斑点免疫结合法检测3种植物病毒

研究了改进的斑点免疫结合法在检测芜菁花叶病毒、烟草花叶病毒和小西葫芦黄化花叶病毒中的应用.无论是使用全抗血清还是纯化的免疫球蛋白,检测感染组织粗汁液中的病毒或纯化的病毒,均获得了满意的结果.同时进行的斑点免疫结合试验、酶联免疫吸附试验和免疫吸附电子显微术等的比较结果表明:无论是检测纯化病毒还是感染组织粗汁液中的病毒,斑点免疫结合法的检测敏感性均优于后2种方法,病毒的可测感度芜菁花叶病毒为0.65ng,烟草花叶病毒为0.39 ng,小西葫芦黄化花叶病毒为0.45 ng;应用碱性磷酸酶标记抗体及羟基吲哚磷酸盐和氮兰四唑为底物较为合适,这种底物可在室温下长期保存,并且反应产物为不褪色的紫色,易于观察和保存.     

钙快速检测试剂盒

针对目前钙检测试剂盒使用不够简便快速。检测终点不易判断，测定不够精确的问题。本产品在设计原理和设计思路方面进行突破。吸收了现有试剂盒的优点，如功能细化、携带方便等；同时，克服了其精确度较低、操作步骤复杂、应用范围小等不足之处。另外，简化了检测装备和检测过程，降低了试剂盒成本。本产品设计独特，制作简单、精良，产品构成简单，易于生产与宣传。     

应用快速斑点免疫结合试验检测泌尿生殖道沙眼衣原体

目的：泌尿生殖道标本的沙眼衣原体检测。方法：采用新型免疫层析技术，以特异性沙眼衣原体单克隆抗体的快速定性检测方法，对178例性病门诊患者泌尿生殖道标本的沙眼衣原体检测。结果：总CT检出率10．1％(18／178)，男性CT检出率8．1％(3／37)，女性CT检出率10，6％(15／141)。结论：提示泌尿生殖道的CT感染在本地区存在，且构成流行，应引起高度重视，并建议将CT检测作为性传播疾病(STD)常规检查项目。     

前列腺癌微小转移检测试剂盒

前列腺癌在欧美国家是最常见的男性恶性肿瘤，在与肿瘤相关的死亡率排行榜上仅次于肺癌，居第二位。随着饮食结构的改变，前列腺癌在我国的发病率有逐渐增高的趋势。目前对前列腺癌的检测手段有血清前列腺特异抗原(PSA)水平、直肠指诊、CT、经直肠B超、磁共振成像和骨扫描等，这些方法可检查出已明显形成转移灶的肿瘤，但对微转移患者却无能为力。     

应用流式细胞仪检测斑点叉尾鮰红细胞免疫粘附功能

制备荧光标记的致敏酵母及未致敏酵母,应用流式细胞仪检测斑点叉尾鮰全血体系与洗涤红细胞体系下红细胞C3b受体(erythrocyte C3breceptors,E-C3bR)与红细胞免疫复合物(erythrocyte immune complexes,E-IC)花环率,同时检测未灭活血清与灭活血清(58℃处理30min)对洗涤红细胞免疫粘附功能的调控作用.结果显示,斑点叉尾鮰红细胞能有效粘附致敏酵母及未致敏酵母,其灭活血清组E-C3bR与E-IC花环率(分别为16.78%和13.51%)明显高于未灭活血清组(分别为5.99%和6.99%)与生理盐水组(分别为8.59%和8.30%);未灭活血清组E-C3bR与E-IC花环率明显低于生理盐水组.试验结果表明斑点叉尾鮰红细胞具有免疫粘附功能,并且血清中存在促进红细胞免疫粘附功能的热稳定因子及抑制其免疫粘附功能的热不稳定因子.该试验不仅从技术上促进了红细胞免疫功能的研究,而且有助于全面客观地了解鱼类的红细胞免疫功能,为鱼类的病害监测及其防治奠定基础.     

