P_2Y受体与三叉神经痛之间的关系

腺苷三磷酸（ATP）作为一种重要的神经递质具有广泛的生物学效应。多种伤害性刺激均可引起三叉神经节（TG）神经元释放ATP,ATP激活P2受体可引起疼痛。P2受体又分为P2X和P2Y两类。在受损的TG神经元上,P2Y受体的表达明显增多。本文就ATP与P2Y受体表达间的相关性、P2Y受体在TG中的信号转导机制、P2Y受体对神经损伤性痛觉信号的转导作用等研究进展作一综述。     

三叉神经痛和P_2X受体的研究进展

多种伤害性刺激均可引起细胞内腺苷三磷酸(ATP)的释放,ATP可激活P2X和P2Y受体,引起相应的生物学效应。P2X和P2Y受体均属于P2受体家族,其中P2X受体为配体门控非选择性阳离子通道受体,允许钠、钙、钾等阳离子通过。P2Y受体属于G-蛋白耦联受体。三叉神经节中含有大量与外周痛觉传导有关的中小型神经细胞,P2X受体在三叉神经节的痛觉传导过程中起至关重要的作用。下面就三叉神经痛以及P2X受体的结构、分布、生物学特性等研究进展作一综述。     

A-317491对P2X3受体介导的三叉神经痛的作用研究

目的:探究P2X3受体特异性拮抗剂A-317491对三叉神经痛的作用影响.方法:慢性压迫性损伤大鼠眶下神经(CCI-ION)建立大鼠三叉神经痛动物模型,应用von Frey细丝法测试机械刺激反应阈值,观察A-317491对三叉神经痛(TN)大鼠机械刺激反应阈值的影响.结合免疫组织化学、原位杂交、蛋白印迹、PT-PCR等方法观察大鼠三叉神经节(TG)中P2X3受体的表达变化.结果:术后14d,Ⅲ组(TN模型组)和Ⅰ组(生理盐水对照组)、Ⅱ组(假手术组)、Ⅳ组(TN模型+A-317491干预组)相比较,大鼠手术侧眶下神经面部感觉区域机械痛敏阈值明显降低(P＜0.01),大鼠TG中P2X3受体表达明显升高(P＜0.01);Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间相比,大鼠手术侧眶下神经面部感觉区域机械痛敏阈值差异没有显著性;Ⅳ组TG中P2X3受体的表达较Ⅲ组低(P＜0.01).结论:P2X3受体涉及到三叉神经痛,P2X3受体特异性拮抗剂A-317491对P2X3受体介导的三叉神经痛有一定抑制作用.     

P物质与三叉神经痛发病关系的临床研究

我们用放射免疫法检测三叉神经痛患者血浆Ｐ物质(ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ ,ＳＰ)的含量 ,用免疫组织化学法观察痛支与非痛支神经组织中ＳＰ免疫反应阳性颗粒的差异 ,报道如下。1 材料和方法 :原发性三叉神经痛住院患者 32例 ,自愿者 10名。用放射免疫法检测 16例患者疼痛发作时患侧颈外静脉血、肘静脉血及术后患侧颈外静脉血中ＳＰ含量 ,10名自愿者颈外静脉血中ＳＰ含量作为正常对照 ;用免疫组织化学法观察 16例患者痛支与非痛支神经组织中ＳＰ免疫反应阳性颗粒的差异。2 结果 :疼痛发作时患侧颈外静脉血中ＳＰ含量明显高于肘静脉血、术后患…     

