大鼠三叉神经尾侧亚核丘脑投射神经元与初级传入和中缝大…

用束路追踪和免疫电镜方法研究了大鼠三叉神经尾侧亚核丘脑揣影神经元与初级传入和中缝大核下投射纤维间的突触联系，光镜观察发现，ＨＲＰ跨节标记三叉神经传入终末与中缝大核顺行追踪的ＰＨＡ－Ｌ标记终末在三叉神经尾侧亚核浅层有重叠分布，在ＶＣ浅层丘脑投射神经元与初级传入和ＲＭｇ下行投射的分布也有重叠。电镜观察发现初级传入终末和丘脑投射神经元估形成非对称性轴树突触，而ＲＭｇ下行投射终末与三叉丘脑投射神经元树突形     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内前原强啡肽与钙结合蛋白共存

目的 观察大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc)内前原强啡肽（PPD）免疫组化染色性结构的分布特点及其与钙结合蛋白calbindin D28k(CB)、caleratin(CR)或pavalbumin(PV)的共存情况。方法 免疫荧光组织化学双重染色技术。结果 PPD阳性神经元在Vc各层均有分布，以Ⅰ层和Ⅱ层外侧部（Ⅱo)最为密集。CB、CR和PV阳性神经元分布于Vc各层，Ⅱ层最为密集，Ⅰ和Ⅲ层较少。部分PPD阳性神经元同时也呈CB、CR或PV阳性，CB／PPD、CR／PPD和PV／PPD共存神经元主要位于Ⅱ层。CB／PPD共存神经元占CB或PPD阳性神经元的比率分别为3．9％和5．1％；CR／PPD共存神经元占CR或PPD阳性神经元的比率分别为3．4％和3．9％；PV／PPD共存神经元占PV或PPD阳性神经元的比率分别为14．0％和3．6％。结论 CB／PPD、CR／PPD和PV／PPD共存神经主要位于Vc的Ⅱ层，PPD与钙结合蛋白共存神经元可能参与传递面口部伤害性信息。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内钙结合蛋白阳性神经元与5—HT和SP阳性终末的联系

目的 观察大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc)内calbindin D-28K(CB)及parvalbumin(PV)阳性神经元与来自脑干下行抑制系统的5－羟色胺（5－HT）阳性终末及来自外周初级传入的P物质（SP)性终末的联系。方法 免疫荧光组织化学三重染色方法，染色结果在激光扫描共聚焦显微镜下观察。结果 5－HT阳性终末主要分布于Vc的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层内较密集；SP阳性终末密集分布于Ⅱ层，Ⅰ层内较少；CB、CR和PV阳性神经元在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ层都有分布，但主要集中在Ⅱ层，特别是Ⅱ层内侧部（Ⅱi)。在Ⅱi内，CB、CR和PV阳性神经元的胞体和树突与5－HT阳性终末以及SP阳性终末形成密切接触；在Ⅱ层外侧部内，也可见少量CB和CR阳性神经元的胞体及树突与5－HT性终末和SP阳性终末形成接触。结论 Vc内的CB、CR和PV阳性神经元可能参与面口部伤害性信息的传递和调控。     

大鼠丘脑腹内侧核的传入纤维联系

采用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）微量注射和微电泳方法，观察大鼠丘脑腹内侧核（ＶＭ）的传入纤维联系，结果表明：ＶＭ接受大脑皮质、无名质、丘脑网状核、脚内核、下丘脑结构、上丘、黑质网状部、蓝斑、臂旁核、中缝核、前庭神经核群、脑桥网状核、小脑齿状核、小脑间位核和脊髓灰质的某些板层的传入纤维。     

大鼠丘脑束旁核的传入纤维联系

用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）微量注射和微电泳方法，观察大鼠丘脑束旁核（ｐｆ）的传入纤维联系。结果表明，ｐｆ接受大脑皮质、丘脑室旁核、丘脑网状核、下丘脑腹内侧核、下丘脑外侧核、未定带、上丘、中央灰质、黑质网状部、蓝斑、ＬｏｒｅｎｔｅｄｅＮｏ＇核、小脑齿状核、小脑间位核、前庭神经核、舌下神经前置核、脑干网状结构、某些感觉中继核和脊髓灰质的某些板层的传入纤维。     

大鼠丘脑中央下核GABA纤维终末与腹外侧眶皮质投射神经元的突触联系

目的:观察大鼠丘脑中央下核(Sm)GABA纤维终末与腹外侧眶皮质(VLO)投射神经元的突触联系。方法:18只大鼠麻醉后固定于脑立体定位仪上,于VLO微量注射辣根过氧化物酶(HRP),48h后,应用包埋前HRP组化和GABA免疫组化双重标记电镜技术观察大鼠SmGABA纤维终末与VLO投射神经元的突触联系。结果:光镜下Sm内有大量GABA纤维终末及少数阳性神经元,电镜下可见GABA纤维终末与HRP标记的阳性神经元胞体及树突间构建了对称性和(或)非对称性突触。结论:形态学上证实了Sm内GABA纤维终末与VLO投射神经元胞体及树突发生突触联系。     

大鼠三叉神经初级纤维传入终末的溃变类型和突触联系

损毁大鼠三叉神经根,观察其纤维终末在中枢内的溃变。结果发现:存活第1天,溃变终末内线粒体肿胀,嵴断裂紊乱,透明小泡聚集;第2天溃变终末电子密度增加,出现典型的神经微丝增生型溃变;第3天溃变的细小轴突终末密度显著增高;第4天细小的溃变轴突终末皱缩并被胶质细胞包绕,有的终末突触小泡融合成大小不等的空泡。另外,较大的扇贝型溃变终末常与多个树突形成轴一树突触,其中有的进一步形成轴—树—树连续性突触,轴—轴突触偶见,表明三叉神经初级传入纤维与中枢内其它神经元联系密切而广泛,与其复杂的痛觉调控机制相一致。     

电刺激大鼠尾核,小脑结合臂对丘脑腹内侧核神经元影响

采用细胞外单位记录方法观察了刺激大鼠尾核（ＣＤ）、小脑结合臂（ＢＣ）对丘脑腹内侧核（ＶＭ）神经元放电活动的影响。结果显示电刺激ＣＤ控制大多数ＶＭ神经元；刺激ＢＣ兴奋大多数ＶＭ神经元；二者的联合刺激抑制ＶＭ神经元的自发放电；刺激ＣＤ组与联合刺激组在反应类型构成比上无显著性差异（Ｐ＞０．０５），刺激ＢＣ组与联合刺激组间则存在着反应类型构成比的显著差异（Ｐ＜０．０１）。结果提示：ＶＭ神经元对小脑、基底神经节的传入有整合作用，其结果以基底神经节的传入表现为主。     

大鼠展神经核向对侧动眼神经核的内直肌亚核的纤维投射研究

目的 :探讨展神经核对动眼神经核的内直肌亚核的纤维投射。方法 :辣根过氧化物酶逆行示踪法。结果 :展神经核的核间神经元由腹内侧亚群及腹外侧亚群构成 ,腹内侧亚群纵长 0 .6 0～ 0 .75mm ,标记细胞数 12 0± 5 0个 ;腹外侧亚群纵长 0 .3～ 0 .4mm ,标记细胞数 14 0± 4 0个。核间神经元的轴突纤维 ,越过中线 ,在对侧内侧纵束中上升 ,专一的终止于对侧的内直肌亚核。结论 :核间神经元在眼的水平同向运动中起关键作用。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核及三叉神经节内5—羟色胺受体3、4、7亚型mRNAs的表达

目的 观察大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc)及三叉神经节（TG）内5－羟色胺受体3、4、7亚型（5－HT3R、5－HT4R、5－HT7R）mRNAs的表达。方法 同位素标记的原位杂交组织化学技术。结果 5－HT3RmRNA阳性神经元密集分布于Vc的浅层（Ⅰ、Ⅱ层），散在分布于Ⅲ层；5－HT4RmRNA在Vc浅层也有较强的表达。Ⅲ层偶见阳性神经元；5－HT7R mRNA在Vc内表达较弱，且仅见于浅层。TG内5－HT3R、5－HT4R及5－HT7RmRNAs阳性细胞的百分比分别为32．8％、24．7％和9．8％。大、中、小型阳性细胞均可见，但以中、小型细胞为主。结论 5－HT3R、5－H4R航5－HT7RmRNAs在大鼠Vc及TG神经元内均有表达，提示这三种受体亚型在面口部感觉信息的传递或调控过程中可能发挥着重要作用。     

