电针干预对透镜诱导型近视豚鼠睫状肌中MMP-3、TIMP-3及Col3α1表达的影响

目的　探讨电针干预对透镜诱导型近视豚鼠睫状肌中基质金属蛋白酶（MMP）-3、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-3和III型胶原α1（Col3α1）表达的影响。方法　2周龄三色豚鼠90只随机分为正常对照（NC）组、透镜诱导型近视（LIM）组以及LIM+电针干预（LIM+EA）组;其中,NC组豚鼠不作任何干预,LIM组和LIM+EA组豚鼠右眼均配戴-6.00 D透镜作为造模眼,左眼不戴镜作为自身对照;LIM+EA组豚鼠右眼戴镜的同时在太阳、合谷穴给予电针刺激。各组豚鼠于造模后1周、2周和4周均进行屈光度和眼轴长度测量,制备病理组织切片观察各组豚鼠睫状肌的形态变化,并应用q-PCR和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组豚鼠睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1的 mRNA及蛋白表达。结果　造模后1周、2周和4周,与NC组相比,LIM组豚鼠造模眼与自身对照眼近视屈光度和眼轴长度的差值均显著增加（均为P<0.001）;与LIM组相比,LIM+EA组造模眼与自身对照眼近视屈光度和眼轴长度的差值均减小（均为P<0.05）。病理组织切片结果发现,NC组豚鼠睫状肌纤维排列均匀、紧密有序;LIM组豚鼠睫状肌纤维排列松散混乱、有机纤维溶解断裂;LIM+EA组豚鼠睫状肌纤维排列相较于LIM组更为有序,相对完整。q-PCR和ELISA检测结果显示,造模后1周和2周,与NC组相比,LIM组豚鼠造模眼睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1 mRNA及蛋白相对表达水平均明显升高（均为P<0.05）;与LIM组相比,LIM+EA组豚鼠造模眼睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1 mRNA及蛋白相对表达水平均明显下降（均为P<0.05）。造模后4周,与NC组相比,LIM组豚鼠造模眼睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1 mRNA及蛋白相对表达水平均降低（均为P<0.05）;与LIM组相比,LIM+EA组豚鼠造模眼睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1 mRNA及蛋白相对表达水平均升高（均为P<0.05）。结论　近视发展初期,电针干预可显著下调透镜诱导型近视豚鼠睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1的表达,明显延缓近视的发生发展。     

视黄醇脱氢酶5在豚鼠形觉剥夺性近视眼中的表达变化

目的　探讨形觉剥夺性近视（FDM）和正常豚鼠的视网膜色素上皮（RPE）细胞中的视黄醇脱氢酶5（RDH5）基因在转录水平和蛋白水平的表达差异。方法　30只豚鼠随机分为:实验组（15只）,其中,右眼进行遮盖为FDM组（15眼),左眼不遮盖为自身对照组（15眼）;空白对照组（15只）双眼不做任何干预。分别于遮盖前,遮盖1周、2周、3周和4周后检查豚鼠屈光度和眼轴长度。采用免疫荧光染色法检测各组豚鼠RPE细胞中RDH5表达,实时荧光定量PCR和Western blot检测各组豚鼠RPE细胞中RDH5 mRNA和蛋白的表达变化。结果　遮盖前、遮盖1周后,FDM组、自身对照组、空白对照组三组间豚鼠的屈光度、眼轴长度差异均无统计学意义（均为P>0.05）;遮盖2周、3周、4周后,三组间豚鼠的屈光度、眼轴长度差异均有统计学意义（均为P<0.05）。遮盖2周、3周、4周后,FDM组豚鼠屈光度分别为（1.47±1.41）D、（3.32±1.39）D、（4.63±1.04）D,眼轴长度分别为（7.69±0.24）mm、（7.92±0.09）mm、（8.34±0.15）mm,与空白对照组和自身对照组相比,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。遮盖4周后,与空白对照组和自身对照组相比,FDM组豚鼠RPE细胞中RDH5 mRNA水平和蛋白水平均明显下调（均为P<0.05）。免疫荧光染色结果显示,RDH5主要表达于豚鼠RPE层,与空白对照组和自身对照组相比,FDM组豚鼠RPE层RDH5蛋白的平均荧光强度最低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　FDM豚鼠近视眼RPE细胞内RDH5基因在转录和蛋白水平的表达均下调,提示RPE 细胞内RDH5可能在近视的发生发展中扮演了一定的角色。     

