔5〕,应用问世不久的代表性差异分析(Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ,ＲＤＡ技术),从一例非甲-非庚型输血后肝炎患者血清中克隆出1株编号Ｎ22的ＤＮＡ序列,经计算机在基因库中比较后认为是一种新的与输血后肝炎相关的ＤＮＡ病毒,暂称为输血传播病毒(Ｔｒａｎｓｆｕ…     

丙型肝炎病毒基因分型研究

采用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）法检测了泰安地区４６例输血后丙型肝炎（ＰＴＨ－Ｃ）患者的血清ＨＣＶ－ＲＮＡ〉对其中３４例生进物ＰＣＲ产物用限制性长度多生分析泊（ＲＦＬＰ）进行了ＨＣＶ基因分型。结果ＨＣＶ－Ⅱ型检出率为７３．５％，ＨＣＶ－Ⅲ型检出率为１１．８％；ＨＣＶⅡ／ＨＣＶⅢ型混合感染率为１４．７％，未发现Ⅰ、Ⅳ和Ⅴ型感染。     

TTV的病原学研究进展

1997年底,Nishzawa等利用代表性差异分析(representational difference analysis)法,分离到一种新的DNA病毒,并认它可能与非甲非庚型肝炎有关。由于该病毒来自一份名为TT的输血后肝炎患的血清,因此被命名为TT病毒,恰与经输血传播病毒(transfusion transmitted virusTTV)巧合。随后许多学对TTV进行了广泛的研究,内容包括流行病学、病原学、临床表现等,其中TTV的病原学是研究得较深入的一个领域。本就TTV的病原学研究最新进展做一综述。     

感染四项阴性献血者去白细胞悬浮红细胞中EB病毒的检测及基因分型

目的 探讨感染四项阴性献血者去白细胞悬浮红细胞感染EBV的情况及基因分型。方法 采用荧光PCR技术对500例去白细胞悬浮红细胞血袋进行EB病毒核酸定量,统计其感染率,并根据EBV的EBNA2与EBNA3C基因连锁多态性及BamHI基因某些片段的保留与缺失通过PCR联合限制性片段长度多态性（RFLP）的检测对EBV阳性标本进行A/B、F/f、C/D分型,分别统计出各型别的检出率。结果 500例血液制品样本中共有44例检测到有EB病毒DNA拷贝,阳性率为8.8%(44/500)。其中A/B分型中A型检出率为36.36%(16/44),B型检出率为63.64%(28/44),A型和B型混合感染未检出。F/f分型中F型检出率为79.55%(35/44),f型的检出率为20.45%(9/44),无两型混合感染。C/D分型中C型检出率为70.45%(31/44),D型检出率为29.55%(13/44),无两型混合感染。结论 感染四项阴性献血者输血时有EBV感染的可能,EBV阳性的样本中,多数以B、C、F型EBV感染为主。     

11株经输血传播病毒（TTV）基因型分析

目的 对11株经输血传播病毒（transfusion transmit virus,TTV）进行基因型分析。方法 用巢式PCR扩增不同地区不明病因的急、慢性肝炎、肝硬化、肝癌和自然健康人群TTV DNA片段,并对此巢式PCR产物进行克隆,测序分析和同源性比较。结果 11例标本的222bp9引物序列除外）的TTV DNA同源性结果为：武汉WH1、WH2、WH33个患者血清中TTV DNA序列与N22同源性分别为97.0％、97.0％和98.0%;广州GZ1、GZ2、GZ33患者血清中TTV DNA序列与N22同源性分别为98.0%、95.0%和95.0%;山东SD2、SD3TTV DNA序列与N22同源性分别为94.6%和95.5%;广州GZ4、山东SD1,新疆XJ1患者TTV DNA序列与TX011同源性分别为98.0%、98.0％和95.0%。结论 根据Okamoto的分类方法,这11株TTV可属于两个亚型,即基因1型的a和b亚型。     

乙型肝炎病毒C基因启动子双突变的检测意义

目的：分析乙型肝炎病毒（HIBV）C基因启动子（BCP）双突变与乙型肝炎临床表现及HBeAg表型的关系。方法：针对BCP双突变的特点，设计一条通用捕捉探针，一条野生型和一条双突变显色探针，待测标本DNA经聚合酶链反应（PCR）扩增后分别与野生型和双突变显色探针杂交，然后用酶联免疫吸附试验（ELISA）显示杂交结果，判定BCP突变与否。结果：147例经证实为HBV DNA阳性的急慢性肝炎患者中共有51例双突变，其中42例为单纯双突变，9例为混合突变（双突变和野生型皆为阳性），117例慢性中，重型肝炎中共有36例BCP双突变，8例混合突变，78例HBeAg阳性患者中，有25例BCP双突变，其中7例为混合突变，65例HBeAg阴性患者中，有26例BCP双突变，结论：慢性肝炎BCP双突变高于高性肝炎；BCP双突变对HBeAg的表达有一定影响。PCR微板核酸杂交ELISA技术是一种简便，特异的基因突变检测的新方法。     

