汉防己甲素对人大肠癌细胞株的放射增敏作用

目的:研究汉防己甲素(Tet)对人大肠癌细胞SW620的放射增敏作用并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT药敏试验、克隆形成分析法检测Tet对SW620细胞的放射增敏作用,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡情况。结果:不同浓度的Tet作用于人SW620细胞株后,其细胞毒性呈剂量依赖性(P<0.05)。Tet对SW620细胞的72h半数抑制浓度(IC50)为:18.359μg/ml。Tet(5μg/ml)能明显降低放射后SW620的克隆形成率,增加X射线的杀伤作用,其放射增敏比SER(Dq)为1.6。流式细胞术结果显示,Tet能够导致放射后SW620细胞G2/M期阻滞,同时增加照射后细胞凋亡比。结论:Tet对SW620细胞株有放射增敏作用,其作用机制可能与Tet阻滞细胞于G2/M期,增加凋亡有关。     

汉防己甲素对食管癌放疗增敏作用的临床研究

目的观察汉防己甲素在食管癌放疗中的增敏作用及毒副反应。方法 76例经病理确诊的食管癌患者分为汉防己甲素+放疗组、顺铂+放疗组和单纯放疗组,3组采用完全相同的放疗,前2组在放疗期间分别给予汉防己甲素、顺铂。结果汉防己甲素+放疗组、顺铂+放疗组的近期疗效略优于单纯放疗组;汉防己甲素+放疗组、单纯放疗组的毒副反应略轻于顺铂+放疗组。结论汉防己甲素在食管癌放疗过程中应用具有一定的放疗增敏作用,且毒副反应未见明显增加。     

汉防己甲素对人肺腺癌细胞的放射增敏作用及其机制的实验研究

目的 探讨汉防己甲素（Tet）对人肺腺癌SPC-A1细胞的放射敏感性的影响及其作用机制。方法 MTT法检测Tet对SPC-A1细胞的增殖抑制作用,比较单纯照射组（4 Gy）、照射（4 Gy）+Tet（1 μmol／L）组、单用Tet组（1 μmol／L）及空白对照组间SPC-A1细胞增殖抑制率的差异。采用克隆形成实验来计算受照射后的细胞存活率,拟合细胞存活曲线,计算D0、Dq、SF2。流式细胞术检测照射前后SPC-A1细胞周期的分布情况。结果 Tet对SPC-A1细胞的24、48和72 h半数抑制浓度（IC50）分别为10.77、5.78、和3.89 μmol／L。照射+Tet组24、48、72 h的细胞增殖抑制率均高于单纯照射组,差异有统计学意义（P＜0.05）。克隆形成实验显示照射+Tet组的D0、Dq和SF2值分别为（1.551±0.045）Gy、（0.522±0.023）Gy和0.503±0.008,均低于单纯照射组。放射增敏比（SER）为1.48。流式细胞仪检测结果显示照射导致了SPC-A1细胞G2期阻滞（P＜0.05）。联合Tet后可以降低G2期阻滞细胞比例（P＜0.05）。结论 Tet可以有效增加人肺腺癌SPC-A1细胞的放射敏感性,其机制可能是通过降低放射导致的G2期阻滞细胞比例,从而使DNA的损伤固定,发生增殖性死亡。     

汉防己甲素对食管癌放射性肺损伤的保护作用

目的观察汉防己甲素对食管癌放射性肺损伤的保护作用及其机制。方法经病理确诊的食管癌患者78例根据治疗方法不同随机分为2组,治疗组40例在放疗第1天起口服汉防己甲素片40~60mg·d-1,对照组38例仅给予放疗。治疗过程中监测患者血清转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。治疗后评价肺损伤情况。结果治疗组放疗结束后1、3、6个月血清TGF-β1、TNF-α水平均低于对照组(P均<0.05)。治疗组在放疗结束后6个月肺CO弥散量下降比对照组少(P<0.05)。治疗组放射性肺炎和放射性肺纤维化的发生率低于对照组(P<0.05)。结论汉防己甲素能抑制食管癌放疗后TGF-β1和TNF-α的过度表达,阻止肺弥散功能的恶化,可用于放射性肺损伤的预防。     

