流式细胞术检测恶性肿瘤患者T淋巴细胞活化抗原的临床意义

目的 研究恶性肿瘤患者的免疫状态及其治疗前后的变化。方法 在荧光单抗直接标记后,用流式细胞术检测５２例癌症病人外周血的淋巴细胞标志抗原和Ｔ淋巴细胞活化抗原,并对其中１５例免疫增强剂治疗前后的抗原表达结果进行比较。结果 恶性肿瘤患者的ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋细胞及ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值较对照组显著减少（Ｐ〈０．０５或０．０１）,而ＣＤ８＾＋细胞显著增多（Ｐ〈０．０１）。１５例治疗后ＣＤ３＾＋、ＣＤ     

国产胸腺肽对人T淋巴细胞E受体和CD2抗原表达的影响

胸腺肽作为一种兔疫调节剂曾广泛用以治疗免疫缺陷病、自身免疫性疾病、感染性疾病以及肿瘤等，均见有一定疗效。我中心采用国产胸腺肽治疗慢性乙型肝炎患者，也取得了良好的效果［1］。本文选用国产胸腺肽以及应用改进的活性E花环试验检测T淋巴细胞E受体［2］，并与新建的生物素-链霉亲和素细胞免疫化学法检测CD+2阳性淋巴细胞增长数，考核胸腔肽制剂活性。结果表明，国产胸腺肽制剂对人T淋巴细胞表面特有的E受体或CD2抗原表达有明显的促进作用，提示该剂具有良好的免疫增强作用，现报道如下。l材料和方法1．l药物：胸腺肽注射液，40mg…     

桥本氏甲状腺炎患者T淋巴细胞Fas抗原的表达的实验研究

本实验利用流式细胞仪定量检测桥本氏甲状腺炎（ＨＴ）患者外周血Ｔ淋巴细胞Ｆａａ抗原的表达情况，目的在于探讨桥本氏甲状腺炎发病的免疫机制。１临床资料与方法１．１研究对象 ＨＴ患者均为我院门诊和住院患者，男２例，女２２例，平均年龄３８．２岁，诊断标准符合《内科学》第四版教材。所有病人经病史、查体、实验室检查及影像学（Ｂ超、ＥＣＴ）等明确诊断为ＨＴ患者，无其他自身免疫病。２０例正常人对照来源于我院健康献血员，其中男１０例，女１０例，平均年龄３８．６岁。所有受试对象均于清晨空腹采取ＥＤＴＡ抗凝静脉血１ｍｌ…     

活化脐血T细胞和NK细胞的抗原及细胞因子表达研究

目的：比较γＩＬ－２及抗ＣＤ３ｍｃＡｂ＋γＩＬ－２对脐血单个核细胞（ＭＮＣ）的免疫表型及细胞因子的影响。方法：采用间接玫瑰花结法实验测定２３例脐血ＭＮＣ表面的分化抗原,ＥＬＩＳＡ双抗夹心法测定肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白介素－６（ＩＬ－６）、白介素－８（ＩＬ－８）。结果：γＩＬ－２及抗ＣＤ３ｍｃＡｂ＋γＩＬ－２激活的脐血ＭＮＣ其分化抗原发生明显变化。１、两组与未活化相比：ＣＤ３＾＋、ＣＤ８＾     

