HL-60细胞IRP2 mRNA、TfR mRNA、Fn mRNA的表达关系研究

为了探讨白血病细胞铁代谢及其调节机制，以及铁调节蛋白2（IRP2）在HL-60细胞铁代谢中的作用，将FeCl3或去铁胺（desferrioxamine，DFO）加入含有10％胎牛血清的RPMl1640培养液中，使HL-60细胞处于缺铁或富铁的不同状态下进行培养。分别于细胞培养后第12、24和48小时收集细胞，提取总RNA，采用RT-PCR半定量法测定IRP，mRNA、铁蛋白（Fn）mRNA和转铁蛋白受体（TfR）mRNA等指标的相对表达量。结果表明：①各实验组之间IRP2 mRNA的表达量变化不大，组间差异无统计学意义（F组间=1．199，P〉0．05）；而细胞培养时间对IRP2 mRNA的表达有影响，组内差异有统计学意义（F组内=43．418，P〈0．01），表现为随时间的延长，IRP2 mRNA的表达降低。②各实验组之间TfR mRNA的表达差异有统计学意义（F组内=7．184，F组间=113．926，P〈0.01）。在加入DFO的两个实验组中，TfR mRNA的表达升高。在加铁的两个实验组中，与对照组相比较，于12小时时TfR mRNA的表达量上升，24小时时达到高峰，之后迅速下降。③在加铁的两个实验组中，Fn mRNA的表达量较高，大约是对照组的2倍，它们与对照组比较，差异具有统计学意义（P〈0．05）；而在加入DFO的两个实验组中Fn mRNA的表达与对照组相比较，无明显的差异（P〉0．05）。④IRP，mRNA与TfR mRNA及Fn mRNA的表达均不相关（r=-0．005，r=0．074，P〉0．05）。结论：①IRP2在转录水平上可能是通过自身不同片段的量的变化，而在转录后水平上是以氧化修饰的方式通过自身降解，对HL-60细胞的铁代谢进行调节。②Fn mRNA和TfR mRNA不同程度地参与了对HL-60细胞内铁的调控过程。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心功能及bcl-2和caspase-3mRNA表达水平的影响

目的观察急性心肌梗死大鼠应用骨髓间充质干细胞（MSCs）移植前后心功能及凋亡相关蛋白bcl-2和caspase-3 mRNA的变化,以期了解骨髓间充质干细胞移植治疗心梗的机制。方法40只SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组、假手术组、心梗组、移植组,每组各10只。心梗组和移植组大鼠分别结扎前降支造成心梗模型。取大鼠骨髓,体外分离扩增培养MSCs。术前4组大鼠进行超声心动图检测心功能,结扎后移植组立即予MSCs多点注射到大鼠心肌梗死区周边,而梗死组和假手术组注射同剂量培养液,对照组不注射。饲养8周后,分别予超声心动图心功能检测。取梗死周边区心肌行RT-PCR检测bck2和caspase-3mRNA的表达。结果术前4组大鼠心功能指数无显著差异（P〉0．05）;而MSCs移植后,梗死组大鼠心肌LVESD、LVEDD较其它3组明显增高,差异具有显著性（P〈0．05）;而移植组又较对照组和假手术组明显增高（P〈0．05）;而对照组和假手术组在上述指标中无显著差异（P〉0．05）;梗死组大鼠EF较其它3组明显降低（P〈0．05）;而移植组又较对照组、假手术组明显降低（P〈0．05）;而对照组与假手术组之间无显著差异（P〉0．05）。bd-2mRNA在对照组和假手术组表达较少,而在梗死组表达增加,差异有显著性（P〈0．05）;在移植组表达更多,与梗死组相比有显著性（P〈0．05）;caspase-3在对照组和假手术组表达较少,在梗死组表达增加,有显著差异（P〈0,05）;在移植组表达又较梗死组表达减少,有显著差异（P〈0．05）;但与对照组和假手术组相比,表达增加（P〈0．05）。结论急性心肌梗死移植MSCs后,心功能得到改善,心肌凋亡得到抑制。     

