五灵脂提取物对大鼠胃酸分泌的抑制作用及其化学成分的研究

临床常用治疗胸胁脘腹痛的五灵脂,是鼯鼠科动物橙足鼯鼠的干燥粪便。五灵脂治疗十二指肠溃疡,有较好的疗效,且用药安全,无毒副作用。本文观察了五灵脂提取物对胃酸分泌的抑制作用,并对其化学成份进行了分析。1 材料和仪器 SD大白鼠,体重140～160g,购于广东省卫生厅实验动物中心;雷尼替丁:杭州民生药厂。五灵脂药材购于广州市药材公司,经广东省药材公司冯耀南主任药师鉴定为Trogopterus xanthipesMilne-Edwards的干燥粪便。HP6890/5973气/质联用仪。2 实验方法与结果2.1 五灵脂提取物对胃酸分泌的抑制作用 五灵脂12Kg按常规用水提取,水提液浓缩后用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次提取,观察乙酸乙酯提取物对胃酸分泌的抑制作用。将SD雄性大白鼠随机分组,每组16只。设生理盐水空白对照组、雷尼替丁对照组、五灵脂提取物大、中、小剂量组。按Shay法制备溃疡模型。大鼠术前禁食24h,但可饮水。术时用0.9％戊巴比妥钠43mg·kg~(-1)体重腹腔注射麻醉后,将胃引出,关腹后立即腹腔注射给药。实验组分为15、60和120mg·kg~(-1)3个给药组,分别相当于生药10、40和80g·kg~(-1)。空白对照组注射生理盐水,阳性药对照组注射雷尼替丁50mg·kg~(-1),术后禁食禁水。10h后颈椎脱臼处死大鼠,将过滤后的胃液置离心机内以4000r     

桃红四物汤对巨噬细胞TGF-β1和 TNF-α mRNA转录的影响

目的:观察桃红四物汤含药血清对体外模拟骨坏死环境下的巨噬细胞的转化生长因子(TGF-β1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA转录水平的影响。进一步明确巨噬细胞在骨坏死修复中的机制。方法:普通级新西兰兔,雌雄各半,随机分为3组,每日ig 1 g.mL-1的桃红四物汤药液,高剂量组15 g.kg-1、低剂量组7.5 g.kg-1,对照组15 mL.kg-1的生理盐水,每日1次,连续ig 2周。U937经佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)诱导后的巨噬细胞以5×105接种于6孔板中,以坏死骨微粒制备模型组,并予以30%的含药血清干预48 h后收集细胞,RT-PCR检测各组巨噬细胞TGF-β1和TNF-αmRNA转录水平的变化。结果:桃红四物汤低、高剂量含药血清组TGF-β1mRNA的转录水平较空白血清组均趋呈现增高的趋势,组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中低剂量为3.366 7,高剂量为4.186 7;TNF-αmRNA的转录水平较空白血清组则呈现减弱的趋势,组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中低剂量为1.603 3,高剂量为1.356 7。结论:桃红四物汤可以提高坏死骨微粒刺激下的巨噬细胞TGF-β1mRNA水平,降低TNF-αmRNA水平,影响巨噬细胞的功能是其促进坏死骨修复的作用机制之一。     

铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂及TNF-α,IL-6的影响

目的:考察铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂、炎症相关蛋白的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:将ApoE-/-小鼠以高脂饲喂养4w构建AS小鼠模型,分别用辛伐他汀(3 mg·kg-1)、铁皮石斛(1.5,3 g·kg-1)对小鼠灌胃给药,8w后处死,酶法检测血清血脂;ELISA检测血清中TNF-α,IL-6表达;苏丹Ⅳ染色观察主动脉瓣处斑块形成情况;HE和油红0染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块;免疫组化法检测TNF-α和IL-6在主动脉壁的表达.结果:铁皮石斛可显著降低小鼠血清中TG,TCHOL,LDL-C水平,下调血清中TNF-α,IL-6表达;可明显减少ApoE-/-小鼠主动瓣处粥样斑块的面积和ApoE-/-小鼠主动脉管腔内粥样斑块的面积,可明显降低TNF-α,IL-6在主动脉内表达.结论:铁皮石斛能有效降低ApoE-/-小鼠血清中有关脂质含量,降低血清和主动脉内TNF-α,iL-6的表达,降低炎症反应的发生,缓解动脉粥样硬化损伤.     