丙型肝炎病毒抗体酶免疫试剂盒的研制

用核心区蛋白（C区）合成肽CP9、CP10抗原和非结构区蛋白NS3，区重组表达C33c抗原组合，用鼠抗人IgGMcAb作为酶标抗体，配以TMB底物显色系统，采用可拆条板，定量滴瓶包装，研制成丙型肝炎病毒体酶免疫试剂盒。     

生物素-抗生物素系统斑点免疫结合试验检测棘球蚴病患者的免疫应答

建立了生物素-抗生物素系统斑点免疫结合试验(BAS-DIBA),并以此法研究了棘球蚴病患者对细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)抗原的免疫应答.79例棘球蚴病患者血清、69例非棘球蚴病患者血清和119例健康人血清的BAS-DIBA试验结果为:两试验检测抗棘球蚴抗原抗体的敏感性分别为97.45%和92.41%;特异性分别为98.40%和98.94%;在91.14%的棘球蚴病患者血清中,BAS-DIBA试验较DIBA法敏感;两法同为阳性的棘球蚴病患者血清中,BAS-DIBA检出的抗体效价的几何均数为DIBA法的5.48倍;4例DIBA试验阴性的棘球蚴病患者血清在BAS-DIBA法中为阳性.证实所建立的BAS-DIBA法是检测棘球蚴病患者免疫应答敏感性高、特异性强的方法,特别是对于低抗体水平的棘球蚴病患者可能具有更高的应用价值.     

芋花叶病毒检测试剂盒的研制

用IPTG诱导融合表达芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,DMV)CP基因的菌株,通过12%SDS-PAGE和5%~20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳获得纯化的CP免疫家兔,获得经过Western blot分析为特异的抗CP血清.硫酸铵沉淀初步提取IgG,然后用Protein A-Red Sepharose亲和层析进一步纯化IgG,IgG与甘油1∶1混合获得效价1∶3 100的一抗,将一抗、羊抗兔二抗和4-硝基苯基磷酸二钠组成DMV检测试剂盒.用研制的检测试剂盒对芋、魔芋和马蹄莲叶片样品的间接ELISA检测表明,DMV在田间普遍发生,并确定研制的试剂盒完全可用于DMV检测.     

松材线虫快速检测试剂盒研制

采用引物对K09F2/R对枯死松树内分离的松材线虫、拟松材线虫及其他线虫进行检测,结果表明,所有松材线虫株系均扩增出一条340 bp的清晰、明亮的条带.而拟松材线虫、其他线虫均无扩增产物.利用引物对K09F2/R构建了松材线虫检测试剂盒.采用该试剂盒可使整个检测过程不超过2.5 h;该试剂盒检测灵敏度为1/7 条线虫,达到了对幼虫成功鉴定的目的,且检测结果便于判读,检测费用较低.     

梨树ASPV检测试剂盒研制及其应用

以库尔勒香梨为材料,利用SDS法提取总RNA,通过苹果茎痘病毒（apple stem pitting virus,ASPV）的基因组序列设计特异性寡核苷酸引物,利用RT-PCR技术研制梨树ASPV的RT-PCR检测试剂盒。该试剂盒的检出其痕量为2．88pg,整个检测过程只需6～8h。该试剂盒在常温下能保存l周以上,在4℃条件下可保存1年以上。试剂盒扩增ASGV病毒,不能得到特异性带。与用NASH方法检测病毒比较,结果表明,该ASPV试剂盒具有特异、灵敏等优点。利用此试剂盒能很好地对梨树ASPV病毒进行检测。     

免疫照相化学测定法

照相化学免疫测定法不是指的对如像发光免疫分析中体系所发射的光采用照相来记录,而是以照相感光活性物质作为标记物,对抗原(或抗体)进行标记后,使之发生免疫反应,随后将反应的结果移到照相底片上使产生感光效应,而实现免疫测定。该方法是80年代初发展的一种新的免疫测定技术。它与放射化学免疫测定、化学发光免疫测定相类似;但避免了放射免疫分析的一些缺点,如所用的放射性同位素标记物不断衰变、不能久存和测     