电针对负透镜诱导型近视豚鼠睫状肌中表皮生长因子及其受体表达的作用

目的　观察表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）及其受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）经电针干预后在近视豚鼠睫状肌中的表达变化,探讨其在近视发生发展中的作用。方法　将90只2周龄健康三色短毛豚鼠随机分为正常对照（normal control,NC）组、透镜诱导型近视（lens-induced myopia,LIM）组和透镜诱导型近视电针（lens-induced myopia+ electroacupuncture,LIM+EA）组,每组各30只。NC组豚鼠正常饲养,不做任何干预;LIM组和LIM+EA组豚鼠右眼均戴-6 D透镜诱导近视,左眼作为自身对照不做任何处理;LIM+EA组豚鼠在戴镜同时选取双侧太阳穴、合谷穴进行电针干预。各组豚鼠造模后2周、4周进行屈光度和眼轴长度的检测,分别制备组织病理切片观察睫状肌的形态;通过定量聚合酶链反应（quantitative polymerase chain reaction,q-PCR）和酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测各组豚鼠睫状肌中EGF mRNA、EGFR mRNA及其蛋白表达水平。结果　造模后2周、4周,LIM组和LIM+EA组造模眼分别与自身对照眼及NC组右眼相比,近视屈光度均增加,眼轴均延长,LIM+EA组造模眼较LIM组造模眼近视屈光度减小,眼轴延长减缓,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。病理检测结果显示,NC组睫状肌纤维完整、排列有序;LIM组睫状肌纤维断裂、溶解,排列混乱;LIM+EA组睫状肌纤维相对完整,排列有序。q-PCR及ELISA检测结果表明,LIM组右眼睫状肌中EGF mRNA、EGFR mRNA及其蛋白表达水平与NC组和LIM+EA组相比均明显降低（均为P<0.05）,而LIM+EA组和NC组EGF mRNA、EGFR mRNA及其蛋白表达水平差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　电针干预近视豚鼠可影响睫状肌中EGF和EGFR的表达水平并能延缓近视发展。     

玻璃体内注射双调蛋白抗体对透镜诱导型近视豚鼠屈光度、眼轴长度及视网膜中双调蛋白表达的影响

目的　探讨双调蛋白（amphiregulin,AREG）对透镜诱导型近视豚鼠屈光度、眼轴长度以及视网膜中AREG蛋白和mRNA表达的影响。方法　选取2周龄健康英国三色短毛豚鼠30只,随机分为正常对照组、近视组、AREG低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组各6只。除正常对照组外,其余组均右眼配戴-10.0 D透镜,左眼作为自身对照与正常对照组均不做任何处理,戴镜2周后分别测量各组的屈光度及眼轴长度。第3周开始,近视组豚鼠右眼玻璃体内注射Linger注射液3 μL,低剂量组、中剂量组、高剂量组豚鼠右眼分别注射500 mg·L^-1 AREG抗体（R&D:MAB989-500）1 μL、2 μL、3 μL,对侧眼作为自身对照,不做任何处理,每周注射1次,连续注射3周,期间继续配戴眼镜,3周后分别测量各组豚鼠的屈光度和眼轴长度。采用免疫荧光标记法检测豚鼠视网膜AREG蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测豚鼠视网膜AREG mRNA的表达。结果　入组前各组豚鼠的初始屈光度及眼轴长度差异均无统计学意义（均为P>0.05）;与正常对照组相比,透镜诱导2周后近视组、低剂量组、中剂量组、高剂量组豚鼠右眼屈光度下降,眼轴延长（均为P<0.05）;各组左眼屈光度和眼轴长度差异均无统计学意义（均为P>0.05）。玻璃体内注射AREG抗体3次后,与近视组相比,低剂量组屈光度和眼轴长度差异均无统计学意义（均为P>0.05）;中剂量组屈光度差异无统计学意义（P>0.05）,但眼轴缩短,差异有统计学意义（P<0.01）;高剂量组屈光度上升且眼轴缩短,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;各组对侧眼的屈光度和眼轴长度差异均无统计学意义（均为P>0.05）。免疫荧光标记法在各组豚鼠眼球后极部、赤道部以及后极部与赤道部之间的视网膜均检测到AREG蛋白,说明AREG主要分布在眼球视网膜组织,且无部位特异性。AREG蛋白在近视组豚鼠视网膜高表达,正常对照组低表达,玻璃体内注射AREG抗体后低剂量组、中剂量组和高剂量组AREG蛋白表达逐渐下降。将正常对照组视网膜AREG mRNA表达量标准化为100%,近视组、低剂量组、中剂量组、高剂量组右眼AREG mRNA表达量分别与标准化后的正常对照组比较得到目的基因的相对表达量。近视组AREG mRNA相对表达量最高,正常对照组其次,低剂量组、中剂量组和高剂量组AREG mRNA的表达呈剂量依赖性下降。结论　玻璃体内注射AREG抗体后,豚鼠眼轴缩短,屈光度增加,视网膜中AREG蛋白和mRNA呈剂量依赖性表达下降。AREG在近视发生发展过程中起重要作用。     

