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相似文献
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1.
采用地高辛(Digoxin Dig)标记神经递质受体NMDAR-L cRNA探针技术进行原位杂交,研究了Wistar新生大鼠脑神经细胞NMDAR-L的基因表达。光学显微镜观察结果显示,大脑皮层、海马等区有明显的NMDAR-L mRNA表达,胞浆着蓝色,胞核不着色,背景浅谈,反差显著。实验结果表明地高辛标记cRNA探针能快速、准确地检测出NMDAR-L mRNA,为进一步研究这一拟受体在脑中表达和分  相似文献   

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半抗原DIG-ddUTP与DNA连接,以此作为探针可以与其相识别的蛋白质相结合,再用带有碱性磷酸的抗体处理,形成的复合物可作用于底物CSPD,使其产生萤光,而被x光片记录下来。  相似文献   

4.
本文利用RT-PCR和PCR技术制备地高辛标记的谷胱甘肽过氧化物酶(ATGPX3)cDNA探针,分别进行DNA和RNA斑点和印迹杂交分析.通过调整杂交液组分的浓度和增加10%硫酸葡聚糖的方法,改进杂交反应.实验结果表明,改良的方法不仅提高了杂交效率,而且明显检测到RNA杂交印迹反应.另外,利用地高辛标记cDNA探针技术也检测到了植物激素ABA诱导的ATGPX3基因的表达,同时证明了该方法可以用来检测植物基因的表达.  相似文献   

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以甘蔗SPS基因选择性剪接保留的内含子6,7,8片段为靶序列,利用PCR扩增技术分别制备出3种地高辛标记的SPS内含子探针:SPS-intron 6探针167 bp,SPS-intron 7探针93 bp和SPS-intron8探针175 bp,并通过斑点杂交实验表明这3种探针灵敏度高,都能检测到pg级的靶核酸,且特异性好,阴性对照实验显示无杂交信号.  相似文献   

7.
荧光原位杂交技术及其在微生物生态学中的应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
介绍了荧光原位杂交技术的基本原理,讨论了该技术的操作程序及其在微生物生态学领域的应用。  相似文献   

8.
基因组原位杂交中探针长度的优化   总被引:5,自引:0,他引:5  
本文对普通野生稻Oryza rufipogon DNA的提取、纯化到最后将DNA剪切成300-500bp的整个过程进行了阐述.同时因为鲑鱼精DNA的G、C含量比较均匀,具有一定的剪切代表性,也对其进行了长度剪切,用来和普通野生稻Oryza rufipogon DNA进行比较,以得出其煮沸时间和剪切长度的关系是否具有普遍性,结果初步验证了普通野生稻Oryza rufipogon DNA的煮沸时间和长度变化的关系与鲑鱼精DNA的煮沸时间和长度变化的关系有很大差别,说明普通野生稻Oryza rutlpogon DNA的煮沸时间和长度变化的关系没有普遍性,而只能说明普通野生稻Oryza rufipogon DNA本身的特性。  相似文献   

9.
荧光原位杂交技术及其应用   总被引:14,自引:0,他引:14  
荧光原位杂交技术是一门新兴的分子细胞遗传学技术,广泛应用于基因定位及病毒感染、DNA物理图谱的构建、产前诊断等许多领域。本文对其基本原理和近年来的应用进行了阐述。  相似文献   

10.
地高辛标记物及其应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
本文介绍了一种新型化合物—地高辛配基-11dUTP的化学合成及其应用。这种通过地高辛配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(Dig-dUTP),随机引物插入结合而使DNA被标记,然后用免疫酶化学检测等新技术,测定靶DNA,其灵敏度可以和同位素标记探针媲美,因此,有广阔的应用前景。  相似文献   

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应用地高辛标记的PCR-ELISA技术快速检测转基因水稻   总被引:10,自引:0,他引:10  
应用地高辛标记的PcR—ELISA(Dig-PcR—ELISA)技术进行转基因水稻检测研究。针对转基因水稻中普遍存在的花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子(p35S)、胭脂碱合成酶(NOS)终止子(Thos),筛选标记潮霉素磷酸转移酶基因(hpt,hph)、β—葡萄糖苷酸酶基因(gus)、抗草丁膦除草剂基因(bar),建立Dig—PcR—ELISA检测方法;能进行半定量检测,敏感性试验表明,Dig—ELISA检测比常规电泳检测可提高敏感性达1000倍,可检测含量达0.1%的GM0样品。全过程可在24h内完成。  相似文献   

12.
用PCR法成功制备了DIG标记探针,探针长度为547bp,探针的产量为21.6mg/μL。此探针与随机引物合成探针检测样品灵敏度相近。用此探针核酸斑点杂交法检测了54尾中国对虾。结果表明:此探针在对白斑综合症病毒的检测、对虾暴发性流行病的诊断等方面具有很高的应用价值。  相似文献   

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该文讨论了近场光学的基本原理和非辐射场探测分辨率,并着重研究了近场扫描光纤探针的辐射机理及其在纳米生物领域的应用.  相似文献   

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原位杂交技术及其在动物遗传育种中的应用   总被引:8,自引:0,他引:8  
在简要介绍原位杂交技术的基础上,论述了该技术在基因定位、基因图普的构建、性别鉴定、转基因等动物遗传育种领域中应用现状,并对其进行了展望。  相似文献   

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本文介绍了非放射性原位杂交(NISH)的基本原理,并对其在医学研究上的应用进行了初步概述。  相似文献   

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用Biotin-11-dUTP进行缺口翻译缺备生物素标记的人β-珠蛋白基因探针并用该探针进行了斑点杂交,硝酸纤维素膜印迹杂交 及琼脂糖凝胶直接染交方法学比较,结果表明:经ABAP法显色后,上述三种杂交法中,DNA最低可检测量依次为5,10,50pg,以斑点杂交法最灵敏。  相似文献   

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原位杂交技术在哺乳类及鱼类基因定位研究中有应用。作者在此基础上进行改进,报告了使用染色体原位杂交技术进行两栖类基因定位的方法。本文还对该方法的意义、应用前景及存在问题进行了讨论。  相似文献   

19.
应用显微切割技术获得赤麂的Y2单条染色体,经LA-PCR(linker-adaptor PCR)扩增后用DIG标记制备探针,然后用Southern blot杂交法对所制备的探针进行验证并对毛冠鹿的中期核型进行原位杂交.结果表明:用该法制备的涂染探针是成功的,原位杂交也获得了阳性结果,可以初步验证毛冠鹿中的Y染色体.  相似文献   

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