分子生物学技术在酵母菌鉴定中的应用

传统的酵母菌分类鉴定主要以其形态学特征,尤其是生理生化特征为依据,但这些特征易受培养条件的影响常出现不确定的结果.为弥补这种鉴定方法的不足,近年来,应用分子生物学技术鉴定酵母菌种得到了快速发展.主要介绍了DNA G+C摩尔百分含量分析、脉冲电泳核型分析(PTGE)、随机扩增多态DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)、DNA限制性酶切片段多态性(Restriction Fragmen Length Polymorphism)、序列分析、DNA-DNA杂交等若干分子生物技术的方法、原理以及在酵母菌鉴定方面的应用现状、前景和局限性.     

分子生物学技术在葡萄酒相关酵母菌分类鉴定中的应用及研究进展

利用分子生物学技术手段对葡萄酒相关酵母菌进行分类鉴定具有非常重要的意义.论述了线粒体DNA限制性酶切分析、DNA限制性片段多态性分析、随机扩增多态性DNA分析、脉冲电泳核型分析、核糖体DNA序列分析等5种常用的分子生物学技术在葡萄酒相关酵母菌的分类鉴定和生物多样性研究中的应用及国内外研究进展.为开发和利用葡萄酒相关酵母资源、酿制优质特色葡萄酒奠定了理论基础.     

黄酒生产中酵母菌多相鉴定技术研究

采用包括26S rDNA D1/D2区序列分析、单链构象多态性分析和生理生化方法的多相分类鉴定技术,对18株黄酒生产中的酵母菌进行多相分类鉴定研究.结果表明,18株酵母分别属于 Saccharomyces cerevisiae,Saccharomycopsis fibuligera和Pichia anomala3个种,采用多相分类鉴定技术可以高效、准确的实现实验室及工业生产中酵母菌的快速鉴定,为优化黄酒生产工艺,提高产品质量提供技术支持.     

分子生物学技术在乳酸菌鉴定中的应用

介绍了几种分子生物学技术在乳酸菌鉴定中的应用,并对这些方法的优缺点进行了简单的阐述,并对该技术今后的发展方向做了明确的讨论。分子生物学技术在乳酸菌的分类鉴定过程中必将成为一种主导因素,也会发挥其快速简便的优点。     

分子生物学技术在酒类酒球菌分类鉴定方面的应用

酒类酒球菌(Oenococcus oeni)是葡萄酒进行苹果酸乳酸发酵(malolactic fermentation,MLF)的主要菌群,对其进行快速、高效的分离鉴定非常重要,该文针对不同分子生物学技术在筛选优良酒球菌的原理及应用进行了分析,同时对其前景进行了展望。     

沙棘果酒优良酵母菌的筛选及分子生物学鉴定

目的:筛选适合酿造沙棘果酒的优良酿酒酵母,为开发沙棘果酒酵母菌资源提供试验依据.方法:时来自成熟沙棘果皮、果汁自然发酵液以及沙棘果园土壤的酵母菌进行富集培养和划线分离,通过镜检、杜氏管发酵法进行初筛,通过产酒精能力测试、耐性能力测试、发酵力测试、凝聚性比较,进行复筛.通过26S rDNA Dl/D2区序列测定及系统发育分析对所筛选菌株进行分子生物学鉴定.结果:从成熟沙棘果皮、果汁自然发酵液以反沙棘果园土壤中分离出108株酵母菌.经杜氏管发酵,从中初筛出15株发酵性能较好的酵母菌.进一步复筛出1株优良的沙棘果酒酵母Y23.发酵试验结果表明,该酵母菌起酵快,发酵7d即可产酒精10.4%(体积分数).具有沙棘果酒的典型风味.经分子生物学鉴定,筛选酵母菌Y23与酿酒酵母(S.ceretisiae)Y-12632T(AY048154)的遗传距离最近,两者之间的同源性为100%.结论:筛选的酵母菌Y23最适合沙棘果酒的酿造.该菌株被鉴定为酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Sacharornyces cerevisiae).     