人牙周膜干细胞成骨分化过程中P2X7受体mRNA的表达特点及作用研究

目的：探讨P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用。方法：将原代培养获得的人牙周膜干细胞分为对照组、三磷酸腺苷组、成骨诱导液组和三磷酸腺苷+成骨诱导液组,比较4组的成骨分化相关基因RUNX2、OCN基因表达和P2X7受体mRNA表达的差异,采用SPSS 16.0软件包进行统计学分析。结果：成骨后1周和2周,三磷酸腺苷+成骨诱导液组的RUNX2和OCN mRNA表达显著高于成骨诱导液组（P<0.05）。三磷酸腺苷+成骨诱导液组成骨后1周的RUNX2和OCN mRNA表达显著高于成骨后2周（P<0.05）。成骨后1周和2周,三磷酸腺苷组和三磷酸腺苷+成骨诱导液组的P2X7受体mRNA表达均显著高于对照组和成骨诱导液组（P<0.05）;成骨后2周,三磷酸腺苷组的P2X7受体mRNA表达显著高于三磷酸腺苷+成骨诱导液组（P<0.05）;三磷酸腺苷组成骨后1周的P2X7受体mRNA表达显著高于成骨后2周（P<0.05）。结论：P2X7 受体明显提高牙周膜干细胞的成骨效果,三磷酸腺苷可激活P2X7 受体的表达。     

雌激素受体基因多态性与三叉神经痛的相关性研究

目的　探讨雌激素受体(ER)基因多态性与三叉神经痛的相关性。方法　采用聚合酶链反应和限制性酶 切片段长度多态性分析方法,对20例三叉神经痛患者(病例组)和20例健康人(对照组)进行ER基因多态性分析, 比较ER基因多态性在组间及组内分布的差异性。结果　ER基因PvuII和XbaI两个酶切位点的多态性以ppxx型 最多,PpXx型和Ppxx型次之,ER基因多态性分布在病例组和对照组组间及组内的分布均无统计学差异(P> 0·05),但病例组Xx基因型构成比高于对照组,xx基因型则低于对照组;病例组PpXx基因型构成比高于对照组,而 ppxx、Ppxx基因型低于对照组。结论　ER基因的PvuII和XbaI酶切多态性与三叉神经痛的发病可能存在某种相关 性。     

P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用

目的：探讨P2X7受体（P2X7 receptor,P2X7r）在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用。方法：选取就诊于贵州中医药大学第一附属医院的健康青年患者因正畸需要而拔除的前磨牙为实验材料,分离、培养人牙周膜干细胞（human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs）。取第4代hPDLSCs,分为A、B、C、D 4组,A组用常规培养液培养,B组用成骨诱导液培养,C组用成骨诱导液+100 nmol/L三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）溶液培养,D组用成骨诱导液+100 nmol/L P2X7受体特异性拮抗剂KN-62培养。7 d后,采用茜素红染色观察各组hPDLSCs成骨效果,采用实时荧光定量反转录PCR（RT-PCR）检测各组hPDLSCs成骨相关因子骨钙素（osteocalcin,OCN）、RUNX2 mRNA的表达量,采用RT-PCR检测各组hPDLSCs中P2X7r mRNA表达。采用SPSS 22.0软件包对结果进行统计学分析。结果：茜素红染色结果显示,B组和C组hPDLSCs细胞形态发生显著变化,逐渐由不规则形变为方形,出现灰白色钙化小结节。结节多呈板层状圆形或椭圆形团块,C组灰白色钙化小结节显著多于B组,而A组和D组钙结节量均很少。B、C组hPDLSCs中OCN、RUNX2、P2X7r mRNA表达量显著高于A组（P<0.05）,C组hPDLSCs中OCN、RUNX2、P2X7r mRNA表达量显著高于B组（P<0.05）,D组hPDLSCs中OCN、RUNX2、P2X7r mRNA表达量显著低于B、C组（P<0.05）,D组hPDLSCs中OCN、RUNX2、P2X7r mRNA表达量与A组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。结论： P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中发挥正调节作用。P2X7受体被ATP激活后,可促进人牙周膜干细胞成骨分化,这为临床上治疗牙周炎提供了新的方向。     