乙型肝炎病毒基因型与血清HBV DNA水平的关系

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基因型与血清HBVDNA水平的关系。方法　采用PCR、核酸杂交和酶联显色技术以及荧光定量PCR技术 ,分别对 12 3例慢性乙型肝炎 (CHB)患者进行HBVDNA基因分型和血清HBVDNA水平的测定。结果　泉州地区CHB患者的HBV基因型以B型为主 ,其次为C型 ,部分以D型和混合型存在 ,分别占 74 80 %、17 0 7%、3 2 5 %和 5 69% ,无A、E、F型。C基因型的HBVDNA水平 (log值 )为 7 0 5± 1 3 5 ,显著高于B基因型的 6 3 2± 1 0 6,P <0 0 1;而C基因型的HBeAg含量为5 3 62± 2 5 3 2 ,亦显著高于B基因型的 40 1l± 15 17,P <0 0 1。C基因型患者的TBIL、ALT、AST均显著高于B基因型 ,而白蛋白水平则显著低于B基因型 ,P <0 0 1。结论　泉州地区CHB患者以B基因型为主 ,部分以C型、D型和混合型存在。C基因型的血清HBVDNA水平显著高于B型 ,其肝损伤程度亦显著高于B型     

TTV在不同类型肝炎患者中的检测

目的：研究输血传播病毒（TTV）在郑州地区甲型、乙型、丙型、非甲－非戊型肝炎患者中的感染情况，寻找非甲－非戊型肝炎的病因。方法：采用巢式聚合酶链反应（nested-PCR）方法对不同人群的血清标本进行检测。结果：TTV DNA在11例甲型肝炎患者中检出1例（9.1%）；在56例乙型肝炎患者中检出13例（23.2%）;在14例丙型肝炎患者中检出1例（7.1%）；在40例非甲－非戊型肝炎患者中检出18例(45%)。结论：TTV在非甲－非戊型肝炎患者中的感染率明显高于其他肝炎人群，可能是非甲－非戊型肝炎的主要致病因子。     

Genotypes of hepatitis B virus among voluntary blood donors in northern Thailand.

There are distinct ethnogeographic variations for the distribution of various hepatitis B virus (HBV) genotypes, and pathogenic and therapeutic differences are also observed. In general, genotype B infection has a relatively better prognosis than genotype C. In Thailand, genotypes C and B were reported as the major genotypes; however, there were no previous reports of HBV genotyping in the north of the country. From 1998 to 2000, 216 HBsAg-positive serum samples (164 males and 52 females, aged 16-52 years), were screened and collected from voluntary blood donors in four provinces of northern Thailand. The method of Naito et al. was employed in this study, with the multiplex-PCR approach and genotype-specific primers to identify genotypes A-F. We found that the HBV genotype C was highly predominant in northern Thailand (89.3%), when compared with the previous reports of genotype C distribution among voluntary blood donors from other areas in the country (50-65%), followed by genotype B (7.4%), mixed infection of genotype B and C (1.9%) and genotype A (0.5%). Four samples (1.9%) were unclassifiable. There was no significant difference of genotype distribution among four northern Thai provinces or each age group.     

兰州地区乙肝病毒基因亚型的感染情况

目的：调查兰州地区乙肝病毒基因分型情况及其和性别，血清标志物的关系，方法：用PCR－微板核酸杂交－ELISA法对88例兰州地区慢性无症状携带者（AsC)及慢性乙型肝炎（CHB），肝炎后肝硬化（HLC）的HBV DNA进行基因分型，并用酶免疫法（EIA）测其血清标志物（HBV－M），结果：兰州地区基因型C型67．0％，B型12．5％，B，C混合型18．2％，其他型2．3％，男、女性感染HBV DNA构成比存在差异，HBeAg阳性率C型较B型高，结论：兰州地区的基因型以C型为主，乙肝病毒基因亚型易感性可能存在性别差异，不同基因亚型感染可形成不同的血清标志物。     

乙型肝炎病毒基因型的分布及与临床相关性

目的了解镇江地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布及与临床的相关性。方法选择镇江地区HBV感染者257例,其中慢性HBV携带者49例,慢性乙型肝炎轻度52例、中度38例、重度32例,重型肝炎22例,肝硬化41例,原发性肝癌23例。应用聚合酶链反应(PCR)微板核酸杂交-酶联免疫吸附(ELISA)技术检测HBV的基因型。结果257例HBV感染者中B基因型112例(43.6%),C基因型140例(54.5%),B C基因型5例(1.95%),未发现A、D、E、F、G和H基因型。C基因型在慢性乙型肝炎重度、重型肝炎、肝硬化、肝细胞癌中占绝对优势,分别占65.6%、72.7%、68.3%、78.3%,显著高于慢性HBV携带者的38.8%,P<0.05。C基因型HBV感染者的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平(262.3±319.7u/L)、总胆红素(TBIL)水平(69.9±35.8μmol/l)、HBeAg阳性率(67.1%)、HBV DNA定量中位数绝对值(6.02±1.34)显著高于B基因型(141.5±206.1u/L)、(38.3±22.4μmol/l)、46.4%和4.18±1.10,P<0.05。B基因型HBV感染者的血清白蛋白(ALB)水平(39.6±9.6g/)显著高于C基因型(30.1±7.3g/l),P<0.05。结论PCR微板核酸杂交—ELISA技术可用于HBV基因型的临床检测。镇江地区HBV感染者基因型以单一的B型或C型为主,含少量B C型。C基因型为本地区优势基因型,并在严重肝病和原发性肝癌中比例较高,其引起的ALT、TBIL、病毒血症水平均较高,HBeAg血症持续时间长,故预后较差。     