赤霞珠相关酵母菌的分离及其分子生物学鉴定

利用WL营养培养基对分离自昌黎地区赤霞珠葡萄品种的114株酵母菌进行了聚类分析,共得到5个培养类型,并采用5．8 SrDNA—ITS区域RFLP分析对从5个培养类型中选出的27株酵母菌进行了分子生物学鉴定,结果获得了4种不同的酶切图谱。17株被鉴定为Hanseniaspora uvarum,6株被鉴定为Saccharomyces cerevisiae,并对其余4株也进行5．8 SrDNA—ITS区域RFLP分析。     

夏黑葡萄附生酵母菌分离及多相分类鉴定

葡萄野生酵母是酿造优质葡萄酒的重要菌种来源,为发现有价值的野生葡萄酵母,本研究以夏黑葡萄为研究对象,采用平板划线分离的方法得到3株葡萄野生酵母YYMPT-1、YYMPT-2和YYMPT-3,利用扫描电子显微镜（SEM）进行形态观察,PCR扩增26S核糖体DNA的D1/D2区（26S r DNA D1/D2）、核糖体内转录间隔区（ITS1-5.8SITS2）和肌动蛋白基因（Actin gene）区域,并构建系统发育树,将3株酵母菌分别鉴定为有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）、近玫色锁掷酵母（Sporidiobolus pararoseus）和假丝酵母（Candida zemplinina）。本研究结果为优质葡萄酒酿造和改善葡萄酒风味提供了3株具有潜在工业化应用价值的资源菌。      

宁夏产区酿酒葡萄酵母菌初步分类鉴定及多样性研究

通过对从宁夏产区的葡萄园土壤、葡萄果实表皮以及葡萄酒发酵过程中获得的729株野生酵母菌株进行初步分离、形态学鉴定,并运用显微镜摄像技术和利用WL营养琼脂培养基对酵母菌进行聚类分析,最终确定为16个酵母类型。进而确定宁夏产区的葡萄酒相关酵母菌的生物多样性,为地方特色葡萄酒酵母菌的筛选和选育提供理论基础和研究依据。     

降解苹果酸酵母菌的筛选及鉴定

使用YPD培养基从猕猴桃果园的土壤、猕猴桃叶片、猕猴桃果浆和猕猴桃酒酒渣中筛选出酵母菌,通过传代培养及镜检获得纯培养物。用苹果酸降解指示培养基厌氧培养,通过培养液蓝色的深浅筛选出能降解苹果酸的酵母菌,检测酵母菌的降酸能力,进行分子生物学鉴定和同源性分析,再测试酵母菌对酒精、SO2、酸、糖的耐受性,最终得到具有较强苹果酸降解能力的酵母菌株ZJ22、PJ34、ZG13,对苹果酸的降解比例分别为28.36%、25.92%和25.68%。经鉴定,菌株ZJ22和菌株PJ34是酿酒酵母,菌株ZG13是毕赤酵母。耐受性试验表明:酿酒酵母-ZJ22对酒精、SO2、酸和糖的耐受性较好,具有潜在使用价值。     

乳制品中乳酸菌分子鉴定技术进展

该文全面论述了乳制品中乳酸菌分类和鉴定的分子鉴定技术,着重阐述了乳制品中乳酸菌鉴定及多态性研究中的DNA指纹图谱技术、基于rDNA序列的分子标记技术和种间特异性PCR等技术的原理、方法及应用.分子鉴定技术的发展为乳酸菌快速分类和鉴定提供了现代可靠的技术手段.根据不同分子鉴定方法分辨率和检测限的不同,可依据研究目的选择合适的分子方法或分子鉴定与表型鉴定结合的方法更有效快速的进行乳制品中乳酸菌的鉴定.     