雷公藤多甙抑制EM患者腹腔巨噬细胞及相应细胞模型分泌TNF-α的实验研究

目的观察雷公藤多甙(TWP)对子宫内膜异位症(EM)患者腹腔巨噬细胞和小鼠腹腔活化巨噬细胞释放TNF-α的影响,以探讨TWP用于临床治疗EM的机制并建立细胞模型,为后续研究做准备。方法收集16例经腹腔镜检查确诊为EM患者腹腔液分离纯化巨噬细胞,并给予不同剂量的TWP进行共同孵育;同时分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞,用脂多糖(LPS)激活以获得细胞模型,同样予TWP进行共同孵育。分别以间接MTT法和RT-PCR法在蛋白质水平和基因水平检测该药物影响激活状态巨噬细胞分泌TNF-α含量的变化。结果 EM患者腹腔液中TNF-α含量显著高于非EM妇女,在4～24 h后TWP(6.25～100μg/L)显著抑制了TNF-α的分泌。结论 TWP在蛋白质和基因水平均能有效抑制激活巨噬细胞分泌TNF-α。     

当归醇沉物及其中性组份体外对巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1的影响

目的观察当归醇沉物(ESA)及其中性组分(ESA-1)体外对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1的影响.方法L929细胞株细胞毒法测TNF-α;L929细胞增殖法测IL-1.结果ESA、ESA-1与小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)共同培养可显著增强其TNF-α、IL-1的分泌.在5～20μg/mL浓度范围,ESA的这种作用呈剂量依赖性;ESA-1虽有明显的作用,但未表现出剂量依赖.结论当归醇沉物及其中性组分体外可增强小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1.     

紫菀酮对脂多糖诱导巨噬细胞释放IL-1β, TNF-α及NO的影响

目的:探讨紫菀酮的体外抗炎作用及其机制分析。方法:利用脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎症反应模型,通过紫菀酮对其进行干预,采用Sun BioTMAm-Blue细胞增殖与活性检测试剂检测紫菀酮对RAW264.7巨噬细胞增殖的影响;Griess法检测细胞培养上清液中NO含量;ELISA法检测细胞培养上清液中白细胞介素~(-1)β(IL~(-1)β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:与空白组比较,50μmol·L~(-1)紫菀酮组RAW264.7巨噬细胞的增殖抑制率明显高于空白组,0.1,1,10,20,30μmol·L~(-1)紫菀酮组RAW264.7巨噬细胞的增殖抑制率无显著性差异;10,30μmol·L~(-1)紫菀酮组NO释放量均显著低于脂多糖组;1,10,30μmol·L~(-1)紫菀酮组IL~(-1)β和TNF-α释放量均显著低于脂多糖组。结论:紫菀酮呈剂量依赖性抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性细胞因子IL~(-1)β,TNF-α及NO的释放,具有体外抗炎作用。     

韩国五加中的海松烷型二萜类成分及其对TNF-α和IL-8分泌的抑制作用

采用反相制备高效液相色谱和重复柱层析,从韩国五加(Acanthopanax koreanum)中分离得到1个新的海松烷型化合物(1)和3个已知化合物(2～4),并检测了其对TNF-a和IL-8分泌的抑制作用。 分离和提取:韩国五加根(10kg)用甲醇回流提取3次,历时15h,得到黑色固体,将其混悬于水中,用二氯甲烷萃取。溶于二氯甲烷的部分真空浓缩后上硅胶柱层析,以己烷-乙酸乙酯梯度洗脱,最后以甲醇洗脱 ,得到5个组分(SR-23-A～E)。SR-23-D上硅胶柱层析,以己烷-乙酸乙酯洗脱得到9个组分(SR-37-A～I)。SR-37-H上硅胶柱层析,以氯仿-丙酮洗脱得到3个组分(SR-54-…     