结直肠癌组织cripto基因mRNA水平及临床意义

目的检测cripto基因mRNA在结直肠癌及其癌旁组织中mRNA表达情况，并探讨其在结直肠癌发生发展中的意义。方法提取36例人大肠癌及癌旁正常组织中总mRNA，采用实时荧光定量PCR法检测其中cripto mRNA表达情况；并分析其表达与患者淋巴结转移、肿瘤分化程度和Dukes’s分期相关性。结果cripto mRNA表达在大肠癌组织中阳性表达率为86．1％（31／36），而正常肠组织未见cripto mRNA表达，统计学差异显著（P〈0．0001）。criptomRNA表达与浆膜侵袭、淋巴结转移和Duke’s分期密切相关（P〈0．05，P〈0．05，P〉0．05），而与患者肿瘤发生部位和分化程度无关（P〉0．05，P〉0．05）。结论cripto基因在结直肠癌组织中高表达，可能与大肠侵袭痈转移有关。     

哮喘患者单个核细胞Th1／Th2和IFN-γ及IL-4 mRNA表达

目的探讨外周血单个核细胞Th1／Th2在哮喘发病中的作用和IFN-γ及IL-4 mRNA表达的情况。方法分别用流式细胞仪及RT-PCR方法检测97例哮喘患者及20例健康人外周血单个核细胞（PBMCs）Th1／Th2水平和IFN-γ及IL-4 mRNA表达。结果哮喘组外周血Th1细胞百分比低于对照组（P〈0．01），而Th2百分比高于对照组（P〈0.01）；哮喘组PBMCS IFN-γ的mRNA表达水平与对照组差异无统计学意义（P〉0．05），而IL-4 mRNA的表达显著高于对照组（P〈0．01）。结论哮喘患者体内存在Th1／Th2的失衡，并提示哮喘属于Th2优势疾病。     

乳腺浸润性小叶癌的声像图特征与病理及Id1mRNA、Id2mRNA表达的研究

目的立足超声检查,分析乳腺浸润性小叶癌（ILC）的病理表现,进一步认识其超声特征;探讨ILC的超声表现与Id1mRNA及Id2mRNA表达之间的关系。方法应用实时荧光定量FIT—PCR检测42例ILC样本中Id1mRNA及Id2mRNA的表达,并与ILC的超声表现进行对照分析。结果Id1mRNA在乳腺正常组织中表达低于癌组织（P〈0．05）,ILC WHOⅢ级表达高于WHOⅠ级（P〈0．01）。Id2mRNA在正常组织中表达高于癌组织（P〈0．05）,WHOⅢ级表达低于WHOⅠ级（P〈0．05）;具有毛刺征及周边高回声晕特征的组别,Id1mRNA均呈高表达（P均〈0．01）,Id2mRNA的表达与ILC超声征象之间均无统计学差异（P〉0．05）。结论ILC声像图表现与其病理改变密切相关;ILC的超声征象可在一定程度上反应Id1mRNA的表达水平。     

胃癌组织中Kangai-1 mRNA和基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达及临床意义

目的：检测Kangai-1（KAI-1）mRNA和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA在胃癌组织中的表达．探讨其与胃癌临床病理特征之间的关系。方法：采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测86例胃癌组织中KAI-1mRNA、MMP-9mRNA的表达。结果：KAI-1mRNA在高分化腺癌组织中的表达率（58．82％）明显高于低分化者（15．56％）（P〈0．05）,MMP-9mRNA表达率在高分化和低分化腺癌间差异无统计学意义（P〉0．051：无淋巴结转移的胃癌组织中KAI-1mRNA表达率（61．90％）明显高于有淋巴结转移者（23．08％）（P〈0．05）,MMP-9mRNA则相反（p〈0．05）;KAI-1mRNA表达率随浸润深度增加而逐渐降低,MMP-9则逐渐升高（P〈0．05）。KAI-1mRNA在TNMI期胃癌的表达率明显高于TNMⅢ期和Ⅳ期者fP〈0．05）,MMP-9差异则无统计学意义（P〉0．05）。结论：KAI-1mRNA在胃癌组织中的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关;MMP-9mRNA在胃癌组织中的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞干扰素诱导的蛋白10mRNA表达的临床价值

