Ca2+和Tb3+对白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A2荧光光谱的影响

研究了金属离子Ｃａ２ ＋ 和Ｔｂ３ ＋ 对长白山白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２） 荧光光谱的作用, 发现Ｃａ２ ＋ 浓度的增加能够增强磷脂酶Ａ２ 的荧光发射强度． 而且Ｃａ２ ＋ 浓度的增大能够明显加快磷脂酶Ａ２ 与其相应反应底物ＤＰＰＣ的反应速率． 稀土离子Ｔｂ３ ＋ 在低浓度条件下对磷脂酶Ａ２ 起荧光淬灭作用, 而在浓度较高时能够提高磷脂酶Ａ２ 荧光发射强度．     

天花粉蛋白与腺嘌呤、单磷酸腺苷、三磷酸腺苷之间的相互作用

利用荧光光谱和透析平衡法研究了腺嘌呤、单磷酸腺苷（ＡＭＰ）、三磷酸腺苷（ＡＴＰ）与天花粉蛋白之间的相互作用。荧光光谱揭示腺嘌呤与天花粉蛋白结合后对其荧光强度影响较小，但使蛋白的荧光峰位红移，而ＡＭＰ和ＡＴＰ只引起蛋白荧光强度下降而不改变峰位。ＡＭＰ，ＡＴＰ引起的荧光强度下降包含着快慢两个过程。透析平衡法测得ＡＭＰ，ＡＴＰ与天花粉蛋白相互作用的结合常数分别为１．２×１０￣（－１）ｍｏｌ／Ｌ和４．５×１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ，二者自由能之差为－２．２６ｋＪ／ｍｏｌ。     

家蚕滞育性生物钟蛋白EsteraseA4的结构模建

利用同源模建的方法构建了家蚕滞育性生物钟蛋白ＥｓｔｅｒａｓｅＡ４的三维结构，并对其二级结构及活性部位进行了分析，根据三维结构及分子表面的静电势与疏水性分布的分析，酶活性主要来自于二硫键和糖基位，它们的作用机理分别为疏水性相互作用及静电相互作用。     

江浙蝮蛇毒中性磷脂酶A2的免疫学研究

用江浙蝮蛇毒中纯化的中性磷脂酶Ａ２（ＮＰＬＡ２）免疫家兔，获得了多克隆抗体，抗体与抗原结合后，抑制了该抗原的神经毒性，而对其催化活力无影响，表明ＮＰＬＡ２有两个活性结构域，即神经毒性与催化活性分别位于两个活性位点上，利用免疫亲和层析纯化了ＮＰＬＡ２的多抗，经ＥＬＩＳＡ检测，与酸性ＰＬＡ２和碱性ＰＬＡ２均有免疫交叉反应，这提示了ＮＰＬＡ２与酸性ＰＬＡ２及碱性ＰＬＡ２的抗原决定簇有同源性。     

鸡主要组织相容性复合体I（BF2和β2m）二级结构与同源模建

为了推进鸡主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ类分子（BF2，β2m）空间结构的研究，克隆、表达了鸡BF2和屉研基因，采用圆二色谱（CD）测定了其重组蛋白的二级结构，并同源模建了其三级结构．首先，将BF2和β2m基因分别插入原核表达载体进行了可溶性表达．对表达的融合蛋白进行纯化、蛋白酶切割并对切割后的蛋白进行分离和纯化，获得了麦芽糖结合蛋白（MBP）-BF2，β2m蛋白以及MBP单体．随后，测定了BF2和β2m的CD值．CD表明BF2蛋白呈典型的α螺旋；其中，α螺旋、β折叠、转角和随机蜷曲分别为72，102，70和90个氨基酸．β2m重组蛋白呈典型的卢折叠，α螺旋、β折叠、转角和随机蜷曲分别为0，46，30和22个氨基酸．同源模建显示鸡BF2和β2m蛋白与人HLA—A2和小鼠H2的3D结构类似．结果显示了BF2和β2m蛋白在二维和三维上的分子特征及其与抗原多肽结合氨基酸的空间分布，为以后进一步构建鸡BF2-β2m复合物体外鉴定病毒抗原肽系统奠定了基础．     

