2.135钙敏感钾电流参与调节C型钠尿肽对豚鼠胃窦环行肌舒张作用

目的研究钠尿肽对胃动力的调节作用. 方法本实验用四道生理记录仪利用传统的全细胞模式的膜片钳技术记录了离体豚鼠胃窦环行肌自发性收缩活动,并且观察了CNP对其自发性收缩活动的影响.     

花生四烯酸抑制豚鼠胃窦环行肌细胞容积敏感氯电流

利用全细胞膜片钳技术 ,在用胶原酶急性分离的豚鼠胃窦环行肌细胞上观察了外源性花生四烯酸 (arachidonicacid ,AA)及其它不饱和脂肪酸对容积敏感氯电流 (volume sensitivechloridecurrent,VSCC)的影响。细胞膜电位钳制在- 6 0mV条件下 ,低渗性细胞膨胀激活VSCC。当给予按 2 0mV间隔的去极化阶跃性方波刺激时 ,VSCC的电流 电压曲线具有外向性整流的特点 ,并表现出去极化到 +40mV以上时呈现时间依赖性衰减的特点。AA呈齐量依赖性地抑制VSCC ,而对VSCC的随时间衰减部分的抑制效应更明显。其它不饱和脂肪酸 ,如含有 2个双键的亚油酸 (Linoleicacid,LA)、含有 1个双键的油酸 (Oleicacid ,OA)也抑制VSCC ,抑制强度顺序为AA >LA >OA ,但饱和脂肪酸 (stearicacid,SA)对VSCC无抑制作用。提示外源性不饱和脂肪酸抑制VSCC ,其抑制效应在VSCC的随时间衰减部分更明显。外源性不饱和脂肪酸对VSCC的抑制作用可能与脂肪酸链中的双键数目有关     

不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流的影响

目的　不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流的影响。方法　本实验在急性分离的豚鼠胃窦平滑肌上 ,利用膜片钳技术的全细胞记录法观察了外源性不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流(IK(Ca) )的影响 ,及其作用机制。结果　结果发现AA明显增强豚鼠胃窦平滑肌细胞上的IK(Ca) ,并存在量效关系 ;当AA浓度在 2、5、10 μmol L ,膜电位去极化至 6 0mV时 ,分别使IK(Ca) 增加 15 9%± 3 6 %、31 9%± 7 0 %、4 6 3%± 10 4。另一种不饱和脂肪酸LA也增强IK(Ca) ,而且也存在量效关系 ;当LA浓度在 5、10、2 0 μmol L ,…     

2.130不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流的影响

目的不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流的影响. 方法本实验在急性分离的豚鼠胃窦平滑肌上,利用膜片钳技术的全细胞记录法观察了外源性不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流(IK(Ca))的影响,及其作用机制.     

微丝对豚鼠胃窦平滑肌细胞钾电流的影响

目的　观察微丝对豚鼠胃窦环行平滑肌细胞钾电流的影响 ,并且探讨肌动蛋白微丝是否参与低渗牵张增强豚鼠胃窦环行平滑肌细胞钾电流的过程。方法　本实验用Ⅱ型胶原酶急性分离单个豚鼠胃窦部环行平滑肌细胞 ,采用传统全细胞模式的膜片钳技术 ,以微丝的解聚剂细胞松弛素B(Cytochala sin -B)和微丝的稳定剂鬼笔环肽 (Phalloidin)作为工具药分别研究了在等渗和低渗条件下 ,微丝与钾电流之间的关系。统计学处理采用同体对照t检验和异体对照t检验 ,所有统计结果皆以均数±标准误来表示。结果　细胞松弛素B明显增强钙激活钾电流(IK(Ca) )和延迟…     

2.136微丝对豚鼠胃窦平滑肌细胞钾电流的影响

目的观察微丝对豚鼠胃窦环行平滑肌细胞钾电流的影响,并且探讨肌动蛋白微丝是否参与低渗牵张增强豚鼠胃窦环行平滑肌细胞钾电流的过程.     