目的 探讨外周血单个核细胞（PBMCs）干扰素诱导的蛋白10（IP-10）mRNA表达与系统性红斑狼疮（SLE）活动的关系。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测46例SLE患者、20例类风湿关节炎（RA）患者、11例非SLE肾损伤患者及20名正常健康人PBMCSIP-10mRNA表达。结果 SLE活动组PBMCSIP-10mRNA表达水平与非活动组间的差异有统计学意义（P〈0．01），活动性狼疮肾炎（LN）组与无肾损伤组之间PBMCSIP-10mRNA表达水平的差异亦有统计学意义（P〈0．05），而RA组和非SLE肾病组患者与正常对照组水平相近似（P〉0．05）。血清IP—10水平与PBMCSIP-10mRNA表达高度正相关（r=0．8971，P〈0．01）。PBMCSIP-10mRNA表达水平与狼疮病活动指数（SLEDAI）评分呈正相关（r=0．6837，P〈0．01），与肾SLEDAI评分亦高度正相关（r=0．7260，P〈0．01）。结论 SLE活动时期PBMCSIP-10mRNA表达增加，与SLE疾病活动状况相关，尤其与LN的活动状况密切相关。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓中端粒保护蛋白TIN2和POT1的mRNA表达

本研究旨在探讨端粒保护蛋白TIN2、POT1的mRNA表达与骨髓增生异常综合征（MDS）发病的关系。采用实时荧光定量PCR方法检测51例初发MDS患者和10例正常人端粒保护蛋白TIN2和POT1的mRNA表达情况。结果表明,WHO分组中RA／RARs／RCMD／MDS-U、RAEB-1及RAEB-2组TIN2mRNA的表达量均高于正常对照组,差异有显著性（P〈0．05）;RA／RARS／RCMD／MDS-U、RAEB-1及RAEB-2组POT1mRNA的表达量均低于正常对照组,差异有显著性（P〈0．05）。IPSS分组中,TIN2mRNA的表达量在高危组、中危-2及中危-1均高于对照组,差异有显著性（P〈0．05）,低危组与对照组间差异没有显著性;POT1mRNA的表达量在高危组、中危-2及中危-1均低于对照组,差异有显著性（P〈0．05）,低危组与对照组间差异没有显著性。MDS中正常染色体核型患者TIN2mRAN的表达量低于异常染色体核型的患者,与对照组相比差异没有显著性;MDS中正常染色体核型患者POT1mRAN的表达量高于异常染色体核型的患者,与对照组相比差异没有显著性。结论：TIN2、POTI mRNA的表达异常可能参与MDS患者端粒动力学的调节,引起MDS患者端粒长度的改变,进而导致疾病的发生。     

咪喹莫特对哮喘小鼠TGF—β1及Smads蛋白的影响

目的 观察咪喹莫特对哮喘小鼠肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）及其信号转导分子Smads表达的影响。方法 40只小鼠按随机数字表法分成4组，每组10只。正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、布地奈德治疗组（C组）和咪喹莫特治疗组（D组）。小鼠于第0、14天以卵白蛋白（OVA）致敏，第24天开始雾化吸入1％OVA激发并持续28d，建立哮喘气道重塑模型，C组和D组在吸入OVA前2h分别雾化吸入布地奈德或咪喹莫特30min。于最后1次雾化结束后24h，对肺组织切片行苏木精-伊红（HE）染色观察病理学改变、过碘酸雪夫（AB—PAS）染色定量杯状细胞百分比及黏液分泌、Masson染色测定胶原沉积；用免疫组化方法检测肺组织TGF-β1的蛋白表达水平；用逆转录-聚合酶链反应半定量检测肺组织TGF-β1 mRNA以及Smad2、Smad7 mRNA表达水平。结果 B组杯状细胞增生明显，伴黏液高分泌，气管壁胶原过度沉积，与A组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；D组杯状细胞轻度增生，黏液分泌减少，气管壁胶原沉积减轻，与B组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；B组TGF-β1蛋白和mRNA、Smad2mRNA的表达较A组增加，差异有统计学意义（P〈0．05），C、D组TGF-β1蛋白和mRNA、Smad2mRNA的表达下降，与B组比较差异均有统计学意义（P〈0．05），D组可显著上调Smad7mRNA的表达，与B组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 雾化吸入咪喹莫特通过抑制慢性哮喘小鼠肺组织TGF-β1，蛋白和mRNA、Smad2mRNA的过度表达，上调Smad7mRNA的表达，从而阻断TGF-β1的胞内信号转导，可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道重塑。     

