同一种HIV抗体酶联检测试剂的回顾性比较

我血站自2000年6月～05年12月底检测HIV抗体,初检、复检均使用A(国产)厂家和B厂家(进口)酶联试剂(ELISA),留取初检和/或复检阳性标本91份,2006年9月使用相应厂家再次检测91份标本,检测结果与先前检测结果进行分析比较结果如下:     

耳血酶联法检测特异性IgM抗体快速诊断呼吸道合胞病毒感染的研究

本文应用ELISA间接法检测60例下呼吸道感染患儿的耳血呼吸道合胞病毒(RSV)IgM抗体;以病毒分离和/或补体结合试验作对照,其诊断符合率为88.3％,同步检测静脉血清RSV IgM抗体,其计数资料相关分析和定量相关回归分析均有高度显著性差异(P<0.01).现报道如下. 对象与方法 一、对象:1987～1988年冬、春,本院儿科住院的60例急性下呼吸道感染患儿,于入院时耳垂采血20μl.将血滴在新华定量滤纸上。采集耳血的同时取静脉血1.5ml。分离血清。 二、方法:滤纸干滴血于检测前一晚剪下,浸泡在0.5ml10％BSA—PBS—T20稀释液中4℃过夜。血清于检测当日用上述溶液按1:50稀释。操作步骤如下。用RSV纯化抗原包被反应板,设正常抗原     

生殖器疱疹患者血清IgM抗体和皮损抗原检测的意义

目的 :评价生殖器疱疹 (GH)患者血清单纯疱疹病毒 (HSV)IgM抗体和皮损HSV抗原检测的临床意义。方法 :用酶联免疫吸附实验 (ELISA)方法对 5 2例GH患者在皮损发作期同时检测血清IgM抗体和局部皮损中HSV抗原。结果 :5 2例患者血清HSVIgM抗体阳性 7例 ,阳性率为 13.4 6 % (7/ 5 2 ) ,IgM阳性组疱疹复发平均间隔时间与IgM阴性组比较 ,无显著性差异 (P >0 .0 5 )。皮损HSV抗原阳性 31例 ,阳性率 5 9.6 2 % (31/ 5 2 ) ,其中丘疹、丘疱疹、水疱性损害阳性率 10 0 % (13/ 13) ,糜烂或浅表溃疡性损害阳性率 6 3.6 4 % (14 / 2 2 ) ,结痂性损害阳性率 2 3.5 3% (4 / 17)。皮损HSV抗原检测阳性率显著高于血清HSVIgM抗体阳性率 (P <0 .0 5 )。结论 :血清HSVIgM抗体检测对GH诊断和判断复发价值不大 ,皮损HSV抗原检测对诊断GH活动性感染具有更重要的临床意义。     

临床关于HSV-Ⅱ四种实验室检测方法的比较

目的评价四种实验室检测Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)感染方法的灵敏度和特异度,寻找一种实验室检测HSV-Ⅱ快而准的方法.方法采用直接免疫荧光法(DIFA)检测生殖器疱疹(GH)患者患处分泌物中的HSV-Ⅱ抗原,用酶免疫法(EIA)检测GH患者患处分泌物中的HSV-Ⅱ抗原和血清中的HSV-Ⅱ IgM抗体,并将以上检验结果与细胞培养法比较.结果 DIFA法、EIA法检测HSV-Ⅱ抗原,EIA法测HSV-Ⅱ IgM抗体,细胞培养法分离HSV-Ⅱ,4种检测方法的灵敏度分别为75.8%,83.9%,17.7%和71.8%;特异度分别为95%,97%,85%和100%.与细胞培养法相比较,DIFA法灵敏度、特异度均无显著性差异(均P＞0.05);EIA法检测HSV-Ⅱ抗原灵敏度高于细胞培养法(P＜0.05),而特异度相比较,无显著性差异(P＞0.05);EIA法检测HSV-Ⅱ IgM抗体灵敏度和特异度均显著低于细胞培养法(P＜0.01,P＜0.05).结论EIA法检测HSV-Ⅱ抗原灵敏度和特异度均较高,是目前临床实验室检测HSV-Ⅱ感染较为理想的方法.     

酶联免疫吸附法检测肺炎支原体IgM抗体及临床意义

目的 :为了解肺炎支原体的发病率 ,给临床提供治疗依据。方法 :采用酶联免疫吸附法对 114 3例患儿进行检测血清含量。结果 :114 3例患儿中肺炎、支气管炎患儿占 4 9%发热患儿占 15 % ,传染性单核细胞增多症患儿占 5 % ,肾病患儿占 4 .7% ,咽炎扁桃体炎患儿占 2 % ,其他患儿 15 %。从年龄段分析 :～ 3岁患儿感染肺炎支原体的占 15 % ,～ 6岁占 2 3% ,～ 9岁的占 32 % ,～ 12岁占 2 9% ,～ 15岁占 2 4 %。结论 :肺炎支气管炎患儿感染肺炎支原体占比例大一些 ,同时学龄期儿童发病率高 ,学龄前儿童亦有发病 ,有相关报道。提示 :感染了肺炎支原体后要用大环内酯类药物效果最佳。     

疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒Ⅱ抗体检测结果分析

目的了解性病门诊生殖器糜烂或溃疡患者单纯疱疹病毒Ⅱ（HSV-Ⅱ）感染情况。方法采用ELISA法检测1294例生殖器糜烂或溃疡患者血清HSV-ⅡIgG、IgM抗体。结果1294例患者HSV-Ⅱ抗体总阳性率为50．46％。其中男性阳性率为44．36％,女性为59．73％,女性阳性率高于男性（P=0．000）。HSV-Ⅱ—IgM阳性率为35．01％,HSV-Ⅱ-IgG阳性率为15．46％。结论性病门诊生殖器糜烂或溃疡患者HSV-Ⅱ阳性率高,HSV-Ⅱ抗体阳性对生殖器疱疹的诊断具有临床意义,如果HSV—Ⅱ-IgM阳性,临床诊断意义更大。     

酶联免疫吸附法检测肺炎支原体IgM抗体及临床意义

目的:为了解肺炎支原体的发病率,给临床提供治疗依据.方法:采用酶联免疫吸附法对1 143例患儿进行检测血清含量.结果:1 143例患儿中肺炎、支气管炎患儿占49 %发热患儿占15 %,传染性单核细胞增多症患儿占5 %,肾病患儿占4.7 %,咽炎扁桃体炎患儿占2 %,其他患儿15 %.从年龄段分析:～3岁患儿感染肺炎支原体的占15 %,～6岁占23 %,～9岁的占32 %,～12岁占29 %,～15岁占24 %.结论:肺炎支气管炎患儿感染肺炎支原体占比例大一些,同时学龄期儿童发病率高,学龄前儿童亦有发病,有相关报道.提示:感染了肺炎支原体后要用大环内酯类药物效果最佳.     

动脉粥样硬化性进展性卒中患者血清疱疹病毒IgM抗体的检测及意义

目的：探讨动脉粥样硬化性进展性卒中与人类疱疹病毒感染之间的关系。方法：应用金标免疫斑点法检测人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV)，单纯疱疹病毒（herpes simplex virus HSV)1例和2型IgM抗体，同时与对照组比较，结果：动脉粥样硬化性进展性卒中组（herpes simplex virus,HSV)1型和2型IgM抗体，同时与对照组比较。结果：动脉粥样硬化性进展性卒中组HCMV和HSV IgM抗体总阳性率为91．07％（51／56），对照组为29．33％（61／208），有显著性差异（P＜0．01），其中HCMV和HSV－1 IgM抗体阳性率分别为51．79％（29／56）和23．21％（13／56），对照组分别为12．50％（26／208）和5．77％（12／208），均有显著性差异（P均＜0．01），HSV－2 IgM阳性率为16．07％（9／56），对照组为11．06％（23／208），两者无显著性差异（P＞0．05）。结论：HCMV和HSV－1感染与动脉粥样硬化性进展性卒中的发病及病情进展有关。     