温度对豚鼠心肌细胞快激活延迟整流钾电流的调节

正快激活延迟整流钾电流(Ikr)是心肌细胞复极化的主要电流,抑制Ikr可使动作电位时程延长,引起早后除极,致心律失常的发生。编码人类心肌细胞Ikrα亚单位的基因为h ERG(human ether-a-go-go-related gene,或KCNH2)[1]。该基因突变可导致遗传性长QT综合征-2 LQTS-2,而许多抗心律失常药物及非抗心律失常药物对h ERG通道的过度抑制     

豚鼠气道平滑肌ATP敏感钾通道电流的动力学特性

气道平滑肌的主要作用是调节气道的紧张度和口径,而钾通道开放剂可经ATP敏感钾通道(ATP-sensitive potassiumchannel,KATP通道)使气道平滑肌松弛,此作用能被KATP通道特异性阻断剂优降糖阻断[1]。     

钙敏感钾通道参与川芎嗪拮抗链霉素耳毒性作用及可能机制

目的探讨川芎嗪拮抗链霉素耳毒性损伤机制。方法将30只豚鼠随机分为三组,对照组(每日腹腔注射生理盐水2.5 ml/kg),链霉素组(SM组,每日腹腔注射硫酸链霉素450mg/kg,同时在对侧腹腔注射生理盐水2.5 ml/kg),川芎嗪+链霉素组(TMP+SM组,每日腹腔注射川芎嗪注射液100mg/kg,同时在对侧腹腔注射硫酸链霉素450 mg/kg)。各组皆连续注射10 d,并于实验前后进行听性脑干电位(ABR)监测。10 d后处死并制备耳蜗标本,进行耳蜗基底膜铺片、透射电镜观察以及BKCa免疫组化染色。结果链霉素组ABR阈值明显高于对照组,而TMP+SM组明显低于链霉素组(P0.01)。SM组外毛细胞(OHC)胞膜有断裂,细胞质溶解,线粒体数目减少、形态模糊、部分嵴缺损,细胞核有异染色质边集。TMP+SM组OHC损伤程度显著轻于SM组。SM组BKCa表达水平明显比对照组低,而TMP+SM组明显高于SM组。结论川芎嗪拮抗链霉素耳毒性损伤可能与上调BKCa表达相关。     

血管紧张素Ⅱ及卡托普利对豚鼠心肌细胞L-型钙电流及钠电流的作用

采用膜片钳全细胞记录方式研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及卡托普利对L-型钙电流及钠电流最大峰电流的作甩。AngⅡ组L-型钙最大峰电流较对照状态明显增加,电压—电流关系曲线形状无明显变化．卡托普利组灌注3,5min,L-型钙最大峰电流较对照状态明显降低;卡托普利 AngⅡ组灌注3,5min,L-型钙最大峰电流较对照状态也明显降低;卡托普利灌注min及3min,钠电流与对照状态比较均显著性地降低．血管紧张素Ⅱ具有电压依赖性地增加L-型钙电流的作用,卡托普利具有电压依赖性地降低L-型钙电流,降低钠电流的峰电流,抑制血管紧张素Ⅱ介导的细胞内钙超载及抑制钙依赖的瞬时内向电流是其发挥抗心律失常的主要机制。     

冬虫夏草对豚鼠心室肌细胞胞浆钙浓度及L-型钙电流的影响

目的 :冬虫夏草 (CodycepsSinensis ,CS)为麦角科真菌 ,是我国传统的名贵药材。它已被研究证明具有抗多种心律失常的作用 ,尤其适用于难治性缓慢型心律失常、传导阻滞。本实验旨在研究冬虫夏草水提液对豚鼠单个心室肌细胞内钙信号及L型钙电流的影响 ,从而探讨其抗心律失常的机制。方法 :急性分离 (使用胶原酶Ⅱ )豚鼠单个心室肌细胞 ,将细胞以Fluo - 3/AM做荧光标记 ,在激光扫描共聚焦显微镜timeseries程序下对细胞XY平面进行扫描 ,以荧光强度值变化表示 [Ca2 + ]i变化。进一步应用全细胞膜片钳技术测定单个心室肌细胞L -型钙电流 ,实…     