应用ELISA试剂盒检测鸡传染性支气管炎抗体

应用ELISA试剂盒对西宁市及乐都县344份血清样品进行了鸡传染性支气管炎抗体水平检测,结果阳性率达97．96％,其中333份样品抗体滴度在500—15000之间;1份样品的抗体滴度小于500;3份样品滴度大于15000。     

用斑点免疫结合法检测转化的烟草植株中的TMV—CP和CMV—CP

1982年,Hawkes 等人仿照分子生物学中点杂交(dot hybridization)的方法发展了斑点免疫结合测试技术(DIBA)用于检测单克隆抗体。本实验就 DIBA 应用在检测转基因烟草。烟草用发根农杆菌 Ri 质粒介导,将烟草花叶病病毒外壳蛋白基因(TMV—CP)和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因(CMV—CP)导入烟草的叶片外植体中,通过对外植体的培养,得到愈伤组织,从愈伤组织进而获得了再生植株,对再生植株进行检测导入的外壳蛋白基因的表达量。     

实验大鼠肺炎病毒ELISA检测试剂盒的研究

在小鼠肺炎病毒的抗原特性进行鉴定的基础上,将其毒种感染BHK_(21)细胞作为抗原,建立了检测大鼠PVM抗体的酶联免疫吸附试验的试剂盒。经过提纯PVM免疫血清结合辣根过氧化物酶,用于阻断试验、免疫荧光抗体(IFA)试验,考核了本试剂盒的特异性,对该试剂盒的灵敏性及重演性作了验证。并用本试剂盒对154只大鼠的PVM抗体水平进行调查,结果是开放大鼠PVM阳性率为38.2％,清洁大鼠为0。并对154只大鼠标本用光密度OD值定值的两种方法作了探讨。     

胭脂红酸ELISA检测试剂盒的制备及应用

为了快速高效检测肉类食品中胭脂红酸含量,制备了胭脂红酸ELISA检测试剂盒,检测了市售肉类样品中胭脂红酸含量,并通过高效液相色谱法进行了验证。结果显示试剂盒的检测限为1 ng/mL,线性范围7. 8～1 150 ng/mL,灵敏度IC50值为95. 2 ng/mL;该试剂盒中的检测抗体对胭脂红的交叉反应率为108. 7%,但与其他4种色素添加剂均未见交叉反应。检测市售肉类样品的批内回收率在79. 1%～103. 1%之间,批间回收率在81. 6%～98. 8%之间;批内、批间试验的相对标准偏差基本小于10%,且与HPLC方法具有良好的一致性(R2=0. 927),说明该试剂盒具有灵敏、准确、简便、快速的特点,为胭脂红酸免疫学快速检测方法的建立提供了技术基础。     

细胞程序性死亡检测试剂盒的研制及其应用

该研究建立的细胞凋亡检测试剂盒,以地高辛-dUTP和未端脱氧转移酶原位标记DNA断裂来检测凋亡细胞,在样品固定、标记反应体系和信号检测步骤等方面有一定的特色.应用试剂盒对缺氧缺血脑损伤引起的细胞凋亡以及抗氧化剂的保护作用进行了探讨,取得了较有价值的结果.     

几种斑点检测算法及其性能比较

斑点检测是计算机视觉的重要内容，图像变换主要包括几何变换、尺度缩放和光照变换等，文章针对常用的几种图像斑点检测算法进行讨论．通过Matlah仿真比较几种算法的性能得出结论，Surf算法在图像斑点检测中具有明显的优越性．能够提高系统的实时运算速度，     

基于边缘检测的快速斑点识别算法

针对珍贵视频影像中的斑点识别与修复问题,提出了一种基于边缘检测的斑点识别算法.首先利用边缘检测算法提取当前帧的大致边缘,然后依据边缘像素,利用提出的正反扫描方法和局部运动估计的SROD算法识别出斑点全部像素点.实验表明,提出的算法时间复杂度是SROD算法和Gullu MK算法的1/4到1/2,而斑点识别效果有较明显的改善,为后续斑点修复提供了快速准确的定位信息.