转甜瓜钾离子通道基因MIRK拟南芥植株的耐盐性分析

植株的钾营养状况与其耐盐性密切相关,钾离子通道是植物钾吸收转运的主要途径之一。为了研究钾离子通道在植株耐盐性方面所起的作用,我们利用Floral Dip法将甜瓜钾离子通道基因MIRK转入拟南芥,Kan检测和PCR结果表明MIRK已经整合到拟南芥基因组中。以不同浓度的NaCI溶液处理转化植株（T3）,并测定其耐盐性相关指标。结果分析表明,转基因植株的钾钠含量比值K^＋/Na^＋约为对照植株的2-3倍,相对电导率仅为对照植株的57．7％,相对含水量和Fv/Fm值均高于对照植株,叶绿素含量为对照植株的1．2倍。以上差异均达显著水平。MIRK的转入在一定程度上提高了拟南芥的耐盐能力。     

转mangrin基因水稻的耐盐性研究

以转mangrin基因水稻的阳性植株(11#,59#,86#)和阴性植株为材料,在0,100,150,200 mmol/L的NaCl溶液中经盐胁迫7 d后,测定叶片相对含水量、质膜透性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和脯氨酸含量4项耐盐指标。结果表明:盐胁迫下,转基因植株的叶片相对含水量、脯氨酸含量、SOD活性明显高于阴性植株,叶片电导率则低于阴性植株。对转基因植株和阴性植株的耐盐性综合评定结果是11#59#86#阴性植株。     

番茄耐盐性研究进展

对国内外番茄耐盐生理、与耐盐性相关的基因、耐盐突变体及其转基因耐盐番茄的研究进展进行了综述。     

转mtlD基因早稻的耐盐性研究

利用基因枪转化技术将来源于大肠杆菌的mtlD(1-磷酸甘露醇脱氢酶)基因导入旱稻。研究结果表明：旱稻愈伤组织的继代时间对抗性愈伤的筛选频率无明显影响；基因枪轰击后愈伤组织的恢复时间(≤7d)较长时，潮霉素B质量浓度应适当提高。转基因植株及其后代的PCR，dot blotting，southern blotting和northern blotting检测表明，mtlD基因已整合到旱稻基因组中，并且稳定表达。在含1．096(质量分数，下同)NaCl的MS培养基上，转基因植株生长速率明显大于阴性对照；在含0．75％ NaCl的盆中，转基因植株能够生长。盐分对转基因植株质膜的伤害减轻，Na^ 向地上部运输受抑，转基因植株的Na^ 与K^ 比率低于阴性对照。T1代转基因旱稻耐盐和盐敏感以及抗潮霉素B和潮霉素B敏感的分离比例均大于3：1，说明基因枪轰击为多拷贝转化。     

棉花苗期耐盐性主基因和多基因混合遗传分析

为探讨棉花苗期耐盐性遗传规律,以2个耐盐性差异明显的棉花品种(系)NY1和中棉所12,以及NY1×中棉所12衍生的F1、F2和F2∶3群体为材料,采用主基因和多基因混合遗传模型分析法,以盐害级别为鉴定指标,对棉花苗期耐盐性进行遗传分析。结果表明,棉花盐害级别的遗传受1对加性-显性效应和加性-显性-上位性多基因遗传模型控制,主基因以负向加性效应为主,呈不完全负显性,在F2和F2∶3代的遗传率分别为64.006%和40.847%,明显高于多基因遗传率。说明棉花苗期耐盐性受1对主效基因控制,在育种中可以通过杂交方法转移主效基因并在F2世代进行单株选择。     

滨海地区园林植物耐盐性研究

滨海地区园林绿化的首要问题是盐害,耐盐性研究日益受到重视,文章分析了滨海地区植物盐害发生的主要原因及其症状,并提出耐盐性园林植物品种的筛选原则及养护方法.     

番茄耐盐性研究进展

综述了近年来国内外番茄耐盐性的研究进展,包括离子的选择性吸收与区域化分布,细胞的渗透调节作用,细胞膜的稳定性以及糖类物质、氮类物质的代谢活性等方面,并提出了今后番茄耐盐性的研究方向.     

