补体3、补体4B1及载脂蛋白E在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨补体3(C3)、补体4B1(C4B1)、载脂蛋白(Apo)E在胰腺癌中的表达及其与TNM分期和胰腺癌淋巴转移的相关性.方法 收集胰腺癌病理切片标本38例及胰腺癌新鲜标本和癌旁正常胰腺组织各20例.分别应用免疫组织化学和Western印迹方法检测胰腺癌和正常胰腺组织中C3、C4B1、ApoE的表达情况,观察C3、C4B1、ApoE阳性表达率和灰度比的差异.使用SPSS 13.0统计软件包分析其与胰腺癌TNM分期和淋巴转移的相关性.结果 38例胰腺癌组织中C3、C4B1、ApoE表达率分别为73.68%(28/38)、86.84%(29/38)、76.31%(33/38),高于正常胰腺组织的42.11%(16/38)、26.32%(10/38)、42.11%(16/38),差异均有统计学意义(χ2分别＝7.77、19.01、16.60,P值分别=0.01、0.00、0.00).C3、C4B1、ApoE在胰腺癌中的灰度比分别为1.63±0.28、1.25±0.18、2.57±0.22,高于正常胰腺(0.88±0.19、0.65±0.13、1.28±0.24),差异均有统计学意义(t值分别=9.93、11.81、17.71,P值均=0.00).C3与胰腺癌的TNM分期和淋巴转移无关.C4B1、ApoE与TNM分期和淋巴转移密切相关.Ⅱ至Ⅳ期胰腺癌和有淋巴转移胰腺癌中C4B1、ApoE表达明显高于Ⅰ期胰腺癌和无淋巴转移胰腺癌.结论 C3、C4B1、ApoE在胰腺癌中均呈高表达.C3只参与胰腺癌的早期过程,与胰腺癌发展进程无关.C4B1、ApoE参与胰腺癌生长和转移.

Abstract：

Objective To investigate the expressions of complements 3 (C3), 4B1 (C4B1) and apolipoprotein E (ApoE) in pancreatic cancer and relations with TNM staging and lymph node metastasis of pancreatic cancer. Methods Thirty-eight pancreatic cancer biopsy specimens, 20 fresh pancreatic cancer specimens and 20 adjacent normal tissues of pancreatic cancer were collected. The expressions of C3, C4B1, ApoE in pancreatic cancers and normal pancreatic tissues were detected by immunohistochemistry and Western-Blot, the positive expression rates of C3, C4B1, ApoE and the differences in gray scale were also observed. Their association with pancreatic cancer TNM staging and lymph node metastasis were analyzed by SPSS 13.0. Results The expression rates of C3, C4B1, ApoE in pancreatic cancer were 73.68% (28/38), 86.84%(29/38) and 76.31% (33/38) respectively, higher than those in normal pancreatic tissues which were 42.11% (16/38), 26.32% (10/38) and 42.11% (16/38) accordingly, the differences were statistically significant (χ2 was 7.77, 19.01, 16.6, and P value were 0.01, 0.00, 0.00 respectively). The gray scale of C3, C4B1 and ApoE in pancreatic cancer were 1.63±0.28,1.25±0.18 and 2.57±0.22 respectively, higher than those in normal pancreatic tissue (0.88±0.19,0.65±0.13,1.28±0.24 respectively), the differences were statistically significant (t value were 9.93,11.81,17.71 and all P value were 0.00, respectively). There was no association between C3 and TNM staging or lymphatic metastasis of pancreatic cancer. C4B1 and ApoE were closely related with TNM stage and lymph node metastases. The expressions of C4B1 and ApoE in stage Ⅱ to Ⅳ pancreatic cancer or with lymphatic metastasis were significantly higher than those in stage Ⅰpancreatic cancer and those without lymph node metastasis. Conclusion C3, C4B1 and ApoE were all highly expressed in pancreatic cancer. C3 was only involved in early event in pancreatic cancer, not related with development of pancreatic cancer. C4B1 and ApoE were involved in tumor growth and metastasis.     

