受体介导的基因转移

受体介导的基因转移技术以其转移基因的相对高效性和特异性日益受到重视．本对该技术的原理、转移基因载体的构建、提高基因转染率和表达水平的方法，以及临床应用潜力等问题进行了综述．     

不同球囊扩张时间转移基因效率的对比研究

为了对不同球囊扩张时间的转移基因效率进行比较。方法：用左旋多聚赖氨酸包被导管球囊，然后吸附携带报告基因Ｌａｃｚ的腺病毒载体，向兔腹主动脉下段定位转移基因。球囊扩张时间分为５分钟，１５分钟和３０分钟用定性和定量方法检测基因转移效率。     

转铁蛋白受体介导的自杀基因转移系统的建立及其体外抗瘤效应

目的 构建转铁蛋白受体介导的自杀基因系统并观察其对肝癌细胞的体外杀伤效应。方法 SPDP法制备抗转铁蛋白受体与多聚赖氯酸(PLL)的复合物并用分子筛层析纯化。根据DNA阻断试验结果，pEBAF／tk重组质粒与Ab-PLL按1：6混合使二者结合形成PEBAF／tk—Ab PLL复合物。将此复合物转入人肝癌细胞株SMMC7721、HepG2和肺癌细胞株A549，并以脂质体转移为对照。加入不同浓度的更昔洛韦(GCV)以观察细胞的自杀效应。结果 加入GCV后HepG2／tk的增殖受抑制最明显。100mg／L和1mg／L时抑制率分别为60．5％和24．3％。SMMC7721／tk受抑制较低，而A549的增殖不受抑制。结论 本基因治疗体系具仃很好的靶向性和杀肿瘤效果。     

多聚赖氨酸包被球囊导管转移基因表达的时相特征

目的评估多聚赖氨酸包被球囊导管－重组腺病毒／ＬａｃＺ（Ａｄ５／ＬａｃＺ）局部基因转移系统的基因转移效率与表达时间。方法利用该系统，在体将Ａｄ５／ＬａｃＺ导入兔腹主动脉下段。然后于转基因后不同的时间点对转基因表达进行了定性（Ｘ－Ｇａｌ染色）及定量（β－Ｇａｌ活性）测定。结果基因转移后７天的表达最高。３天与１４天的次之，２１天时表达显著下降。２８天时几乎测不到转基因的表达。结论该基因转移系统能有效地实现直接、在体的基因转移。腺病毒介导的基因表达时间是短暂的。其表达峰值约在７天左右。     

醛脱氢酶基因转移介导的环磷酰胺耐受性研究

醛脱氢酶基因 (ＡＬＤＨ1)能氧化环磷酰胺 (ＣＴＸ)的中间代谢产物醛磷酰胺 ,形成无毒的羧基磷酰胺 ,发挥对ＣＴＸ的解毒作用。我们利用逆转录病毒介导ＡＬＤＨ1转染人造血细胞系Ｋ5 6 2 ,体外实验观察ＡＬＤＨ1基因转移过表达与ＣＴＸ耐受程度间的关系。一、材料和方法1.主要试剂 :Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ转染试剂购自ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司 ;4 氢过氧化ＣＴＸ(4 ＨＣ)由美国Ｄｕｋｅ大学癌症研究中心ＳｕｓａｎＬｕｄｅｍａｎ博士惠赠 ;Ｇ4 18、总ＲＮＡ试剂ＴＲＩｚｏｌ、Ｍ ＭＬＶ逆转录酶为ＧＩＢＣＯ ＢＲＬ…     

四种球囊导管基因转移系统作用的比较

目的：对４种多聚物包被的球囊导管局部基因转移系统的在体转基因效果进行对比评估。方法：用由相同多聚物包被、携带不同的基因载体，及由不同的多聚物包被、携带相同的基因载体的球囊导管系统，将报告基因分别导入兔腹主动脉下段。结果：除由脂质体—腺病毒（Ａｄ５）载体组成的基因转移系统外，其他３种系统均实现了在体基因转移。其中，由左旋多聚赖氨酸包被球囊导管—重组腺病毒载体（Ａｄ５／ＬａｃＺ）基因转移系统的基因转移效果最佳。结论：左旋多聚赖氨酸包被球囊导管—Ａｄ５／ＬａｃＺ基因转移系统是一种新型的、有效可行的在体局部基因转移系统。     

肝细胞受体介导的基因治疗

肝脏是基因治疗的重要靶向器官，受体介导的基因转移方法能够借助于受体与配体的特异性结合将目的基因有效导入靶细胞，对肝脏疾病的治疗有其优越性。受体介导的复合物由目的ＤＮＡ、配体及中介多价阳离子组成，复合物的大小、对溶酶体的抗性及其进入核内的的数量均会影响目的基因的转导效率与表达水平。     

肝细胞受体介导的基因治疗

肝脏是基因治疗的重要靶向器官,受体介导的基因转移方法能够借助于受体与配体的特异性结合将目的基因有效导入靶细胞,对肝脏疾病的治疗有其优越性。受体介导的复合物由目的DNA、配体及中介多价阳离子组成。复合物的大小、对溶酶体的抗性及其进入核内的数量均会影响目的基因的转导效率与表达水平。     