慢性活动性乙型肝炎外周血T细胞亚群上活化抗原的表达

目的探讨慢性活动性乙型肝炎(CAHB)患者外周血活化抗原CD69、HLA-DR分子在T细胞表达的变化及其意义。方法以31例正常人作为对照,采用免疫荧光三色标记流式细胞术,检测30例CAHB患者外周血T细胞亚群及其CD69、HLA-DR抗原表达;同时用荧光定量PCR检测患者的病毒DNA载量。结果CAHB患者外周血CD3+T细胞的百分率(63.78%±9.70%)与正常对照组比较差异有显著性(P<0.01),CD4+T细胞的百分率(45.88%±8.51%)明显低于正常对照组(P<0.001),CD8+T细胞的百分率(44.64%±7.10%)明显高于正常对照组(P<0.001);CD3+T细胞CD69的表达(6.85%±2.83%)与正常人对照组比较差异也有显著性(P<0.01),其中CD4+T细胞CD69的表达(2.31%±0.94%)与正常对照组比较差异无显著(P>0.05),CD8+T细胞表达CD69水平(3.87%±1.81%)明显高于对照组(P<0.01);CD3+T细胞上HLA-DR的表达(17.09%±4.23%)与正常对照组之间差异有显著性(P<0.001),其中CD4+T细胞中HLA-DR+细胞(7.97%±2.43%)和CD8+T细胞中HLA-DR+细胞(5.52%±1.48%)均比正常对照组显著增高(P<0.01)(P<0.001);CD8+CD69+、CD8+HLA-DR+细胞的数量与病毒DNA载量之间呈正相关。结论CAHB患者存在细胞免疫功能紊乱和淋巴细胞异常激活现象,T淋巴细胞的激活以CD8+T细胞为主,其在抗病毒感染中起着重要作用。     

电离辐射致人T淋巴细胞CD3抗原表达的改变

用流式细胞仪、免疫细胞化学和免疫透射电镜方法，分析研究不同剂量γ线体外照射人外周血Ｔ淋巴细胞后，不同时间细胞表面ＣＤ３抗原的表达和分布。发现随照射剂量增加，ＣＤ３阳性细胞百分率减少，同一照射剂量随照后时间延长，ＣＤ３阳性细胞百分率缓慢增加。受照细胞胞浆内游离ＣＤ３随照射剂量增加而增多，并于浆内出现ＣＤ３－ＳＰＡ－胶体金颗粒（未照射细胞只见于细胞表面，全未见于浆内）。ＣＤ３、ＣＤ４双阳性流式细胞仪分     

5名电离辐射事故患者外周血T细胞T细胞抗原受体,T细胞分化抗原…

文中报道了５名事故性急性骨髓型放射病患者照后２．５和３．５年外周血Ｔ淋巴细胞Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因，ＴＣＲ、Ｔ细胞分化抗原决定簇－３（ＣＤ３）表达与ＴＣＲ／ＣＤ３复合物功能的辐射效应。发现５名患者于照后２．５年，２名（５．２Ｇｙ和２．４Ｇｙ，５５岁）于照后３．５年外周血Ｔ细胞应答抗ＣＤ３单抗刺激而增殖的能力尚未完全恢复；经同时用ＩＬ－２和抗ＣＤ３单抗刺激，增殖能力比单用抗ＣＤ３单抗刺激有所增强；     

