胎肝造血与凋亡

细胞凋亡是多细胞器官控制自身细胞增殖率和死亡率以保持自身组织稳定的一种重要方式，是有别于坏死的一种生理过程。胚胎时期胎肝造血以红系为主，受ＥＰＯ水平的调节。ＥＰＯ作用于ＣＦＵ－Ｅ和部分ＢＦＵ－Ｄ，通过调节ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ的凋亡控制经系造血。     

免疫酶标染色观察胎肝巨核细胞造血

免疫酶标染色观察胎肝巨核细胞造血马东初，冯新莉，初俊杰，孙英慧，常奎忠，唐谊海人胚胎时期，胎儿肝脏在造血方面起着重要的作用，以往人们对胎肝巨核细胞造血研究较少。我们采用免疫酶标染色对不同胎龄胎儿肝脏巨核细胞的成熟程度和分布，特别是形态学不可辨认的巨核...     

E-选择素表达与小鼠胎肝发育及造血功能

背景:E-选择素作为一种细胞黏附分子在细胞间选择性识别黏附、调节白细胞归巢及渗出和肿瘤细胞转移等方面的作用已有研究报道,但胚肝发育过程中E选择索的定性定位研究、与胚肝造血功能的关系至今未见报道.目的:观察小鼠肝脏发育过程中E-选择素的表达与肝细胞、肝血窦内皮形态分化及胎肝造血作用的关系.方法:取胚胎11.5(E11.5)至出生后15.5d(P15.5)的小鼠胚胎或胎肝,常规制作石蜡切片,行苏木精-伊红染色及免疫组织化学检测.光学显微镜下观察胎肝的组织结构变化及细胞形态;免疫组织化学方法检测发育各期肝组织内E-选择素表达.结果与结论:E11.5肝始祖细胞形成团索样结构,其间有窦样间隙,内有散在的造血干细胞;E12.5 d肝始祖细胞开始增殖分化,其后,随着小鼠胎肝的不断发育,肝细胞数量及体积增大,核质比减小,至出生时形成肝小叶结构:窦样间隙由少到多,由宽变窄,窦壁内皮细胞从少量、不连续逐步增殖形成完整的内皮;造血细胞于E12.5开始造血,E13.5～E15.5达高峰,之后造血功能均逐步减弱.E-选择索表达于E11.5～E15.5胎肝的内皮细胞,定位于内皮细胞的胞膜,随内皮细胞发育及肝细胞分化成熟,E选择素表达渐消失.提示E12.5～E15.5为小鼠胎肝各细胞发育分化的关键时期,E-选择素表达于此阶段的血窦内皮,与肝脏造血及肝细胞分化有密切关系.     

同种胎肝造血干细胞输注和移植的研究

1958年 Uphopp 首先报道对致死剂量照射的小鼠输注胎肝细胞后取得了促进造血功能恢复的显著疗效。此后20多年来,造血干细胞的研究已成为实验血液学和临床血液学中一个相当活跃的领域。造血干细胞是造血细胞移植中起重要作用的细胞类型。它     

胎肝造血细胞在造血障碍疾病治疗中的应用

近十年来同种骨髓移植已有了相当进展,对先天免疫缺陷病、再生障碍性贫血(再障)及白血病等均取得了较好的疗效.本文重点以治疗再障为例,论述胎肝造血细胞(FHC)临床应用中的几个有关问题.简史早在1853年 Kolliker 就指出胎肝是主动造血部位.1958年 Uphoff 成功地用胚肝治愈了致死量照     

小鼠造血组织卵黄囊与胎肝的基因表达谱初步研究

目的　以C5 7BL/6小鼠胚胎期造血组织卵黄囊与胎肝为对象 ,识别在不同的发育阶段c kit 与Sca 1 早期造血细胞的变化 ,以及在基因表达水平上的主要特点 ,了解造血组织在原始造血向永久造血转移阶段造血能力变化的机制。方法　用流式细胞仪计数分离到的单个细胞中c kit 与Sca 1 细胞的比例 ,以总RNA建立的cDNA文库通过随机测序的方法 ,识别这些细胞总体的基因表达情况。结果　随胚胎发育 ,卵黄囊和胎肝中的Sca 1 细胞比例逐步升高 ,交配后 9～ 1 2d卵黄囊Sca 1 细胞比例为 0 .2 4 %～ 2 .5 0 % ,而卵黄囊中c kit 细胞的比例有明显下降 ,交配后 9～ 1 2d卵黄囊c kit 细胞比例为 6 .1 0 %～ 1 .77% ;对交配后第 9天和第 1 2天的卵黄囊和交配后第 1 2天的胎肝 3个文库的部分基因测序 ,识别的已知功能基因显示表达量较高的基因为各型珠蛋白 ,且以胚胎型为主。结论　细胞表面标志和基因表达的水平测定显示胚胎期的红系造血相对较为活跃 ;卵黄囊和胎肝基因表达存在明显差异     