鼻息肉组织中补体C3、C4、C1q的表达及意义

采用免疫组化SABC法检测补体C3、C4和C1q在30例鼻息肉（NP）和14例正常下鼻甲组织中的表达,对C3、C4和C1q。表达阳性细胞的类型、分布进行分析。结果显示,C3、C4和C1q。在NP组织中的阳性表达率分别为76．67％、66．67％、63．33％,在下鼻甲组织中分别为21．43％、21．43％、14．29％,两者相比,P均〈0．01;C3、C4和C1q。主要表达于NP的上皮细胞及炎性细胞中。认为补体C3、C4和C1q。在NP的发生、发展中起着重要作用。     

DNA甲基转移酶3b在人胰腺癌组织中的表达及其意义

目的 检测人胰腺癌组织中DNA甲基化转移酶3b( DNMT3b)的表达,分析其与肿瘤临床病理特征的相关性.方法 应用蛋白质印迹法检测12例配对人胰腺癌和癌旁组织中DNMT3b的表达;免疫组织化学法检测59例胰腺癌组织中DNMT3b的表达,并分析其与肿瘤临床病理特征的相关性结果 蛋白质印迹法结果显示,胰腺癌及癌旁组织DNMT3b蛋白表达量分别为0.69 ±0.13和0.14 ±0.03,癌组织的表达量明显高于癌旁组织(t=4.464,P＜0.05).免疫组化结果显示,胰腺癌组织DNMT3b阳性高表达率为59％,癌旁组织阴性表达.肿瘤组织DNMT3b表达强度与TNM分期和淋巴结转移相关.结论 DNMT3b在胰腺癌组织中高表达,其表达与肿瘤的恶性生物行为有关.     

人胰腺癌细胞与组织Jab1、Smad4蛋白表达及意义

目的检测人胰腺癌(PC)细胞及组织中抑癌基因Smad4及原癌基因Jun激活区域—连接蛋白1(Jab1)的蛋白及mRNA表达,探讨其在PC发病中的作用。方法采用Western blotting技术检测人PC组织、癌旁组织及人PC细胞系(PANC-1、AsPC-1、BxPC-3)中的Smad4、Jab1蛋白表达;RT-PCR法检测人PC组织、癌旁组织的Smad4mRNA表达。结果在人PC组织中,Smad4蛋白无表达或明显低于癌旁组织,Jab1蛋白表达明显高于癌旁组织(P<0.01或<0.05);两组织中的Smad4 mRNA表达无统计学差异。在3种人PC细胞系中,BxPC-3细胞Smad4蛋白表达阴性、Jab1蛋白表达强阳性,PANC-1及AsPC-1细胞的Smad4蛋白低表达、Jab1蛋白高表达。结论在人PC组织及细胞中,Smad4蛋白低表达或不表达、Jab1蛋白高表达;提示Smad4蛋白不稳定可能与Jab1蛋白水平相关,其可能在PC发病机制中起重要作用。     

类肝素酶在胰腺癌组织中的表达意义

目的 探讨胰腺癌组织中类肝素酶(heparanase 1,Hpal)表达与胰腺癌侵袭性、临床病理等因素之间的关系.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化(SP)法检测37例胰腺癌患者痛组织、癌旁组织及正常胰腺组织中Hpal表达,并统计分析Hpal表达与胰腺癌侵袭性、临床病理等因素之间的相关性.结果 Hpal在胰腺癌组织、癌旁组织、正常胰腺组织中的表达阳性率分别为64.9%(24/37)、56.8%(21/37)和10.8%(4/37).胰腺癌组织中Hpal表达与胰腺癌TNM分期、侵及神经和血管情况、包膜完整情况以及淋巴转移明显相关(P＜0.05),但与患者年龄、性别、组织学分化程度、肿瘤大小无关(P＞0.05).结论 Hpal与胰腺癌发生、发展密切相关,Hpal表达与胰腺癌的侵袭性、局部浸润、临床分期以及区域淋巴结转移有密切关系,胰腺癌Hpal过表达可促进胰腺癌浸润生长与转移,其表达对评价胰腺癌预后亦有一定的价值.     