肿瘤放射增敏剂及增敏机制研究进展

放射增敏剂是指能增强射线对肿瘤内乏氧细胞的杀灭作用而对有氧的正常组织一般损伤较小的一些化学物质。本文主要介绍了放射增敏剂的研究进展。从影响肿瘤放射敏感性因素入手,详细叙述了放射增敏剂的种类、主要作用机制和发展趋势。     

肿瘤放射增敏剂及增敏机制研究进展

放射增敏剂是指能增强射线对肿瘤内乏氧细胞的杀灭作用而对有氧的正常组织一般损伤较小的一些化学物质.本文主要介绍了放射增敏剂的研究进展.从影响肿瘤放射敏感性因素入手,详细叙述了放射增敏剂的种类、主要作用机制和发展趋势.     

三氧化二砷对纤维肉瘤细胞放射增敏作用的研究

目的 研究和探讨三氧化二砷（As2O3）是否对纤维肉瘤细胞有放射增敏作用。方法以人纤维肉瘤细胞HTl080为实验对象，首先检测As2O3的单药毒性，确定IC10、IC50和IC90。放射增敏作用的实验分为空白对照组、单纯给药组、单纯照射组（包括1、2、4、6、8、10Gy剂量）、照射前加药组（于照射前24h加入设定浓度的As2O3，药物作用24h后进行照射）和照射后加药组（于照射后即刻加入设定浓度的As2O3，药物作用24h）。所有实验均重复3次。采用克隆形成分析法观察单纯照射和照射联合As2O3对细胞的杀伤作用。计算细胞的存活分数，用多靶单击模型进行拟合并做图。结果 HT1080细胞的IC10、IC50和IC90剂量分别为0．57、3．67和12．0μmol／L。无毒剂量的As2O3照射前给药增敏比（SER）为0．86（Do值比）、0．98（SF2值比），照射后给药SER为0．99（Do值比）、1．09（SF2值比）。IC50剂量的As2O3照射前给药SER为0．90（Do值比）、0．87（SF2值比），照射后给药SER为1．14（Do值比）、1．08（SF2值比）。IC90剂量的As2O3照射前给药和照射后给药的SER均为1．14（Do值比）、3．20（SF2值比），As2O3对低剂量照射的放射增敏作用好于高剂量照射（SERSF2〉SERDo）。结论 As2O3对HT1080纤维肉瘤细胞具有一定的放射增敏作用，为临床放疗和As2O3联合应用提供了实验依据。     

紫杉醇联合放射线照射对肺腺癌细胞放射增敏作用的研究

目的 探讨化疗药紫杉醇是否对肺腺癌A973细胞有放射增敏作用.方法 取指数生长期的人肺腺癌细胞A973,采用成克隆分析法检测紫杉醇毒性,确定IC10、IC50和IC90剂量作为药物浓度.分析照射前后紫杉醇IC10、IC50和IC90浓度下作用24 h,照射剂最分别为0、1、2、4、6、8、10 Gy时的细胞存活分数,并用多靶单击模型拟合细胞存活曲线.采用流式细胞术分析不同浓度紫杉醇作用0、2、4、6、10、18、24 h,A973细胞周期分布变化.结果 紫杉醇对A973细胞的IC10、IC50和IC90剂量分别为0.5、2.6和8.7 nmol/L.IC10剂量紫杉醇照前给药增敏比为0.97(D0值比)、1.01(D0值比)、1.00(SF2值比),照后给药为0.97、1.02、1.02;IC50剂量照前给药为1.06、129.00、2.61,照后给药为0.94、129.00、2.14;IC90剂量照前给药为1.00、120.00、2.09,照后给药为0.98、120.00、2.09.IC10剂量紫杉醇对A973细胞无明显的G2+M期阻滞作用,而IC50和IC90剂量紫杉醇分别于2和18 h将A973细胞阻滞在G2+M期.结论 紫杉醇对肺腺癌细胞A973产生明显的放射增敏作用,且照射前后给药均有相似的增敏作用,中高浓度剂量联合小剂量X线照射增敏效果最好.     

