荧光定量分型法在HLA-DRB1位点分型中的应用

目的：探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)分型方法在HLA分型中的应用价值。方法：在低分辨SSP法基础上，加入荧光探针，建立HLA-DR位点荧光定量分型法，对46例标本进行分型。结果：46例样本分型均成功。与SSP结果完全相同，与血清学分型结果比较，以DR位点单体型计算，符合率66.3％（61/92），两个等位基因型与血清学结果完全相符者43.5％（20/46）。结论：荧光定量分型法可提高自动化程度，减少污染机会，简化操作。与血清法相比，准确性提高。     

基因芯片与血清学方法用于120份供、受者 HLA-A分型的比较

目的 比较基因芯片和血清学方法用于汉族的移植供、受者白细胞抗原Ⅰ类A抗原（HLA—A）分型的准确性和临床实用性。方法 采集供、受者的外周血共120份,再将每份血样分为2部分,分别采用血清学和基因芯片方法检测HLA—A抗原分型,对两种方法分型结果不同的样本,采用序列特异引物聚合酶链反应技术（PCR-SSP）检验。通过比较分型结果和操作方法,评价两种方法的准确性和临床实用性。结果 血清学分型总耗时3h,基因芯片分型总耗时4．5～5h,共有112份样本分型成功,其中两种方法结果一致的有91份,不一致的有21份。经验证,基因芯片分型错误2份,总误差率为2％;血清学分型错误19份,其中5份抗原误差,14份空白误差,总误差率为17％。结论 基因芯片分型准确性明显优于血清学,随着芯片性能的不断完善,将来可能完全取代血清学方法,并具有广阔的应用前景。     

基因芯片快速HLA-DR52组分型

目的 用基因芯片对HLA-DR52组快速分型。方法 根据中国汉族人群常见的HLA-DRB位点及其基因多态性的独特序列，设计特异性的寡核苷酸分型探针，制成寡核苷酸芯片。通过组间特异引物扩增基因组DNA，扩增中用荧光标记，扩增标记后的产物与芯片的探针杂交，通过杂交产生的荧光信号确定样品的基因亚型。83份样本分别用基因分型芯片和序列特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)对HLA-DR52组分型。结果PCR-SSP分型DR52组57个位点中，经芯片分型有2个无DR52组位点，3个PCR-SSP分型为DR52组纯合子，芯片为DR52组杂合子，1个PCR-SSP分型为非DR52组纯合子，芯片分型为含有1个DR52组位点的杂合子。结论 基因芯片能对HLA-DR52组快速、准确的分型，比PCR-SSP能更多的检出DR52组位点，特别是能将纯合子进一步分型，适合临床应用。     

DNA芯片技术检测HLA-DR1,DR51组基因型

目的 采用DNA芯片技术对HLA—DRl，DR51组基因分型。方法 根据编码HLA—DR1，DR51组抗原等位基因序列设计特异分型探针，制作DNA分型芯片。通过组间特异引物扩增基因组相应区段DNA，扩增中用Cy5-dCTP荧光标记，扩增标记后的产物与芯片探针杂交，通过杂交产生的荧光信号及分布格局确定样品基因亚型。分型结果用标准DNA和PCR—SSO验证。结果130份样本共检出HLA-DR1，DR51组位点34个，包括18个：DR15，8个DR16，6个：DR10，2个DR1，无假阳性或假阴性，准确率和重复率均达100％。检测总耗时约3．5h。结论 DNA芯片用于HLA-DR1、DR51组基因分型具有高分辨度、高特异性和简单快速的优点，适于器官移植临床应用。     

