大孔吸附树脂纯化九节总黄酮工艺的研究

试验旨在利用大孔树脂纯化九节中的粗黄酮,优选纯化总黄酮的最佳工艺。试验比较3种不同大孔吸附树脂AB-8、HP-20、D-101的吸附-解吸附特性,选择最优吸附纯化树脂考察其上样工艺及洗脱工艺,采用Box-Behnken响应面分析法建立数学模型,优选最佳纯化条件。结果显示,HP-20型大孔树脂吸附性强、解吸容易,最佳富集纯化工艺为上样浓度5 g/L、上样pH值4、层析柱高径比7∶1、洗脱液为60%乙醇。使用该工艺对九节总黄酮进行纯化,精制后的总黄酮含量由纯化前17.6%提升至87.8%,约是纯化前的5倍。研究表明,试验获得了HP-20型大孔树脂吸附九节总黄酮的最佳纯化条件,为九节总黄酮作为饲料添加剂的开发利用提供参考。     

板栗花粉总黄酮的分离纯化工艺研究

AB-8大孔吸附树脂柱层析分离纯化板栗花粉总黄酮,理想的分离纯化工艺参数为：有效柱体积20mL,黄酮液上样量6mL,水洗液10BV,洗脱液乙醇浓度为75%,洗脱速度1mL/min,洗脱液用量为树脂床6BV时,黄酮物质基本被洗脱下来,HPLC表征板栗花粉黄酮得到分离纯化。     

大孔树脂富集纯化藏药五脉绿绒蒿总黄酮的工艺研究

优选大孔吸附树脂富集纯化藏药五脉绿绒蒿中总黄酮的工艺条件。方法:以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量;以比吸附量、吸附率、比解吸量、解吸率等为指标,采用静态吸附-解吸试验,考察AB-8、NKA-9、D-101、HPD-100、DM-301等5种型号的树脂;采用单因素试验,考察静态吸附-解吸附动力学曲线,确定吸附、解吸时间,筛选解吸剂浓度、上样液浓度、流速等参数。结果:D-101型大孔树脂对五脉绿绒蒿总黄酮吸附-解吸性能较好,比吸附量492.8μg/g、吸附率68.21%,解吸率83.26%。工艺条件为:室温下,以2.0 mL/min流速循环上样动态吸附2次,后静态吸附,动态吸附和静态吸附的累计时间不小于8 h。以70%乙醇解吸,静态解吸2 h以上,后以1.0 mL/min流速进行动态解吸,静态解吸和动态解吸累计时间不小于8 h。上样液粗总黄酮质量浓度为140～150μg/mL,每100 mL上样液需装柱树脂为30～40 g。结论:经D-101大孔树脂纯化后,所得干浸膏中总黄酮纯度提高2.96倍,回收率62.23%,纯化物粘度和吸湿性降低,工艺稳定可行,五脉绿绒蒿总黄酮得到有效的富集,为后期的新药开发研究提供参考。     

大孔吸附树脂纯化蜂胶总黄酮的工艺研究

[目的]研究大孔树脂纯化蜂胶总黄酮的最佳工艺。[方法]以比吸附量、解析率及总黄酮回收率为指标,通过考察静态吸附及解吸附试验,筛选最佳大孔吸附树脂。并考察该最佳大孔吸附树脂的动态吸附及解吸附条件,包括原液质量浓度、吸附流量、吸附时间、洗脱剂及洗脱剂流量,从而筛选出该大孔吸附树脂分离纯化蜂胶总黄酮的最佳工艺条件。[结果]FL—1大孔树脂为四种树脂中吸附及解吸附性能最佳,因此选择FL-1为分离纯化蜂胶总黄酮的最佳树脂,其最佳工艺参数为:动态吸附质量浓度0.25～0.38mg/mL,吸附速度1mL/min;树脂柱吸附时间1h,洗脱剂为90%乙醇,洗脱流量为1mL/min。蜂胶总黄酮质量分数从13.07%提高到85.25%,总黄酮回收率达79.37%。[结论]FL-1型大孔树脂对蜂胶总黄酮具有良好的纯化效果,优选工艺合理、稳定、可行。     

