重组人血管内皮抑制素治疗食管癌的研究进展

重组人血管内皮抑制素是一种新型抗血管生成药物,能够抑制血管内皮细胞生成,降低血管内皮生长因子水平.近年来研究发现重组人血管内皮抑制素注射液(商品名:恩度)可以抑制食管癌细胞生长,联合放化疗治疗食管癌可以提高临床疗效.本文主要针对恩度治疗食管癌的研究进展做综述.     

重组人血管内皮抑制素注射液

[通用名称]recombinant human endostatin injection，重组人血管内皮抑制素注射液 [商品名]恩度，Endostar [性状]无色澄明液体     

重组人血管内皮抑制素体外生物学活性检测方法的研究

为建立重组人血管内皮抑制素（rh-endostatin,rh-ES)体外生物活性检测方法。选用牛肾上腺毛细血管内皮细胞（BCE）作为靶细胞。应用酶免疫染色技术建立了rh-ES的生物活性检测方法，并探讨了rh-ES在不同剂量条件下对BCE细胞的抑制活性。结果表明，该法具有简便，稳定，重复性好的特点，同时证明rh-ES对BCE细胞有明显的抑制作用。     

重组人血管内皮抑制素壳聚糖纳米粒的制备

目的 以壳聚糖(CS)为载体,研究其对重组人血管内皮抑制素(Endostar)的包封及控释能力.方法采用大分子复合法制备纳米粒,考察形成条件及冻干工艺,并对纳米粒的形态、包封率、体外释放及Endostar的完整性进行考察.结果CS与羧甲基纤维素钠( CMC - Na)的质量比介于6∶1～1∶2时可以形成纳米粒,粒径为1...     

重组人血管内皮抑制素对人胃癌MGC-803细胞株VEGF表达的影响

目的探讨重组人血管内皮抑制素(rhEndo)对人胃癌细胞株MGC-803血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法免疫组化法观察MGC-803细胞株VEGF的蛋白表达。rhEndo处理MGC-803后,用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平检测VEGF表达量的变化。结果 MGC-803细胞高表达VEGF蛋白,经rhEndo处理后VEGF mRNA和蛋白表达量明显减低(P<0.05)。结论 rhEndo能抑制MGC-803细胞中VEGF的表达。     

重组人血管内皮抑制素用于晚期肿瘤的治疗与护理

重组人血管内皮抑制素（恩度）是为血管生成抑制类生物制品（大肠杆菌工程发酵产品）。我院2006年10月-2007年7月应用恩度治疗肿瘤复发、高龄及体质较差的晚期肿瘤患者,并进行观察及护理,报道如下。     

抗肿瘤治疗新希望：重组人血管内皮抑制素

1971年Folkmen首次提出肿瘤生长依赖血管形成的观点。基于此观点，提出了抗血管生成治疗肿瘤的设想。近年来体内外研究证实，重组人血管内皮抑制素（en-dostar，商品名恩度）能直接抑制肿瘤细胞，并具有抑制肿瘤转移的功能。自2001年起，经国家食品药品监督管理局批准，[第一段]     

重组人血管内皮抑制素治疗瘢痕疙瘩的临床观察

目的:探讨重组人血管内皮抑制素治疗瘢痕疙瘩的有效性及安全性。方法:将2015年1月-2016年1月在南充市中心医院就诊的瘢痕疙瘩患者64例按随机数字表法分为观察组和对照组,各32例。两组患者均进行点阵CO_2激光治疗。术后,对照组患者常规给予抗氧化药物和抗菌药物治疗;观察组患者在对照组治疗基础上加用重组人血管内皮抑制素注射液0.1~0.2 mg/cm~2进行瘢痕瘤体注射,每月1次,共注射2次。比较两组患者的临床疗效、激光治疗后和治疗2个月后的症状评分、创面愈合时间、治疗前后的创面色素沉着面积和瘢痕面积,以及不良反应发生情况。结果:观察组和对照组患者的总有效率(93.75%vs.87.50%)和不良反应发生率(15.63%vs.12.50%)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗2个月后,对照组患者的各项症状评分与激光治疗后比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者红斑、水肿和色素沉着评分明显低于治疗前及对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者瘙痒和灼痛感评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者的创面结痂时间、脱痂时间及创面完全愈合时间均明显短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者的色素沉着面积和瘢痕面积均明显小于治疗前,且观察组均明显小于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:重组人血管内皮抑制素治疗瘢痕疙瘩可有效缓解红斑、水肿、色素沉着等症状,缩短创面愈合时间,可有效抑制色素沉着及瘢痕的再生,且安全性较好。     

双抗原夹心酶联免疫法检测抗白细胞介素-3的抗体

目的 :建立一种多用途、快速简便和易行的检测抗白细胞介素 3(IL 3)抗体的酶联免疫检测方法。方法 :以高纯度的基因工程人白细胞介素 3(rhIL 3)包被酶标板 ,以辣根过氧化物酶标记rhIL 3,建立了检测抗rhIL 3抗体的一步法双抗原夹心法。结果 :特异性 :与相似的蛋白分子 (其它细胞因子抗体 )无交叉反应 ,实验动物和人的正常血清反应呈阴性。灵敏度 :最低检出限为抗IL 3的单抗 5ng/ml。精密性 :组间和组内变异系数均 <1 2 %。应用于rhIL 3长期毒性实验取得良好的检测效果。结论 :此法特异性强、灵敏度高、方法稳定、操作简便 ,与其它细胞因子的单抗无交叉反应 ,能在同一条件下检测不同种属动物血清中的IL 3抗体 ,用于IL 3长期毒性实验等明显优于间接酶联免疫法。     

人巨细胞病毒重组抗原及单克隆抗体在ELISA中的应用

用重组人巨细胞病毒（rhCMV)gp52蛋白作抗原及相应的单克隆抗体酶标记物建立捕获ELISA，检测人血清中的HCMV特异性IgM抗体。其工作浓度均由方阵滴定法确定。并进行精密度、特异性和干扰实验。用该法检测体检献血员病毒性肝炎患者及疑似CMV感染的肝炎综合症患者血清共计939份。结果gp52蛋白抗原最佳浓度为1μg/ml,酶标单抗的工作浓度为1：1600，批内平均变异系数CV3．7％，批间CV7．9％。634例献血员IgM抗体阳性17例（2．7％）；288例病毒性肝炎患者，阳性10例（3．5％）；17例肝炎综合症患者，阳性11例（64．7％）。均经免疫印迹法证实。该组合特异性强，灵敏度高，不受类风湿因子的影响，结果可靠，优于全病毒抗原构成的检测试剂。适用于临床诊断和流行病学调查。     

ELISA法定量测定抗精子抗体AsAb

目的 通过对抗精子总抗体(AsAb)的测定,探讨其与临床不育(或不孕)症的关系.方法 对107例志愿者AsAb的类型和含量用ELISA法进行了分型和定量研究.结果 总抗体的测定上限可达500U/ml;回收率在96.4%～103.0%之间;批内重复性为2.1%～5.0%;本试剂盒呈色稳定性较好,操作简单.通过测定其参考值范围为AsAb＜75.3U/ml.结论 该法准确可靠,可作为临床诊断不育或不孕症病因的辅助诊断方法.     

重组人血管内皮抑制素冻干粉针剂的研制和质量评价

目的研究重组人血管内皮抑制素(endostar)冻干粉针剂的制备和质量控制。方法以4%甘露醇、2%蔗糖、30mm乙酸钠为辅料,将endostar制备成冻干粉针剂。分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)和高效液相法(HPLC)分析冻干粉的纯度,使用人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)分析冻干粉的活性,其他检测项目按照《中国药典》进行。结果 Endostar冻干粉的纯度大于99%,生物学活性每支含量2.4×105U,等电点主区带在8.8～9.8之间,冻干粉用胰蛋白酶消化后,肽图与理化对照品一致。结论按照此工艺制备的endostar冻干粉针剂各项指标均符合《中国药典》要求。     

重组人内皮抑素工程菌发酵条件的优化

重组人内皮抑素(rhEndostatin)是人内皮抑素经过基因突变获得的新的蛋白质序列,是一种血管生成抑制剂类蛋白,具有抗肿瘤活性.实验对蛋白rhEndostatin产生菌E. coli BL21(DE3)的基本发酵条件进行了研究并用正交试验对培养基成分进行了优化,优化后的培养基组成为:蛋白胨1%,酵母粉0.5%,葡萄糖0.5%,NaC1 0.2%,Na2 HPO4·12H2O 1.5%,KH2PO4 0.2%,(NH4)2SO4 0.2%,MgSO4·7H2O 0.02%,VB15mg/L,VB2 1 mg/L,微量元素:CoCl2·6H2O 5 mg/L,MnCl2·4 H2O,H3BO3,Na2MoO4·2H2O,AICI3·6H2O,Ferric citrate均20 mg/L.优化后的培养基在发酵罐发酵,湿菌重达到45 g/L以上,目的蛋白产量达324 mg/L,为rhEndostatin的进一步研究开发打下了基础.     