寡核苷酸DNA微阵列用于人类白细胞抗原-DR53组基因分型的研究

目的 建立用于人类白细胞抗原(HLA)-DR53组基因分型的寡核苷酸DNA微阵列。方法 根据中国汉族人群HLA-DRB等位基因的频率设计特异性的分型探针,制作寡核苷酸DNA微阵列。通过组间特异引物扩增基因组DR153相应区段的DNA,扩增中用Cy5-dCTP荧光标记,扩增标记后的产物与芯片的探针杂交,通过杂交产生的荧光信号及分布格局确定样品的基因亚型。分型结果用标准DNA和序列特异寡核苷酸探针杂交验证。结果 经寡核苷酸DNA微阵列分型,111份样本中共检出DR53组位点72个,其中DR9 34个,DR4 25个,DR7 13个,无一例假阳性或假阴性,重复率和准确率均达到100％。检测总耗时约5h。结论 寡核苷酸DNA微阵列用于HLA-DR53组基因分型具有高分辨率、高特异性和简单快速的特点,适合于临床应用。     

基因芯片技术在肾移植组织配型中的应用

目的比较基因芯片和特异性聚合酶链反应(PCRSSP)两种HLADR分型方法,探讨适用于肾移植供、受者分型的新方法。方法对60份肾移植供、受者的DNA样本同时采用基因芯片和PCRSSP进行HLADR分型,并进行分析比较。结果60例样本的两种分型方法结果完全一致56份,相同率达93%。结果不相同的样本共4份,经第三方验证,其中基因芯片分型漏1个位点2例、1个位点误判1例,PCRSSP分型漏1个位点1例。其中20份样本作了重复实验,其重复率达到96%。结论基因芯片用于HLA分型具有灵敏度高、效率高、标准化程度高的优点,是其它分型方法所无可比拟的,具有广阔的应用前景。     

快速盐析法提取DNA在HLA基因分型中的应用

采用快速盐析方法提取人类有核细胞ＤＳＡ，并在临床肾移植的ＨＬＡ基因配型中应用。通过对２１０份不同组织来源的样本与标准酚氯仿法同步对比研究显示：快速盐析法提取模板ＤＮＡ，无污染和有害作用；操作简单、快速，总耗时１１０分钟；方法稳定可靠，无一例失败；所获ＤＮＡ质量好，纯度高，达到酚氯仿法所获ＤＮＡ的水平；用于临床肾移植基因型均获成功，与酚氯仿法结果完全相同。证实该法提取的ＤＮＡ适用于临床器官移植基因水     

PCR—SSP快速HLA—DR基因分型与临床应用

应用分子生物学技术，建立顺序特异引物聚合酶链反应方法，首次对１１２例肾移植供受者和９份标准ＤＮＡ进行ＨＬＡ－ＤＲ基因分型，每份样本同时２０管ＰＣＲ的反应，扩增条件为９４℃３０秒，６０℃５０秒，７２℃４０秒，共３４个循环，即可对ＤＲ各等位基因作出准确分型，总耗时５小时。分型结果经标准ＤＮＡ，限制性内切酶分析和特异性探针杂交等予以确证，特异性和重复性１００％，无一例假阳性和假阴性，显示本方法快速、精确     

PCR-ST Amp法应用于HLA-DRB1测序分型的研究

目的采用单管PCR扩增(ST Amp)方法建立高效的人类白细胞抗原-DRB1(HLA—DRB1)基因测序分型(SBT)技术并探讨其应用价值。方法合成7个5’端特异性扩增引物和1个3’端共用引物，将上述引物混合在一起组成单个PCR反应用于HLA—DRB1的DNA测序分型分析。结果所有样本都能成功分型．分型结果准确可靠，重复性好。结论STAmp法改进了测序分型技术，具有高分辨率、高特异性和高效率的特点．值得推广应用。     

十字类型法在胫骨平台骨折诊断治疗中的初步研究

目的研究十字类型法在胫骨平台骨折分型、诊断、治疗中的初步应用。方法对249例胫骨平台骨折采用十字类型法及Schatzker分型进行骨折分型,并对两种分型方法进行比较。结果十字类型法重整了Schatzker分型Ⅰ~Ⅲ型,将Ⅳ~Ⅵ型加以细化,并补充了部分类型。结论十字类型法制订科学、应用广泛,对手术治疗中切口、内固定放置、植骨等方面有明确的指导作用。     