TfR1mRNA和IRP1mRNA在不同铁状态孕妇胎盘中的表达

目的 测定转铁蛋白受体1(TfR1)和铁调节蛋白1(IRP1)在不同铁状态足月孕妇胎盘中的mRNA表达水平,探讨胎盘铁转运及调控机制.方法 采用RT-PCR方法测定正常组、铁缺乏(ID)组及缺铁性贫血(IDA)组足月孕妇胎盘中TfR1和IRP1的mRNA相对表达水平.结果 ①正常组TfR1 mRNA为0.4813±0.1891,ID组为0.6647±0.2788,IDA组为0.9767±0.2858,IDA组与正常组和ID组相比差异均有统计学意义(分别t=0.002,P＜0.01;t=0.028,P＜0.05),而ID组与正常组之间差异无统计学意义(t=0.117,P＞0.05).②正常组IRP1 mRNA为0.2616±0.0785,ID组为0.3696±0.1801,IDA组为0.3971±0.0902,各组间差异无统计学意义(F=1.845,P=0.179).结论 ①胎盘TfR1 mRNA随孕妇缺铁程度加重而增加,表明IRP1参与胎盘TfR1 mRNA的调节.②不同铁状态孕妇胎盘组织中IRP1 mRNA无量的显著变化,明确了IRP1发挥调节作用不是通过自身量的变化,但TfR1 mRNA表达水平的变化说明IRP1在胎盘铁代谢中发挥调节作用.     

育龄期女性缺铁性贫血患者血清铁调素和erythroferrone水平的变化

目的:检测育龄期女性缺铁性贫血(Iron deficiency anemia,IDA)患者血清铁调素和erythroferrone(ERFE)含量,并探讨其与铁代谢各参数的相关性.方法:选取住院育龄期女性缺铁性贫血患者35例,年龄相匹配的健康女性对照人群30例.采用全自动电化学发光仪检测血清铁蛋白水平,全自动生化仪测定...     

维生素AD联合铁剂治疗婴幼儿缺铁性贫血的效果

目的:观察维生素AD滴剂联合蛋白琥珀酸铁口服液治疗婴幼儿缺铁性贫血的临床效果。方法:选取安徽省庐江县人民医院儿童保健门诊缺铁性贫血患儿102例,性别不限,采用随机数字表法分为观察组(n=52)和对照组(n=50)。观察组治疗采用蛋白琥珀酸铁口服液联合维生素AD滴剂口服,对照组治疗仅采用蛋白琥珀酸铁口服液口服。治疗前分析缺铁性贫血患儿维生素A和25-羟维生素D缺乏情况,于治疗1个月后对2组治疗效果进行比较并对贫血相关指标进行分析。结果:治疗前两组缺铁性贫血患儿维生素A和25-羟维生素D缺乏严重。治疗后,观察组的显效率为61.54%,明显高于对照组的44%(P<0.05);总有效率为94.23%,也明显高于对照组的84%(P<0.05);观察组血红蛋白、血清铁和血清铁蛋白较对照组明显改善(P<0.05)。结论:维生素AD滴剂联合蛋白琥珀酸铁口服液用于婴幼儿缺铁性贫血治疗时可有效改善患儿相关的贫血指标,显著提高临床治疗效果。     