PPARy受体激动剂罗格列酮对形觉剥夺性近视和正常豚鼠屈光度的影响

目的　探讨过氧化物酶体增殖物激活受体y（PPARy）激动剂罗格列酮在豚鼠形觉剥夺性近视（FDM）中的作用。方法　选取40只3周龄豚鼠（均为右眼）,随机分成4组:正常组、FDM组、正常+罗格列酮组、FDM+罗格列酮组,其中正常组豚鼠不做处理,FDM组豚鼠使用头套法造模,正常+罗格列酮组豚鼠每天腹腔注射罗格列酮5 mg·kg^-1,FDM+罗格列酮组豚鼠每天戴头套并腹腔注射罗格列酮5 mg·kg^-1,持续28 d。实验前和实验后28 d测量豚鼠屈光度,实验后28 d测量豚鼠眼轴长度,保留眼球,免疫组织化学及Western blot测量豚鼠I型胶原蛋白(COL-I)、转化生长因子-β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）蛋白的分布与表达,HE染色观察巩膜形态变化。结果　与正常组相比,FDM组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度均增加,形成相对近视,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;巩膜明显变薄,胶原纤维排列紊乱,断裂明显,分布不规则。与正常组相比,正常+罗格列酮组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度变化差异均无统计学意义（均为P>0.05）;巩膜形态没有明显变化。与正常组相比,FDM+罗格列酮组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度变化差异均无统计学意义（均为P>0.05）。与FDM组相比,FDM+罗格列酮组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度均减少,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;巩膜胶原纤维排列松散,分布略紊乱。Western blot检测结果显示,与正常组相比,FDM组豚鼠巩膜中COL-I、TGF-β1、TIMP-2蛋白表达量均减少,MMP-2蛋白表达量增加,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;与正常组相比,正常+罗格列酮组豚鼠巩膜中,COL-I、TGF-β1蛋白表达量均增加,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,TIMP-2和MMP-2蛋白表达量差异均无统计学意义（均为P>0.05）;与正常组相比,FDM+罗格列酮组豚鼠巩膜中COL-I蛋白的表达接近正常组,差异无统计学意义（P>0.05）,TGF-β1、TIMP-2蛋白表达量均增加,MMP-2蛋白表达量减少,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;与FDM组相比,FDM+罗格列酮组豚鼠巩膜中COL-I、TGF-β1、TIMP-2蛋白表达量均增加,MMP-2蛋白表达量减少,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。豚鼠巩膜中COL-I、TGF-β1、TIMP-2、MMP-2蛋白免疫组织化学表达趋势与Western blot检测结果一致。结论　PPARy受体激动剂罗格列酮可能通过调节TGF-β1、COL-I、TIMP-2和MMP-2蛋白的表达水平抑制FDM,对正常豚鼠的屈光影响不大。     