人类免疫缺陷病毒1感染者外周血CD8+T淋巴细胞表面CD38和人类白细胞抗原DR表达的研究

目的 探索人类免疫缺陷病毒（HIV）-1感染者外周血CD8+T淋巴细胞表面CD38（CD38+/CD8+）、人类白细胞抗原DR（HLA-DR）（HLA-DR+/CD8+）表达水平的变化及其与疾病进展的关系。方法 选取2012年5-8月河南省淮阳县中医院、西平县中医院、驻马店驿城区中医院、泌阳县中医院、博爱县中医院收治的经河南省疾病预防控制中心确诊的HIV-1感染者409例为HIV-1感染组,河南中医学院第一附属医院体检健康者28例为对照组。采用流式细胞仪检测外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞计数和百分比,计算CD4+/CD8+,实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测血浆病毒载量,应用全血染色、流式细胞术检测HIV-1感染者CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+。根据CD4+T淋巴细胞计数分为4组：＜200 cells/μl组87例、200～＜350 cells/μl组119例、350～＜500 cells/μl组99例、≥500 cells/μl组104例,比较不同CD4+T淋巴细胞计数者间CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+。结果 HIV-1感染组CD4+T淋巴细胞计数、百分比低于对照组,CD8+T淋巴细胞计数、百分比高于对照组（P＜0.001）;HIV-1感染组CD4+/CD8+低于对照组（P＜0.001）。HIV-1感染者血浆病毒载量为（38 415±1 067）copies/ml。Pearson相关分析表明,HIV-1感染者CD4+T淋巴细胞计数与血浆病毒载量呈负相关（r=-0.246,P＜0.001）;CD38+/CD8+与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关（r=-0.260,P＜0.001）;CD38+/CD8+与血浆病毒载量呈正相关（r=0.409,P＜0.001）;HLA-DR+/CD8+与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关（r=-0.225,P＜0.001）;HLA-DR+/CD8+与血浆病毒载量呈正相关（r=0.378,P＜0.001）。200～＜350 cells/μl组、350～＜500 cells/μl组、≥500 cells/μl组CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+低于＜200 cells/μl组（P＜0.05）。结论 HIV-1感染者CD4+T淋巴细胞计数、百分比降低,CD8+T淋巴细胞计数、百分比升高,CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+与血浆病毒载量呈正相关。CD4+T淋巴细胞计数、CD8+T淋巴细胞计数结合CD8+T淋巴细胞的活化水平可以更全面地反映HIV-1感染者免疫功能受损的程度,HIV-1感染后CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+的变化可作为评价疾病进展的新指标。     

超抗原诱导人外周血T淋巴细胞的增殖

本文以人外周血淋巴细胞为材料，用超抗原葡萄球菌肠毒素Ｂ刺激后，检查了淋巴细胞的应签反应及特征。结果显示出微量的ＳＥＢ具有比ＰＨＡ，ＳＥＡ更为敏感的诱导Ｔ细胞应签反应的能力。Ｔ细胞应答反应中粘附性巨噬细胞起了抗原提呈作用；去除了粘附细胞，Ｔ细胞表现出完全不反应。Ｔ细胞活化途中伴随白介素的释放。     

成人急性T淋巴细胞白血病患者髓系抗原的表达

目的:观察成人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者中髓系抗原(MyAg)的表达及意义.方法:采用CD45/SSC参数设门多色流式细胞术检测63例成人T-ALL患者骨髓细胞的免疫表型,分析MyAg+T-ALL患者的临床特征.结果:①49.2%的成人T-ALL患者表达MyAg,以CD13(33.3%)和CD33(25.4%)为主,CD117和CD64阳性率分别为12.7%和3.2%,未检测到CD14表达.②MyAg+T-ALL患者高白细胞性白血病和肝脾浸润发生率及CD2的表达均低于MyAg-T-ALL患者(x2分别为6.232,5.769和4.872,P均<0.05),2组诱导死亡率(3/22vs3/29)及完全缓解率(14/19vs 23/26)差异无统计学意义(x2分别为0.006,1.640,P均0.05).MyAg单一表达或联合表达对成人T-ALL患者的临床特征无影响.结论:MyAg的表达在成人T-ALL中并不少见;MyAg表达与高白细胞性白血病、肝脾浸润、CD2表达有关,与诱导治疗反应无关.     

CD28超竞争单抗对大鼠原位气管移植术后早期免疫炎性损伤的影响

目的:研究大鼠原位气管移植术后应用CD28超竞争单抗对在体扩增CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的效果及对移植气管早期免疫排斥炎性反应的影响。方法:采用大鼠同种异体原位气管移植模型,分2组。治疗组受体移植当天经腹腔注射CD28超竞争单抗JJ316(0.5 mg);对照组注射同型抗体mIgG(0.5 mg)。于术后第5天采用流式细胞仪检测颈部引流淋巴结、脾及外周血单个核细胞中CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比率;移植气管进行病理形态学检查。结果:CD28超竞争单抗治疗组较同型抗体mIgG对照组气管闭塞程度、炎症反应细胞浸润及呼吸道上皮损伤情况明显减轻;外周血、脾脏及颈部淋巴结中CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比率[(16.9±4.2)%、(14.8±3.6)%、(5.8±1.2)%]高于同型抗体mIgG对照组[(2.8±1.4)%、(3.3±1.3)%、(2.9±0.9)%,P<0.05]。结论:大鼠原位气管移植后在体应用CD28超竞争单抗可减轻术后早期的免疫排斥损伤。     