GATA-2过表达对小鼠胎肝造血干细胞功能的影响

本研究探讨GATA-2过表达对小鼠胎肝造血干细胞功能的影响。应用带GFP绿荧光的逆转录病毒载体介导的病毒感染实验将GATA-2基因引入小鼠胎肝细胞,通过流式免疫荧光术、细胞周期检测及集落形成实验等技术手段研究这些GATA-2过表达胎肝造血干细胞的生物学功能变化。研究结果表明:过表达GATA-2的胎肝细胞中Lin-Sca1+C-Kit+(LSK)细胞比例显著增加,LSK细胞周期未受太大影响,但其定向克隆形成能力受抑。结论:过表达GATA-2引起小鼠胎肝造血干细胞LSK比例增加,并抑制其定向分化能力,其机制可能与HES-1表达上调导致细胞在干/祖细胞阶段受阻滞有关。     

小鼠胎肝造血基质细胞株的建立及生物学特性和功能研究

小鼠胎肝造血基质细胞经原代和传代培养并克隆成细胞株。该细胞株单层贴壁生长,核分裂相较多,有丝分裂指数较高,生长有赖于马血清的存在,有密度依赖抑制现象,染色体众数4n近80者常见。在半固体培养中无集落形成,ConA凝集试验阴性。该细胞株能双向调控红系和粒系造血,其刺激性影响主要由体液因子介导,其抑制性作用尚含细胞间短距离的调节因素。其培养上清液包括无血清培养上清液具有支持红系和粒系造血祖细胞增殖分化的活性,文中讨论了实验结果与胎肝临床疗效间的可能关系。     

小鼠胎肝基质细胞高活性造血刺激因子的纯化及性能研究

对我室克隆的小鼠胎肝基质细胞林(MFLSC株)的无血清培养上清中的造血活性物质进行了初步纯化。通过离子交换层析和凝胶过滤层析两步分离,从中得到一高活性的造血刺激因子,称为基质细胞造血刺激因子-1(SHF-1)。经凝胶过滤及电泳结果估测,此因子是分子量约为70kD的单体蛋白,耐碱,较耐热。在体外它对小鼠骨髓粒系、红系祖细胞、多向祖细胞及多能造血干细胞均有刺激作用。     

应用胎肝与胎胸腺输注预防移植物抗宿主病

报告４７例人类白细胞抗原／混合淋巴细胞培养（ＨＬＡ／ＭＬＣ）不合的骨髓移植（ＢＭＴ）。所选病例ＨＬＡ至少有一个位点与供者不一致，或ＭＬＣ相对反应值大于１０％，或二者皆有。将患者分为胎肝与胎胸腺试用组与非试用组。非试用组患者采用常规预处理方案，试用组患者同时输注了配型不同的，胎龄为３～４个月的胎肝与胎胸腺。结果试用组患者严重的急慢性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）发生率均显著低于非试用组。说明对于ＨＬＡ／ＭＬＣ不合的ＢＭＴ，应用胎肝与胎胸腺预防ＧＶＨＤ是十分有效的     

胎肝的免疫活性

应用酶组织化学和免疫组织化学方法,观察12例4～9月胎肝组织中的T淋巴细胞和树突状细胞,并用2例成人标本作对照。结果发现胎肝与成人肝比较,其免疫活性并不弱。用组织包埋方法进行动物实验也证实了这一点。     

Bcl-2家族与造血干/祖细胞凋亡

造血干/祖细胞的增殖分化是血细胞发育的动态平衡过程,细胞凋亡在造血调控过程中起必不可少的作用。本文介绍Bcl-2家族对细胞凋亡的调控,尤其是在造血干/祖细胞中表达的意义。     