电针对透镜诱导性近视豚鼠闪光视网膜电图的影响

目的　探讨电针对透镜诱导性近视豚鼠闪光视网膜电图（ｅｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｏｇｒａｍ,ＥＲＧ）的影响。方法　２４只３周龄健康三色短毛豚鼠随机分为透镜诱导组（１２只）与透镜诱导＋电针组（１２只）。两组豚鼠右眼戴－１０Ｄ透镜,左眼不戴镜作为自身对照。透镜诱导＋电针组在戴镜的同时,电针刺激豚鼠两侧合谷穴与太阳穴。４周后测量２组屈光度、眼轴长度及ＥＲＧ波形的变化。结果　４周后,与自身对照眼比较,透镜诱导眼近视屈光度增加（Ｐ＜０．０１）,眼轴延长（Ｐ＜０．０１）;同时其暗适应振荡电位的ＯＳ２波振幅及总振幅下降（均为Ｐ＜０．０１）,暗适应最大混合反应、明适应视锥细胞反应的ｂ波振幅下降（均为Ｐ＜０.０１）。电针干预后,透镜诱导眼的屈光度和眼轴长度没有变化（Ｐ＞０．０５）;但与透镜诱导组右眼相比,透镜诱导＋电针组透镜诱导眼暗适应振荡电位的ＯＳ２波振幅及总振幅,暗适应最大混合反应、明适应视锥细胞反应的ｂ波振幅均增高（均为Ｐ＜０．０５）,达到与其自身对照眼相似的水平（均为Ｐ＞０．０５）。结论　电针刺激合谷穴与太阳穴影响透镜诱导性近视豚鼠ＥＲＧ,可使其恢复至正常水平。     

双调蛋白抗体对双眼诱导型近视豚鼠眼部的影响

目的　探讨双调蛋白抗体对双眼诱导型近视豚鼠眼轴长度、屈光度及后极部巩膜厚度等的影响。方法　60只三色短毛豚鼠随机分为5组:正常对照组、近视模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组12只。豚鼠双眼戴-10 D透镜诱导近视:正常组不作任何处理,戴镜2周后,低、中、高剂量组豚鼠右眼玻璃体内注射低、中、高剂量双调蛋白抗体,同时左眼玻璃体内注射同等剂量的乳酸钠林格注射液（buffer组）,注射抗体前后持续戴镜。于戴镜前、戴镜后2周、注射3次抗体后测量豚鼠的屈光度和眼轴长度。注射3次抗体后,过碘酸雪夫染色法检测豚鼠眼球后极部视网膜、脉络膜及巩膜的厚度,实时荧光定量PCR和免疫荧光法检测视网膜中双调蛋白及表皮生长因子受体mRNA、蛋白的表达。结果　透镜诱导2周后,近视模型组与正常对照组比较眼轴长度增长、屈光度缩短,差异均有统计学意义（均为P<0.01）。注射3次抗体后,与buffer组相比,低、中、高剂量组眼轴长度均缩短,屈光度均上升,后极部巩膜厚度均明显增加,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。各组后极部视网膜厚度无明显变化。实时荧光定量PCR结果和免疫荧光检测结果显示近视模型组及buffer组视网膜中双调蛋白mRNA和蛋白表达增加,高、中、低剂量组视网膜中双调蛋白mRNA和蛋白表达均下降,与buffer组相比,低剂量组视网膜中表皮生长因子受体表达下降（t=2.606,P=0.022）。结论　在近视造模豚鼠的玻璃体内注射双调蛋白抗体后,豚鼠屈光度上升、眼轴长度明显缩短、后极部巩膜厚度增加,其机制可能与双调蛋白表达的减少有关。     