添加P2O5对生物活性玻璃力学性能与生物活性的影响

目的：研究不同含量P₂O₅替代SiO₂对生物活性玻璃的力学性能及生物活性的影响。方法：应用高温熔融法烧制各组分基础玻璃,P₂O₅含量分别为0wt%、1wt%、3wt%、6wt%、9wt%、12wt%。以聚氨酯海绵为模板,有机泡沫浸渍法制作多孔生物活性玻璃支架。万能力学试验机单轴压缩和三点弯曲法测试支架的力学性能,标准模拟体液(simulated body fluid,SBF)浸泡计算质量损失百分比及扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察、X线衍射分析(X-ray diffraction,XRD)观测生物活性。结果：(1)五组多孔支架的抗压强度及抗弯强度测试结果显示,除P₂O₅含量为0wt%和1wt%两组无显著差异外,随P₂O₅含量增高材料的力学性能逐渐增强,但当P₂O₅含量达到12wt%时支架无法烧制成型。...     

口腔癌前病变和鳞癌P53表达与微核的关系

目的　分析脱落细胞涂片和组织病理切片检测P     

嘌呤受体P2Y_2在涎腺腺样囊性癌的表达及ATP对其细胞生长的抑制

目的研究嘌呤受体P2Y2在涎腺腺样囊性癌非高转移细胞株（SACC-83）和高转移细胞株（SACC-LM）的表达,及其激动剂ATP对二者细胞生长的抑制作用。方法采用免疫细胞化学法检测P2Y2受体在SACC-83和SACC-LM细胞株中的表达;采用MTT法检测不同浓度ATP（0.1mM/L、0.2mM/L、0.4mM/L、0.8mM/L和1.6mM/L）在不同作用时间点（24h、48h和72h）对SACC-83和SACC-LM细胞生长的抑制作用。结果 SACC-83和SACC-LM细胞中P2Y2均呈阳性表达,在细胞膜的染色较胞浆深,其表达在两细胞株中无明显差异。ATP对SACC-83和SACC-LM细胞的生长均有明显的抑制作用（P〈0.05）,并且对SACC-LM细胞的抑制作用强于对SACC-83细胞的抑制作用,其抑制作用与药物浓度和作用时间呈正相关。结论不同转移能力的涎腺腺样囊性癌细胞SACC-83和SACC-LM的胞膜和胞浆中均有嘌呤受体P2Y2表达,ATP对二者细胞生长有显著抑制作用。     

原发性三叉神经痛与单纯疱疹病毒感染的相关性研究进展

原发性三叉神经痛(PTN)的病因和发病机制至今仍不清楚,近来越来愈多的研究揭示其与单纯疱疹病毒(HSV)的潜伏有关.PTN患者的三叉神经节和神经根有明显的脱髓鞘变,而脱髓鞘病变是PTN的主要病理基础.HSV依赖其嗜神经特性感染三叉神经半月节并长期潜伏,在机体免疫低下时激活,造成对三叉神经的慢性炎症性刺激,导致三叉神经脱髓鞘病变进而引发PTN.诠释PTN的病因和发病机制,对于揭开三叉神经痛之谜,创建并运用有针对性的治疗方法具有重要的临床意义.     

实验性牙移动中三叉神经节P2X3受体蛋白量及mRNA的表达变化

目的 研究正畸牙移动中P2X3受体蛋白量及mRNA在三叉神经节（TG）中的表达变化规律。方法 以雄性SD大鼠为实验对象,模拟临床矫治的牙移动过程,分别在实验4 h,1 d,2 d,3 d,5 d,7 d 和14 d时取出三叉神经节,应用Western blot分析检测P2X3受体蛋白的表达量,同时应用原位杂交方法对P2X3受体的表达部位及强度变化进行研究。结果 大鼠牙齿加力后,Western blot分析观察发现TG内P2X3受体蛋白量发生一定变化,并呈现一定的时间规律,在实验1 d后开始出现变化,3 d后达到高峰,14 d后下降至与对照组基本一致。同时观察到TG内P2X3 mRNA杂交信号阳性标记神经元的数量呈现一定的时间规律,与Western blot分析结果基本一致。结论 在大鼠牙移动过程中,TG中P2X3受体表达为一过性变化,呈现短时上调的规律,时间与正畸牙移动时的疼痛时间吻合,推测P2X3在正畸牙移动中可能与疼痛传导密切相关,但其作用机制还有待进一步探索。     