中缝大核内神经降压素对大鼠痛和电针镇痛作用的影响

目的 探讨大鼠中缝大核(NRM)内神经降压素(NT)在电针镇痛中的作用，分析内源性NT和5-HT在电针镇痛中作用的相互关系。方法 以钾离子透入法引起大鼠甩尾反应的电流强度(mA)为痛反应指标，测定动物痛阈，观察中缝大核内神经降压素对痛和电针镇痛的影响。结果 大鼠中缝大核内微量注射神经降压素后，大鼠电针镇痛的效应明显增加；注入抗神经降压素血清或NT拮抗剂后，大鼠电针镇痛效应则明显降低。大鼠中缝大核内注入噻庚啶后，可阻断NT电针镇痛的效应。结论 大鼠中缝大核内的神经降压素在电针镇痛复杂病理生理过程中发挥着重要作用。至少其部分效应可能是通过内源性5-HT系统中介的。     

兴奋不同传入神经纤维对大白鼠中缝大核神经元活动的影响

于清醒的肌肉麻痹的大鼠,用直流电分级阻滞法,以n=10或n=100的电脉冲刺激腓肠神经的不同传入纤维(分Ⅱ、Ⅱ+Ⅲ、Ⅲ、Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ和Ⅳ类五组),观察刺激后即刻和10min时对中缝大核(NRM)神经元单位放电的影响。可见到(1)无论从引起兴奋的神经元数或反应的强度来看,均以细纤维的作用最大,粗纤维的作用最小,粗加细纤维居中。(2)Ⅲ类纤维的兴奋作用,短串脉冲大于长串脉冲。Ⅳ类纤维的兴奋作用,长串脉冲稍大于短串脉冲。(3)在刺激各组纤维后,所引起的反应,潜伏期有的较长;反应有的呈单相,有的呈兴奋和抑制的相互转化。上述结果为解决针刺或刺激神经镇痛的外周传入纤维问题提供了直接的实验依据。     

大鼠红核对中缝大核神经元电活动的影响

在32只大鼠的中缝大核内共记录到225个神经元自发放电。其中,痛相关神经元占58％。观察了剌激红核对160个中缝大核神经元自发放电频率的影响,其中,起兴奋作用的占59％。特别是对痛兴奋神经元起兴奋作用的就占68％。刺激红核对中缝大核神经元的兴奋作用在一定范围内与剌激强度、频率和持续时间呈正变关系。结果表明,红核除有调节躯体运动的机能外,还可能通过中缝大核对感觉传入起调制作用。     

缰外侧核向中缝背核腹侧亚核投射的递质性质

取20只大白鼠,应用HRP和免疫组化双标记法对缰外侧核向中缝背核腹侧亚核投射的递质性质进行了研究,结果在缰外侧核看到三种细胞:①HRP单标记细胞;②SP免疫阳性反应细胞;③SP-HRP双标记细胞。实验从形态学上证明缰外侧核的SP能纤维投射到中缝背核腹侧亚核,该结果对进一步探讨缰核、中缝背核在针刺镇痛中的相互关系提供了形态学依据。     

中缝大核内催产素在大鼠痛行为调制中的作用

目的：探讨中缝大核（NRM）内催产素（OT）在痛行为调制中的作用，及其和内源性5－HT在痛行为调制中的关系。方法：以钾离子透入法引起大鼠甩尾反应的电流强度（mA)为痛行为反应指标，测定动物痛阈，观察NRM内催产素对大鼠痛行为反应的影响。结果：NMR内注入催产素后，大鼠的痛阈明显增加；注入抗催产素血清后，大鼠的痛阈则明显降低。NRM内注入噻庚啶后，可阻断OT镇痛的效应。结论：NRM内的催产素在痛行为调制的复杂过程中发挥着一定作用，且其效应可能是通过内源性5－HT系统中介的。     

