miR-126表达水平及其基因启动子甲基化状态与胶质母细胞瘤术后复发的关系

目的 探讨miR-126表达水平及其基因启动子甲基化状态与胶质母细胞瘤（GBM）术后复发的关系。方法 收集2016年8月到2020年12月手术切除的GBM组织标本86例和同期颅脑损伤内减压术中切除非肿瘤脑组织30例,采用PCR和MSP法检测miR-126表达水平及其基因启动子甲基化状态。随访至2021年3月,随访时间2~56个月,中位随访时间24.0个月。术后定期复查MRI确定肿瘤复发和复发时间。结果 术后58例复发,复发率为67.44%。与非肿瘤脑组织相比,GBM组织miR-126表达水平明显降低（P<0.05）,miR-126基因启动子甲基化率明显升高（P<0.05）。与未复发组相比,复发组GBM组织miR-126表达水平明显降低（P<0.05）,同时miR-126基因启动子甲基化率明显升高（P<0.05）。生存曲线分析显示,miR-126甲基化组中位复发时间（16.0个月）较非甲基化组（39.0个月）明显缩短（P<0.05）。多因素logistic回归分析显示miR-126基因启动子高甲基化是GBM术后复发的独立危险因素（P<0.05）。ROC曲线分析显示,miR-126表达水平预测GBM术后复发的曲线下面积为0.894（95% CI 0.837~0.950;P<0.05）,最佳截断值为0.830,灵敏度和特异度分别为90.0%和75.6%。结论 GBM组织miR-126表达水平普遍降低,与其基因启动子异常甲基化有关。检测miR-126表达水平对GBM术后复发有良好的预测价值。     

脑胶质瘤中ppENK基因启动子区的甲基化状态研究

目的 检测脑胶质瘤组织中候选抑癌基因ppENK基因启动子区的甲基化状态,探讨ppENK基因启动子的异常甲基化水平在脑胶质瘤发生发展中的作用以及与临床病理资料之间的关系.方法 采用巢式聚合酶链反应(nested polymerase chain reaction nPCR)方法和亚硫酸氢盐修饰后测序法(Bisulfite sequence polymerase chain reaction BSP),检测32例脑胶质瘤组织和10例正常脑组织中ppENK基因启动子区CpG岛的甲基化状态.结果 脑胶质瘤组织中ppENK基因启动子甲基化率为40.6％(13/32),明显高于正常脑组织中ppENK基因启动子甲基化率0％(0/10),两者差异存在统计学意义(P=0.015).在低级别(Ⅰ-Ⅱ级)组和高级别(Ⅲ- Ⅳ级)组脑胶质瘤中ppENK基因启动子甲基化率分别为21.1％(4/19)和69.2％ (9/13),通过分析表明两者差异存在统计学意义(P=0.006).结论 ppENK基因启动子的CpG岛在脑胶质瘤中存在高甲基化现象,可能与胶质瘤发生有关.ppENK基因启动子的甲基化状态与胶质瘤病理分级有关,与年龄、性别、病理分型无关.     

偶发低级别胶质瘤的手术效果及生存预后的影响因素分析

目的 探讨偶发低级别胶质瘤的手术效果及生存预后的影响因素。方法 回顾性分析2010年1月1日至2017年12月31日手术治疗的75例成人大脑半球偶发低级别胶质瘤的临床资料。结果 75例中,出现临床症状之前手术49例(无症状组),出现症状之后手术26例(症状组)。肿瘤全切除59例(78.7%),次全切除13例(17.3%),部分切除3例(4%);术后病理检查结果显示弥漫性星形细胞瘤44例(58.7%),少突胶质细胞瘤31例(41.3%)。症状组术后功能障碍发生率(11.5%,2/26)明显高于无症状组(0%;P<0.05)。59例(无症状组33例,症状组26例)术前接受MRI随访12～60个月,平均(30±10)个月;其中症状组术前随访18～60个月,平均(35±10)个月;无症状组术前随访12～38个月,平均(25±7)个月。59例肿瘤生长速率1～5 mm/年,平均(2.7±0.9)mm/年;无症状组生长速率1～5 mm/年,平均(2.9±0.9)mm/年;症状组生长速率1～4 mm/年,平均(2.5±0.7)mm/年;两组肿瘤生长速率无显著差别(P>0.05)。多因素Co...     