大孔吸附树脂分离纯化山丹鳞茎中皂苷的工艺研究

为了研究大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷静态吸附和解吸性能,筛选出纯化效果较好的树脂,试验采用静态吸附筛选树脂和动态吸附确定工艺参数的方法来研究大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷的分离纯化工艺。结果表明:D101大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷的纯化效果较好,在上样原液浓度为6 mg/m L、pH值为8的条件下进行吸附,解吸条件为乙醇浓度70%、洗脱流速0.5 BV/h。在此条件下对山丹鳞茎中皂苷进行纯化,皂苷纯度提高了4.35倍。说明D101大孔吸附树脂对山丹鳞茎皂苷有较好的富集、纯化效果。     

AB-8大孔树脂吸附、解吸中药复方多糖的研究

为了对中药复方免疫增强剂中的多糖进行纯化,试验采用苯酚硫酸法测定多糖含量,然后以AB-8大孔吸附树脂为分离材料,以乙醇为洗脱剂,系统研究上样液浓度、上样量、上样速率、洗脱剂乙醇浓度、洗脱速率、洗脱剂用量等参数对多糖吸附-解吸效果的影响。结果表明:上样液浓度为5.93 mg/mL,上样量为1倍量树脂体积(BV),上样液速率为每小时2倍树脂体积数;洗脱剂乙醇浓度为50%,洗脱速率为每小时3倍树脂体积数,洗脱剂用量为3倍量树脂体积;吸附率为74.3%,解吸率为93.6%。说明AB-8大孔树脂可用于纯化中药复方免疫增强剂中的多糖。     

大孔树脂纯化猫爪草多糖的工艺研究

为探索出适宜分离和纯化猫爪草多糖的大孔树脂,并确定最佳纯化工艺参数,试验对10种不同型号大孔树脂(HPD-722、H103、DA-201、AB-8、HPD300、NKA-9、X-5、HP20、DM301、 D-101)的吸附量、吸附率及解析率进行考察,优选出最佳纯化树脂,并通过考察pH值、上样速度、上样浓度、洗脱剂浓度、洗脱剂用量、流速等指标确定最佳纯化工艺。结果表明:HPD-722型大孔树脂为最优树脂,最佳上样条件如下:pH值为3.5、上样速度为2.0 BV/h、上样浓度为4.0 mg/mL;最佳洗脱条件为80%乙醇,洗脱剂用量为3.5 BV、流速为1.0 BV/h。经过该工艺纯化后,猫爪草多糖的纯度由13.25%提高到了71.46%。说明HPD-722型大孔树脂能够很好地富集、纯化猫爪草中的多糖。     

紫象草原花青素的大孔吸附树脂纯化、平均聚合度及体外抗氧化活性测定

试验旨在利用大孔吸附树脂获得紫象草原花青素粗提物的纯化条件,并探究在此条件下获得纯化物的平均聚合度和体外抗氧化活性。试验采用单因素试验设计,通过比较3种大孔吸附树脂D101、HP-20、ADS-17的吸附与解吸特性,选择最优吸附树脂类型,对紫象草原花青素粗提物进行洗脱浓度、上样体积和洗脱体积的筛选,之后利用静态和动态吸附与解吸试验确定纯化条件,制备紫象草原花青素纯化物;采用盐酸-香草醛法测定纯化物原花青素的平均聚合度及其对1,1-二苯基-2三硝基肼（DPPH·）和羟自由基（·OH）的体外清除率。结果表明：采用φ2.6 cm×30.0 cm玻璃层析柱,选择D101型大孔吸附树脂、90%(V/V)浓度乙醇为洗脱剂,上样体积480 mL,洗脱体积155 mL时纯化效果较好,纯化后原花青素B2含量由纯化前10.01 mg/g提升至13.82 mg/g,提升了36.06%;紫象草原花青素粗提物经乙酸乙酯萃取后,获得水相和乙酸乙酯相的平均聚合度分别为26.87、13.63,纯化物的平均聚合度为14.67。当紫象草原花青素纯化物质量浓度为100 mg/mL时,DPPH·、·OH清除能力分别为99.5...     