ELISA法检测单纯疱疹病毒Ⅱ型特异性抗体的临床应用研究

目的 探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－２）感染的早期特异检测手段。方法 对５２例性病门诊的生殖器疱疹患者改良的ＥＬＩＳＡ方法进行了ＨＳＶ－ｇＤ２ＩｇＧ检测并同细胞分离方法进行对比观察。结果 病毒分离的阳性率为６９．２％,ＥＬＩＳＡ法检测抗体的阳性率６５％,两种方法检测结果差异无显著性。结论：ＥＬＩＳＡ法检测血清疱疹病毒ＩｇＧ抗体具有简便,快速,特异的优点,适合于临床大规模检测之有     

肺炎支原体抗体IgM二种检测方法的比较

肺炎支原体可引起支原体肺炎，病原学直接检验很困难，其抗体IgM可辅助诊断支原体感染。我们用快速斑点免疫全渗滤法(DIGFA)、酶联免疫法(ELISA)二种方法进行了检测比较。     

检测抗HSV-1IgG的斑点金免疫渗滤方法的建立

目的：建立检测人血清中抗单纯疱疹病毒Ⅰ型IgG（抗HSV-1 IgG）的斑点金免疫渗滤法（DIGFA）。方法：增殖纯化HSV-1抗原并包被于硝酸纤维素膜，自制胶体金并用于标记羊抗人IgG，自制斑点金免疫渗滤检测装置，用于检测血清中抗HSV-1 IgG。结果：当血清样本中抗HSV-1 IgG为阳性时，滴加的金标羊抗人IgG可使检测装置膜上出现红色斑点。以DIGFA与酶联免疫吸附试验（ELISA）用于检测血清样本41份，两法差异无显著性（X^2=0.01，P〉0.05）。结论：建立了检测抗HSV-1 IgG的斑点金免疫渗滤方法，该法较其他方法检测时间短，操作简便快捷。     

双引物聚合酶链反应同时快速检测梅毒螺旋体和单纯疱疹病毒Ⅱ型

目的 建立双引物聚舍酶链反应（PCR）用于同时快速检测梅毒螺旋体和单纯疱疹病毒Ⅱ型。方法 基于单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的DNA聚合酶基因以及梅毒螺旋体47KD膜蛋白基因序列，自行设计2对特异性寡核苷酸引物，建立了同时检测上速2种痛原体的双引物PCR。结果 各特异性引物仅扩增相应的病原体DNA，即单纯疱疹病毒Ⅱ型扩增产物为202bp以及梅毒螺旋体扩增产物为252bp。其他11种生殖道常见微生物及正常人基因组DNA不被扩增。检测了51例临床标本，梅毒螺旋体暗视野显微镜检查阳性检出率为15．7％，双引物PCR阳性检出率为19．6％；二种方法检测结果间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。HSV阳性培养率23．6％，双引物PCR阳性率47．1％，双引物PCR阳性检出率显著高于HSV培养且差异有统计学意义（P=0．019）；上速临床标本分别进行了2种痛原体的单引物PCR，与双引物PCR对照结果完全一致。结论 我们建立的双引物PCR一次可同时检测2种病原体，且有快速、敏感、特异以及简便的特点。     

三种肺炎支原体特异性抗体IgM检测方法结果的比较

目的:比较三种肺炎支原体特异性抗体IgM检测方法的临床诊断效果及应用价值。方法:将采集的疑似MP感染患者血清标本612份,分别进行酶联免疫法(ELISA);被动颗粒凝集法(PPA)及免疫胶体金法(GIA)肺炎支原体特异性抗体IgM平行检测,具体检测方法、结果判断,均严格按照相应试剂盒说明书执行。结果:通过对三种血清学检测方法结果的比较,酶联免疫法(ELISA)在真阳性(TP)、假阳性(FP)、真阴性(TN)、假阴性(FN)等方面与被动颗粒凝集法(PPA)比较,差异无统计学意义(P>0.05);而与免疫胶体金法(GIA)比较有显著性差异(P<0.05);被动颗粒凝集法(PPA)与免疫胶体金法(GIA)之间比较差异明显(P<0.05),在假阳性率(FPR)、假阴性率(FNR)、敏感度(Sen)、特异度(Spe)、阳性似然比(+LR)、阴性似然比(-LR)、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、约登指数(Youden index)及总符合率(Coincidence rate)等10项评价指标方面酶联免疫法(ELISA)与被动颗粒凝集法(PPA)比较无明显优势,但优于免疫胶体金法(GIA)。结论:三种检测方法都具有高敏感度、高特异度且操作简便,均可用于临床早期快速诊断MP,联合应用可为临床提供更客观、更准确的检测结果,提高MP诊断符合率,以减少漏诊率和误诊率的危害。     