5-溴汉防己甲素与汉防己甲素对K562/A02细胞多药耐药性逆转作用的比较

背景与目的:5-溴汉防己甲素(5-bromotetrandrine,BrTet)是汉防己甲素(tetrandrine,Tet)的溴化产物,具有逆转P-糖蛋白(P-glyeoprotein,P-gp)介导的肿瘤多药耐药(muhidrug resistance,MDR)的作用。本研究旨在比较BrTet与Tet对人白血病细胞K562/A02多药耐药的逆转作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)法检测不同浓度BrTet对K562细胞和K562/A02细胞的增殖抑制效应;检测阿霉素(adfiamycin,ADM)对K562细胞和K562/A02细胞增殖的抑制作用,以及加用BrTet、Tet时上述抑制作用的变化,并计算半数抑制浓度(IC50)及逆转倍数。Westernblot法检测各组细胞P-gp的表达,流式细胞仪检测各组细胞内ADM的蓄积。结果:K562/A02细胞对ADM的耐药倍数为49.51倍。2.0μmol/L及更低浓度的BrTet和1.5μmol/L及更低浓度的Tet对K562细胞和K562/A02细胞抑制率均小于10%,无明显细胞毒性作用。加入1.0μmol/L的Tet后,K562/A02细胞对ADM的耐药倍数为12.17倍。加入0.25、0.5和1.0μmol/L的BrTet后,K562/A02细胞对ADM的耐药倍数分别为17.88、9.97和4.24倍。1.0"mol/L的BrTet和Tet分别使K562/A02细胞内ADM浓度提高了69.0%和51.6%,使P-gp表达分别下调了51.1%和43.73%,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:BrTet及Tet均可逆转K562/A02细胞耐药,且前者较后者逆转作用更强,逆转机制与抑制P-gp的表达、增加细胞内抗肿瘤药物浓度有关。     

放射增敏剂的研究进展

放射增敏剂可提高放射线对肿瘤细胞的杀伤作用。增加放疗效果。理想的放射增敏剂可以显著增加放疗疗效。对正常组织没有或很少有毒副反应。国内外学者进行了大量研究，在合成药物、分子靶向药物和天然药物等方面取得了新的进展，显示了放射增敏剂的发展趋势。文章主要对此进行综述。     

吉西他滨联合X射线照射对肺癌细胞系放射增敏作用的初步研究

目的 探讨吉西他滨(GEM)是否对非小细胞肺癌具有放射增敏作用,并对GEM的放射增敏机制进行初步探讨.方法 用克隆形成分析法观察GEM对p53基因突变的人肺腺癌细胞系(973细胞)的放射增敏效应.流式细胞术观察照射前后973细胞周期分布和细胞凋亡,分析其与p53基因突变是否为放射增敏机制.结果 10 nmol/L GEM照前、照后给药均具有极轻微放射增敏作用;100 nmol/L GEM照前、照后给药时均具有明显放射增敏作用,且照前给药组的增敏作用明显强于照后给药组.p53基因突变影响细胞周期再分布及细胞凋亡,但与GEM的放射增敏作用无关.结论 100 nmol/L GEM具有明显放射增敏作用,p53基因突变、细胞周期再分布及细胞凋亡不是GEM放射增敏作用的主要机制.     

人参皂苷Rg3对食管癌细胞放射增敏作用的初步研究

目的 探讨人参皂苷Rg3（简称Rg3）对食管癌EC109细胞的放射增敏作用。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法观察不同浓度的Rg3（10、20、50、100、200、400、600mmol/L）作用EC109细胞24、48及72h的细胞存活率,克隆形成实验及单击多靶模型计算10mmol/L Rg3预处理24h经0、1、3、6和9Gy X射线照射后的辐射增敏比（SER）。根据实验设计分为对照组、单纯照射组及Rg3+照射组,流式细胞仪及Foci焦点形成实验分别检测3组经8Gy X射线照射48h的细胞凋亡率和DNA分子损伤情况。结果在10～600mmol/L范围内,Rg3可降低EC109细胞的存活率,呈剂量和时间依赖性;10mmol/L Rg3处理EC109细胞的SER为1.28。Rg3+照射组的凋亡率为（62.33±4.60）%,高于对照组的（6.46±1.23）%和单纯照射组的（30.68±3.55）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;Rg3+照射组的Foci焦点细胞数为（64±12）个,亦高于对照组的（6±3）个和单纯照射组的（32±6）个,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论Rg3对食管癌EC109细胞有放射增敏作用,能够抑制细胞活性并诱导细胞凋亡与DNA分子损伤。     