3例同种异体肝移植供肝切取护理体会

目的：探讨肝移植术供肝取中如何减少肝热缺血时间的护理配合措施。方法：术前完善各项准备工作，术中快速、敏捷、准确配合，快速完成插管灌注，使供肝得到及时保护，妥善保存供肝。结果：3例肝移植均获成功，供肝切取手术顺利，平均热缺血时间5.5min，最短一次热缺血时间仅4.5min。结论：保证供肝的活性是肝移植成功与否的关键所在，需要多方配合，其中手术护理配合也起着重要的作用。     

同种异体原位肝移植术的麻醉围手术期处理

探讨临床同种异体原位肝移植围手术期的麻醉处理。方法：在动物实验的基础上实施临床同种 异体原位肝移植麻醉。选择合适的麻醉前用药、麻醉方法及麻醉药物,术中注意输液、扩容、维持循环血量、行体外 静脉－静脉转流术。适量应用血管活性药物、支持循环、维持血流动力学稳定。结果：麻醉效果满意。血压在门静 脉及下腔静脉转流后回升。供肝置入复流时血压为 １４．３－ １５．６／７．８～９．１ｋＰａ（１１０－ １２０／６０－７０ ｍｍＨｇ）。结论：选 择合适的麻醉前用药、麻醉方法及麻醉药物及行体外静脉－静脉转流术,有助于维持血液动力学的稳定。术后呼吸 支持和镇痛是必要的。     

人类白细胞抗原G在肾移植受者外周血的表达探讨

目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)G的膜型HLA-G(mHLA-G)、胞内HLA-G(iHLA-G)和可溶型HLA-G(sHLA-G)在肾移植受者外周血的表达及其与术后临床相关性.方法 研究对象为2000年2月至2006年6月解放军第三零九医院全军器官移植中心行肾移植的175例受者,根据4周内是否发生排斥反应分为急性排斥反应组(36例)、功能稳定组(139例),30例健康供者作为对照组.应用流式细胞术检测外周血mHLA-GI、iHLA-G1的表达,酶联免疫吸附法检测血浆sHLA-G5的含量.结果 T淋巴细胞CD~+ mHLA-G1~+、CD8~+ mHLA-G1~+、CD4~+ iHLA-G1~+、CD8~+ iHLA-G1~+平均表达率在对照组分别为0.43%±0.19%、1.23%±0.41%、27%±13%、36%±14%,急性排斥反应组分别为:0.57%±0.34%、1.31%±0.56%、26%±8%、37%±17%,功能稳定组分别为0.61%±0.43%、1.39%±0.47%、26%±9%、37%±17%,3组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05).外周血浆sHLA-G5表达在对照组为(25±14)ng/ml;急性排斥组术前为(24±15)ng/ml,术后为(34±21)ng/ml;功能稳定组术前为(25±11)ng/ml,术后为(56±32)ng/ml;急性排斥组和功能稳定组术前与健康组比较,差异无统计学意义(P>0.05),术后功能稳定组明显高于急性排斥组(P<0.05).结论 肾移植受者外周血存在一群比率较低的HLA-G~+ T淋巴细胞,mHLA-G1和iHLA-G1的表达与肾移植术后的排斥反应发生无关,sHLA-G5的高表达与排斥反应发生的减少有关.     

T细胞疫苗免疫诱导大鼠肝移植免疫耐受的作用探讨

目的　探讨供体抗原特异性T细胞疫苗诱导大鼠肝移植免疫耐受的作用。方法　分别用LOU/C大鼠脾细胞和LEW大鼠脾细胞免疫BN大鼠 ,获取被免疫BN大鼠的脾细胞制备成针对LOU/C大鼠的T细胞疫苗 (LCTCV)和针对LEW大鼠的T细胞疫苗 (LTCV)。分别用制备的T细胞疫苗免疫正常的BN大鼠 (0 .2ml/次 ,1次 /周 ,连续 3次 ) ,于第 3次免疫后第 5天以被疫苗免疫BN大鼠作为受体 ,以LOU/C大鼠作为供体进行原位肝移植 ,设单纯移植组作为对照。观察移植后大鼠的平均存活时间 (MST) ,并对肝移植物进行组织病理学观察 ;于移植后第 7天以受体BN大鼠的脾细胞作为反应细胞 ,以LOU/C大鼠的脾细胞作为刺激细胞进行单向混合淋巴细胞反应 (MLR)。结果　单纯移植组MST为 (8.4 3± 1.99)d ,　LTCV免疫组为 (11.2 9± 1.98)d ,与单纯移植组比较P <0 .0 5 ,LCTCV免疫组为 (17.4 3± 4 .12 )d ,与LTCV免疫组比较P <0 .0 1;观察移植后第 7天组织病理学改变 :单纯移植组呈明显的急性排斥反应病理征象 ,　LTCV免疫组仅出现轻度的炎性细胞浸润和细胞水肿 ,　LCTCV免疫组肝移植物结构基本正常 ,未发现明显的病理损害 ;MLR结果表明 :单纯移植组每分钟脉冲数值为(16 0 0 2± 2 330 ) /min、在LTCV免疫组为 (10 0 2 2± 1348) /min ;比单纯移植组明显     

HLA抗体对肝移植术后急性排斥发生的影响

目的 探讨肝移植手术前后HLA抗体变化对移植肝脏急性排斥的影响。方法 134例患者接受改良背驮式肝移植,分别于手术前、手术后第1、7、14、30日通过酶联免疫吸附（ELISA）法检测HLA抗体,通过B超引导下肝穿刺病理检查明确有无急性排斥,观察肝移植前后HLA抗体变化对急性排斥发生的影响。结果 术前HLA抗体阳性组急性排斥发生率（56．8％）显著高于术前HLA抗体阴性组（25.9％）（P=0．001）;术前HLA抗体阴性而术后转为阳性组急性排斥发生率与术前术后HLA抗体均为阴性组有显著差异（P=0．003）。结论 患者术前HLA抗体阳性可能是引起肝移植术后急性排斥的原因之一。患者术后HLA抗体持续阳性与急性排斥的发生密切相关。     

犬同种异体原位肝移植实验研究与临床肝移植1例报告

探讨犬原位肝移植技术和临床肝移植术中及围手术期的处理方法,以及液压式转流泵应用的可 行性。方法：在滚压式转流泵进行静脉-静脉转流的情况下,进行１５例犬同种异体原位肝移植实验研究,并为１例 原发性肝癌患者施行同种异体原位肝移植,对术中及围手术期发生的各种问题进行研究和处理。结果：滚压式转 流泵转流效果良好;１５只犬肝移植存活９只;临床肝移植患者存活３．５个月,死于肺部感染,肿瘤无复发。结论：大 动物的肝移植实验研究是临床肝移植的必要技术准备;在肝移植中用液压式转流泵进行静脉-静脉转流安全可行; 肝移植可用于肝癌的治疗。     

Effect of emodin in suppressing acute rejection following liver allograft transplantation in rats