应用绿色荧光蛋白标记技术研究钙调激Ⅱ在HeLa细胞中的分布

采用绿色荧光蛋白（GFP）标记技术研究钙离子钙调素依赖性蛋白激毒Ⅱ(CaMKⅡ）在HeLa细胞中的分布，为了研究细胞风钙离子钙调素信号的下游作用物，我们首先构建了CaMKⅡ与GFP的融合基因，磷酸钙沉淀法将pCaMKⅡ－GFP重组载体导入HeLa细胞，通过荧光显微镜观察，发现在细胞间期，CaMKⅡ－GFP融合蛋白主要分布于细胞核中，细胞质中亦有少量分布，这一分布不同于绿色荧光蛋白在间期细胞内的动匀分布，同时讨论了与间接免疫荧光染色方法相比，GFP技术在功能蛋白定位研究上的应用优势。     

同步荧光法研究白眉蝮蛇蛇毒酶发色团的微环境

利用同步荧光技术对长白山白眉蝮蛇蛇毒中纯化得到的４ 种酶： 磷脂酶Ａ２ （ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２ , ＰＬＡ２） 、精氨酸酯酶（ａｒｇｉｎｉｎｅ ｅｓｔｅｒａｓｅ,ＡＥａｓｅ） 、纤溶酶（ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ,ＦＥａｓｅ） 和Ｌ－ 氨基酸氧化酶（Ｌ－ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｏｘｉｄａｓｅ, Ｌ－ ａ ａ ｏｘｉｄａｓｅ） 进行了研究． 结果表明： 当Δλ＝ ２０ｎｍ 时, 酶的荧光主要由酪氨酸（Ｔｙｒ） 残基所贡献; 当Δλ≥７５ｎｍ 时, 酶的荧光主要由色氨酸（Ｔｒｐ） 所贡献． 而且, 长白山白眉蝮蛇蛇毒４ 种酶的Ｔｙｒ 和Ｔｒｐ 残基所处的微环境并不相同．     

二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭测定微量锌(Ⅱ)

研究了二苯乙烯荧光蓝－Ｓ荧光猝灭测定微量锌（Ⅱ）的实验条件．在ｐＨ６．０的Ｈ３ＰＯ４－Ｈ３ＢＯ３－ＨＡｃ－ＮａＯＨ缓冲溶液中，试剂的最大激发波长λｅｘ＝３６７ｎｍ，最大荧光发射波长λｅｍ＝４５７ｎｍ；Ｚｎ（Ⅱ）与试剂生成的１∶２的配合物使试剂的荧光强度减弱；利用荧光猝灭法测定微量锌（Ⅱ），线性范围为０～０．８μｇ／１０ｍｌ；方法用于测定食品中、人发中的微量锌（Ⅱ），结果满意．     

二苯乙烯荧光蓝—S荧光猝灭测定微量锌（II）

研究了二苯乙烯荧光蓝－Ｓ荧光猝灭测量微量锌（Ⅱ）的实验条件，在ｐＨ６．０的Ｈ３ＰＯ４－Ｈ３ＢＯ３－ＨＡｃ－ＮａＯＨ缓冲溶液中，试剂的最大激发波长λｅｘ＝３６７ｎｍ，最大荧光发射波长λｅｍ＝４５７ｎｍ；Ｚｎ（Ⅱ）与试剂生成的１：２的配合物使试剂的荧光强度减弱；利用荧光猝灭法测定微量锌（Ⅱ），线性范围为０￣０．８μｇ／１０ｍｌ；方法用于测量食品中、人发中的微量锌（Ⅱ），结果满意。     