胎肝来源肝母细胞的制备方法

学术背景:在重症肝病等待肝移植过程中,应用肝母细胞治疗是可即时实施的方法之一.从胎肝中高效率的分离纯化优质细胞来源的肝母细胞具有重要的现实意义.目的:介绍制备胎肝来源的肝母细胞所涉及到的操作方法,并将这些方法横向对比,进而指出它们各自的优势与缺点,为今后实验和临床根据不同需要选择制备肝母细胞的具体方法提供依据.检索策略:应用计算机检索PUBMED数据库1997-01/2007-08有关从胎肝中分离纯化肝母细胞的文献,检索词为"fetal liver progenitor/hepatoblasts,isolation/purification",限定文章语言种类为English.同时检索CNKI数据库1997-01/2007-08有关胎肝细胞分离纯化的文献,检索词为"肝,胚胎,上皮前体细胞/肝母细胞",并限定文章语言种类为中文.另外于吉林大学图书馆查阅相应书籍及部分外文.对资料进行初审,对发表于近5年内权威杂志的文章优先考虑.排除重复研究或Meta分析类文章.共收集到245篇文献,选出其中具有代表性的介绍肝母细胞离散及分离纯化方法的文献33篇.文献评价:31篇文献中10篇文献用以介绍研究背景;5篇文献研究了胎肝细胞离散的问题;9篇文献研究了肝母细胞分离纯化的问题;7篇文献指出了该领域存在的问题及发展前景.资料综合:这些从胎肝中分离纯化出具有肝细胞和胆管上皮细胞双向分化潜能的肝上皮细胞前体细胞(又称肝母细胞),能在体外增殖并诱导分化,移植体内后显示出良好的归巢性、整合能力和再生修复功能.说明从胎肝中分离纯化肝母细胞的技术日臻完善,该领域的研究成果将有力推动以细胞为基础的肝病治疗方案在临床中的应用.结论:对各种分离纯化方法的改进和组合应用,以及新的高特异性抗原的发现有助于胎肝来源肝母细胞纯化效率的提高.     

胎肝输注与移植的临床应用

近年来,胎肝造血组织的研究和应用,引起人们的兴趣与重视。通过胎肝的输注与移植,已经治疗了一些血液疾病,国内外均在开展并已取得一定的成效。虽然骨髓移植有一定优越性,获得的成绩十分突出,挽救和治愈不少难治患者,但由于同种白细胞抗     

Bcl—2家族与造血干／祖细胞凋亡

造血干／祖细胞的增殖分化是血细胞发育的动态平衡过程,细胞凋亡在造血调控过程中起必不可少的作用。本文介绍Bcl-2家族对细胞凋亡的调控,尤其是在造血干／祖细胞中表达的意义。     

胎肝造血细胞临床应用现状

1958年Uphoff 等首先报告经致死剂量射线照射后的小鼠经胎肝细胞悬液输注能使该小鼠的骨髓造血功能得到重建,次年Thomas 等便报告试用胎肝细胞输注治疗骨髓功能低下患者,并取得了一定疗效。之后。对胎肝造血细胞的生物学特性作了大     

小鼠胎肝干细胞的分离培养与鉴定

背景:胎肝细胞可能具有比骨髓干细胞等更强的增殖分化能力和更低的免疫原性,但目前涉及胎肝干细胞直接分离、培养的报道甚少.目的:拟在体外分离培养小鼠胎肝干细胞,并对其生物学特性进行初步鉴定.设计、时间及地点:细胞学体外观察.于2008-03/06在重庆市神经病学重点实验室完成.材料:SPF级13.5 d龄昆明种胎鼠9只,由重庆医科大学实验动物中心提供.方法:采用胶原酶+EDTA联合消化法与差速贴壁法体外分离胎鼠肝干细胞,按2×108L-1接种,待细胞80%一90%汇合后消化传代.采用链霉亲和素一生物素-过氧化酶复合物技术对原代接种后5 d的贴壁细胞进行多种肝干细胞表面标志物的标记.主要观察指标:原代胎肝干细胞形态变化,胎肝干细胞的传代扩增情况.胎肝十细胞表面标志的表达.结果:原代培养24 h细胞贴壁,呈致密圆形,边缘清楚:3 d左右部分细胞呈梭形,7 d后细胞铺展呈上皮样:传代后细胞扩增速度无明显变化,至第5代仍保持较均一的上皮细胞状.原代接种后5d的贴壁细胞,人干细胞因子受体与甲胎蛋白呈阳性表达,白蛋白与细胞角蛋白19呈阴性.结论:胎肝干细胞原代培养早期表达甲胎蛋白与人干细胞因子受体,不表达白蛋白和细胞角蛋白19,提示所分离的胎肝干细胞可能足一种较原始的干细胞,尚处在未分化的早期阶段.     

诊断剂量超声与胎鼠中枢神经元的凋亡

目的 探讨诊断剂量超声对胎鼠中枢神经元凋亡的影响。方法 用诊断剂量彩超（探头频率3．5MHz,彩色增益50dB,Pwr=0dB,MI=1.7,TIB=0.9)辐照孕18d大鼠子宫体表投影区,分为辐照10min、20min、30min和对照组共4组。应用TUNEL技术及透射电镜观察凋亡细胞,采用χ^2检验比较各组间差异。结果 ①对照组及辐照10min组凋亡细胞极少见,而辐照20min及30min组凋亡细胞增加,该两组分别为10min组及对照组比较差异有显著性意义（P＜0．01）。②透射电镜观察30min组胎鼠皮层神经细胞核高电子密度,染色质边集,呈典型凋亡改变。结论 诊断剂量的彩超辐照孕鼠20min以上可诱导胎鼠脑皮层神经细胞凋亡。