仙茅提取物对小鼠巨噬细胞RAW264.7的诱导活化作用

目的:研究仙茅提取物对小鼠巨噬细胞株RAW264.7的诱导活化作用。方法:应用水提醇沉方式制备仙茅提取物,其中多糖含量为50%。将不同浓度的仙茅提取物(31.25~500μg/ml)作用于RAW264.7细胞36h后,采用流式细胞术检测膜表面模式识别受体TLR2/4和MR的表达;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞i NOS和TNF-α的mRNA表达水平;收集培养上清液,用ELISA法测定中TNF-α含量,Griess法检测NO的含量。结果:仙茅提取物的剂量在500μg/ml以下时,对细胞增殖影响不明显;与空白对照组相比,浓度高于62.5μg/ml的仙茅提取物刺激RAW264.7细胞可使TNF-a、i NOS mRNA表达量显著升高,促进细胞分泌活性因子TNF-α和NO;仙茅提取物可以有效增加RAW264.7细胞表面的模式识别受体的表达,TLR2由空白组的31.25±5.19上升到39.82±4.53,TLR4由空白组的6.41±2.44上升到24.34±5.22,MR由空白组的7.35±3.54上升到36.24±9.53,且均呈现剂量-反应关系。结论:仙茅提取物可能通过影响巨噬细胞膜表面部分模式识别受体的表达使TNF-α和NO的分泌量增多,诱导巨噬细胞活化,具有潜在的免疫调节价值,此作用与仙茅传统用于治疗虚劳内伤、现代用于免疫调节的临床应用有关。     

绞股蓝总黄酮对缺氧/复氧心肌细胞TNF-α浓度,Fas/FasL蛋白表达的影响

目的：探讨绞股蓝总黄酮(TFG)对培养的缺氧/复氧(H/R)乳鼠心肌细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度,凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法：利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立心肌细胞H/R模型,实验分6组：①对照组；②H/R组；③15 mg·L^-1 TFG+H/R组；④45 mg·L^-1 TFG+H/R组；⑤105 mg·L^-1 TFG+H/R组；⑥105 mg·L^-1 TFG对照组。用ELISA法测定心肌细胞TNF-α,免疫组化法检测Fas/FasL蛋白表达。结果：H/R后,心肌细胞Fas/FasL蛋白阳性表达指数(PEI)显著高于对照,TFG组PEI 低于(H/R)组；TFG能抑制心肌细胞产生TNF-α。结论：H/R时凋亡相关基因Fas及其配体FasL蛋白表达增强,TFG对H/R心肌具有保护作用,其机制与减少TNF-α的生成,下调Fas/FasL蛋白表达,减少凋亡有关。     

短葶山麦冬多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的观察短葶山麦冬多糖(LMP)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞用不同质量浓度LMP(62.5、125、250、500μg/m L)共同培养,检测巨噬细胞吞噬中性红试验,趋化作用和分泌TNF-α、IL-6的功能。结果不同质量浓度的LMP能显著增强巨噬细胞吞噬能力和趋化作用,促进TNF-α、IL-6释放。结论 LMP能增强小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能。     