肾阳虚体质对负透镜诱导豚鼠眼球生物参数及后极部巩膜厚度的影响

目的 探讨肾阳虚体质对负透镜诱导豚鼠的屈光度、眼轴长度及后极部巩膜厚度的影响.方法 选取24只3周龄雄性健康三色短毛豚鼠,随机分为正常对照组、透镜诱导组和肾阳虚+透镜诱导组,每组各8只.肾阳虚+透镜诱导组每日腹腔注射氢化可的松注射液,剂量10 mg·kg-1,正常对照组和透镜诱导组则注射等量生理盐水,每日1次,连续2周.第3周起,透镜诱导组、肾阳虚+透镜诱导组右眼均戴-10.00 D透镜,左眼作为自身对照眼,正常对照组则不作任何处理,透镜诱导2周后各组进行屈光度、眼轴长度及后极部巩膜厚度的测量.结果 透镜诱导组自身对照眼屈光度、眼轴长度和后极部巩膜厚度分别为(1.52±0.45)D、(8.52±0.04) mm、(291.25±18.08) μm,与之相比透镜诱导组造模眼近视屈光度增加为(-2.16±0.09)D,眼轴延长为(8.61±0.03)mm,后极部巩膜厚度降低为(233.75±23.26) μm(均为P＜0.01);肾阳虚+透镜诱导组自身对照眼屈光度、眼轴长度和后极部巩膜厚度分别为(1.56±0.18)D、(8.53±0.09) mm、(296.25±22.64)岬,与之相比肾阳虚+透镜诱导组造模眼近视屈光度增加为(-2.73±0.55)D,眼轴延长为(8.70±0.10)mm,后极部巩膜厚度降低为(180.00±16.04) μm(均为P＜0.01);与透镜诱导组造模眼相比,肾阳虚+透镜诱导组造模眼近视屈光度增加更多,眼轴延长更显著,后极部巩膜厚度降低更明显(均为P＜0.05).结论 在负透镜诱导下,肾阳虚豚鼠较正常豚鼠眼轴延长和近视度增加更加显著,肾阳虚体质与近视的发生发展可能有密切联系.     

电针肾俞穴对甲状腺素加负透镜诱导性近视豚鼠屈光参数和血清激素的影响

目的 观察电针肾俞穴对甲状腺素诱导性近视豚鼠的屈光参数和血清激素的影响。方法 选取2周龄三色健康短毛豚鼠50只，随机分为正常组、近视组、模型组、假穴组和电针组5组，每组10只豚鼠。近视组豚鼠右眼配戴-6.00 D透镜诱导近视，模型组、假穴组和电针组动物右眼配戴-6.00 D透镜诱导近视的同时，每日腹腔注射左旋甲状腺素钠0.05 mg·kg^-1·d^-1构建甲状腺功能亢进(简称甲亢)性近视模型；电针组于造模成功后(造模后第3周)开始电针肾俞穴治疗，持续4周；假穴组电针臀部假穴。正常组不做任何处理。观察并记录各组豚鼠造模后不同时间的一般情况、体重和肛温变化；同时利用检影镜和A超检测造模后0周、2周和6周时动物屈光度和眼轴长度。利用ELISA法检测造模后2周和6周各组豚鼠血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)和雌二醇(E2)水平变化。结果 造模后2周，与正常组比较，近视组、模型组、假穴组和电针组豚鼠的屈光度均显著下降(均为P<0.05);与近视组和正常组比较，模型组、假穴组和电针组豚鼠呈身体消瘦、烦躁不...     

外源性视黄酸诱导的豚鼠近视模型的建立

目的建立豚鼠外源性视黄酸诱导近视模型,观察外源性视黄酸在三色豚鼠眼轴生长和屈光变化中的作用。方法选取体质量100g左右3～4d三色豚鼠20只,随机分为正常对照组和视黄酸诱导组。视黄酸诱导组予连续5d喂饲24mg.kg-1花生油调配的视黄酸0.5mL,正常对照组喂饲0.5mL花生油,喂饲前和喂饲后第5天分别测量其眼轴长度、屈光度,观察其变化。用HE染色测量视黄酸诱导组豚鼠巩膜和正常对照组豚鼠巩膜的厚度变化并通过透射电镜观察巩膜成纤维细胞的变化及胶原纤维的改变。结果实验前豚鼠的屈光状态和眼轴长度,两组之间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。实验第5天,视黄酸诱导组豚鼠眼轴增长,正常对照组豚鼠的眼轴长度为(7.628±0.009)mm,视黄酸诱导组豚鼠眼轴长度为(7.743±0.005)mm,两组比较差异具有统计学意义(P<0.01);正常对照组的豚鼠眼的屈光度为(+6.50±1.60)D,视黄酸诱导组的豚鼠眼的屈光度(+1.73±0.80)D。与正常对照组相比,视黄酸诱导组的豚鼠眼屈光度平均增加了-4.80D,屈光度差异有统计学意义(P<0.01)。后极部巩膜HE染色显示,视黄酸诱导组巩膜比对照组巩膜薄。透射电镜结果显示,视黄酸诱导组巩膜胶原纤维数量减少,直径变小。结论外源性视黄酸能稳定有效地诱导眼轴增长,形成相对性的近视漂移并直接引起巩膜重塑。     

电针干预对透镜诱导型近视豚鼠视网膜和视皮层中BDNF、NGF及AchE表达的影响

目的 探讨电针干预对透镜诱导型近视(LIM)豚鼠视网膜和视皮层中脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)及乙酰胆碱酯酶(AchE)表达变化的影响.方法 将90只2周龄雄性豚鼠随机分为正常对照(NC)组、LIM组和LIM+电针治疗(LIM+EA)组.NC组豚鼠正常饲养,不进行干预;LIM组和LIM+EA组豚...     

形觉剥夺性高度近视豚鼠巩膜形态改变及缺氧诱导因子-1α和氧自由基在高度近视中的作用

目的　观察形觉剥夺性高度近视（form deprivation high myopia，FDHM）豚鼠巩膜形态变化，探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）及氧自由基在高度近视中的作用。方法　将豚鼠适应性饲养1周后，随机分为空白对照组（25只）和模型组（25只）。模型组豚鼠右眼行眼睑缝合，所有模型组豚鼠均选择右眼作为FDHM组，对侧眼为自身对照组。空白对照组豚鼠不做任何处理。于造模前及造模后8周采用检影镜测量屈光度，A超进行生物测量。形觉剥夺8周以后处死豚鼠，观察巩膜形态和超微结构的变化，测定巩膜HIF-1α相对表达量，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力及丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量。结果　豚鼠形觉剥夺8周以后，FDHM组屈光度从（+3.59±0.33）D变为（-7.96±0.55）D，明显高于空白对照组（+0.89±0.32）D、自身对照组（-0.55±0.49）D（均为P<0.05）；玻璃体腔深度为（4.12±0.13）mm明显高于空白对照组（3.71±0.23）mm和自身对照组（3.93±0.04）mm（均为P<0.05）；眼轴长度为（8.93±0.22）mm明显长于空白对照组（7.95±0.37）mm和自身对照组（8.01±0.15）mm（均为P<0.05）。巩膜组织明显变薄，细胞外基质增多，成纤维细胞密度降低，胶原纤维平均直径减小。FDHM组巩膜中HIF-1α相对表达量、MDA含量明显高于空白对照组和自身对照组，SOD活力明显低于空白对照组和自身对照组（均为P<0.05）。结论　形觉剥夺8周后，豚鼠FDHM眼近视度数明显增加，玻璃体腔深度增加，眼轴延长，巩膜形态发生病理性变化；HIF-1α、SOD、MDA可能参与了FDHM的形成。     

针刺对形觉剥夺性近视豚鼠巩膜形态及组织中HIF-1α、SOD、MDA水平的影响

目的 探究针刺对形觉剥夺性近视(FDM)豚鼠巩膜组织形态特点及巩膜组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响。方法 选取普通级3周龄健康三色豚鼠72只,随机分为空白组、模型组和针刺组(各24只)。用半透明气球作为眼罩分别固定于模型组和针刺组豚鼠右眼及头面部建立FDM模型,左眼充分暴露作自身对照;针刺组在豚鼠模型建立当天起,于每日相同时间对豚鼠进行针刺和电针干预治疗,空白组豚鼠不做任何干预。记录每组豚鼠造模前、造模后2周及4周的眼轴长度和屈光度。造模后4周处死豚鼠,光学显微镜下观察巩膜形态变化,Western blot检测各组豚鼠巩膜中HIF-1α蛋白表达,比色法测定各组豚鼠巩膜中SOD活力和MDA含量。结果 造模后2周和4周,与空白组比较,模型组及针刺组豚鼠遮盖眼近视屈光度及眼轴长度均明显增加(均为P<0.05);与模型组比较,针刺组豚鼠遮盖眼近视屈光度减小,眼轴增长明显减缓(均为P<0.05)。造模后4周,与空白组比较,模型组豚鼠巩膜厚度明显变薄,胶原纤维分布稀疏,有明显纤维空隙且排列不规则;与模型组相比,针刺组豚鼠巩膜层...     