四君子汤对脾虚大鼠肠黏膜 TFF3蛋白表达及 TFF3mRNA 表达的影响

目的：探讨四君子汤对脾虚大鼠肠道黏膜 TFF3蛋白表达及 TFF3mRNA 表达的影响。方法大鼠随机分为正常对照组、脾虚模型组、自然复健组和四君子汤组,蛋白印迹（Western-Blot）法测定回肠黏膜 TFF3蛋白表达的变化,采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测 TFF3mRNA。结果与正常对照组相比,脾虚各组大鼠肠黏膜 TFF3蛋白表达,TFF3mRNA 降低。经四君子汤治疗后,大鼠肠黏膜 TFF3蛋白表达,TFF3mRNA 明显上调,优于自然复健组（P ＜0．01）。结论研究表明,四君子汤可增强 TFF3mRNA 与蛋白的表达,促进受损肠黏膜的重建与修复,增强肠黏膜防御能力。     

Iron Balance in Regular Blood Donors

SUMMARY: BACKGROUND: Numerous reports have shown that iron stores decrease in blood donors after donation. As we need healthy donors, it is essential to test hemoglobin and ferritin levels for preventing reduced of iron stores in donors. METHODS: This study was conducted on 235 healthy men. The donors were divided into three groups: group I) control group with no donation; group II) case group 1 with two donations within 1 year; group III) case group 2 with three donations within 1 year. RESULTS: The mean level of hemoglobin was 15.9 and 14.7 g/dl in the control group and in the case group, respectively (p < 0.0000). The mean level of serum ferritin in group I, II and III, was 108, 56 and 26 μg/l, respectively (p < 0.0000). When studying various stages of iron deficiency in donors, it could be shown that 58% of group III donors but only 1% of control group donors had a negative iron balance. Moreover, iron deficiency anemia was observed in 20% of group III donors. CONCLUSION: Just measuring the hemoglobin level is not sufficient for selecting donors. In addition, testing of the ferritin level and iron supplementation are recommended in regular donors with more than one donation per year.     

CHr在缺铁性贫血中的诊断意义

目的探讨CHr在缺铁性贫血中的诊断价值。方法选取病例120例,分别建立IDA患者组和非IDA患者组,在体检人群中选出正常对照30例,分别比较正常对照组、IDA贫血组和非IDA贫血组CHr、CH、MCV、SI等参数的均值,并按贫血诊断标准比较这四个参数的灵敏度和特异度。结果IDA贫血组与健康组和非IDA组相比均有统计学意义（P〈0．05）;非IDA组与健康组相比差别无统计学意义（P〉0．5）;四个参数中CHr的灵敏度和特异度均高于其他三个参数。结论CHr能够简便、快速、特异地诊断缺铁性贫血。     

甲状腺激素T3影响K562细胞转铁蛋白受体和铁蛋白表达的分子机制研究

目的 探讨甲状腺激素T3对白血病细胞K562转铁蛋白受体(TfR)和铁蛋白(Fn)表达的调控作用及其可能的机制。方法 采用流式细胞术和放射免疫法分别检测TfR和Fn的表达水平，用RNA/蛋白带移动分析法测定铁调节蛋白(IRP)与铁反应元件(IRE)的结合活性。应用RT—PCR方法半定量分析TfR和Fn的mRNA水平。结果 T3对K562细胞TfR的表达无明显作用，而以不同浓度的T3处理细胞后使Fn的表达增加，其中当T3为100nmol/L和200nmol/L时，与空白对照组相比，差异有显性(P＜0．05)。T3能减少IRP/IRE的结合活性，且以T3为50nmol/L时减少最为明显。不同浓度的T3在不同的作用时间内均能提高H—FnmRNA水平，而对TfRmRNA水平无显影响。结论 T3可增加细胞Fn的表达，而对TfR的表达无明显调控作用，其机制除包含转录后的调节外，可能还具有转录水平的调控作用。