山新杨转eIF1A基因及耐盐性分析

将从柽柳cDNA文库中分离的eIF1A基因采用农杆菌介导法进行山新杨的遗传转化。经PCR及Northern检测,证明了该基因已经整合到山新杨基因组中,并且能够在转录水平上得到表达。盐胁迫处理表明:盐胁迫处理7 d后,转基因山新杨净光合速率(Pn)、气孔导度平均值(Gs)分别为对照的1.33、1.27倍。光化学猝灭系数(qp)、PSⅡ电子传递量子产率(ΦPSⅡ)的平均值是对照株系的1.49、1.10倍。胁迫处理15 d后,转基因株系与非转基因株系相比,所受的盐害较小,而高生长均高于对照株系,其平均值是对照的1.26倍。这些指标的变化均证实eIF1A基因的表达能够提高转基因山新杨抵抗盐胁迫的能力。     

转mtlD基因旱稻的耐盐性研究

利用基因枪转化技术将来源于大肠杆菌的mtlD(1-磷酸甘露醇脱氢酶)基因导入旱稻.研究结果表明:旱稻愈伤组织的继代时间对抗性愈伤的筛选频率无明显影响;基因枪轰击后愈伤组织的恢复时间(≤7 d)较长时,潮霉素B质量浓度应适当提高.转基因植株及其后代的PCR,dot blotting,southern blotting和northern blotting检测表明,mtlD基因已整合到旱稻基因组中,并且稳定表达.在含1.0%(质量分数,下同)NaCl的MS培养基上,转基因植株生长速率明显大于阴性对照;在含0.75% NaCl的盆中,转基因植株能够生长.盐分对转基因植株质膜的伤害减轻,Na+向地上部运输受抑,转基因植株的Na+与K+比率低于阴性对照.T1代转基因旱稻耐盐和盐敏感以及抗潮霉素B和潮霉素B敏感的分离比例均大于3∶1,说明基因枪轰击为多拷贝转化.     

Dark respiration rate of transgenic tomato plants expressing FeSOD1 gene under chloride and sulfate salinity

Dark respiration of transgenic tomato regenerants expressing Fe-dependent superoxide dismutase under conditions of sulfate and chloride salinity has been studied. The method and system of measuring the dark respiration rate by means an infrared gas analyzer have been modified, making possible the use of individual regenerants in vitro in a small volume test tube. It is shown that transgenic lines expressing the FeSOD1 gene from Arabidopsis thaliana L. demonstrates a differently directed response to the effect of NaCl and Na₂SO₄.     

HVA1基因的同源克隆及其转基因植物耐逆性研究进展

大麦HVA1基因编码的蛋白属于第3组LEA蛋白,其在植物的抗旱和耐盐性方面有重要作用.国内外学者对该基因的结构、功能以及转基因植物的抗旱、耐盐性进行了深入的研究.根据近年的研究结果,对HVA1基因同源性序列的克隆、表达特性以及转HVA1基因植物的抗旱、耐盐性检验等方面进行了综述.     

Engineering herbicide tolerance in transgenic plants

The herbicide glyphosate is a potent inhibitor of the enzyme 5-enolpyruvylshikimate- 3-phosphate (EPSP) synthase in higher plants. A complementary DNA (cDNA) clone encoding EPSP synthase was isolated from a complementary DNA library of a glyphosate-tolerant Petunia hybrida cell line (MP4-G) that overproduces the enzyme. This cell line was shown to overproduce EPSP synthase messenger RNA as a result of a 20-fold amplification of the gene. A chimeric EPSP synthase gene was constructed with the use of the cauliflower mosaic virus 35S promoter to attain high level expression of EPSP synthase and introduced into petunia cells. Transformed petunia cells as well as regenerated transgenic plants were tolerant to glyphosate.     