雷帕霉素对豚鼠形觉剥夺性近视的干预作用及相关机制研究

目的　探讨球结膜下注射雷帕霉素对豚鼠形觉剥夺性近视（FDM）的干预作用及相关机制。方法　选取2～3周龄豚鼠80只（80眼）,雌雄不限,随机分为4组:空白对照组、FDM组、雷帕霉素组、FDM+雷帕霉素组;空白对照组不做任何处理;FDM组单纯缝合豚鼠右眼眼睑;雷帕霉素组于实验第1天、第7天豚鼠右眼球结膜下注射雷帕霉素50 μg;FDM+雷帕霉素组于实验第1天、第7天豚鼠右眼球结膜下注射雷帕霉素50 μg后再缝合右眼眼睑。记录各组豚鼠实验前及实验第7天、第14天的眼轴长度、屈光度;并取各组豚鼠视网膜行过碘酸-雪夫染色（PAS染色）及透射电镜检查,观察各组豚鼠视网膜形态变化;取各组豚鼠巩膜行RT-PCR检测巩膜组织中mTOR、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及转化生长因子β1（TGF-β1）的mRNA表达;利用Western blot 检测各组豚鼠巩膜组织中AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的蛋白表达。结果　FDM组与空白对照组相比,实验第7天、第14天豚鼠的右眼眼轴长度、屈光度增加,形成了相对近视;FDM组巩膜中MMP-2、α-SMA 的mRNA相对表达量与空白对照组相比均增加,TGF-β1 mRNA相对表达量减少,差异均具有统计学意义（均为P<0.05）;与空白对照组相比,FDM组豚鼠巩膜中mTOR mRNA和AKT、P-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白的相对表达量变化不大,差异均无统计学意义（均为P>0.05）,但视网膜变薄,各层结构排列紊乱、疏松。雷帕霉素组与空白对照组相比,实验第7天、第14天豚鼠右眼眼轴长度、屈光度差异均无统计学意义（均为P>0.05）,且视网膜形态无明显变化。FDM+雷帕霉素组与FDM组相比,实验第7天豚鼠右眼眼轴长度、屈光度差异均无统计学意义（均为P>0.05）,实验第14天右眼眼轴长度和屈光度均减小,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,TGF-β1 mRNA的相对表达量增多,MMP-2、α-SMA、mTOR 的mRNA和AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的蛋白相对表达量均减少,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　雷帕霉素球结膜下注射可延缓豚鼠FDM的形成,可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路、调节巩膜中的MMP-2、TGF-β1、α-SMA的表达而发挥作用的,且对正常豚鼠视网膜结构没有影响。     

Comparison of form-deprived myopia and lens-induced myopia in guinea pigs

AIM: To study the efficacy difference between form-deprived myopia (FDM) and lens-induced myopia (LIM), the degree of myopia, axial length and pathological changes of the posterior sclera from guinea pigs were evaluated.METHODS: Four-week pigmented guinea pigs were randomly assigned into 3 groups, including normal control (n=6), FDM group with monocular cover (n=11) and LIM group with monocular -7D lens treatment (n=11). FDM group was form-deprived while LIM group was lens-induced for 14 d. Refractive error and axial length were measured prior to and post treatment, respectively. Morphological changes of sclera were examined using both light and electronic microscopes.RESULTS: After 14d treatment, refractive errors for FDM group and LIM group were -3.05±0.71D and -2.12±1.29D, respectively, which were significantly more myopic than that of normal controls and fellow control eyes (P<0.01). As for axial length, it was 7.93±0.03 mm for FDM group and 7.89±0.06 mm for LIM group, which were significantly longer than both normal and fellow controls (P<0.01). With respect to both refractory error and axial length, the differences between FDM group and LIM group were not significant (P>0.05). Under light microscope, both FDM group and LIM group showed thinned sclera, disarrangement of fibrosis and enlarged disassociation between fibers. Consistently, ultrastructural examination showed degenerated fibroblasts and thinned fibers in posterior sclera.CONCLUSION:Following two weeks of myopia induction in guinea pigs, with regard to the degree of myopia, axial length and pathological alterations, there was no significant difference between FDM and LIM models. Therefore, FDM and LIM are equally effective and useful as a model of experimental myopia and guinea pigs are ideal animals for induction of experimental myopia because their high sensitivity to both form-deprivation and lens-induction.     