汉防己甲素对人食管癌细胞株Ｅｃａ-１０９放射增敏研究

目的　研究汉防己甲素（Ｔｅｔ）在γ射线照射人食管癌细胞株Ｅｃａ-１０９中的放射增敏作用,并探讨其机制。方法　采用克隆形成分析法测定Ｔｅｔ对人食管癌细胞株Ｅｃａ-１０９放射敏感性的影响,流式细胞术分析Ｅｃａ-１０９细胞经放射线照射后细胞周期的再分布情况,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ法分析周期相关蛋白表达以及分裂指数法分析Ｔｅｔ对照射后细胞分裂的影响。结果　在Ｅｃａ-１０９细胞中,Ｔｅｔ显著增加γ射线的杀伤作用,其增敏比为１.４３;在γ射线照射后,细胞明显阻滞于Ｇ２期,Ｔｅｔ可以降低这种阻滞。Ｅｃａ-１０９细胞在受到γ射线照射后其ＣｙｃｌｉｎＢ１与Ｃｄｃ２蛋白表达水平明显降低,Ｔｅｔ可以逆转γ射线对ＣｙｃｌｉｎＢ１与Ｃｄｃ２蛋白的表达的抑制作用。Ｔｅｔ可以促使阻滞于Ｇ２期的Ｅｃａ-１０９细胞进人Ｍ期。结论　Ｔｅｔ能显著增加γ射线对人食管癌细胞的杀伤作用,其作用机制可能与Ｔｅｔ去除放射引起的Ｇ２／Ｍ期阻滞有关。     

热疗对食管癌细胞株EC-1放疗的增敏作用

目的 初步探讨热疗对食管癌细胞株EC-1放射增敏作用及其可能机制,为热疗与放疗联合治疗食管癌提供理论依据。方法 采用平板克隆形成分析法计算各组细胞存活分数SF,“多靶单击数学模型”拟合细胞存活曲线。流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化。结果 热疗对食管癌细胞株EC-1放疗有显著的增敏作用,热疗30 min的放射增敏比为1.060。热疗可使细胞阻滞在G2/M期,使G₀/G₁期、S期细胞比例减少,增加细胞凋亡,与对照组相比差异有统计学意义 (P<0.05)。结论 热疗对食管癌EC-l细胞具有增敏作用,热疗可通过影响食管癌EC-l细胞周期,诱导细胞凋亡,增强放射线对细胞的杀伤作用。     

拓扑替康不同时间给药对人鼻咽癌细胞放射增敏作用的实验研究

目的　探讨拓扑替康联合放射线照射在不同时间给药对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ-２的放射增敏作用。方法　取指数生长期的鼻咽癌细胞株ＣＮＥ-２,采用ＷＳＴ １法测定拓扑替康的ＩＣ₁₀和ＩＣ_５０值。实验分为空白对照组、单纯药物组、单纯照射组和照射＋药物组,其中照射＋药物组根据不同的给药时间再分为１５个组,分别为放疗前、后的２４、１２、８、４、２、１、０.５ｈ给药和放疗同时给药组,Ｘ线照射剂量为０、０.５、１、２、３、４、６、８、１０Ｇｙ。采用多靶单击数学模型拟合细胞存活曲线,得出Ｄ_０、Ｄ_ｑ、ＳＦ₂及放射增敏比ＳＥＲＤ０及ＳＥＲＤｑ。结果　以拓扑替康对鼻咽癌ＣＮＥ-２细胞系ＩＣ_１０（０.０１ｍｇ／ｍｌ）作为给药浓度,随着给药与照射时间的间隔不同,Ｄ_０、Ｄ_ｑ、ＳＦ_２越小,ＳＥＲＤ_０、ＳＥＲＤ_q则越大,放射增敏作用的最佳给药时间集中在照射前０.５ｈ至照射后１ｈ之间,照射同时给药放射增敏效果最佳（ＳＥＲＤ₀＝１.３６５,ＳＥＲＤ_q＝５３.５８）。结论　低剂量的拓扑替康联合Ｘ线照射需注意给药时间,以照射前０.５ｈ至照射后１ｈ为宜。     

