霍乱菌苗:回顾与前瞻

本文概述了霍乱菌苗的历史沿革及其存在的问题,着重从霍乱菌苗的预防效果方面进行了讨论并提出一些看法。     

霍乱O139型菌苗的试制

对来自孟加拉、泰国、印度、中国四地区Ｏ１３９型霍乱菌株进行了毒力、免疫原性、免疫力与相互交叉保护力试验,结果显示不同地区分离的Ｏ１３９型霍乱弧菌其所试特性相互间无差异。用中国（９３－３）株试制的菌体菌苗,其抗原性、毒性、免疫力安全性等经检定符合霍乱菌苗规程要求。鉴于Ｏ１３９型霍乱弧菌存在荚膜的特性,而现有的几种荚膜多糖菌苗都显示有明显的保护作用,因而,使用Ｏ１３９型菌苗有可能在一定程度上达到控制Ｏ１３９型霍乱流行的目的。     

冻干口服霍乱rBS-WC菌苗安全及效率评价的小鼠模型探讨

我们构建了高产、分泌霍乱毒素B亚单位的工程菌株E.coli MM2,并用该菌株生产的重组霍乱毒素B亚单位(rBS)与灭活霍乱弧菌菌体制成冻于口服rBS-WC菌苗。这一菌苗的实验室动物研究亦已进行,肯定其在多种动物安全、有效。目前已能较大量地生产rBS,正在探索放大与工业化生     

一种安全有效霍乱口服减毒活菌苗的新进展

<正> 以前,我们曾利用DNA重组技术特异缺乏霍乱肠毒素基因部分,得到一些减毒菌株,这些减毒株在志愿者已产生良好的保护作用,可耐受含毒力的霍乱弧菌攻击,然而,这些菌株制成菌苗并不令人满意;因为它使40-50％志愿者在免疫初期出现轻度腹泻。现在我们已构建成在志愿者中不出现反应或反应极低的一个菌株。称CVD103霍乱弧菌。它是古典型稻叶菌569B的衍生体。     

伤寒杆菌营养缺陷型活菌苗

<正> 一般公认,使用弱毒沙门氏菌活菌苗来抵御沙门氏菌的全身感染,其保护作用要比注射死菌苗好。 有证据表明,对于人的伤寒以及各种家畜的沙门氏菌感染来说情况也是如此。通过引入1个或1个以上分子特性已知的突变,导致机理清楚的毒力丢失而形成的无毒株作为活菌苗,似要比一些机理不清楚或不完全清楚而减毒了的菌株好得多。获得此类菌株的方法之一是诱发对一些代谢物有依赖性的不可逆突变。本实验室已经构建了好几株这样的伤寒杆菌突变株,其中的一株541Ty及其Vi-阴性变异株543Ty已进行了志愿者试验。下面介绍涉及使用营养缺陷型菌苗的一些原则以及对所构建的鼠伤寒沙门氏和都柏林沙门氏芳香簇依赖株的结果,即其效果能     

冻干口服霍乱rBS—WC菌苗安全及保护效果评价的小鼠模型探讨

本文仿照人口服免疫程序用小鼠为模型对冻干口服霍乱ｒＢＳ－ＷＣ菌苗制品进行了安全及保护率评价。给ＫＭ小鼠口服三种不同剂量的ｒＢＳ－ＷＣ菌苗后,无发病,无体重减轻,无死亡现象,表明该菌苗安全,无毒副作用。免疫组与安慰剂组小鼠用肠结扎攻毒试验评价保护效果,两组小鼠用吴江－２及滨－４３活菌攻击后,免疫组显示良好保护作用（Ｐ＜０．０５）。此法可以用于口服型ｒＢＳ－ＷＣ菌苗的评价,但也存在需要动物数较多,个体间差异较大,手术较麻烦的问题。     

霍乱cT-B和LPs-o双价抗原工程菌苗株的构建

作者将霍乱弧菌O抗原及毒紊B亚单位基因片段,经DNA体外重组技术,得到了能表达双价抗原的工程菌株1046(pMG305)。经GMl一ELlsA分析表明该菌株能够表达特异的霍乱cT—B抗原,且能分泌到胞外,通过菌体凝集,全细胞O抗原酶联分析和血凝抑制试验表明在1046(pMG305)菌体表面表达了霍乱的0抗原,它的脂多糖O抗原通过sDS-PAGE电泳分析．显示它表达了霍乱LPs的特征区带。小鼠腹腔免疫后用霍乱弧菌毒株攻击表明．有良好的保护作用．因此1046(pMG30s)可望成为霍乱活疫苗的候选株。     

国内外钩端螺旋体活菌苗研究动态

钩端螺旋体(以下简称钩体)死菌苗,已广泛用于预防人类和各种动物的钩体病,并已取得肯定的效果。然而,在用于动物时,不少学者相继发现,死菌苗虽可防止钩体病临床症状的出现,但尚不足以制止免疫动物肾脏带菌或尿中排菌。White等认为,制备死菌苗时,由于使用了福尔马林(以下简称福尔马林菌苗)或其它杀     