自身免疫性肝炎患者血清补体C3和C4的临床检测意义

目的评价补体C3、C4在自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的临床检测意义。方法选取2011年5月-2013年12月于奉节县人民医院就诊的AIH患者90例,其中活动期45例,缓解期45例。采用间接免疫荧光法检测患者抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA)的表达,全自动生物化学分析仪检测患者的肝功能生化指标,散射比浊法检测患者外周血中的补体C3、C4、Ig G、Ig A、Ig M的表达水平,肝脏穿刺病理组织检测判断其炎性活动水平。然后分析AIH患者C3、C4水平与炎症活动程度的关系。结果 C3、C4在AIH活动期表达水平[(0.89±0.05)g/L、(0.16±0.03)g/L]显著低于缓解期表达水平[(1.12±0.06)g/L、(0.23±0.04)g/L,P0.01];C3表达水平与AST(r=-0.248,P=0.000)、TBIL(r=-0.372,P=0.003)、DBIL(r=-0.471,P=0.012)呈负相关;C4表达水平与AIH活动期患者肝脏病理组织穿刺的HAI病理评分呈负相关(r=-0.635,P=0.000)。结论 AIH活动期患者补体C3、C4表达水平下降,可通过对其检测辅助评估肝脏炎性活动程度。     

人重组载脂蛋白E在大肠杆菌中的表达和纯化

用含有载脂蛋白EcDNA的PET32a原核表达载体转化大肠杆菌BL21（DE3），使之高效表达载脂蛋白E-thioredoxin融合蛋白，利用融合蛋白上的一段组氨酸序列，用镍离子亲合层析柱进行分离纯化。由于在载脂蛋白E和thioredoxin之间存在凝血酶的识别位点，用凝血酶消化后，经SephacrylS-300凝胶过滤得到人重组载脂蛋白E。用此方法可以从1L大肠杆菌培养液中纯化20-30mg高纯度的各种载脂蛋白E异构体和非自然存原突变体。方法简便，产量高，纯度达95%以上。     

eIF4E和Ki67在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的：探讨eIF4E和Ki67在子宫内膜癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测eIF4E和Ki67在36例Ⅰ型子宫内膜癌、9例Ⅱ型子宫内膜癌及30例正常子宫内膜组织中表达情况,分析两者与子宫内膜癌临床病理特征的关系以及两者表达的相关性。结果 eIF4E、Ki67在Ⅰ型及Ⅱ型子宫内膜癌中的表达均高于正常子宫内膜（P均＜0．01）。 eIF4E和Ki67的表达均与子宫内膜癌组织病理分级、手术临床分期、肌层浸润程度及有无淋巴结转移相关（P均＜0．05）,二者在子宫内膜癌中的表达呈显著正相关（r＝0．763,P＜0．01）。结论eIF4E和Ki67与子宫内膜癌的发生发展有关,联合检测eIF4E和Ki67可能有助于判断子宫内膜癌患者的预后。     

狼疮肾炎患者肾组织中载脂蛋白E的表达及意义

目的 了解狼疮肾炎(LN)肾组织中载脂蛋白E(APOE)的表达,并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系.方法 用免疫组织化学方法对40例LN患者.肾组织APOE的表达进行检测,并对其与LN的肾脏病理改变和肾功能损害的相关性进行分析.结果 健康肾脏组织有较弱的ApoE表达;LN肾组织APOE的表达较健康肾组织明显增高[肾小球(31.2±11.0)与(3.0±1.6);肾小管(71.64±8.90)与(0.60±0.06)],并且Ⅳ型LN患者肾组织APOE表达量高于非Ⅳ型LN患者[肾小球(38.4±4.5)与(18.0±4.6);肾小管间质(77.6±2.5)与(60.0±3.2)];Spearman相关分析显示LN肾组织ApoE的表达与LN肾脏病理活动指数和肾功能呈显著相关(P＜0.01).结论 LN患者肾脏组织中ApoE的表达增高,尤以Ⅳ型LN为著,其表达量可反映LN肾脏活动性病变及肾脏损害情况.     

TMPRSS4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4( TMPRSS4)在胰腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用实时PCR法和蛋白质印迹法检测16例胰腺癌和配对癌旁组织TMPRSS4 mRNA和蛋白表达;采用免疫组织化学法检测61例胰腺癌标本、26例配对癌旁组织、4例正常胰腺组织TMPRSS4蛋白的表达,分析其与临床病理特征的相关性.结果 胰腺癌组织TMPRSS4mRNA和蛋白表达明显高于配对癌旁组织(9.09±7.01比1.27±0.72;1.223±0.125比0.667 ±0.106,P值均＜0.01),胰腺癌组织TMPRSS4蛋白阳性表达率为67.2％ (41/61),显著高于癌旁组织3.8％ (1/26)的阳性表达率(P＜0.01).正常胰腺组织未见TMPRSS4蛋白表达.胰腺癌TMPRSS4表达与患者年龄、性别及肿瘤部位、肿瘤大小无关,而与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期密切相关(P值均＜0.05).结论 胰腺癌组织高表达TMPRSS4,其表达与肿瘤的恶性程度相关.     