Ti,B 化合物制取颗粒增强 TiB_2/Al 复合材料

用熔炼法制备ＴｉＢ２／Ａｌ复合材料．通过添加Ｔｉ，Ｂ化合物，在纯铝基体中原位生成ＴｉＢ２颗粒，基体得以增强．就ＴｉＢ２的体积分数对复合材料机械性能和显微组织的影响进行了研究，并对两种Ｔｉ，Ｂ化合物（Ⅰ，Ⅱ号）的增强效果进行了比较．结果表明，ＴｉＢ２／Ａｌ复合材料的机械性能明显优于铝基体．与Ⅰ号Ｔｉ，Ｂ化合物相比，Ⅱ号Ｔｉ，Ｂ化合物能更有效地提高复合材料的强度和硬度．ＴｉＢ２／Ａｌ复合材料的拉伸强度和硬度随Ｔｉ，Ｂ化合物加入量增多而提高，而延伸率降低．含２．０％（体积分数）ＴｉＢ２的复合材料其热轧退火态的拉伸强度和铸态布氏硬度分别为１５８ＭＰａ和３８８ＭＰａ，与纯铝基体相比，拉伸强度和硬度分别提高了１１１％和５１％．     

绿色荧光蛋白基因在烟草植株中的表达

用冻融法将含有绿色荧光蛋白基因的质粒ｐＧＬ２－ＧＳ导入农杆菌菌株ＬＢＡ４４０４ （ｐＴＯＫ２３３），两个质粒发生同源重组，形成一个新的二元载体ｐＴＯＫ２３３－ＧＳ．农杆菌菌株ＬＢＡ４４０４ （ｐＴＯＫ２３３－ＧＳ） 经叶盘法转化烟草，筛选具有卡那霉素抗性的愈伤组织，诱导成苗．ＰＣＲ 扩增发现，绿色荧光蛋白基因在９０％ 的再生植株中存在．在荧光显微镜下，使用蓝色激发光观察再生植株的徒手切片和压片发现，８０ ％ 以上的再生植株都能不同程度地发出绿色荧光．多数植株的根尖和叶脉都发光，一些植株的气孔、叶表皮或叶绒毛也发光     

人SEPT9蛋白同源建模和活性位点分析

利用生物信息学在线软件预测了人SETP 9蛋白质的二级结构和模体信息,同时对其三级结构进行同源建模和模建结果质量评价,其次预测了该蛋白质的活性位点信息,旨在从蛋白质序列特征和分子结构水平理解其在人类生理病理过程中的作用.结果表明,模建的SEPT 9蛋白结构品质较高,具有7段α-螺旋和2组β-折叠结构,是一个典型的α/β类蛋白,表面呈弱正电势分布;人SEPT 9蛋白具有8个不同模体,可能参与不同生化反应或执行不同的功能.搜寻获得了人SEPT 9蛋白配基结合位点有10个,其中位点1可能是该蛋白的活性位点.这些研究结果对理解人SEPT 9蛋白功能以及配基结合位点定位非常重要,也为针对SEPT 9蛋白的分子对接和药物从头设计提供了理论基础.     

钙离子及酸度对蛇毒抗凝血因子溶液构象的影响

用荧光光谱方法研究了Ｃａ２＋离子对抗凝血因子（ＡＣＦ）溶液构象的影响,证实了Ｃａ２＋离子不仅能与ＡＣＦ可逆结合,还能维持ＡＣＦ的结构．脱去Ｃａ２＋离子后的ＡＣＦ中约有４６％的Ｔｒｐ残基相对暴露在外．在一定的酸度范围内,酸度对ＡＣＦ的结构影响不大．     

SLA-Ⅰ重链分子的表达及结构分析

为研究SLA-Ⅰ重链分子在pMAL-p2X载体表达条件,从培养基pH值、温度、菌体密度、IPTG浓度、时间5个条件设计了优化条件的实验.SDS-PAGE筛选出在pMAL-p2X系统上表达SLA-Ⅰ重链分子的最佳条件,并运用EXPASY服务器上的SOPMA法对SLA-Ⅰ重链分子和HLA-A2进行2级结构的预测,同时同源模建其3级结构.结果表明：pH8.0,37℃,0.2 mmol/LIPTG,培养5 h,D600 nm=0.8是SLA-Ⅰ重链分子蛋白表达的最佳条件.2级结构预测和分析发现,猪和人MHCⅠ类分子重链2级结构成分上非常相似,其同源率远远大于氨基酸的同源率;同源模建发现,猪和人、小鼠的MHCⅠ类分子3级结构非常相似.     