口服痢疾活菌苗深层培养试生产小结

在英明领袖华主席抓纲治国的战略决策指引下,坚持预防为主的卫生工作方针,为防治菌痢这一常见病、多发病,我所正积极研制口服痢疾活菌苗。 我们用痢疾F_2a 、、F_3a(依链株)菌种,简单培养基,先于10立升深层培养罐内38℃恒温进行小量培养试验,试验中,按口服痢疾活菌苗质量指标要求,对培养基的选择,培养温度,PH变化,与生长浓度、活菌率之间的关系,初步掌握试生产工艺的全过程后,改用100立升罐培养、制苗。现将试生产7批次的结果,小结如下:     

霍乱cT-B和LPs-o双价抗原工程菌苗株的构建

作者将霍乱弧菌O抗原及毒素B亚单位基因片段,经DNA体外重组技术,得到了能表达双价抗原的工程菌株1046(pMG305)。经GM1-ELISA分析表明该菌株能够表达特异的霍乱CT-B抗原,且能分泌到胞外,通过菌体凝集,全细胞O抗原酶联分析和血凝抑制试验表明在1046(pMG305)菌体表面表达了霍乱的O抗原,它的脂多糖O抗原通过SDS-PAGE电泳分析,显示它表达了霍乱LPS的特征区带。小鼠腹腔免疫后用霍乱弧菌毒株攻击表明,有良好的保护作用,因此1046(pMG305)可望成为霍乱活疫苗的候选株。     

表达霍乱CT-B和LPS-O抗原的鼠伤寒菌苗株的构建

编码霍乱CT—B和LPSO抗原的基因与载体质粒pYA248重组后,转入△cya△crp △ asd减毒鼠伤寒疫苗株x4072,构建成无药物抗性、带双价抗原的工程菌株x4072(pMG306)。该菌株能分泌表达特异的霍乱CTB抗原,并且在菌体表面同时表达霍乱和鼠伤寒的。抗原。小鼠腹腔免疫和攻击试验表明该菌苗株对霍乱毒株的攻击具有良好的保护作用。本研究为新型霍乱／鼠伤寒双价口服活疫苗的构建打下了基础。     

表达霍乱CT-B和LPS-O抗原的鼠伤寒菌苗株的构建

将编码霍乱ＣＴ－Ｂ和ＬＰＳ－Ｏ抗原的基因与载体质粒ｐＹＡ２４８重组后,转入△ｃｙａ△ｃｒｐ△ａｓｄ减毒鼠伤寒疫苗株ｘ４０７２构建成无药物抗性,带双价抗原的工程菌株ｘ４０７２（ｐＭＧ３０６）。该菌株能分泌表达特异的霍乱ＣＴ－Ｂ抗原,并且在菌体表面同时表达霍乱和鼠伤寒的Ｏ抗原。小鼠腹腔免疫和攻击试验表明该菌株对霍乱毒株的攻击具有良好的保护作用。本研究为新型献计霍乱／鼠伤寒双价口服活疫苗的构建打下了基础     

O139霍乱灭活全菌体菌苗免疫后人群抗体水平测定

Ｏ１３９霍乱弧菌经甲醛灭活制备而成的全菌体菌苗在广西田阳县进行临床考核。每组５０名中学生经肌肉途径接种４５亿菌和９０亿菌两种剂量,一个月后８０％接种者血清中杀弧菌抗体升高,最高可达１∶１６０,免疫后３个月开始缓慢下降,但仍有６８－７２％接种者抗体效价在１∶２０以上。高剂量组半数接种者的杀弧菌抗体可维持存在６个月。血清中凝集抗体升高明显,但３个月后下降也明显。与对照组Ｏ１菌苗相比,两种抗体水平升高与下降趋势一致。采用ＥＬＩＳＡ法测定抗毒抗体,Ｏ１３９菌苗组与Ｏ１菌苗组结果相似,均有一定上升。上述结果提示Ｏ１３９霍乱灭活菌苗可作为短效应急菌苗使用     

小鼠模型用作口服痢疾活菌苗效力指标的意义

小鼠皮下免疫、腹腔攻击模型作为验证减毒痢疾活菌苗效力的指标已沿用多年,但其能否代表痢疾菌苗的效力还有待商榷。实验选用口服痢疾活菌苗ＦＳ,以不同活菌含量来验证模型的意义。实验表明,菌体皮下免疫均能产生类似的保护效果,与活;菌含量无关,血清学试验也论证了同样观点,而人体试验表明,菌苗的保护效果与活菌数密切相关,故认为小鼠皮下免疫、腹腔攻击模型不能准确反应痢疾菌苗的保护效果。     

冻干布鲁氏活菌苗皮上划痕接种人体反应观察

在毛主席的革命卫生路线指引下,坚持走《六·二六》道路,实行生产、科研、使用三结合。1967年7月,我们在银川市红花公社沙渠和北塔两大队,对兰州所冻干布鲁氏活菌苗,进行了皮上划痕接种人体的反应观察,为提高制品质量,生产安全有效和使用方便的人用布鲁氏活菌苗,提供了实践根据。现将观察结果总结如下: