鹿流行性出血热病毒

鹿流行性出血热病毒陈志飞李树清（上海动植物检疫局２０００３２）鹿流行性出血热病毒（ｅｐｉｚｏｏｔｉｃｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｄｉｓ－ｅａｓｅｖｉｒｕｓｏｆｄｅｅｒ，ＥＨＤＶ）又叫鹿流行性出血病病毒，是呼肠孤病毒科环状病毒属的一种虫媒病毒，能引起白尾鹿严...     

鹿流行性出血热病毒研究进展

鹿流行性出血热病(EHD)是一种在全世界野生及驯养的有蹄动物中广泛存在的虫媒病毒病。以白尾鹿、糜鹿、大角羚羊等多种驯养和野生反刍动物体温升高、呼吸困难、黏膜和浆膜面出血、常处于昏迷状态下死亡为特征的严重致死性传染病,牛和羊也可以感染发病,导致怀孕牛流产、死产。我国虽然尚无鹿流行性出血热暴发的报道,但从全球范围看其对养殖业的危害不容小觑。本文从流行与分布情况,病原学,流行病学,临床症状和病理变化等进行综述,为牛羊鹿流行性出血热病毒病的诊断与控制提供参考。     

云南省2株鹿流行性出血热病毒的分离鉴定

为了监测云南省反刍动物鹿流行性出血热病毒(epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)的感染情况,本试验在云南省师宗县设立了监控点,筛选出EHDV抗体阴性的10头牛和5只羊作为哨兵动物,每年的5～10月份每周采血1次,11月到次年4月份每月采血1次,通过酶联免疫吸附试验监测其抗体转阳情况,用转阳牛的红细胞接种BHK以分离病毒,用病毒RT-PCR和中和试验鉴定病毒。结果显示,从2头转阳牛的抗凝血中分离到2株EHDV,其TCID₅₀分别为10^-2.5/0.1 mL和10^-3.44/0.1 mL,血清型均为EHDV-5型。本试验在云南省分离到EHDV,明确了云南省反刍动物存在EHDV感染,为我国监控EHDV流行情况及疫病风险防范提供了重要借鉴意义。     

新疆牛群中鹿流行性出血热血清学调查

本研究采用鹿流行性出血热(EHD) cELISA诊断试剂盒分别对2014年和2015年6、7月份从新疆10个地(州、市)随机采集的662份牛血清进行了EHD检测。结果检出阳性48份,阳性率为7.25%;检出地区有:哈密市、巴里坤县、伊吾县、尉犁县、岳普湖县,其中哈密市和岳普湖县的阳性率较高,在20%左右。这是首次对新疆部分地区进行EHD血清学调查,检测结果为今后新疆地区的EHD研究,特别是病原学方面研究提供了科学依据。     

鹿流行性出血热的诊断

鹿流行性出血热是一种以高热和各种组织器官广泛性出血为特征的病毒性传染病。鹿流行性出血热病毒属于呼肠孤病毒科、环状病毒属。病毒含双股RNA,无囊膜,对乙醚等脂溶剂不敏感。本病首次报道于1955年,实际上1890年已有该病流行。在美国、加拿大等国均有发生。由于国际交流日益频繁,同时该病发病急、死亡率高,严重威胁养鹿业发展。     

鹿流行性出血病病毒双抗夹心ELISA方法的建立

为建立鹿流行性出血病病毒(EHDV)病原学检测方法,用纯化的抗EHDV特异性单克隆抗体包被ELISA板,用兔抗EHDV IgG作为夹心抗体,IgG作为夹心抗体建立EHDV双抗夹心ELISA方法,并对该方法的特异性和敏感性进行了试验.用ELISA分别检测EHDV、蓝舌病病毒(BTV)、水疱性口炎病毒(VSV)、赤羽病病毒...     

应用PCR技术检测鹿流行性出血病病毒

对PCR (包括PCR/化学发光杂交检测、抗体亲和捕获套式PCR检测、原位PCR检测、PCR/RFLP检测 )检测在最近几年鹿流行性出血病病毒 (EHDV ,包括EHDV 1 ,EHDV 2等 )临床诊断的应用和研究成果进行了论述 ,认为该技术为EHD的诊断、流行病学调查、疫情监控及防制等提供了一种更灵敏、特异和快速的方法     

鹿流行性出血病病毒单克隆抗体的制备与鉴定

为了更好的研究鹿流行性出血病病毒(EHDV)的生物学特性和建立EHDV免疫学检测方法,本研究用纯化的EHDV免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,有限稀释法克隆,获得了2株(1A5和8H6)能够稳定分泌抗EHDV单抗的杂交瘤细胞株.其细胞培养上清效价分别为1∶256和1∶512,腹水效价分别为1∶1 024 000和1∶2 048 000;McAb 1A5和8H6 的相对亲和力分别为0.9 mg/L和0.7 mg/L.间接ELISA结果显示,2株单抗仅与EHDV反应,不与蓝舌病病毒、赤羽病病毒、水疱性口炎病毒、小反刍兽疫病毒和BHK细胞反应,表明2株单抗特异性良好.这2株单抗的获得为研究EHDV生物学特性和建立EHDV检测方法奠定了基础.     

鹿流行性出血病毒分子生物学研究进展

鹿流行性出血病毒是一种在全世界野生及驯养的有蹄动物中广泛存在的重要病原体.该病毒属呼肠病毒科环状病毒属,有12个血清型,是一种有10个节段(L1-L3、M4-M6、S7-S10)的双链RNA病毒,编码10个蛋白(VP1-7和NS1、NS2、NS3/NS3A).VP7蛋白具有很强的抗原性且保守性最高.VP2与病毒型特异性有关,可诱导产生中和抗体.VP3为群特异性抗原,高度保守,具有亲水性保守区域.非结构蛋白NS1、NS2和NS3/NS3A及其编码序列均相当保守.该病毒的分子生物学诊断技术主要有PCR和核酸探针杂交技术.     

猪流行性腹泻GZ9101病毒株核酸型的鉴定

将我们分离并适应于猪肾传代细胞株（ＰＫ１５）传代、增殖的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）。经多次冻融后进行浓缩处理，在抽提病毒核酸前使用核酸酶和蛋白酶Ｋ清除细胞核酸和杂蛋白，抽提后的病毒核酸用ＲＮＡ酶消化；将各个试样以０．８％琼脂糖凝胶进行电泳分析，结果表明，ＰＥＤＶ样品的核酸型为ＲＮＡ。     

猪流行性腹泻病毒(PEDV)核酸疫苗研究进展

猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是危害养猪业健康发展的重要疾病之一.它是急性的,具有高度传染性,给养猪业造成严重的经济损失.猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染会破坏动物的消化系统,导致患猪食欲不振,呕吐和严重腹泻,用...     

猪对传播流行性出血热作用的研究

应用ＩＦＡ和免疫酶染色法（ＩＥＡ）分别对家猪屠宰工人和饲养员及其猪肺组织和血清检测流行性出血热（ＥＨＦ）病毒抗原与抗体（抗－ＥＨＦ），结果屠宰工人和饲养员ＥＨＦ隐性感染率随着工龄和接触时间的增加而上升，呈正相关关系（ｒ＝０．９５；０．９８）。特别是从ＥＨＦ病毒抗原阳性猪的饲养员抗－ＥＨＦ率高达２０％（２／１０），而ＥＨＦ病毒抗原阴性猪饲养员未见感染（０／５０），不同疫区猪带毒率和抗－ＥＨＦ阳性率均     

流行性出血热及其检测技术的研究进展

流行性出血热(epizootic hemorrhagic disease, EHD)是由节肢动物库蠓叮咬引起的一种在全世界野生及家饲有蹄动物中广泛分布的非接触性虫媒病毒病,目前至少有9种血清型,其中有7种在我国流行。流行性出血热病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus, EHDV)主要感染鹿和牛,羊和其他反刍动物为无症状感染,给养殖业造成了严重损失。检测EHDV的方法有很多,主要以分子生物学和血清学检测方法为主。文章就EHD的病原学、流行病学及检测方法等方面进行综述,重点总结了该病的检测方法,以期为相关研究提供参考。     

流行性出血热及其检测技术的研究进展

流行性出血热(epizootic hemorrhagic disease,EHD)是由节肢动物库蠓叮咬引起的一种在全世界野生及家饲有蹄动物中广泛分布的非接触性虫媒病毒病,目前至少有9种血清型,其中有7种在我国流行.流行性出血热病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)主要感...     

云南边境地区流行性出血热病毒血清学监测及血清型鉴定

为了解近几年云南边境地区牛、羊流行性出血热病毒（EHDV）的感染和流行情况,本研究从2014年起连续3年在与老挝、越南接壤的江城县设置EHDV监测点,每年选择投放EHDV抗体阴性的10头牛和5只山羊作为哨兵动物进行跟踪监测。每年5~10月份对哨兵动物采血,每周1次,11、12月每月采集一次,进行EHDV抗体、抗原监测和病毒分离。针对致细胞病变的样品,采用EHDV群特异性S7基因片段引物进行RT-PCR方法检测,同时利用EHDV-1、-5、-6、-7、-10标准阳性血清对分离到的病毒进行中和试验鉴定。结果显示,2014－2016年江城县牛EHDV抗体阳性率分别为41.9%、58.6%和75.4%;3年期间共监测到15头EHDV抗体阳性黄牛,并从中分离到20个可致细胞病变样品,经RT-PCR确认为EHDV,遗传进化分析发现有11个毒株与1997和2003年日本分离的EHDV毒株亲缘关系较近,9个毒株与1977和1981年澳大利亚分离的EHDV毒株亲缘关系较近,5个毒株与2015年广西分离株的亲缘关系较近;3年期间在山羊体内未检测出抗体,未发现抗原阳性动物;经中和试验血清型鉴定,确定20株毒株包括EHDV-5、-6、-7、-10型4种血清型,感染时间均在5~9月之间。本研究发现,江城县长期存在多种血清型EHDV同时流行,2014－2016年EHDV抗体阳性率逐年增加,亟需加强对EHDV感染情况及活动规律的持续研究,提高流行性出血热的防控效率。     

鹿流行性出血病病毒VP7基因的克隆及原核表达

根据已经扩增的鹿流行性出血病病毒(EHDV)VP7基因序列,设计一对扩增VP7基因特异性引物,用RT-PCR从血清I型EHDV(EHDV-1)总RNA中扩增VP7基因,并将其克隆到原核表达载体pBAD/Thio中,构建了重组原核表达质粒pBAD/Thio-EHDV VP7。将表达载体转入大肠埃希菌(E.coliLMG194),用L-阿拉伯糖诱导表达。SDS-PAGE和Western blot试验结果表明,EHDV VP7基因在LMG194中得到了表达,其表达产物可以与EHDV阳性血清特异性反应,说明该融和蛋白具有免疫学活性。