DTS与DR技术应用于胫骨平台骨折Schatzker分型的效能比较

目的比较X射线摄影系统(Digital radiography,DR)和数字断层融合技术(Digital tomosynthesis,DTS)用于胫骨平台骨折Schatzker分型的诊断效能。方法纳入自2017-05—2018-11诊治的120例胫骨平台骨折,患者入院后常规进行DR和DTS成像技术检查,以术中Schatzker分型为金标准,比较采用DR和DTS影像进行胫骨平台骨折Schatzker分型的准确性。结果术中Schatzker分型结果:Ⅱ型27例,Ⅲ型18例,Ⅳ型18例,Ⅴ型37例,Ⅵ型20例。DR分型结果:未骨折8例,Ⅰ型3例,Ⅱ型23例,Ⅲ型17例,Ⅳ型20例,Ⅴ型26例,Ⅵ型23例。DTS分型结果:Ⅱ型22例,Ⅲ型18例,Ⅳ型21例,Ⅴ型34例,Ⅵ型25例。DR分型与手术确诊分型结果相同91例,不相同29例,准确率为75.8%。DTS分型与手术确诊分型结果相同112例,不相同8例,准确率为93.3%。采用DTS进行胫骨平台骨折Schatzker分型的准确率高于DR分型,差异有统计学意义(P0.001)。结论相对于DR成像技术,采用DTS成像技术对胫骨平台骨折进行Schatzker分型时具有更好的影像学还原性,同时具有更高的诊断准确率。     

采用顺序特异引物聚合酶链反应技术行快速HLA—DR53基因配型

采用顺序特异引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ－ＳＳＲ）对６５例肾移植供受ＨＬＡ－ＤＲ５３组（ＤＲ４、ＤＲ７、ＤＲ９）进行基因水平分型。结果本组有位点均分型成功，无一例假阳性和假阴性；每位点重复１０次，重复１００％；总耗时５小时。分型结果经标准细胞株、限制性内切酶分析和寡核苷酸探针杂交予以确证，特异性１００％。显示本方法用于ＨＬＡ－ＤＲ５３组基因分型具有高分辨率、高特异性和简捷快速物特点，适合于临床应用     

利用基因芯片技术筛选早期乳腺癌的差异表达基因

目的 比较相同病理类型和临床分期预后不同的早期(Ⅰ、Ⅱ期)乳腺癌样本的基因表达差异,寻找有显著差异的基因,探索与早期乳腺癌预后有关的基因分型.方法 用Agilent4×44K人全基因组Oligo芯片对47例早期乳腺癌患者的组织样本,结合其预后好、差数据,根据其临床预后的不同分为对照组(预后好)24例和实验组(预后差)23例,进行差异基因表达分析;采用Real-time PCR技术,对两组乳腺癌样本中差异表达的基因进行验证.结果 基因芯片检测分析发现,实验组样本比对照组样本有差异表达基因126个,其中60个基因显著上调,66个基因显著下调(差异均在2倍以上).结论 不同预后的早期乳腺癌样本中,基因表达存在显著差异,早期乳腺癌的预后与这些基因的表达有关.     

股骨颈骨折在MSCT诊断后手术方案选择中的临床研究

目的 探讨MSCT在股骨颈骨折分型中的准确率及对手术方案选择的参考意义。方法 将2017年1月至2022年3月期间，本院收治的72例股骨颈骨折患者纳入研究，入院患者均接受MSCT三维重建和DR检查。比较两种检查方式在不同股骨颈骨折分型中的差异。结果 在解剖分型比较中，MSCT检查诊断头下型28例，经颈型12例，基底型30例，MSCT (97.22%)诊断准确率显著高于DR检查（84.72%）(P<0.05);Garden分型结果中，MSCT检查确诊Ⅰ型8例、Ⅱ型19例、Ⅲ21例和Ⅳ型23例，MSCT(98.61%)较DR检查（86.11%）准确率高，差异显著（P<0.05）；术前MSCT预测手术方案与术中实际采取的手术方案无显著差异（P>0.05）。结论 MSCT在股骨颈骨折分型中效果良好，准确的分型结果为术者手术方案的选择提供了有利参考依据，值得作为股骨颈骨折术前的必要检查之一。     