SLA-I重链分子的表达及结构分析

为研究SLA-I重链分子在pMAL-p2X载体表达条件,从培养基pH值、温度、菌体密度,IPTG浓度、时间5个条件设计了优化条件的实验.SDS-PAGE筛选出在pMAL-p2X系统上表达SLA-I重链分子的最佳条件.并运用EXPASY服务器上的SOPMA法对SLA-I重链分子和HLA-A2进行2级结构的预测,同时同源模建其3级结构.结果表明:pH8.0,37℃,0.2 mmol/L IPTG,培养5 h,D600nm=0.8是SLA-I重链分子蛋白表达的最佳条件.2级结构预测和分析发现,猪和人MHCI类分子重链2级结构成分上非常相似,其同源率远远大于氨基酸的同源率;同源模建发现,猪和人.小鼠的MHCI类分子3级结构非常相似.     

鸡心脱血红素细胞色素C与其突变体V92A的结构模 …

鸡心脱血红素细胞色素ｃ可自发插入或通过人工膜，并具有自发折叠特性，用同源模建方法通过计算机构建了野生型鸡心脱血红素细胞色素ｃ和其突变体Ｖ９２Ａ的三维结构，对二者的结构进行了分析，发现Ｖ９２Ａ的螺旋含量低于野生型，而且较野生型处于更松散的折叠状态，并对此结果作了解释。     

大肠杆菌RecA蛋白质的提取与纯化

作者报道了从大肠杆菌超表达菌株ＪＣ１１２７２中，制备重组酶ＲｅｃＡ蛋白的研究。利用亚精胺选择性沉淀，单链ＤＮＡ－纤维素亲和层析及阳离子换柱Ｍｏｎｏ Ｑ进行离子交换层析，从２升超表达细菌培养物中提纯了５５ｍｇ和ＲｅｃＡ蛋白。通过９％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳检测结果表明，纯化的ＲｅｃＡ蛋白纯度达９９．５％，具有催化同源ＤＮＡ链交换的能力。     

用蛋白内源荧光考察溶液pH对PSⅡ两种外周蛋白构象的影响

借助278nm和295nm激发的内源荧光光谱分析，考察不同pH值缓冲液中23kD、17kD蛋白构象变化．结果表明：295nm波长光激发时，23kD蛋白具有326nm荧光发射峰和360nm副峰；17kD蛋白具有328nm荧光发射峰和355nm副峰；278nm波长光激发时，23kD和17kD蛋白的最大荧光发射峰均在306nm处．与中性条件下相比，酸性(pH3．0～4．0)或碱性(pH8．0～9．0)缓冲液中，23kD蛋白和17kD蛋白的内源荧光光谱都发生显著变化：最大荧光峰位置和强度均不相同，340nm-360nm荧光发射副峰的强度增加．反映溶液中两种蛋白的构象易发生改变，离子键和氢键是维系23kD、17kD蛋白构象的重要因素之一。     

FD耐热逆转录酶的同源模建及结构同源分析

ＦＤ－ＴＲＴ是一种耐热逆转录酶。根据ＴａｐＤＮＡ聚合酶的晶体结构为模板,采用计算机同源模建的方法建立ＦＤ－ＴＲＴ的三级结构模型,并对ＦＤ－ＴＲＴ和ＤＮＡ聚合酶家族的其他蛋白功能差异的结构基础以及保守性功能性残基的作用进行研究。     

纳米Al2O3薄膜的结构与性能

本工作用直流叠加方波脉冲电流，对铝合金进行阳极氧化，制得了纳米Ａｌ２Ｏ３薄膜；用透射电镜、介电场强和显微硬度测定以及荧光光谱等手段研究了它的显微结构和有关物理性质。结果表明纳米Ａｌ２Ｏ３薄膜具有较高的介电强度、硬度和相对强度为６８．２％的兰绿色荧光发光谱等优异性能。