卡培他滨对食管癌细胞系EC9706细胞毒性和放射增敏作用的研究

目的:探讨卡培他滨对食管癌细胞系EC9706细胞毒性和放射增敏作用。方法:取健康成年家兔1只,以卡培他滨141mg/kg,对其进行灌胃,分别于灌胃前、后2.5～3h,取耳缘静脉血8～10mL,不加抗凝剂,并防止溶血和细菌污染,离心取血清-20℃保存备用;用CCK8分别检测不同量的加药血清和对照血清对食管癌细胞系EC9706细胞毒性,同时观察不同量的加药血清对食管癌细胞系EC9706的放射增敏作用。结果:加药血清对食管癌细胞系EC9706细胞有明显的抑制作用,其抑制作用48h达到高峰,2、4、6、8和10μL血清作用细胞48h后抑制率分别为14.29%、23.96%、50.59%、52.16%和53.96%(P均为0.00),72h其细胞毒性无增加;加药血清孵育2.5h后,在相同放射剂量作用下,不同量血清组的OD值均显著低于对照组(P值均为0.00),其增敏作用无明显的剂量依赖性。结论:卡培他滨对食管癌细胞系EC9706有明显的细胞毒性和放射增敏作用。     

siRNA干扰EGFR表达对食管鳞癌和腺癌细胞放射敏感性影响

目的 探讨siRNA干扰EGFR表达对食管鳞癌和腺癌放射敏感性的影响。方法 以食管鳞癌、腺癌细胞系ECa-109、OE-19作为研究对象。脂质体转染化学合成的不同EGFR-siRNA和阴性-siRNA,通过RT-PCR及蛋白印迹法检测转染前后EGFR表达情况,CCK8法分析转染对细胞增殖活性影响。设ECa-109、OE-19细胞空白对照组(O1、O2组)、单纯照射组(R1、R2组)及EGFR-siRNA照射组(E-R1、E-R2组),单次照射0、2、4、6、8 Gy。克隆形成实验计算细胞存活分数及放射增敏比(SER_D0值比),流式细胞仪检测EGFR-siRNA联合放射对细胞周期分布和细胞凋亡率影响,单次照射6 Gy。结果 EGFR-siRNA可明显下调两种细胞EGFR表达,且转染对细胞增殖抑制率<5%(4.9%、4.5%)。克隆形成实验结果显示E-R1、E-R2组细胞SF值低于O1、O2组,SER_D0值比分别为1.40、1.01。流式细胞术结果显示E-R1组比E-R2组照后G₂+M期比例增加、S期比例下降(P=0.016、0.028),细胞凋亡率也增高(P=0.007)。结论 与食管腺癌细胞相比,干扰EGFR表达显著提高了食管鳞癌细胞的放射敏感性。     

E1A基因对喉癌细胞系放射敏感性的影响及机制的初步实验研究

目的 探讨ElA基因对喉癌细胞系(Hep-2细胞)放射敏感性的影响并初步探讨其机制.方法 以腺病毒为载体将E1A基凶及其空载体转染至人Hep-2细胞,经RT-PCR法鉴定获得含ElA的阳性兜隆.设未转染组(PBS)、转染空载体组(Ad-β-gal)和转染组(Ad-E1A),分别给予6 MVx线单次照射0、1、2、4、6、8、10 Gy,成克降实验绘制细胞存活曲线并计算D0、Dq、α、β值以观察E1A基因对Hep-2细胞放射敏感件的影响.设PBS组、Ad-β-gal组、Ad-E1A组、PBS+照射组、Ad-β-gal+照射组、Ad-E1A+照射组,单次照射6 Gy,流式细胞仪检测细胞凋亡及RT-PCR检测血管内皮牛长因子(VEGF)水平并半定量VEGF以初步探讨机制.结果 转染后的阳性克隆细胞RT-PCR结果显示E1A已整合到细胞基因组中并且稳定表达.Ad-E1A组、Ad-β-gal组、PBS组细胞的D0值分别为0.86、1.96、1.98 Gy,Dq值分别为1.02、1.97、1.99 Gy,α值分别为0.536、0.112、0.104(Gy-1)和β值分别为0.521、0.137、0.125(Gy-2).PBS组、Ad-β-gal组、Ad-ElA组、PBS+照射组、Ad-β-gal+照射组、Ad-E1A+照射组的细胞凋亡率分别为1.26%、1.18%、2.16%、2.55%、2.96%、4.96%.Ad-E1A组、PBS+照射组、Ad-βgal+照射组及Ad-ElA+照射组VEGF的表达水平较PBS组及Ad-β-gal组低,且Ad-E1A+照射组表达最低.结论 成功构建了稳定表达E1A基因的喉癌细胞系.EIA基因对人喉癌细胞有放射增敏作用,其机制可能与降低VEGF表达和促进细胞凋亡有关.     