拉米夫定对湖北地区乙型肝炎病毒基因型的影响

目的研究拉米夫定对湖北地区乙型肝炎病毒基因型的影响及其临床意义。方法采用多对型特异性引物-聚合酶链反应检测160例慢性乙型肝炎患者血清HBV基因型;采用基因芯片技术对86例拉米夫定治疗18个月的慢性乙型肝炎患者进行酪氨酸—蛋氨酸—天冬氨酸—天冬氨酸(YMDD)基序、G1896A、A1814C、A1792T和G1764A单碱基变异检测。结果160例慢性乙型肝炎患者,B基因型127例(79%),C基因型24例(15%),BC混合型9例(6%),未发现A、D和E基因型。拉米夫定治疗的86例患者中,17例(19.7%)发生YMDD变异,B型14例,C型2例,BC混合基因型1例,其中6例发生多重变异,包括B型4例,C型2例;HBeAg/HBeAb血清转换率B型41例(68.3%)高于C型8例(40%)(P<0.05)。另外17例患者,经拉米夫定治疗后,HBVDNA仍阳性,亦未发现YMDD变异株。结论湖北地区HBV存在B、C和BC混合基因型,B型为本地区优势基因型,B型在拉米夫定治疗中更易发生YMDD变异;未变异者,血清HBeAg/HBeAb转换率高。     

Genotypes, mutations, and viral load of hepatitis B virus and the risk of hepatocellular carcinoma: HBV properties and hepatocarcinogenesis

Chronic infection with hepatitis B virus (HBV) is the major risk factor for hepatocellular carcinoma (HCC) worldwide. Ten HBV genotypes (A-J) have been discovered so far. Genotypes B and C are endemic in East and Southeast Asia. Genotype C HBV is associated with increased risks of cirrhosis and HCC. Genotype B (B2) is associated with the development of HCC in non-cirrhotic patients younger than 50 years and with relapse of HCC after surgical treatment. It is also associated with earlier hepatitis B e antigen seroconversion than genotype C. High HBV load is independently associated with the occurrence and post-treatment recurrence of HCC. Different genotypes have distinct patterns of mutations. Viral mutations in the core promoter region and in the preS region are frequently found to be significantly associated with an increased risk of HCC. These mutations often occur before the onset of HCC and accumulate during the progression of chronic HBV infection. Multiple such mutations are more frequent in patients with HCC and are specific for HCC. HBV subgenotypes, viral mutations, and viral load can be used for the prediction of HCC. Early identification of HBV-infected individuals who will eventually develop HCC will help to develop active prophylactic protocols to reduce or delay the occurrence of HCC.     

Transfusion-transmitted virus in association with hepatitis A-E viral infections in various forms of liver diseases in India

AIM: To describe the prevalence of transfusion-transmitted virus (TTV) infection in association with hepatitis A-E viral infections in different forms of liver diseases in North India. METHODS: Sera from a total number of 137 patients, including 37 patients with acute viral hepatitis (AVH), 37 patients with chronic viral hepatitis (CVH), 31 patients with cirrhosis of liver and 32 patients with fulminant hepatic failure (FHF), were analyzed both for TTV-DNA and hepatitis A-E viral markers. Presence of hepatitis B virus (HBV), hepatitis C virus (HCV) and hepatitis E virus (HEV) infections was detected in different proportions in different groups. Moreover, TTV-DNA was simultaneously tested in 100 healthy blood donors also. RESULTS: None of the patients had hepatitis A virus (HAV) and hepatitis D virus (HDV) infections. Overall prevalence of TTV-DNA was detected in 27.1% cases with AVH, 18.9% cases with CVH, 48.4% cases with cirrhosis and 9.4% cases with FHF. TTV-DNA simultaneously tested in 100 healthy blood donors showed 27% positivity. On establishing a relation between TTV infection with other hepatitis viral infections, TTV demonstrated co-infection with HBV, HCV and HEV in these disease groups. Correlation of TTV with ALT level in sera did not demonstrate high ALT level in TTV-infected patients, suggesting that TTV does not cause severe liver damage. CONCLUSION: TTV infection is prevalent both in patients and healthy individuals in India. However, it does not have any significant correlation with other hepatitis viral infections, nor does it produce an evidence of severe liver damage in patients with liver diseases.