胰岛素受体基因第8外显子多态性与原发性高血压病的关系

目的：探讨ＩＮＳＲ基因第８ 外显子ＮｓｉＩ多态性与原发性高血压（ＥＨ）的关系。方法：ＥＨ 患者（ｎ＝ １２０）和正常对照组（ｎ＝ ８６）进行血压、身高、体重及空腹血糖（Ｇｌｕ）、血总胆固醇（Ｔｃｈ）、甘油三脂（ＴＧ）浓度测定；用饱和盐析法常规提取外周血白细胞ＤＮＡ，采用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）结合限制性内切酶方法检测基因多态性。结果：高血压组除收缩压、舒张压显著高于对照组外，其它临床指标如体重指数、空腹血糖及血脂水平两组间无显著差异；ＩＮＳＲ基因Ｎ２ 等位基因频率在ＥＨ组高于正常对照组（０．２５４ｖｓ０．１６９， Ｐ＜ ０．０５）。结论：ＩＮＳＲ基因ＮｓｉＩ多态性与中国人高血压病有关，Ｎ２ 等位基因可能是中国人高血压病的一个易感基因     

胰岛素受体基因多态性与高血压肾损害相关性研究

为探讨原发性高血压(EH)肾损害与胰岛索受体(INSR)基因第8外显子Nsi I酶切多态性的关系，采用生化法、多聚酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)等技术，检测了N2等位基因在EH肾功能正常(EH—NRF)组、EH肾损害尿毒症(EH—CRF)组及正常对照(NC)组中的表达。结果显示，Nsi I多态性与患者的年龄、体重指数(BMI）、总胆固醇(TC)及甘油三脂(TG)等无相关性，N2等位基因频率在EH-NRF组及EH—CRF组均明显高于NC组(P＜0．05、＜0．01)，且在EH—CRF组高于EH—NRF组。提示N2等位基因可能是中国人EH(特别是EH—CRF)的一个重要易感基因。     

肥胖基因与leptin受体基因

Ｌｅｐｔｉｎ是肥胖（ｏｂｅｓｅ，ｏｂ）基因编码，脂肪组织分泌的一种激素，其主要作用维持体重相对恒定，本文就Ｌｅｐｔｉｎ的研究历史，ｏｂ基因和Ｌｅｐｔｉｎ受体基因的研究现状作了一概述。     

贲门组织中多巴胺受体基因的分布与表达

目的探讨人贲门组织中多巴胺受体（DR）基因（D4mRNA,D5mRNA）的表达,揭示D4mRNA,D5mRNA在贲门组织中的抗溃疡机制。方法应用RT-PCR方法检测贲门组织中D4mRNA,D5mRNA的分布与表达。结果在食管环行肌、胃底环行肌、钩状纤维、套索纤维中D4mRNA分别为0．112±0．053、0．124±0．047、0．122±0．03、60．125±0．027,D5mRNA分别为0．116±0．023、0．118±0．035、0．121±0．026、0．116±0．078,两者均呈低表达（P〉0．05）。在贲门的食管黏膜和胃黏膜中,D4mRNA分别为0．416±0．082和0．423±0．094,D5mRNA分别为0．248±0．068和0．252±0．070,均呈高表达（P〉0．05）。两种黏膜与4条肌束中D4mRNA和D5mRNA的表达均存在显著性差异（P〈0．01）。结论在贲门肌肉组织和黏膜中D4mRNA和D5mRNA的表达不同,推测在贲门、胃黏膜中的D4mRNA、D5mRNA受体有着重要的抗溃疡作用。     

人促甲状腺激素受体基因的研究进展

综述促甲状腺激素受体基因序列、基因突变、氨基酸序列及ＴＳＨＲ抗原决定簇的研究进展。ＴＳＨＲ属于鸟苷酸调节偶联蛋白（Ｇ偶联蛋白）受体，与其它Ｇ偶联蛋白具有同源性，人ＴＳＨＲ基因长度６０千碱基，位于染色体１４ｑ３１处。生理情况下，ＴＳＨＲ基因表达主要受ＴＳＨ调控。ＴＳＨＲ蛋白有７６４个氨基酸，是一个大分子糖蛋白，分子量按７６４氨基酸计算是８６１８６，分为膜外、跨膜和膜内区三个部分。研究ＴＳＨ以及ＴＳＨ     

磺脲受体基因研究进展

磺脲类药物是一类目前在临床广泛应用于治疗 2型糖尿病的口服降糖药 ,主要是通过和胰岛 β细胞膜上的受体结合 ,促进胰岛素的释放 ,而起到降低血糖的作用。近年来随着分子生物学研究的深入 ,磺脲受体的分子结构和作用机制得到进一步的阐明 ,其基因的变异与某些疾病〔包括婴儿持续性高胰岛素性低血糖症 (ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎｅｍｉｃｈｙｐｏ ｇｌｙｃｅｍｉａｏｆｉｎｆａｎｃｙ ,ＰＨＨＩ)和 2型糖尿病〕之间的相关性研究成为近些年相关领域的研究热点 ,并取得了显著成果。本文就以上研究进展作一综述。一、磺脲…     