恶性脑胶质瘤MGMT基因启动子甲基化状态与患者临床预后的相关性

目的 探讨恶性脑胶质瘤组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态及MGMT蛋白表达与患者生存预后的关系,评价MS-MLPA技术检测MGMT基因启动子甲基化状态对脑胶质瘤化疗的意义. 方法 选择自2006至2010年南方医科大学珠江医院神经外科手术治疗且病理证实为恶性脑胶质瘤(WHOⅢ级、Ⅳ级)的39例患者为研究对象,应用免疫组化染色法检测肿瘤组织MGMT蛋白表达,应用MS-MLPA技术检测MGMT基因启动子甲基化状态,并观察患者化疗后总生存时间. 结果 肿瘤组织中MGMT蛋白表达阳性、弱阳性者与表达阴性者生存时间比较差异有统计学意义(P=0.003),MGMT蛋白表达阳性者比表达阴性者预后更差.肿瘤组织中MGMT基因启动子未甲基化者、低度过甲基化者、中度过甲基化者、高度过甲基化者生存时间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05),MGMT基因启动子过甲基化率越高者预后越好.MGMT蛋白表达与MGMT基因启动子甲基化状态存在统计学相关性(r=0.697,P=0.000),基因甲基化程度越高者蛋白表达越低. 结论 MGMT蛋白表达与MGMT基因启动子甲基化状态均可以作为接受烷化剂化疗的恶性胶质瘤患者生存期的预测指标.MS-MLPA技术是一种可靠的检测MGMT基因启动子甲基化状态的方法.     

p16基因甲基化与脑胶质瘤的关系

抑癌基因p16位于人类染色体9p21,由3个外显子和2个内含子组成.脑胶质瘤中,p16基因5'CpG岛异常甲基化导致P16蛋白表达的减少与肿瘤发病率密切相关.本文总结了p16基因5'CpG岛高甲基化的形成机制、在脑胶质瘤中的发生率以及相应的治疗对策,供临床医生参考.     

SLC22A18基因启动子甲基化与胶质瘤SLC22A18表达的关系

目的 探讨胶质瘤中SLC2218基因肩动子甲基化与其表达的关系.方法 选取上海交通大学医学院附属第三人民医院神经外科自2006年9月至2009年6月、武汉大学中南医院神经外科自2002年9月至2005年6月间手术切除的胶质瘤标本30例,另选10例行内减压术颅脑损伤患者的正常脑组织作为对照.采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测标本中SLC22A18基因启动子甲基化的状态,RT-PCR和Westem blotting分别检测SLC22A18 mRNA和蛋白的表达.体外培养胶质瘤U251细胞于含2 μmol/L去甲基化药物5-aza-2-deoxycytidine的培养液(实验组1中,同时设普通培养液作对照,培养3、5、7 d后进行细胞计数并应用Western blotting检测SLC22A18蛋白的表达.结果 MSP检测结果显示15例胶质瘤组织出现甲基化,对照脑组织均表现出非甲基化;15例甲基化胶质瘤组织中SLC22A18 mRNA、蛋白的表达明显低于对照脑组织.培养5、7 d实验组U251细胞计数少于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).培养7 d Western blotting检测结果发现实验组细胞SLC22A18蛋白的表达明显高于对照组.结论 SLC22A18基因启动子甲基化导致其表达下调;去甲基化药物能恢复U251细胞SLC22A18的表达,并抑制U251细胞增殖.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between aberrant methylation of SLC22A18 gene promoter and SLC22A18 expression in human glioma. Methods Thirty patients with glioma and 10 patients with craniocerebral injury performed decompression were chosen in our study;their tissue samples were prepared. Methylation-specific PCR (MSP) was used to detect the methylation status of SLC22A18 gene promoter;and Western blotting and RT-PCR were employed to measure the protein and mRAN expressions of SLC22A18 in these tissue samples. U251 cells were cultured in vitro with demethylating agent 5-aza-2-deoxycytidine (experimental group, 2μmol/L) and common medium (control group), resepectively;the re-expression of SLC22A18 in U251 cells was measured by Western blotting and cell growth suppression induced by 5-aza-2-deoxycytidine was also observed 3, 5 and 7 d after the culture. Results The methlylation of SLC22A18 gene promoter existed in glioma tissues of 15 patients (50%) but that did not exist in the tissues of patients with craniocerebral injury. The protein and mRAN expressions of SLC22A18 in the tissue samples of these 15 patients were significantly decreased as compared with those in patients with craniocerebral injury (P<0.05);cell counting of U251 cells in the experimental group on the 5th and 7th d of culture was significantly decreased as compared with that of those in the control group (P<0.05). On the 7ht d of culture, Western blotting indicated that the protein b expression level of SLC22A18 in the experimental group was obviously higher than that in the control group. Conclusion The aberrant methylation of SLC22A18 gene promoter plays a key role in down-regulating SLC22A18 expression, and demethylation agents can restore the SLC22A18 expression and suppress the growth of U251 cells.     