P物质在大鼠中缝大核中参与痛觉调制的机制探讨

目的：探讨P物质（SP）在大鼠中逢大核（NRM）中参与痛觉调制的作用，揭示内源性镇 痛系统的神经递质机制。方法：以浅麻状态大鼠的甩尾反射潜伏期（TFL）为痛阈指标，采用核团内微量注射的方法。结果：SP(0.5μg/0.5μl)注入NRM后的15min内，大鼠TFL明显延长，并可被预先注射纳洛酮及CP-96345所阻断。结论：SP可能在NRM内介导痛觉调制过程，该过程有内源性阿片肽的参与，并通过NK-1受体实现。     

中缝背核触液神经元对荧光活性染料DiI亲和性的实验研究

目的 观察荧光染料DiI标记中缝背核触液神经元的可行性.方法 6只雄性SD大鼠,侧脑室注射1％3μl的DiI染料,3天后经4％多聚甲醛灌注固定,冰冻切片机切片,共聚焦显微镜下观察,并进行连续光学切片兼对标记的触液神经元进行三维重塑.结果 DiI对中脑导水管腹侧处中缝背核内的触液神经元标记清楚,且阳性标记神经元的三维重塑显示,中缝背核触液神经元的胞体和近胞体的一级树突可被清楚标记.结论 中缝背核触液神经元对荧光活性染料DiI的亲和力较强,脑切片无需进行其他染色处理,可直接在荧光显微镜下观察到触液神经元,是一种示踪标记中缝背核触液神经元的良好方法.     

大鼠中缝背核内一氧化氮合酶阳性神经元向伏隔核的投射

目的:观察大鼠中缝背核内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元向伏隔核的投射,为阐明一氧化氮(NO)在中缝背核与伏隔核的纤维联系中的作用提供有价值的形态学依据。方法:用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH d)法结合辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法,观察大鼠中缝背核内NOS阳性神经元向伏隔核的投射。结果:在中缝背核内观察到HRP/NOS双标记神经元,所占比例为5%。结论:中缝背核内有NOS阳性神经元向伏隔核投射。     

5-羟色胺能神经元向三叉神经运动核和感觉核的投射

目的 观察５－羟色胺（５－ＨＴ）能神经元向三叉神经运动核（Ｕｍ）和三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）的投射。方法 荧光金（ＦＧ）逆行单标或ＦａｓｔＢｌｕｅ（ＦＢ）和Ｄｉａｍｉｄｉｄｎｏ Ｙｅｌｌｏｗ（ＤＹ）逆行双标与免疫荧光组化染色相结合的双重或三重标记技术。结果 将ＦＧ注入Ｖｍ或Ｖｃ后,在中缝核簇和中脑导水管周围灰质内可见ＦＧ逆标并呈５－ＨＴ样阳性的双重标记神经元;将ＦＢ和ＤＹ同时分别注入Ｖｍ和Ｖｃ     

大鼠三叉神经脊束间质核接受咬肌伤害性信息的calbindin D-28k神经元向孤束核的投射

目的：探讨三叉神经脊束间质核(IN V)内接受口面部深层结构(咬肌)伤害性信息的calbindin D-28k(CB)神经元是否投射到孤束核(NTS)．方法：应用荧光金(FG)逆行束路追踪结合Fos和CB免疫荧光组织化学三重标记法．结果：FG逆标细胞和Fos免疫阳性细胞主要分布于注射和刺激同侧IN V的背侧边缘旁核(PaMd)和三叉旁核(Pa V)内；大量的CB免疫阳性细胞分布于双侧IN V内．IN V内的大部分FG逆标细胞(约73．3％)呈CB免疫反应阳性．在FG和CB双标记的神经元中。又有一部分(约47．4％)为同时呈Fos免疫反应阳性的三重标记．结论：IN V投射至NTS的CB神经元接受口面部深层结构的躯体伤害性信息，含CB的神经元可能在口面深部伤害性信息经IN V至NTS的传导径路中发挥着重要作用．