采用顺序特异引物聚合酶链反应技术行快速HLA－DR53组基因配型

采用顺序特异引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ－ＳＳＰ）对６５例肾移植供受者的ＨＬＡ－ＤＲ５３组（ＤＲ４、ＤＲ７、ＤＲ９）进行基因水平分型。结果本组所有位点均分型成功，无一例假阳性和假阴性；每位点重复１０次，重复性１００％；总耗时５小时。分型结果经标准细胞株、限制性内切酶分析和寡核苷酸探针杂交予以确证，特异性１００％。显示本方法用于ＨＬＡ－ＤＲ５３组基因分型具有高分辨率、高特异性和简捷快速的特点，适合于临床应用。     

PCR－SSP快速HLA－DR基因分型与临床应用

应用分子生物学技术，建立顺序特异引物聚合酶链反应方法（ＰＣＲ－ＳＳＰ），首次对１１２例肾移植供受者和９份标准ＤＮＡ进行ＨＬＡ－ＤＲ基因分型。每份样本同时２０管ＰＣＲ反应，扩增条件为９４℃３０秒，６０℃５０秒，７２℃４０秒，共３４个循环。即可对ＤＲ各等位基因作出准确分型，总耗时５小时。分型结果经标准ＤＮＡ，限制性内切酶分析和特异性探针杂交等予以确证，特异性和重复性１００％，无一例假阳性和假阴性。显示本方法快速、精确，适合于临床应用     

基因芯片——器官移植配型的新策略

在影响移植物长期生存率的因素中，组织型是重要因素之一，随着分子生物学的发展。HLA抗原的分型方法逐步由血清学、细胞学水平向分子水平过渡，分型的效果也逐渐达到特异，准确，快速、大量的目标。本文回顾了HLA分型方法的发展过程，评价各种DNA分型方法的优缺点，重点对基因芯片用于HLA分型的相关问题作了介绍。     

pH值对单克隆抗体法检测大便潜血的影响

目的:探讨不同pH值溶液对单克隆抗体法检测结果的影响.方法:在pH为0～14的不同pH值水溶液中,用单克隆抗体法对大便进行潜血检测,观察不同pH值溶液对单克隆抗体法的影响.结果:溶液pH值对单克隆抗体法检测大便潜血有影响,出现了假阳性.结论:单克隆抗体法检测大便潜血简单、快速、具有很高的特异性和灵敏度,不受饮食和药物的限制,但它可受溶液pH值的影响.     

产瘫的分型分度

目的 提出新的产瘫分类方法。方法 通过对358例产瘫的诊治，研究，按照损伤的解剖部位进行分型；按照损伤的程度进行分度。结果 本组358例产瘫均可用新的分型分度法进行,共分5型4度。结论 分型分度法是一种切实可行的新的产瘫分类方法，可以更好地指导产瘫的医，教，研工作。     

盆下型骨盆倾斜的分型与治疗

目的：对盆下型骨盆倾斜进行临床分型和分型治疗。方法：盆下型骨盆倾斜以畸形演变机制为基础，结合临床表现分为2个类型，即髋关节周围挛缩型，下肢不等长型。结果：作者从1987年起对1085例骨盆倾斜进行了分型治疗，其中在髋关节周围挛缩型中，患侧肢体髋关节周围挛缩型58例，健侧肢体髋关节周围挛缩型232例；在下肢不等长型中，代偿性骨盆倾斜762例，固定型骨盆倾斜33例，采用分型治疗方法，骨盆倾斜纠正满意。