新疆自然发酵酸马奶中酵母菌的分离鉴定

从自然发酵酸马奶中分离出25株酵母菌,并对酵母菌进行传统形态学、生理生化特性鉴定。鉴定结果为:12株为克鲁维酵母属Kluyveromyces(8株为马克思克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus,4株为乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis)、1株为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、1株为白地霉Galactomyces geotrichum,其他菌株无法推断出。再利用5.8S rDNA序列同源性分析,对25株酵母菌进行分子生物学鉴定,同时对1、2、18、25、27、28号菌株进行系统发育树分析。鉴定结果为:10株单孢酿酒酵母Kazachstania unispora、8株马克思克鲁维酵母K.marxianus、4株乳酸克鲁维酵母K.lactis、1株酿酒酵母S.cerevisiae、1株白地霉G.geotrichum、菌株27疑似新种。     

分子标记技术用于乳酸菌分类鉴定研究进展

介绍了几种分子标记技术的基本原理和方法及其在乳酸菌分类鉴定中的研究进展.     

两种分子标识在酵母分子鉴定中的比较

rDNA序列同源性分析是一种通用的酵母分子鉴定方法,26S rDNA D1/D2区域和rDNA内部转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)是rDNA序列同源性分析中最为常用的两种分子标识。同时使用这两种分子标识对20株分离自水果表面的酵母菌株进行分子鉴定,结果显示19株酵母分离物的鉴定结果相一致,两种分子标识序列在认定酵母种内和种间关系时都拥有足够的差异,能将大部分酵母菌株直接鉴定到种一级水平。     

宁夏玉泉营地区酿酒葡萄酵母菌的分离筛选及分子鉴定

为进一步探究宁夏玉泉营地区酿酒葡萄酵母菌的多样性,更好地开发利用本土葡萄酒产区酵母菌资源,从宁夏玉泉营地区的葡萄园土壤、葡萄果实表皮以及葡萄自然发酵过程中进行酵母菌的分离筛选,对得到的22株酵母菌株运用WL营养琼脂培养基进行初步聚类分类,并采用26S rDNA D1/D2区序列分析法进行菌株鉴定。结果表明,供试菌株共鉴定为6种,分别为大隐球酵母（Cryptococcus magnus）、美极梅奇酵母（Metschnikowia pulcherrima）、葡萄酒有孢汉生酵母（Hanseniaspora vineae）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、克鲁维毕赤酵母（Pichia kluyveri）、东方伊萨酵母（Issatchenkia orientalis）。     

DNA条形码技术在石斛分类鉴定中的应用进展

由于石斛属植物种间、种内形态相似,地域分布范围广泛、杂交种众多,市场上混乱,现亟需一种简单、高效的鉴定方法对其进行准确地鉴定。DNA条形码技术利用标准的一个或多个DNA片段对物种进行鉴定,是近年来生物学研究的热点领域,也是生物学发展最迅速的方向之一。DNA条形码技术可以从分子水平弥补传统鉴定方法的一些不足。该技术具有良好的通用性,使得物种鉴定过程更加快速,已经广泛应用于石斛的鉴定研究中。本文综述了DNA条形码技术及其原理,同时讨论了基于核基因片段(ITS、ITS2)以及叶绿体基因片段(matK、rbcL、psbA-trnH)在石斛分类鉴定中的应用,以期为加大石斛分类鉴定的力度和精度,以及为DNA条形码技术在石斛分类鉴定领域拓展和应用提供一定的理论指导依据。     

咖啡真实性鉴别技术研究进展

咖啡作为世界上人们最喜爱的饮品之一, 具有广阔的消费市场, 需求量巨大。但由于干旱和农作物疾病的影响, 近年来巴西、非洲等咖啡主要产地的咖啡产量显著下降。咖啡豆的资源紧缺和高利润导致咖啡真实性问题逐渐成为全球关注的热点。咖啡中的物种掺假、品种掺假和地理来源标示虚假是3种比较常见的真实性问题。本文综述了国内外研究者关于咖啡真实性鉴别技术的研究进展, 包括光谱检测技术、色谱/质谱检测技术、分子生物学检测技术和多种手段联合技术, 探讨了不同检测技术的优缺点, 并对该领域分析技术未来的发展趋势进行展望, 以期能为咖啡的真实性问题的解决提供资料参考和依据。