微量全血酶联法检测特异性IgM抗体对呼吸道合胞病毒流行病学调查的应用研究

应用本所建立的微量全血酶联(ELISA)法检测特异性IgM抗体技术,对540例急性下呼吸道感染患儿进行呼吸道合胞病毒(RSV)病原检测,其实验室间检测结果重复性良好(X~2=17.86,P>0.05)。20份用滤纸保存1年的外周血进行RSV—IgM抗体再检测,与初次检测结果比较,证实了其抗体活性稳定。提示该项技术和采集标本的方法十分适宜基层卫生单位在RSV流行病学调查中应用。     

酶联免疫吸附试验检测抗HBc—IgM对诊断乙型肝炎病毒感染的意义

本文介绍了一种酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗HB_c-IgM的方法,具有高度特异性和敏感性。共调查各类肝炎及携带者109例,抗HB_c—IgM检出率急肝为15/57,迁肝16/24,慢活肝8/14,携带者7/14,抗-HB_c-IgM的阳性平均滴度急性早期乙肝(10≥10~(-5))>迁慢肝(10~(3·1))>携带者(10~(2.45))。把抗HB_c-IgM血清稀释度类型分为三类:Ⅰ急性早期乙肝,O,D最高值在10~(-3)至10~(-5)成以上仍为阳性,Ⅱ迁慢肝,O,D最高值常在10~(-2),可达10~(-3)或10~_(-4),Ⅲ携带者,与Ⅱ相似,但下降更迅速。作者对抗HB_c-IgM在诊断急肝,迁慢肝携带者中的应用进行了讨论,指出了高滴度的的抗HB_c-IgM的意义,同时强调动态观察及HBV指标的综合分析。     

ELISA法与荧光定量PCR法检测HSVⅡ感染的应用研究

目的：分析ELIS法和荧光定量PCR法联合检测生殖器范疹感染HSVⅡ的敏感性。方法：对191例生殖器疮疹患者同时运用改良的ELISA法和荧光定量PCR法进行检测。结果：ELISA法检测抗体阳性率为61．8％，荧光定量PCR法检测HSVⅡ阳性率85．9％，总阳性率92．1％。结论：荧光定量PCR法灵敏度优于ELISA法，两种方法联合进行检测可提高校测阳性率。     

快速斑点酶联法(Dot—ELISA)检测抗HBc IgG,IgM,IgA的研究

本文报道以本室自制的梳状硝酸纤维素滤膜为载体,采用问接Dot—ElISA法检测患者血清抗HBc IgM,IgG,IgA。研究表明,本法除可在2h内快速获得结果外,尚有特异性强,敏感性高(检测抗HBc IgG可达0.4ng/ml),操作简便,结果易于观察等优点。与板上ELISA法进行比较检测,符合率为94％。在检测抗HBc IgM时,不受RF因子的影响。将本法所用材料组装成新型试剂盒后,在4℃下可保存半年以上,便于基层单位应用。     

兔抗猪Ⅱ型胶原抗血清的制备与检测

目的：采用纯化的猪Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔制备Ⅱ型胶原抗体,并经改良的ELISA法检测确定Ⅱ型胶原抗体效价。方法：提取猪Ⅱ型胶原,经层析纯化,将纯化无菌Ⅱ型胶原与不完全佛氏佐剂等量混合,注射于兔脚掌、背部和皮下。并每隔20天追加抗原刺激,共3次,每隔一定时间收集血浆,以ELISA法检测抗Ⅱ型胶原抗体。结果：提纯猪Ⅱ型胶原纯度与Sigma标准品一致。Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔,抗体含量具二个高峰期,分别在首次致敏后第21天和第40天,免疫第40天抗血清的效价达1：2430。结论：采用纯化猪Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔短期内可产生高效价抗体。