低级别胶质瘤自噬相关基因预后分类器的构建及验证

目的 本研究旨在构建自噬相关基因(ARGs)的风险分类器,从而预测低级别胶质瘤(LGG)患者的生存率。方法 从UCSC Xena, CGGA, GlioVis和GTEx公共数据库中获取LGG患者和正常脑组织数据,结合人类自噬数据库筛选出232个ARGs。通过差异分析得到差异ARGs。在训练集中,利用单因素Cox回归分析和LASSO回归分析,构建ARGs的预后分类器。通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线确定最佳Cut-off值。Kaplan-Meier生存曲线和ROC曲线下面积(AUC)用于评估分类器性能,并在内部数据集和外部数据集中验证。Cox回归分析用于评估分类器的独立预后价值。最后,结合常见临床参数和风险分类用于构建列线图模型,并利用ROC曲线,一致性指数和校准曲线评估该模型的预测能力。结果 本研究构建了由6个ARGs(BAG1、 PTK6、 EEF2、 PEA15、 ITGA6和MAP1LC3C)的预后风险分类器,其可将LGG患者分为具有明显生存差异的高、低风险组在多个数据集(均P<0.05)。5年AUC值显示该分类器在训练集,内部验证集和TCGA总集中分别为0.837, ...     

胶质瘤细胞GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响

目的 探讨胶质瘤细胞胶质细胞原性神经营养因子（GDNF）基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响。方法 体外培养胶质瘤U251细胞,加入不同浓度5-氮杂胞苷（浓度分别为1、5、10和20 μmol/L）干预,以加入PBS为对照。采用重亚硫酸盐测序法测定GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平,RT-PCR检测GDNF mRNA的表达。结果 与PBS组相比,1 μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平无显著影响（P>0.05）,5、10和20 μmol/L 5-氮杂胞苷均显著降低其甲基化水平（P<0.05）。与PBS组相比,1 μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF mRNA表达水平无显著影响（P>0.05）,5 μmol/L 5-氮杂胞苷显著增加其表达水平（P<0.05）,但随着浓度进一步增加（10、20 μmol/L）,其表达水平逐渐降低。结论 5-氮杂胞苷对GDNF基因具有去甲基化作用;GDNF启动子Ⅰ区去甲基化能够增加GDNF基因的转录水平。     

成人弥漫性低级别胶质瘤相关性癫痫发生机制与治疗的研究进展

癫痫是成人幕上弥漫性低级别胶质瘤(DLGG)最常见的临床症状,常常影响着DLGG患者的生活质量,致残致死率高。控制癫痫发作对于改善DLGG患者的生存质量尤为重要。该文总结了弥漫性低级别胶质瘤相关性癫痫的发作特点、发生机制及治疗方法,以期为弥漫性低级别胶质瘤相关性癫痫患者的个体化临床诊疗决策提供依据。[国际神经病学神经外科学杂志, 2022, 49(2):74-78.]     