乳糖诱导重组人内皮抑素在大肠杆菌中的表达

使用乳糖作为诱导剂,摇瓶培养大肠杆菌Origami(pET-hES)发酵生产重组人内皮抑素,优化了诱导温度、诱导时机、诱导时间及诱导剂浓度四因素.利用SDS-PAGE电泳检测并分析上述各因素的优化效果.结果表明,25℃,在菌株对数生长初期(培养6 h,D600=0.8)加入乳糖至终浓度为8 g/L,诱导14 h,可溶性目的蛋白表达量占其总表达量的82%;总目的蛋白表达量占全菌总蛋白的35%,优于以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)为诱导剂的诱导效果(25%).     

重组人血管内皮抑素联合化疗治疗乳腺癌的实验研究

目的 研究重组人血管内皮抑素联合化疗方案对人乳腺癌裸鼠移植瘤模型的治疗效应,并进一步探讨其抑制肿瘤血管生成的作用机制。 方法 将乳腺癌荷瘤裸鼠40只随机分为4组,分别为化疗组、内皮抑素组、联合用药组及对照组。化疗组给予长春瑞滨和顺铂;内皮抑素组给予重组人血管内皮抑素;联合用药组给予长春瑞滨,顺铂,和重组人血管内皮抑素;对照组给予等量的生理盐水。给药期间测量肿瘤大小,实验结束取肿瘤称重,计算肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并比较各组的抑瘤率。免疫组化方法检测各组肿瘤组织微血管密度(MVD),VEGF,HIF-1α及P53的表达。 结果 联合用药组抑瘤率为64.63％,化疗组抑瘤率为35.47％。联合用药组与其他3组MVD计数比较明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组及化疗组相比,联合用药组的VEGF、HIF-1α和P53的表达均明显减少,其差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论 重组人血管内皮抑素联合化疗能够有效控制裸鼠乳腺肿瘤生长,降低肿瘤MVD,其机制可能为下调VEGF及HIF-1α的表达。内皮抑素对P53的作用机制有待于更进一步的研究。     

重组人血管内皮抑素联合DIA方案治疗骨肉瘤的临床分析

目的观察重组人血管内皮抑素联合DIA方案治疗骨肉瘤的临床效果。方法将我院2007年9月至2008年9月收治的76例骨肉瘤患者随机分成观察组和对照组,每组38例。所有患者手术治疗后,观察组采用重组人血管内皮抑素联合DIA方案治疗,对照组采用DIA方案治疗,比较两组的临床疗效、不良反应、5年生存曲线以及肢体功能。结果观察组和对照组的临床有效率分别为71.0%、51.3%,观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者不良反应的差异无统计学意义(P>0.05);而5年生存曲线以及肢体功能的差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组人血管内皮抑素联合DIA方案治疗骨肉瘤的疗效较单用DIA方案更好,且安全性高,值得在临床推广。     

婴幼儿仙台病毒天津株感染的IgM抗体检测及意义

目的:通过对婴幼儿仙台病毒天津株感染的IgM抗体检测,了解人兽共患病原体——仙台病毒对婴幼儿急性下呼吸道的致病情况。方法:观察组为2006年冬季天津市儿童医院0～7岁首诊呼吸道感染患儿83例血清标本,通过间接免疫荧光检测法(IFA)排除了7种常见呼吸道病毒的感染,用自建的酶联免疫吸附法(ELISA)对仙台病毒的IgM抗体进行检测,同时设20例正常儿童血清标本为阴性对照组。结果:观察组16例为阳性,阳性率19.28%。与2004年同期数据44.59%(33/74)相比,本组阳性率有所降低,差异有统计学意义(P<0.01)。IgM抗体检测阳性率1岁内最高,1～3岁和3～7岁组阳性率基本接近,但3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:仙台病毒在儿科急性呼吸道感染的病原体中占有一定的比例,不可忽视。应对其感染状况进行深入研究。     

弓形虫STAg免疫小鼠后血清抗体水平的动态检测

目的 观察弓形虫可溶性速殖子抗原(STAg)免疫小鼠后,小鼠血清IgG抗体水平的动态变化,探索STAg抗原的最佳免疫次数.方法 5～6周龄BALB/c小鼠20只,随机分成对照组和实验组,其中对照组头背部皮下注射生理盐水,实验组头背部皮下注射20 μg STAg,免疫5次,每次免疫1周后取5只小鼠,采血并分离血清,通过ELISA法测定IgG抗体;通过Western Blot方法检测血清中产生的IgG和IgM抗体条带.结果 第二次免疫后小鼠血清IgG值明显高于初次免疫小鼠的血清IgG值,差异有统计学意义;但是.Western Blot检测的IgG抗体条带颜色未明显增强.第四次免疫后小鼠血清IgG再次增高并达到峰值,同时第四次免疫后小鼠血清中的IgG抗体条带的反应颜色也明显变深.结论 利用STAg免疫小鼠,免疫2次就会产生明显的免疫效果,但是免疫4次可进一步有效提高小鼠的免疫力.