大孔树脂纯化蓝刺头中总黄酮生产工艺探讨

本试验旨在研究大孔树脂纯化蓝刺头中总黄酮的最佳生产工艺条件。利用紫外-可见分光光度法,建立总黄酮含量的检测方法;采用静态吸附试验对5种类型的大孔树脂进行了筛选;采用动态吸附试验,探讨了蓝刺头上样液浓度、上样速度、树脂径高比等因素对蓝刺头总黄酮吸附率的影响,并通过响应面优化试验确定最佳工艺条件。结果表明：最佳大孔树脂类型为AB-8,湿法加入装柱,径高比为1:8,上样液为总黄酮含量6 mg/mL的蓝刺头溶液,以1 BV/h流速对其进行动态吸附,再用80%乙醇进行洗脱,纯化后总黄酮的含量达65%以上。综上,该工艺条件适于蓝刺头总黄酮的纯化。     

基于响应面法的华金6号金银花叶总黄酮有效部位的制备及其体外抗氧化活性研究

为利用响应面法优化金银花叶总黄酮有效部位的制备工艺,并考察其体外抗氧化能力,试验对4种型号大孔树脂的吸附-解吸能力进行比较,并筛选最优的大孔树脂型号;采用单因素试验和Box-Behnken响应面法优化大孔树脂纯化金银花叶总黄酮有效部位的制备工艺,分别考察洗脱溶剂浓度、洗脱溶剂体积、上样流速、洗脱流速等因素水平,并进行三次验证试验;以抗坏血酸为阳性对照,测定金银花叶黄酮有效部位的DPPH自由基清除能力和ABTS+自由基的清除能力。结果表明:优选D101大孔树脂最佳纯化工艺为:上样流速2.5 m L/min,洗脱溶剂为60%乙醇,洗脱溶剂体积为4倍柱体积,洗脱流速2 m L/min;制备的有效部位提取物中总黄酮的含量超过50%;60%乙醇部位体外抗氧化能力试验证明金银花叶总黄酮有效部位具有良好的体外抗氧化能力。采用Box-Behnken响应面法优化的大孔树脂纯化金银花叶总黄酮有效部位的工艺可行,且稳定性好;金银花叶总黄酮有效部位的体外抗氧化效果显著,值得进一步研究开发。     

利用大孔吸附树脂提取吸水链霉菌BS-112菌株的抗真菌活性物质

吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)BS-112菌株产生的活性物质对白僵菌、绿僵菌、黄曲霉菌等家蚕病原真菌具有抑制作用。研究了7种大孔吸附树脂对BS-112菌株产生的抗真菌活性物质的吸附和解吸性能,筛选出对抗真菌活性物质具有良好吸附及解吸性能的X-5树脂,这种树脂对抗真菌活性物质的饱和吸附量为73.37 mg/g,最适吸附温度为25℃,饱和吸附时间为150 min,以75%乙醇进行动态解吸,解吸率可达93.68%。BS-112菌株产生的抗真菌活性物质在低浓度下即能够较好地抑制家蚕病原白僵菌的生长,96孔板法测定的最小抑菌浓度(MIC)和杀菌浓度(MFC)分别为1.56、3.13μg/mL,并且活性物质的毒性小,以2 000 mg/kg剂量的活性物质灌胃小鼠,小鼠无急性中毒表现。     

DM-2型大孔树脂分离纯化沙枣多糖的工艺研究

为了确定DM-2型大孔树脂分离、纯化沙枣多糖的最佳工艺条件,试验以吸附率和解吸率为评价指标,通过动态试验研究各因素对分离、纯化效果的影响。结果表明:在沙枣多糖样品溶液浓度为0.7 mg/mL、pH值为10、上样速率为2.5 BV/h、上样量为3 BV、洗脱剂浓度为55%、洗脱速率为1 BV/h、洗脱剂用量为3 BV时,吸附率和解吸率分别达到84.05%和97.3%。说明在同时满足上述条件的情况下,DM-2型大孔树脂分离、纯化沙枣多糖的效率较高。     

用树脂法分离提取类芽孢杆菌(Paenibacillus)Cp-S316抗细菌活性物质

类芽孢杆菌Cp-S316对家蚕真菌、细菌病原物具有广谱抗性。为研究抗菌物质的化学结构、理化性质,并探讨其工业化生产的可行性,研究了不同树脂对抗细菌活性物质的吸附性能,对吸附性能优良的树脂进行了解吸性能的比较,并对解吸剂进行了筛选。结果:X-5树脂对活性物质具有较好的吸附性能,当树脂与发酵液混合后的质量浓度为0.03 g/mL时,振荡吸附4 h,其吸附率为90%;以0.02 mol/L HCl-75%丙酮为最佳解吸剂,层析柱柱长12 cm,直径1.5 cm,流速3.9 mL/(cm2.min)动态解吸,其总解吸率为92%,其中浓度较高部分(树脂与解吸液混合后的质量浓度为0.67 g/mL)的解吸率为90%。关键词类芽孢杆菌Cp-S316;活性物质;分离提取;树脂     