G-CSF对豚鼠单个缺血心房肌细胞钙、钠、钾电流的影响

目的:采用膜片钳全细胞记录方法,观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)急性干预对分离的豚鼠单个缺血心房肌细胞钙、钠、钾电流的影响。方法:使用酶解方法获得豚鼠单个心房肌细胞,在缺血缺氧条件下,采用全细胞膜片钳技术观察记录不同浓度G-CSF急性干预对钙通道电流-电压曲线、激活曲线、失活曲线,钠通道电流-电压曲线、激活曲线、失活曲线、静态失活曲线,延迟整流钾通道及其快成分、慢成分电流-电压曲线的影响。结果:随G-CSF浓度的增加,缺血心房肌细胞膜L型钙通道电流较缺血对照组有明显增大。当G-CSF浓度超过100μg/kg后,L型钙通道电流的增强维持于同一水平。当给予G-CSF浓度为300μg/kg时最大激活电压发生改变,较前有所增加。激活曲线与失活曲线未见明显改变。不同浓度G-CSF对缺血心房肌细胞膜钠离子通道电流无明显影响。G-CSF干预缺血心房肌细胞膜延迟整流钾电流未见明显改变,但延迟整流钾电流快成分在G-CSF 100μg/kg干预后明显增加,而延迟整流钾电流慢成分未见明显改变。结论:G-CSF对于缺血心房肌细胞部分通道的作用影响基本为非电压依赖性,但具有浓度依赖性,可能减少缺血心房心律失常的发生率。     

血管内皮舒张因子对阻力血管平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

本实验用生物测定方法的原理,在膜片钳技术(patch clamp technique)中引入了微量灌流系统,直接观察了由乙酰胆碱(Ach,10-~(6)M)激发大鼠主动脉内皮细胞产生的血管内皮舒张因子[Endothelium derired relaxing factor(s),EDRF(s)]对大鼠肠系膜动脉阻力血管平滑肌膜钙激活钾通道的作用。 阻力血管平滑肌取自成年Wistar大鼠肠系膜动脉A_4、A_5段分支,依酶法先将其置于无钙Kreb's液中剪碎松散,再放入膠原酶液中温育消化,分离得单个平滑肌细胞供膜片钳制用。从同一只大鼠取出主动脉,纵行部开血管剪成大小相当的具有或擦去血管内皮的肌条放入标本池内。前者于加Ach后作为EDRF(s)的供者,后者则作为无EDRF(s)的对照。特     

川芎嗪对慢性缺氧豚鼠右室心肌细胞钾电流的影响

目的： 探讨慢性缺氧及川芎嗪长期应用对豚鼠右室心肌细胞钾电流的影响。方法：采用全细胞膜片钳技术分别记录并比较正常对照组、缺氧组、药物（ 川芎嗪） 治疗组豚鼠单个右室心肌细胞的膜电容、延迟整流钾电流峰值和电流－ 电压关系曲线及内向整流钾电流－ 电压关系曲线。结果：上述３ 组细胞膜电容分别为（１５４ ．９ ±１６ ．７） ｐＦ、（１７７ ．３ ±１４ ．３）ｐＦ、（１６０ ．５ ±１３ ．９）ｐＦ,其中缺氧组显著大于另两组（ Ｐ＜ ０－０１） ;延迟整流钾电流峰值分别为（１ ．１３ ±０ ．２９）ｎＡ、（０ ．７９ ±０ ．２１） ｎＡ、（１ ．０３ ±０ ．２３） ｎＡ,其中缺氧组显著低于另两组（ Ｐ＜ ０－０５） ;在－ ２０ ｍ Ｖ～＋ ６０ ｍ Ｖ,慢性缺氧组延迟整流钾电流密度较另两组显著下降（ Ｐ＜ ０－０５） 。３ 组之间的内向整流钾电流无显著差异（ Ｐ＞ ０－０５） 。结论： 慢性缺氧不改变豚鼠右室心肌细胞内向整流钾电流,但能使细胞膜电容增加,延迟整流钾电流幅度和电流密度下降;长期应用川芎嗪能在一定程度上减轻这些变化     