利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21)

【目的】在番茄中表达人成纤维细胞生长因子-21(Fibroblast growth factor-21,FGF21),为利用植物反应器规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi)作为转基因植物的选择标记,将人源fgf21基因克隆至表达载体pCAMBIA1390RⅡ(简写为p1390RⅡ)上,构建重组表达质粒p1390 RⅡMFGF21。采用冻融法将质粒p1390RⅡMFGF21转入根瘤农杆菌EHA105,叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum)"中蔬6号",采用PCR检测、Southern杂交筛选转基因番茄阳性植株,并对FGF21蛋白在转基因番茄叶片中的表达进行了Western blot分析。【结果】成功构建了带pmi安全选择标记基因的植物双元表达载体p1390RⅡMFGF21,在番茄中初步建立了以pmi为选择标记基因的遗传转化体系,共获得了26株转基因番茄植株,其中5株为阳性克隆,转化率为19.2%。采用PCR扩增和Southern blot分析进行检测,结果表明,重组fgf21基因已整合到转基因番茄基因组中。Western blot分析检测结果显示,FGF21蛋白在转基因番茄叶片中有一定水平的表达,并具有良好的抗原性。【结论】获得了以pmi为选择标记成功表达FGF21蛋白的转基因番茄遗传体系。     

利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21)

【目的】在番茄中表达人成纤维细胞生长因子-21（Fibroblast growth factor-21,FGF21）,为利用植物反应器规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以甘露糖-6-磷酸异构酶基因（pmi）作为转基因植物的选择标记,将人源fgf21基因克隆至表达载体pCAMBIA1390RⅡ（简写为p1390RⅡ）上,构建重组表达质粒p1390 RⅡMFGF21。采用冻融法将质粒p1390RⅡMFGF21转入根瘤农杆菌EHA105,叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum)“中蔬6号”,采用PCR检测、Southern杂交筛选转基因番茄阳性植株,并对FGF21蛋白在转基因番茄叶片中的表达进行了Western blot分析。【结果】成功构建了带pmi安全选择标记基因的植物双元表达载体p1390RⅡMFGF21,在番茄中初步建立了以pmi为选择标记基因的遗传转化体系,共获得了26株转基因番茄植株,其中5株为阳性克隆,转化率为19.2%。采用PCR扩增和Southern blot分析进行检测,结果表明,重组fgf21基因已整合到转基因番茄基因组中。Western blot分析检测结果显示,FGF21蛋白在转基因番茄叶片中有一定水平的表达,并具有良好的抗原性。【结论】获得了以pmi为选择标记成功表达FGF21蛋白的转基因番茄遗传体系。     

转ipt基因水稻植株耐冷性研究

在孕穗期和开花期分别用17.5和12℃恒温对水稻材料转ipt基因ey-105(鄂宜105)和组培苗(对照)各处理5 d,通过相对电导率、叶绿素含量、根系活力等生理指标的测定以及成熟后不同处理的粒重、单株产量、结实率等性状的观测,对转ipt基因ey-105与对照在低温下的耐冷性表现进行分析,并通过灰色关联度对不同的处理进行分析判断观测指标与单株产量的关系。结果表明:在孕穗期和开花期低温处理下,转ipt基因ey-105的相对电导率的变化量和叶绿体受低温的危害小于对照,而根系活力大于对照。对产量的影响则对照大于转ipt基因ey-105。在不同生育期的低温处理下电导率、根系活力、叶绿素a/b和百粒重对单株产量的影响较大。     

Production of transgenic tomato plants with the Fe-dependent superoxide dismutase gene

Agrobacterial transformation of tomatoes by an expression vector containing the Fe-SOD gene is carried out. The transgenic status of the transformants obtained is confirmed by PCR analysis. Differences are noted in the cell cycle and ultrastructure of transgenic and nontransgenic plants under the effect of salt stress.     

番茄耐热性研究现状

文章对番茄耐热性研究概况进行了综述,其中包括鉴定方法、遗传规律、番茄耐热种质资源、热胁迫对番茄所产生的生理效应等方面的研究动态。     

NaCl胁迫下不同番茄品种幼苗耐盐性研究

采用水培法,对11个番茄品种进行不同浓度NaCl胁迫处理,10d后调查不同品种番茄幼苗生长情况。结果表明,11个供试品种幼苗期存在明显的耐盐性差异。2608、2496为盐敏感品种,1480、2560为耐盐品种,其余均为中等耐盐品种。