91例胃癌患者真核细胞起始因子与血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的探讨胃癌中真核细胞起始因子4E（eIF4E）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况、相互关系及其临床意义.方法应用免疫组化的方法检测91例胃癌及30例正常胃组织中eIF4E及VGEF的表达水平.结果在正常胃组织中未见eIF4E或VEGF阳性表达,在胃癌组织中eIF4E及VEGF的阳性表达率分别为95.6%（87/91）和68.1%（62/91）.eIF4E及VEGF表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移以及临床分期有关（P＜0.05）,但与肿瘤组织学分化程度、年龄、性别无关.胃癌中eIF4E与VEGF表达密切相关（P＜0.05,r=0.407）.结论胃癌组织中eIF4E和VEGF表达水平异常增高在胃癌的发生发展过程中起重要作用,可作为评价胃癌生物学行为的参考指标之一.     

广东籍汉族人系统性红斑狼疮的易感性与补体C4零基因相关分析

目的 分析广东籍汉族人系统性红斑狼疮的易感性与补体Ｃ４零基因相关性。方法 采用国际参考实验室的方法及计算机凝胶图像光密度分析系统检测４５例广东籍汉族ＳＬＥ患者和７８例广东籍汉族正常人的Ｃ４同种异型，特别是Ｃ４＊Ｑ０基因。结果 ＳＬＥ患者组Ｃ４Ａ＊Ｑ０（０．２１９８）和Ｃ４Ｂ＊Ｑ０（０．２１９８）基因频率明显高于正常对照组Ｃ４Ａ＊Ｑ０（０．０４４９）和Ｃ４Ｂ＊Ｑ０（０．０５７７）（Ｐｃｏｒｒ〈０．０     

Mesothelin在胰腺癌组织的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织mesothelin的表达及其与临床肿瘤指标的关系。方法(1)通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测5株胰腺癌细胞株mesothelin mRNA的表达;(2)收集54例手术切除的胰腺癌及42例相应癌旁胰腺组织石蜡标本,利用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织Mesothelin的表达情况。结果5株胰腺癌细胞株均有mesothelin mRNA表达;54例胰腺癌中mesothelin阳性表达41例(75.9%),42例癌旁胰腺组织中均无阳性表达;mesothelin阳性率与肿瘤分化程度相关(P<0.005),与肿瘤大小、淋巴及远处转移无关(P>0.05)。结论Mesothelin在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其表达有助于胰腺癌的诊断,并可作为判断胰腺癌恶性程度的重要指标。     

Serum complement C4a and its relation to liver fibrosis in children with chronic hepatitis C

AIM:To evaluate serum complement C4a and its relation to liver fibrosis in children with chronic hepatitis C virus(HCV)infection.METHODS:The study included 30 children with chronic HCV infection before receiving antiviral therapy.Chronic HCV infection was defined by positive anti-HCV,a positive polymerase chain reaction for HCV-RNA for more than 6 mo with absence of any associated liver disease.A second group of 30 age-and sex-matched healthy children served as controls.Serum C4a levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay.Liver fibrosis stage and inflammatory grade were assessed using Ishak scoring system.Serum C4a levels were compared according to different clinical,laboratory and histopathological parameters.Statistical significance for quantitative data was tested by MannWhitney U non-parametric tests.For qualitative data,significance between groups was tested by 2test.Correlation was tested by Spearman’s test.Results were considered significant if P value≤0.05.RESULTS:The age of the patients ranged from 3.5to 18 years and that of controls ranged from 4 to 17years.C4a mean levels were merely lower in patients(153.67±18.69 mg/L)than that in the controls(157.25±11.40 mg/L)with no statistical significance(P=0.378).It did not differ significantly in patients with elevated vs those with normal transaminases(152.25±16.62 vs 155.36±21.33;P=0.868)or with different HCV viremia(P=0.561).Furthermore,there was no statistical significant difference in serum levels between those with no/mild fibrosis and those with moderate fibrosis(154.65±20.59 vs 152.97±17.72;P=0.786)or minimal and mild activity(155.1±21.93 vs 152.99±17.43;P=0.809).Though statistically not significant,C4a was highest in fibrosis score 0(F0),decreasing in F1 and F2 to be the lowest in F3.When comparing significant fibrosis(Ishak score≥3)vs other stages,C4a was significantly lower in F3 compared to other fibrosis scores(143.55±2.33 mg/L vs 155.26±19.64 mg/L;P=0.047)and at a cutoff value of less than 144.01 mg/L,C4a could discriminate F3 with 76.9%sensitivity and75%specificity from other stages of fibrosis.CONCLUSION:Serum complement C4a did not correlate with any of transaminases,HCV viremia or with the histopathological scores.Although C4a decreased with higher stages of fibrosis,this change was not significant enough to predict individual stages of fibrosis.Yet,it could predict significant fibrosis with acceptable clinical performance.     