三叉神经痛射频热凝术中疼痛程度与病灶位置的关系

目的：探讨三叉神经痛射频热凝术中三叉神经不同周围支在治疗过程中疼痛程度的关系。方法：对89例三叉神经痛患者行射频热凝治疗。上颌支18例,下颌支71例。治疗过程中采用视觉模拟评分法（VAS）对两组病例疼痛程度进行评估。结果：89例治疗效果均为优良,治疗过程中上颌支VAS评分中位数为7（5-9）,下颌支VAS评分中位数为5（3-8）。两组VAS评分比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：射频热凝术治疗三叉神经痛时,上颌支病灶会导致患者更为明显的疼痛。     

三叉神经痛大鼠中钙通道α2δ-1亚单位表达的变化

目的研究大鼠眶下神经结扎后钙通道α2δ-1亚单位（Cavα2δ-1）表达的变化,探讨Cavα2δ-1与三叉神经痛的关系。方法将12只SD大鼠随机分为神经结扎组和假手术对照组,每组6只。用铬肠线轻松结扎神经结扎组大鼠的眶下神经,建立三叉神经的神经病理性疼痛动物模型;假手术对照组仅暴露神经,不结扎。术前1 d,术后第3、6、9、12、15天测定机械刺激反应阈值。术后第15天收集三叉神经节（TG）和三叉神经脊束核尾侧亚核及颈段第一、二脊髓背侧角（Vc/C2）组织,采用Western印迹杂交法测定Cavα2δ-1蛋白浓度。结果神经结扎组大鼠术侧机械刺激反应阈值在术后逐渐降低,与术前比较,术后第9、12、15天机械刺激反应阈值差异有统计学意义（P<0.05）。术后第15天神经结扎组术侧TG和Vc/C2中Cavα2δ-1表达明显上调（P<0.01）。结论Cavα2δ-1参与了大鼠三叉神经痛的
发生发展,为进一步探讨三叉神经痛发病机制提供实验基础。     

Nociceptin/orphanin FQ up‐regulates P2X3 receptors in primary cultures of neonatal rat trigeminal ganglion neurons

Recent evidence indicates a nociceptive role of the nociceptin/orphanin FQ–opioid receptor‐like receptor (N/OFQ‐ORL1) system in craniofacial pain; however, the mechanisms of such an effect remain unclear. We investigated whether the action of N/OFQ involves the modulation of P2X₃, a pain‐transducing ionotropic receptor. Double‐labeled immunohistochemical staining was used to determine the co‐localization of ORL1 and P2X₃ receptors in the trigeminal ganglia (TG) of neonatal Sprague‐Dawley rats. The effect of N/OFQ (at a concentration ranging from 1 pM to 10 nM) on the expression of P2X₃ receptors was detected by RT‐PCR, western blotting, and immunocytochemical staining. We found that ORL1 receptors were co‐localized with P2X₃ receptors and that the application of N/OFQ could up‐regulate, in a concentration‐dependent manner, the expression of P2X₃ receptor mRNA and P2X₃ receptor protein in TG neurons. Immunocytochemical staining also revealed enhanced P2X₃ immunoreactivity beneath the neuronal membrane and an increased percentage of P2X₃‐positive neurons after treatment with N/OFQ. Those effects were completely blocked by a specific ORL1 antagonist, UFP‐101. Our results suggest that the activation of ORL1 receptors by N/OFQ can potentiate P2X₃ receptors in primary cultures of neonatal trigeminal neurons, which may be a mechanism for the nociceptive role of N/OFQ in the modulation of craniofacial pain. Our findings may also have implications in treating craniofacial pain.     