奶牛对蛋氨酸锌的表观吸收率

本试验用粪分析法对蛋氨酸锌饲喂奶牛的表现吸收率进行了测试。试验分３组，每组同质奶牛４头，３组分别在饲料中按日粮加入６ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ锌含量的蛋氨酸锌。试验结果，３组奶牛的表观吸收率依次为８５．０２％、７３．２９％、６４．６６％。结果表明奶中锌不能和蛋氨酸锌的添加量成比例地增长，饲料中锌的食入量较低，奶中锌的表观吸收率较高。饲料中蛋氨酸锌的添加量以２０ｍｇ／ｋｇ左右为宜。这项研究结果为奶牛饲喂蛋氨酸锌制取高锌奶提供了依据。     

火龙果杂交实生苗快速繁育技术研究

以杂交得到的红皮红肉型火龙果自然成熟果实的种子为外植体,进行改良的组织快繁实验,筛选适宜的培养基、激素浓度配比,并对组培苗进行了移栽。结果显示,萌芽诱导培养1/2MS NAA0.3 mg/L。实生苗增殖培养MS 6-BA5.0 mg/L NAA0.3 mg/L,增殖系数可达,且芽生长势强,质量好。子叶二次萌芽培养1/2MS 6-BA1.5 mg/L,生根培养1/2MS NAA0.3mg/L IBA0.3 mg/L,生根率达95%。炼苗后7天的幼苗移栽至处理好的苗床上,20天后成活率达96%以上。     

聚天门冬氨酸对紫花苜蓿生物学性状及产量的影响

采用叶面喷施法研究了5个不同质量浓度聚天门冬氨酸(PASP)处理(20,40,60,80,100 mg/L)对紫花苜蓿(Medicago sativa)干草产量及生物学性状的影响。结果表明:不同质量浓度的PASP对紫花苜蓿一年3茬每茬次的干草产量具有不同影响,20、406、0 mg/L的PASP可显著提高年干草产量(P0.05),其中20 mg/L对提高苜蓿产量最明显,全年干草产量为14 424.03 kg/hm2,比对照增长了13.68%。喷施PASP对紫花苜蓿生物学性状也具有不同影响,20 mg/L的处理对株高、叶面积和节间数促进作用最好,对茎粗促进作用最好的是40 mg/L的处理,分枝数以60 mg/L的处理最高。     

Sulphadoxine and trimethoprim in goats and cows: absorption fraction, half-lives and the degrading effect of the ruminal flora

Oral administration of sulphadoxine to adult goats (100 mg/kg body weight) resulted in absorption of about two thirds from the gastrointestinal tract. The absorption rate was lowest in newborn kids and increased with increasing age. Following administration of sulphadoxine (40 mg/kg body weight) through a rumen fistula about 80% was absorbed in cows. Also the elimination rate for sulphadoxine was lower in newborn kids than in adult goats and increased with the age. Oral administration of the trimethorpim (TMP) to kids, goats (20 mg/kg body weight) and cows (8 mg/kg body weight) resulted in higher plasma concentrations in newborn kids than in the older age groups and the maximal concentration of TMP in the blood of adult goats and cows was lower than 0.2 μg/ml. In vitro experiments showed that trimethoprim may be degraded by ruminal microorganisms, but from experiments with oral administration of trimethoprim to cows it is concluded that metabolism in the cow's liver is at least as important as ruminal degradation.     

3种中药及其提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的研究

为研究板蓝根、黄芪和青蒿及其提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用,本试验在研究板蓝根、黄芪和青蒿及其提取物对Marc-145细胞最大安全浓度的基础上,研究3种中药提取物体外抗PRRSV的作用。结果显示,板蓝根多糖、黄芪多糖和青蒿素3种中药提取物对Marc-145细胞安全浓度分别为为0.03、0.03和0.06 mg/mL,板蓝根、黄芪和青蒿3种中药单方的安全浓度分别为6.25、6.25和3.13 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中,3种中药单方中黄芪的阻断作用最强,能达到100%的保护率,中药提取物中板蓝根多糖对PRRSV的阻断作用最强,在浓度为0.031 mg/mL时对细胞保护率能达到48.03%,青蒿素最差,在0.16 mg/mL时就已不具有阻断作用。板蓝根多糖对病毒不具有直接杀灭作用,黄芪多糖和青蒿素在浓度为0.32 mg/mL时,保护率都是20%左右;黄芪的直接杀灭作用保护率为100%,且非常稳定,青蒿在浓度较高时还有促进细胞生长的作用,但稳定性差,随浓度降低其保护率迅速下降。在对病毒的抑制作用试验中,3种中药提取物的作用相当,浓度为0.01 mg/mL时,板蓝根多糖、黄芪多糖和青蒿素多糖对细胞的保护率分别为24.57%、24.30%和26.20%;而3种中药单方的细胞保护率都能达到100%甚至以上。综合3种作用方式可知,3种中药提取物中,黄芪多糖的抗PRRSV作用最好,青蒿素次之,板蓝根多糖最差;3种中药单方中黄芪的效果最好,青蒿最差。因此,可知黄芪及其提取物具有非常强的抗PRRSV作用,可对其进行进一步研究,以供临床上使用。     

Antiviral Effects of Three Chinese Herbal Medicine and Their Polysaccharides on Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus (PRRSV) in vitro

In order to figure out the antiviral effects of Radix Isatidis,Astragalus herb,Artemisia annua and their polysaccharides on porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) in vitro,the antiviral activity of the three Chinese herbal medicine and their polysaccharides,Isatis root polysaccharide (IRPS),Astragalus polysaccharides (APS) and artemisinin maximum were evaluated by adding to Marc-145 cell cultured with PRRSV respectively.The results showed that the safety concentrations of IRPS,APS and artemisinin to Marc-145 cells were 0.03,0.03 and 0.06 mg/mL;The safety concentrations of Radix Isatidis,Astragalus herb,Artemisia annua to Marc-145 cells were 6.25,6.25 and 3.13 mg/mL.Almost all the cells (about 100%) were protected from PRRSV when Astragalus herb were added early to PRRSV,while IRPS had the same effect on PRRSV among three extracts with 48.03% cells were protect and artemisinin could not protect cells when the concentration was lower than 0.16 mg/mL.IRPS had no effect on PRRSV while APS and artemisinin got a protection rate for cells at about 20% when simultaneously added with PRRSV,under the concentration of 0.32 mg/mL.In terms of simultaneously added with PRRSV,Chinese herb Astragalus could exterminate the virus directly with its protect cells coming to 100% and more.Artemisia annua could promote the growth of cells but its stability was weak.Its protection rate decreased as its concentration reducing.In the experiment of exploring the antivirus effect of infected cells,polysaccharides of these three herbs had nearly the same effect.When in a concentration of 0.01 mg/mL,IRPS,APS and artemisinin respectively protected 24.57%,24.30% and 26.20% cells.However,the protection rate to cells of the three herbs themselves was respectively up to 100% or more.In conclusion,in the extracts of the three herbs,APS had the best antiviral effect,followed by artemisinin and IRPS,and in the single herbal medicines,Astragalus was the best and Artemisia annua was worst.Therefore,Astragalus and APS had the best antiviral effect on PRRSV.It needed more research on Astragalus and APS,and try to use them as antiviral drug in clinical application.     

Supplementing salinomycin to diets for growing-finishing pigs

Feeding experiments with growing-finishing pigs were carried out to study the effect of different dietary salinomycin concentrations upon animal performance. Besides a dietary treatment without antibiotic, three treatments consisted of 20/10 mg/kg, 40/20 mg/kg and 60/30 mg/kg salinomycin (the first and second number refer to the salinomycin content in grower and finisher diet, respectively). Compared to the control group, feeding diets with 20 or 40 mg/kg salinomycin resulted in significantly higher weight gain in the grower period (25-45 kg body weight), while also feed conversion was lower (although not statistically significant). In the finisher period (45-100 kg body weight) salinomycin had no significant effect upon weight gain or feed conversion efficiency, but the 20 and 30 mg/kg treatments yielded the best results. Considering the grower and finisher period together the dietary treatments 40/20 mg/kg and 60/30 mg/kg showed highest growth rate and most favourable feed conversion, although not statistically significant. Carcass characteristics (dressing percentage, carcass length, backfat thickness, percent meat) were not affected by dietary salinomycin supplementation.