血小板活化因子对豚鼠心室肌细胞钾电流及动作电位的影响

 目的：研究血小板活化因子(PAF)对豚鼠心室肌细胞钾电流及动作电位的影响。 方法:应用全细胞膜片钳技术，记录豚鼠心室肌细胞动作电位及钾电流(I_K 与I_K1)。 结果:当电极内液ATP浓度为5 mmol/L，1 μmol/L PAF使APD₉₀由对照的(225.8±23.3)ms延长至(352.8±29.8)ms(n=5, P<0.05)；使I_K尾电流在指令电压 +30 mV 时由对照的(173.5±16.7)pA降为(152.1±11.5)pA(P<0.05, n=4)；使I_K1在指令电压 -120 mV 时从(-6.1±1.3)nA降为(-5.6±1.1)nA(P<0.05, n=5)；当电极内液ATP 为0 mmol/L，APD₉₀明显缩短，1 μmol/L PAF使APD₉₀由对照的(153.0±24.6)ms缩短为(88.2±19.4)ms (n=5, P<0.01)，而用1 μmol/L格列本脲 ( I_KATP特异性阻滞剂)预处理后，恢复了PAF可显著延长动作电位时程的作用。 结论: PAF使缺血区K_ATP开放，动作电位时程缩短，却可抑制正常区I_K 与I_K1，使动作电位延长，从而放大了缺血区与正常区的不均一性，这可能与缺血时心律失常的发生有关。     

活性氧对豚鼠心室肌细胞不同钾通道离子电流的影响

目的：揭示年头自由基导致跨膜电位变化的离子电流基础。方法：采用全细胞膜片钳技术,观察了Ｈ２Ｏ２（１ｍｍｏｌ／Ｌ）对豚鼠单个心室肌细胞不同钾通道影响。结果：Ｈ２Ｏ２使习心肌细胞静息电位（ＲＰ）降低,动作电位时程（ＡＰＤ）显著缩短的同时,明显抑制超极化时的内向整流钾电流（Ｉｋ１）,致（Ｉｋ１）正常呈Ｎ字型Ｉ－Ｖ曲 成一条斜线;增强延迟整流钾电流（ＩＫ）的快组分（ＩＫＲ）和慢组分（ＩＫＡ）,尤其ＩＫＲ２     

缓激肽对胶质瘤血瘤屏障体外模型中钙激活钾电流的作用

目的建立胶质瘤血瘤屏障体外模型,研究缓激肽(BK)对胶质瘤血瘤屏障钙激活钾电流(Ikca)的作用,探讨BK开通血瘤屏障的机制。方法条件培养和共培养,膜片钳全细胞记录。结果条件培养的脑微血管内皮细胞(BMECs)形态无明显变化,胶质瘤C6细胞之间相互接触紧密。共培养的BMECs和C6细胞各自聚集,之间形成界面,1μmol.L-1缓激肽使BMECs和C6细胞界面内钙激活钾电流下降。结论1μmol.L-1的缓激肽抑制部分血瘤屏障体外模型BMECs和C6细胞的钙激活钾电流。     

四逆汤对过氧化氢所致心肌细胞L型钙电流异常的作用

目的探讨四逆汤对氧自由基所致心肌细胞L型钙电流异常的作用。方法用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流,首先观察5mmol/LH2O2对心肌细胞ICa,L的改变,然后观察预先用四逆汤含药血清孵育30min后5mmol/LH2O2对心肌细胞ICa,L的影响。结果在H2O2作用下,大鼠心室肌细胞ICa,L电流密度增加,电流-电压曲线显著下移,稳态失活曲线明显左移。四逆汤含药血清对离子电流无直接影响,但可以减轻H2O2所引起的稳态失活曲线的异常改变。结论四逆汤可减轻H2O2对心肌细胞钙通道的损伤作用。     

卡托普利对豚鼠心室细胞动作电位及外向延迟整流钾电流的作用(英)

目的：探讨卡托普利对豚鼠心肌细胞动作电位间期及延迟整流钾电流的作用。 方法: 采用内充3 mol/L KCl的玻璃微电极记录心肌动作电位。采用膜片钳全细胞技术，钳制电位-50 mV, 保持时间100 ms, 指令电位+40 mV, 记录外向延迟整流钾电流(Ik)最大峰电流。 结果: 与缺血组比较卡托普利组APD30、APD50及ERP显著延长，APD90无显著变化，缺血组Ik幅度显著增高而卡托普利组及卡托普利+缺血组显著降低。电流-电压关系曲线形状各组间无显著变化, 缺血组显著上移而卡托普利组及卡托普利+缺血组下移。 结论： 卡托普利具有的电生理作用是由于它降低外向延迟整流钾电流及延长APD30、APD50和ERP。