急性淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链及T细胞受体γ基因重排的临床观察

免疫球蛋白重链 (ＩｇＨ )基因和Ｔ细胞受体 (ＴＣＲ)ｒ基因的重排可作为淋巴细胞白血病的特异性基因标志。应用敏感、特异的多聚酶链反应 (ＰＣＲ)技术检测ＩｇＨ及ＴＣＲγ基因重排 ,对急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ)的基因分型、微小残留病变 (ＭＲＤ)的检测、判断疗效、预测复发等均具有重要意义。我们于 1997年～ 1998年应用ＰＣＲ技术对 42例成人ＡＬＬ病人的ＩｇＨ及ＴＣＲγ的基因重排进行研究。对象与方法1.对象 :ＡＬＬ患者 42例 ,男性 2 5例 ,女性 17例。年龄 15～ 70岁 ,中位年龄 3 5岁。分型 :Ｌ16例 ,Ｌ2 2 8例 ,Ｌ3 8例。其中…     

VLDL受体及其基因多态性研究进展

血浆中的胆固醇、甘油三酯和磷脂等是与载脂蛋白结合成脂蛋白而溶解、转运的。低密度脂蛋白 (ＬＤＬ)含胆固醇和胆固醇酯最多 ,极低密度脂蛋白 (ＶＬＤＬ)含甘油三酯最多 ,高密度脂蛋白 (ＨＤＬ)含蛋白最多。血浆中增高的脂质以ＬＤＬ、ＶＬＤＬ和经动脉内膜表面脂蛋白酯酶的作用而分解成残片的形式侵入动脉壁。近年来 ,随着研究的深入 ,载脂蛋白在动脉粥样硬化中所起的重要作用受到了关注。其中载脂蛋白Ｅ(ＡｐｏＥ)ε4等位基因与血脂、冠心病及阿尔茨海默病 (ＡＤ)的联系已得到许多研究的证实。而作为含ＡｐｏＥ的脂蛋白受体 ,ＶＬＤＬ受…     

胰岛素受体基因多态性与脑血管病

胰岛素受体基因多态性是胰岛素抵抗的重要原因之一。由于胰岛素抵抗而继发的高胰岛素血症是动脉粥样硬化、原发性高血压及微血管病变的重要致病因素。文章综述了胰岛素受体基因的多态性与动脉粥样硬化、原发性高血压、微血管损害的相互关系及可能的致病机制,推测胰岛素受体基因多态性与脑血管病存在相关性。     

腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移导致心功能损害

目的本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接PKCε基因转移对左室收缩功能的影响。方法使用标准方法建立表达PKCt基因的重组腺病毒载体。直接注射重组腺病毒到FVB／N和ICR小鼠心肌，对照鼠给予相同剂量空载腺病毒。Western免疫印迹测定PKCε蛋白质表达水平。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术评价小鼠左室收缩功能。结果与对照鼠相比基因转移鼠心肌转基因PKCε蛋白质表达水平增加近4倍，基线左室最大收缩压、最大收缩速率（dP／dt）、-dP／dt明显降低，左室舒张末压、舒张压明显升高（P〈0．01），异丙肾上腺素激发后左室dP／dt剂量依赖的升高明显减弱（P〈0．01），PKCε基因转移鼠心脏／体重比也较对照鼠明显增加（P〈0．01）。结论腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移诱发了左室收缩功能的损害，导致了心肌肥厚和心衰。     

反义转化生长因子βⅡ型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的 观察反义转化生长因子βⅡ型受作(TGF βRⅡ)表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法 运用重组DNA技术中构建反义TGF βRⅡ真核细胞表达质粒,采用猪血清腹腔注射制备免疫性大鼠肝纤维化模型,实验动物分为肝纤维化模型组、反义TGF βRⅡ治疗组、pCDNA3对照组及正常对照组。反义TGF βRⅡ质粒和pCDNA3空质粒与糖化多聚赖氨酸偶联后经尾静脉分别导入大鼠体内,通过northern blot、RT-PCR、Western blot检测外源导入质粒在肝组织中的表达,检测血清转化生长因子β1(TGFβ1)、肝组织羟脯氨酸测定,Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组织化学与Van Gieson染色观察反义TGF βRⅡ质粒对大鼠肝纤维化的影响。 结果 反义TGF βRⅡ表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可使反义治疗组血清TGF β1含量下降,反义TGF βRⅡ治疗组为(23.16 ± 3.13)ng/ml,模型组为(32.96±3.79)ng/ml,F=36.73,P<0.01。肝组织羟脯氦酸含量下降,治疗组为(0.17±0.01)mg/g,模型组为(0.30±0.03)mg/g,F=15.48,P<0.01。减少了肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积,治疗组Ⅰ型胶原为650.26±51.51,Ⅲ型胶原为661.5 8±55.28,模型组Ⅰ型胶原为1209.44±16.60,Ⅲ型胶原为1175.14±121.44,F值分圳为69.87、70.46,P<0.01。并促进反义治疗组肝脏病理形态一定程度的改善。