前列爽颗粒对慢性前列腺炎模型大鼠血清中IL-10,TNF-α含量的影响

目的:观察前列爽颗粒对慢性前列腺炎(CAP)模型大鼠血清,白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TN F-α)表达的影响,并初步探讨其作用机制.方法:将60只SD大鼠随机分为正常对照组、CAP模型组、前列回春胶囊组(0.18 g·kg-1)、前列爽低剂量组(0.79 g·kg-1)、前列爽中剂量组(1.58 g·kg-1)、前列爽高剂量组(3.15 g·kg-1),每组10只.观察大鼠前列腺病理形态学改变,ELISA法检测IL-10,TNF-α.结果:CAP模型大鼠的组织病理学改变符合CAP的特点,治疗组炎症明显消退.模型组血清中IL-10,TNF-α水平明显高于正常组(P＜0.05),前列回春胶囊组、前列爽颗粒中、高剂量组血清TNF-α水平明显低于模型组(P＜0.05),前列回春胶囊组、前列爽颗粒中、高剂量组,血清中IL-10水平明显升高.结论:前列爽颗粒可通过调节抗炎/促炎因子分泌而发挥治疗CAP的作用.     

经口感染白色念珠菌对脾虚小鼠巨噬细胞吞噬功能和血清中TNF-α的影响

目的：研究脾虚小鼠经口感染白色念珠菌后,血清中TNF-α含量以及腹腔中巨噬细胞吞噬功能的变化情况。方法：将小鼠经口感染白色念珠菌,观察不同状态下的小鼠感染白色念珠菌后机体巨噬细胞功能及血清中TNF-α的变化情况。结果：与正常对照组比较,正常加白色念珠菌和脾虚加白色念珠菌组吞噬百分率均明显降低（P〈0.01）,脾虚组也有降低（P〈0.05）;血清中TNF-α含量的测定结果显示,正常对照组与脾虚模型组、正常加白色念珠菌组和脾虚加白色念珠菌组相比,均高于其他3组（P〈0.01）,与脾虚模型组比较,正常加白色念珠菌组高于该组（P〈0.01）,而脾虚加白色念珠菌组低于该组（P〈0.05）。结论：经口感染白色念珠菌的脾虚小鼠巨噬细胞吞噬功能和血清中TNF—a含量均明显低于正常对照组和脾虚对照组。     

石斛合剂对糖尿病肾病小鼠TNF-α及IL-6表达的影响

目的:观察石斛合剂对db/db糖尿病小鼠肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)表达水平的影响。方法:选用11~12周龄雄性db/db小鼠,按空腹血糖及体质量随机分成模型组、格列吡嗪治疗组、石斛合剂低剂量组和高剂量组,db/m小鼠为正常组。连续灌胃给药8周。检测小鼠体质量及24 h尿蛋白定量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理形态改变;通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清及肾组织TNF-α,IL-6的含量;分别应用免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测肾组织中TNF-α,IL-6蛋白的表达。结果:石斛合剂能明显降低db/db小鼠的体质量(P0.05,P0.01)及24 h尿蛋白定量(P0.05,P0.01)。HE染色结果显示模型组小鼠肾小球体积增大,系膜基质增多,系膜区增宽,肾小管上皮细胞空泡变性;与模型组相比,各治疗组肾小球基底膜变薄,系膜细胞增生情况减轻,细胞外基质减少,肾小管结构基本恢复正常。免疫组织化学,ELISA和Western bolt结果表明,与正常组比较,模型组小鼠TNF-α,IL-6的表达均显著增加(P0.01);与模型组比较,各治疗组TNF-α,IL-6的表达均明显减少(P0.05,P0.01),但仍高于正常组。结论:石斛合剂可能通过下调TNF-α及IL-6的表达减轻肾组织内的炎症反应,改善db/db小鼠的肾脏损害,从而延缓DN的进展。     