RNA干扰抑制STAT-1基因表达对食管癌细胞放射生物效应影响

目的 利用RNA干扰技术抑制人食管癌细胞(ECA109)信号转导与转录活化因子1(STAT 1)基因表达,观察其对放射敏感性和细胞周期影响。
方法 针对基因STAT 1 设计构建干扰质粒pSTAT 1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合后共同转染293T细胞,收集病毒液感染ECA109细胞。采用RT-PCR和蛋白印迹法测定STAT 1在mRNA水平和蛋白水平的表达,采用克隆形成实验和流式细胞术检测ECA109细胞放射敏感性和周期分布。
结果 空白对照、转染阴性、转染阳性细胞的D 0-值分别为2.98、3.02、2.03,SF2分别为0.88、0.88、0.83,Dq值分别为1.39、1.57、1.20。4 Gy照射后12、24、48 h 转染阳性细胞比空白对照和转染阴性细胞的G1G0期比例增高(34.13%∶22.03%∶22.27%、43.80%∶28.40%∶28.63%、53.20%∶42.2%∶41.83%,F=7.56、10.01、10.73,P=0.023、0.012、0.010)和G2+M期比例降低(14.33%∶32.23%∶32.23%、27.73%∶43.53%∶44.00%、14.23%∶27.97%∶27.93%,F=16.86、26.62、40.34,P=0.003、0.001、0.000)。
结论 RNA干扰不影响ECA109细胞的增殖活性,可能是通过调节照射后细胞周期分布来增加放射敏感性。     

X线反复照射人食管鳞癌细胞系KYSE-150的生物效应研究

目的 建立人食管鳞癌放射抗拒性细胞系,并检测肿瘤干细胞标志物的表达,以期了解肿瘤干细胞与放射抗拒性形成之间的关系.方法 分次照射建立人食管鳞癌放射抗拒性细胞系KYSE-150R,在相差显微镜下观察细胞形态学差异,用G显带法进行染色体分析.用成克隆实验验证KYSE-150和KYSE-150R细胞的放射敏感性差异,流式细胞术检测它们的细胞周期分布,Western Blotting法检测它们中肿瘤干细胞(CSCs)标志物β-catenin和Integrin-β_1的表达.结果 KYSE-150R细胞的群体倍增时间长于亲代细胞KYSE-150[(25.90±0.55)h:(23.62±0.23)h,t=6.62,P=0.00].KYSE-150R细胞的染色体数目增加,并观察到染色体畸变.KYSE-150R细胞SF_2、D_0、D_q及N值均高于KYSE-150细胞,Dn值比为1.21.流式细胞仪分析显示KYSE-150细胞照射后S期比例增加(45.35%±4.03%:55.09%±1.70%,t=-3.86,P=0.02),G_2+M期比例下降(9.91%±3.83%:1.15%±0.32%,t=3.95,P=0.02),而KYSE-150R则变化不大.Western Blotting结果 显示KYSE-150R中的β-catenin和Integin-β_1的表达量约为KYSE-150细胞的2倍.结论 新细胞系KYSE-150B比其亲本更具放射抗拒性,其含有的CSCs比例也较其亲本高,证明CSCs与放射抗拒性产生机制有关.