三叉神经根与周围血管的关系

目的研究三叉神经根与周围血管的关系。方法在手术显微镜下解剖灌注红色乳胶的头部标本16例（32侧）。结果三叉神经根与周围血管(主要是小脑上动脉和小脑下前动脉)发生接触的占50.0％(16/32),形成压迫的占12.5％(4/32)。结论血管压迫三叉神经根是三叉神经痛的重要原因。     

Adenosine triphosphate stimulates RANKL expression through P2Y1 receptor–cyclo‐oxygenase‐dependent pathway in human periodontal ligament cells

Luckprom P, Wongkhantee S, Yongchaitrakul T, Pavasant P. Adenosine triphosphate stimulates RANKL expression through P2Y ₁ receptor–cyclo‐oxygenase‐dependent pathway in human periodontal ligament cells. J Periodont Res 2010; 45: 404–411. © 2010 John Wiley & Sons A/S Background and Objective: Our previous study showed that human periodontal ligament cells responded to mechanical stress by increasing adenosine triphosphate (ATP) release, accompanied by the increased expression of RANKL and osteopontin. We found that the signaling pathway of mechanical stress‐induced osteopontin was mediated through ATP/P2Y₁ receptor and Rho kinase activation but that of mechanical stress‐induced RANKL was different. In this study, we further investigated the effect of extracellular ATP on the expression of RANKL and the mechanism involved. Material and Methods: Human periodontal ligament cells were treated with ATP (10–40 μm ). The expressions of RANKL and cyclo‐oxygenase 2 (COX‐2) were examined by RT‐PCR and western blot analysis. The level of prostaglandin E₂ was determined using ELISA. Signaling pathways were investigated by using inhibitors and antagonist. Results: Adenosine triphosphate induced the expression of RANKL. Indomethacin, an inhibitor of COX, could abolish the induction of RANKL expression, suggesting a COX‐dependent mechanism. A cAMP‐dependent protein kinase inhibitor, H89, and a nuclear factor κB (NFκB) inhibitor, pyrrolidine dithiocarbamate, inhibited RANKL expression, prostaglandin E₂ production and NFκB translocation. In addition, a specific P2Y₁ receptor antagonist, MRS2179, and P2Y₁ small interfering RNA diminished the effect of ATP. Conclusion: Extracellular ATP stimulates RANKL expression in human periodontal ligament cells through a pathway dependent on the P2Y₁ receptor, cAMP‐dependent protein kinase, NFκB and COX. Our results suggest that, among the molecules responsible for the effect of mechanical stress, ATP participates in bone resorption or bone homeostasis by mediating its signal through the P2Y₁ receptor and the NFκB–COX–RANKL axis in periodontal tissue.     

大鼠三叉神经痛模型中小胶质细胞激活情况及经时变化

目的 研究大鼠三叉神经痛模型中三叉神经脊束核尾侧亚核（Sp5C）小胶质细胞激活情况及随时间的变化,并探究其与颌面部疼痛是否具有一致性。 方法 部分结扎大鼠三叉神经的眶下神经（IoN）分支,引起三叉神经慢性压迫性损伤（CCI）,构建大鼠三叉神经痛动物模型（IoN-CCI）。手术当天（术前）、术后第1、5、10、15、30天观察大鼠行为学变化,通过电子Von Frey测痛仪测试机械痛阈变化,称重测量体重变化,免疫组织化学染色检测Sp5C中小胶质细胞标志物钙离子结合衔接分子1（Iba-1）表达量变化,并对3种不同形态的小胶质细胞占比进行分析。 结果 行为学变化及机械痛阈变化显示,IoN-CCI组手术同侧颌面部疼痛水平在术后先升高后降低。IoN-CCI组手术同侧Sp5C的Iba-1表达及变形虫样小胶质细胞占比分别在术后第10天及术后第5天达到峰值,至术后第30天基本恢复至与同组对侧一致,该趋势与颌面部疼痛水平变化基本一致。 结论 眶下神经部分结扎构建大鼠三叉神经痛模型引起Sp5C中小胶质细胞激活,激活情况与颌面部疼痛情况基本一致,在第10天达到最高峰。