复方乌骨藤胶囊对Lewis肺癌小鼠TNF-α,NK活性的影响

目的:观察复方乌骨藤胶囊对Lewis肺癌小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和自然杀伤细胞(NK)活性的影响。方法:取C57 BL/6雄性小鼠50只,常规接种Lewis肺癌,24 h内随机分为5组:荷瘤对照组、环磷酰胺组(CTX,0.02 g.kg-1)和复方乌骨藤胶囊高、中、低剂量组(2.25,1.125,0.563 g.kg-1)。每天ig给药1次,连续给药12 d。末次给药后次日,处死小鼠,剥离肿瘤,称重后计算抑瘤率,取脾脏制备脾细胞悬液,检测TNF-α,NK的活性。结果:复方乌骨藤胶囊高、中剂量组抑瘤率分别达到31.43%,22.38%;与荷瘤对照组TNF-α细胞毒指数(45.79±7.01)%相比,复方乌骨藤胶囊2.25,1.125 g.kg-1组的TNF-α细胞毒指数(60.48%±8.29)%,(56.00±9.72)%,显著提高(P<0.005,P<0.01);与荷瘤对照组NK细胞杀伤率(10.37±21.33)%相比,复方乌骨藤胶囊高、中、低剂量组的NK细胞杀伤率(32.23±24.03)%,(35.22±12.67)%,(26.70±12.11)%,显著提高(P<0.05,P<0.01);结论:复方乌骨藤胶囊对Lewis肺癌小鼠具有抑瘤作用,并能够增强其TNF-α和NK细胞活性,从而提高荷瘤小鼠的免疫功能。     

猫豆提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

[目的]研究猫豆提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用,并筛选出相关化合物。[方法]用系统溶剂提取法制备猫豆根、茎、叶、花、豆和豆荚的提取物,分别进行α-葡萄糖苷酶抑制实验,确定活性部位后,用液相-高分辨质谱分析各提取物中的化学成分,筛选出在活性部位高表达的化合物。[结果]猫豆根的正丁醇提取部位,叶的水提物Ⅰ和甲醇、正丁醇、氯仿提取部位,豆荚的甲醇、正丁醇和氯仿提取部位,对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度（IC50）均小于10μg/ml,对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用。经质谱分析筛选出13个高表达的化合物：山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷、山柰酚-3-O-鼠李半乳糖苷、7-羟基-6,4’-二甲氧基异黄酮、大豆异黄酮、花旗松素、柚皮苷查尔酮、高丽槐素、mucunone A、3-hydroxy-2-methyl-2,3-dihydrobenzofuran-4-carboxylic acid、新喋呤、3-甲基吲哚、2’-hydroxy-biochanin A、丁二酸,这些化合物多分布在正丁醇、甲醇及氯仿提取部位。[结论]从猫豆提取物中共筛选出13个对α-葡萄糖苷酶活性具有明显抑制作用的化合物,可...     

4种归肺经中药对肺热证小鼠TNF-α,IL-1β表达的影响

目的：探讨麻黄、干姜、黄芩、桑白皮4味归肺经中药对小鼠肺热证的影响,并初步揭示其作用机制。方法：将100只昆明种小鼠随机分为正常对照组,模型组,麻黄、干姜、黄芩、桑白皮组（20,10 g·kg^-1）,每组10只,灌胃给药7 d,每天1次,于实验第4,5,6天鼻腔滴入肺炎链球菌菌液建立小鼠肺热证模型,病理学观察肺组织形态变化,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,免疫组化法测定肺组织TNF-α,白介素-1β（IL-1β）蛋白表达。结果：与正常组比较,模型组肺组织实变（P<0.001）,血清TNF-α含量升高（P<0.01）,肺组织TNF-α,IL-1β蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较,麻黄低剂量组,干姜高、低剂量组,黄芩高剂量组肺组织病理有明显改善（P<0.01,P<0.05）;血清TNF-α含量降低,除干姜高剂量组、黄芩低剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;肺组织TNF-α,IL-1β蛋白表达降低,其中,TNF-α表达除干姜低剂量组、桑白皮高剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）,IL-1β表达除麻黄低剂量组、桑白皮低剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。结论：麻黄、干姜、黄芩、桑白皮可以干预肺热证,抑制TNF-α,IL-1β炎症因子表达可能是其减轻小鼠肺热证肺组织损伤的主要途径。     