<正>Objective:To investigate the mechanism of action of emodin for suppressing acute allograft rejection in a rat model of liver transplantation.Methods:Brown Norway(BW) recipient rats of orthotopic liver transplantation(OLT) were divided into three groups,Group A receiving isografting(with BW rats as donor), Group B receiving allografting(with Lewis rats as donor),Group C receiving allografting and emodin treatment (50 mg/kg daily).They were sacrificed on day 7 of post-transplantation,and their hepatic histology,plasma cytokine levels,and T-cell subset expression were detected.Results:Compared with those in Group A,rats in Group B exhibited severe allograft rejection with a rejection activity index(RAI) of 7.67±0.98,extensive hepatocellular apoptosis with an apoptosis index(Al) of 35.83±2.32,and elevated plasma levels of interleukin-2 (IL-2),interleukin-10(IL-10),tumor necrosis factor-α(TNF-α),CD4~+ and CD4~+/CD8~+ ratio.However,recipients in Group C showed a decrease in histological grade of rejection and hepatocellular apoptosis,as well as a decrease in plasma levels of IL-2,TNF-α,CD4~+ and CD4~+/CD8~+ ratio,but elevated levels of IL-10 as compared with the allograft group.Conclusion:Post-OLT acute rejection could be attenuated by emodin,its mechanism of action may be associated with protecting hepatocytes from apoptosis,polarizing the Th 1 paradigm to Th2,and inhibiting the proliferation of CD4~+ T cell in plasma.     

非静脉-静脉转流肝移植术中酸碱及电解质的变化

目的:探讨非静脉-静脉转流肝移植手术患者术中酸碱及电解质变化的临床意义。方法:46例终末期肝病患者在静吸复合身麻醉下行背驮式肝移植术,分别在无肝前期(切皮后20min)、无肝期10、20、30、60min及新肝期10、20、30、60min时间点,采集外周动脉血检测pH值、二氧化碳分压(PCO2)、碳酸氢根(HCO3-)和血钠(Na )、血钾(K )、血钙(Ca2 )、血糖(BG)。结果:新肝期的10、20和30min时间点pH值显著降低(分别为P<0.001,P<0.001和P<0.05);PCO2在无肝期的60min(P<0.05)及新肝期各时间点均增高(分别为P<0.001,P<0.001,P<0.001和P<0.05);HCO3-在无肝期的20min(P<0.001)、30min(P<0.01)、60min(P<0.01)及新肝期的10min(P<0.001)、20min(P<0.01)、30min(P<0.01)均增高。新肝期10minK 和Na 浓度均显著降低(分别为P<0.001,P<0.01)。Ca2 浓度在围手术期无统计学差异。BG在无肝期10min(P<0.05)、20min(P<0.05)时间点和新肝期的10min(P<0.001)、20min(P<0.001)、30min(P<0.01)时间点均增高。结论:新肝期早期阶段易出现复合型酸碱失衡。     

高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路的影响

目的：探讨高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路的影响。方法采集体重200～250 g的健康Wistar大鼠外周静脉血样，分离T淋巴细胞，培养于含有植物血凝素（ PHA）的无菌16孔培养板中。采用随机数字表法，将其分为3组：对照组常规培养；高碳酸组和缓冲液组于O2－N2－CO2混合气体培养箱中培养，维持培养液PaCO280～100 mmHg；缓冲液组用NaH－CO3缓冲液调节，维持培养液pH值7．2～7．4。分别于给予植物血凝素前和给予植物血凝素细胞培养1、2、4 h（ T0～3）时，随机取4孔，收集细胞和培养液，采用流式细胞仪测定T淋巴细胞坏死率、凋亡率、CD28和CD2阳性率；采用ELISA法测定培养液IL－2、IFN－γ、IL－4和IL－10的浓度。结果3组T细胞T0～3时坏死率和凋亡率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。与对照组比较，高碳酸组和缓冲液组T1～3时培养液IL－2和FN－γ的浓度降低，IL－4和IL－10的浓度升高，T2，3时T淋巴细胞CD28和CD2阳性率降低（P＜0．05或P＜0．01）；与高碳酸组比较，缓冲液组T1～3时培养液IL－2和IFN－γ的浓度升高，IL－4和IL－10的浓度降低（ P＜0．05或P＜0．01），各时点T淋巴细胞CD28和CD2阳性率差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论高碳酸因素可能通过抑制CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路，减少T淋巴细胞的活化，这是CO2直接作用和其酸性环境共同完成的。