Mucin4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织中Mucin 4(MUC4)的表达及其与临床病理参数间的关系。方法(1)采用ABC免疫组织化学方法检测35例胰腺癌、12例胰腺良性肿瘤及5例慢性胰腺炎组织MUC4的表达。(2)通过RT-PCR方法检测12例胰腺癌组织、癌旁胰腺组织以及2株胰腺癌细胞株MUC4 mRNA的表达。结果 (1)35例胰腺癌组织中MUC4蛋白阳性表达24例,12例胰腺良性肿瘤中MUC4蛋白阳性表达2例,5例慢性胰腺炎组织中MUC4蛋白均为阴性。MUC4蛋白胰腺癌组织中阳性表达率显著高于胰腺良性肿瘤及慢性胰腺炎组织(P<0．05)。MUC4在胰腺癌组织中阳性表达率与肿瘤的部位、淋巴结转移、临床分期无关(P>0．05)。(2)12例胰腺癌组织中MUC4 mRNA表达阳性有6例,癌旁组织中无阳性表达,2株胰腺癌细胞株均呈阳性表达。MUC4 mRNA在胰腺癌组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0．05)。结论 MUC4在胰腺癌中有较高的表达率,检测其表达可能有助于胰腺癌的诊断,并可作为鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎一个重要参考指标。     

载脂蛋白E基因多态性与尼尔雌醇的调脂作用

目的　观察尼尔雌醇对绝经妇女的调脂作用与载脂蛋白E(apoE)基因多态性 ,以探讨遗传基因与药物效应的关系。　方法　对 94例绝经 2年以上的妇女按apoE等位基因分为 3组 :apoE2、E3、E4组 ,对其中 36例接受尼尔雌醇治疗的妇女与 5 8例未接受治疗的妇女进行血脂、载脂蛋白以及脂蛋白 (a)〔Lp(a)〕对照比较。　结果　治疗组与对照组比较 ,治疗组高密度脂蛋白 (HDL C)升高、低密度脂蛋白 (LDL C)以及Lp(a)降低 ,差异均有显著性 (P <0 0 5 )。从等位基因分组来看 ,接受治疗的E2组妇女表现为HDL C和TG升高、LD C降低 ,但与对照组比较差异无显著性。接受治疗的E3组妇女HDL C(2 7± 0 9)mmol L、LDL C(3 2± 1 0 )mmol L和Lp(a) (0 4± 0 2 )g L ,与对照组HDL C(1 7± 0 5 )mmol L和Lp(a) (0 5± 0 3)g L比较差异有显著性。接受治疗的E4组妇女表现HDL C(2 6± 1 0 )mmol L升高 ,LDL C(2 5± 1 6 )mmol L、TC(5 5± 0 7)mmol L降低 ,与对照组HDL C(1 4± 0 4 )mmol L、LDL C(4 0± 0 4 )mmol L比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。　结论　绝经妇女使用长效、小剂量尼尔雌醇可以升高HDL C ,降低LDL C以及Lp(a) ,但apoE基因位点不同治疗效果不同 ,E4组妇女是心血管疾病的高危人群 ,激素替代治疗后 ,调脂     

The complement component C4 in black Americans with Type 1 (insulin-dependent) diabetes mellitus

Summary The complement component C4 variants C4A4, C4B 4 and C4B QO were found to be significantly increased in 64 black patients with Type 1 (insulin-dependent) diabetes compared with 169 black control subjects, yielding relative risks of 3.3, 2.9 and 3.4, respectively. The increased frequencies of C4B 4 and C4B QO in black Type 1 diabetic patients are similar to those found in Caucasoid Type 1 diabetic patients. The data suggest that Type 1 diabetes in black Americans may be partially due to admixture of genes from whites.