激活蛋白1（AP-1）在豚鼠进展性近视巩膜重塑中与I型胶原的表达关系研究

目的　研究近视眼巩膜重塑中激活蛋白-1（activator protein 1,AP-1）的动态表达变化以及与Ⅰ型胶原表达之间的关系。方法　选取出生1周左右的三色豚鼠75只,随机抽取50只遮盖左眼建立形觉剥夺近视组（FDM组,50眼）,其右眼作为自身对照组（50眼）,其余25只豚鼠双眼均未做任何处理作为空白对照组（50眼）,分别测量并记录空白对照组和FDM组豚鼠在遮盖前（0周）及遮盖后2周、4周、6周及遮盖4周去遮盖1周（4/-1周）时的双眼屈光度及眼轴长度。于上述5时间点分别处死豚鼠并制备巩膜组织切片,采用免疫组织化学染色法及逆转录PCR（RT-PCR）技术检测各组豚鼠巩膜中遮盖不同时间点 AP-1 和Ⅰ型胶原蛋白及mRNA的表达量并分析二者之间的关系。结果　遮盖前空白对照组、自身对照组、FDM组的豚鼠屈光度均为远视,差异无统计学意义（P＞0.05）,FDM组由遮盖前（0周）时的远视眼（2.09±0.31）D到遮盖2周、4周、6周及4/-1周后逐渐变成近视眼［（-1.23±0.68）D、（-4.17±0.58）D、（-7.07±0.55）D、（-2.67±0.59） D］,眼轴长度由遮盖0周（5.93±0.38）mm到遮盖2周、4周、6周及4/-1周后逐渐增加［（6.62±0.37）mm、（7.30±0.35）mm、（7.99±0.31）mm、（6.97±0.32）mm ］,与空白对照组、自身对照组比较,遮盖后各个时间点FDM组豚鼠近视屈光度明显升高,眼轴测量值明显增加,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。各组巩膜组织均有AP-1和Ⅰ型胶原蛋白与mRNA表达,遮盖前空白对照组、自身对照组与FDM组豚鼠巩膜组织中AP-1和Ⅰ型胶原蛋白及mRNA表达量的差异均无统计学意义（均为P＞0.05）,随着遮盖时间的延长,FDM组中AP-1和Ⅰ型胶原蛋白表达量均逐渐减弱（均为P<0.05）,AP-1和Ⅰ型胶原的mRNA表达也相应逐渐下调（均为P<0.05）,两者具有高度正相关性。结论　在近视巩膜重塑过程中,AP-1可能作为转化生长因子-β1的下游信号转录因子参与调控Ⅰ型胶原的合成与降解。     

幼年期豚鼠形觉剥夺性近视的动态变化

目的评价幼年期豚鼠在形觉剥夺性近视进展过程中眼球各项参数的动态变化。方法将48只幼年期雄性花色豚鼠(出生后3周)随机分为2组:实验组(单眼眼罩遮盖,n=24)和对照组(n=24)。每组又分为 4个亚组(n=6),分别在形觉遮盖开始前及开始后2、4、6和8周进行实验眼和对侧眼的生物学测量(屈光力、角膜曲率、眼轴长度、后巩膜干重)。使用线形相关分析遮盖时间与各测量参数之间的相关性。结果 (1)单眼面罩遮盖动物眼2周组实验眼较对侧眼增加(-1．79±0．58)D的近视(mean±SE;P<0．05;配对t检验;表1),遮盖8周组可达(-4．71±0．74)D(实验眼与对侧眼比较,所有时间段P<0．05);玻璃体腔长度较对侧眼延长,自遮盖2周组的(0．14±0．01)mm到遮盖8周组的(0．29±0．02)mm(试验眼与对侧眼比较,所有时间段P<0．05)。后巩膜干重较对侧眼减轻,自遮盖2周后的(-0．17±0．02)mg至遮盖8周后的(-0．35±0．04)mg(实验眼与对侧眼比较, 所有时间段P<0．05);(2)4组实验眼角膜曲率、前房深度、晶状体厚度与对侧眼之间无显著性差异(P>0．05)。 (3)对比实验眼与对侧眼之间屈光力、玻璃体腔长度、后巩膜干重的差异,面罩组和对照组之间存在显著性差异(所有时间段P<0．05)。(4)面罩组实验眼与对侧眼之间屈光力、玻璃体腔长度、后巩膜干重的差异与遮盖时间呈正相关关系。结论随时间的延长,遮盖豚鼠眼可诱导更多的近视度数,而后巩膜进一步变薄,干重减轻。