黄芩苷对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的观察黄芩苷对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫相关因子释放的影响。方法从BALB/c小鼠的腹腔分离巨噬细胞进行原代细胞培养,往细胞中加入不同剂量的黄芩苷,检测腹腔巨噬细胞释放一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白介素1(IL-1)的含量。结果黄芩苷能够显著的减少在LPS刺激下的小鼠腹腔巨噬细胞NO、TNF-α和IL-1的释放,与对照组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩苷能够减少腹腔巨噬细胞的免疫相关因子的释放,可能是其抗炎免疫作用的分子机制。     

赛北紫堇化学成分及其对肝癌细胞的增殖抑制作用

目的:对赛北紫堇90%乙醇提取物化学成分进行系统研究,并对分离得到的化合物进行体外细胞增殖抑制作用评价。方法:采用正相硅胶,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20),ODS柱色谱以及半制备高效液相色谱等分离技术进行分离纯化,运用NMR,MS等波谱方法以及理化性质结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定,并采用四甲基唑蓝(MTT)法测定了分离得到的13个化合物对人肝癌HepG2,SMMC-7721细胞的体外抑制活性。结果:从赛北紫堇90%乙醇提取物中分离并鉴定了13个化合物,其结构分别为5-羟基吡啶-2-甲酸乙酯(1),元胡内酯(2),3,4-顺-3,4-二羟基-β-紫罗兰酮(3),megastigmane(4),9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(5),blumenol A(6),吲哚-3-羧酸(7),1-methyl-[1,2,4]triazolo[4,3-b][1,2,4]triazin-7-one(8),腺嘌呤(9),烟酰胺(10),2-羟甲基-5-羟基吡啶(11),腺嘌呤核苷(12),β-胡萝卜苷(13)。细胞增殖抑制作用显示化合物3对人肝癌HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50)为24. 7μmol·L~(-1)(阳性药顺铂IC50为4. 8μmol·L~(-1)),化合物4对人肝癌SMMC-7721细胞的IC50为13. 8μmol·L~(-1)(阳性药顺铂IC50为5. 4μmol·L~(-1))。结论:其中化合物1为一新的天然产物,3～8为首次从紫堇属中分离得到,化合物2,9～12为首次从赛北紫堇中分离得到。化合物3对人肝癌HepG2具有较弱的抑制活性,化合物4对人肝癌SMMC-7721具有中等的抑制活性,其他化合物对上述两种肝癌细胞均没有明显的抑制活性。     

心安颗粒对病毒性心肌炎小鼠IL-6,TNF-α及病毒复制的影响

目的:研究心安颗粒对病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠的柯萨奇B3病毒(CVB3)mRNA,白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:将60只健康雄性BALB/c小鼠随机分为6组,空白组、模型组、利巴韦林组(阳性药物,0.02 g·kg-1·d-1)和心安颗粒高、中、低剂量组(12,6,3 g·kg-1·d-1),其中空白组腹腔接种0.15 m L生理盐水,其余5组均腹腔接种1×10-8TCID50·m L-1CVB3 Nancy标准病毒液0.15 m L,进行模型制备。造模2 h后对各给药组小鼠灌胃(ig)相应药物,空白组和模型组小鼠ig生理盐水,连续7 d。7 d后小鼠进行实验,观察小鼠心肌组织病理变化,并进行评分;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌组织中CVB3 mRNA水平和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测TNF-α,IL-6蛋白表达。结果:给药7 d后,与空白组比较,模型组心肌细胞排列紊乱,出现间质水肿,可见大量炎症细胞浸润,发生明显病变,心肌病变评分和心肌组织中CVB3 mRNA表达水平和IL-6,TNF-α蛋白水平明显升高(P0.05);与模型组比较,各给药组小鼠心肌组织病变得到改善,病理评分和心肌组织中CVB3 mRNA和TNF-α,IL-6蛋白水平明显降低(P0.05)。结论:心安颗粒可明显下调病毒性心肌炎模型小鼠心肌组织中CVB3 mRNA和TNF-α,IL-6蛋白水平的表达,推测是其防治病毒性心肌炎的作用机制之一。