Geminin表达水平与脑胶质瘤病人预后的关系

目的 探讨Geminin表达水平与脑胶质瘤病人预后的关系.方法 收集2014年1月～2017年1月手术切除并经术后病理证实的脑胶质瘤标本90例,以及因颅脑损伤内减压术切除的非肿瘤脑组织50,采用PCR检测Geminin mRNA表达水平.90例脑胶质瘤根据Geminin mRNA表达水平中位数分为高表达组和低表达组.9...     

Association of miR-122, miR-124 miR-126 and miR-143 gene polymorphisms with ischemic stroke in the northern Chinese Han population

Abstract

Objectives: Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in microRNA (miRNA) genes can have diverse functional consequence by affecting the processing and target selection of miRNA. Recent evidence indicates that miRNA play important roles in the pathogenesis of atherosclerosis, which is a major cause of ischemic stroke (IS). The aim of this study was to clarify whether genetic variations in four miRNA genes (miR-143 rs4705342, miR-122 rs17669, miR-126 rs4636297, and miR-124 rs531564) contribute to IS susceptibility.

Methods: A case-control study was used to explore miRNA genetic polymorphisms in 567 IS patients and 552 control subjects that were frequency matched by age and gender. We genotyped four SNPs using polymerase chain reaction/ligation detection reaction.

Results: The miR-126 gene rs4636297 polymorphism was associated with decreased small vessel stroke risk (GA vs. GG: odds ratio (OR)?=?0.62, p?=?.015; GA?+?AA vs. GG: OR?=?0.637, p?=?.018; A vs. G: OR?=?0.696, p?=?.033). Using logistic regression analysis, this significant association remained after adjusting for confounding risk factors (adjusted OR?=?0.626, 95% confidence interval (CI)?=?0.426–0.921). However, the three other miRNA (miR-143 rs4705342, miR-122 rs17669, and miR-124 r531564) were not associated with IS risk under allele or genotype, nor in different inheritance models. In addition, there were no significant associations with stroke subtypes for these three miRNA SNPs.

Conclusion: Our study suggests that the miR-126 gene rs4636297 polymorphism may play an important role in the pathogenesis of small vessel occlusive stroke in the northern Chinese Han population.     

脑胶质瘤病人血浆miR-9-3p的变化及其与病人临床预后的关系

目的 探讨脑胶质瘤病人血浆miR-9-3p的变化及临床意义。方法 选取2016年3月1日至2019年3月1日收治的脑胶质瘤42例,另选20例同期健康查体者为对照,用RT-PCR法检测血浆miR-9-3p水平。42例脑胶质瘤术后随访24～60个月,记录生存情况;以血浆miR-9-3p平均值为准,分为低表达和高表达。结果 脑胶质瘤病人血浆miR-9-3p水平明显降低（P<0.05）,多因素Cox分析显示,血浆miR-9-3P低表达是脑胶质瘤病人不良生存预后的独立危险因素（P<0.05）。生存曲线分析显示,miR-9-3p低表达脑胶质瘤病人中位总生存期较高表达病人明显缩短（P<0.05）。结论 人脑胶质瘤血浆miR-9-3p表达下调,与病人不良生存预后密切相关。     

lncRNA MIR4435-2HG的表达水平及甲基化状态与脑胶质瘤病理分级的关系

目的 探讨长链非编码RNA MIR4435-2HG的表达水平及甲基化状态与脑胶质瘤病理分级的关系.方法 选取2019年1～12月手术切除的脑胶质瘤组织110例和颅脑损伤内减压术中切除正常脑组织20例(对照组).采用实时荧光定量PCR和甲基化特异性PCR检测组织和血清MIR4435-2HG水平及甲基化状态.结果 110例...     

血清miR-122-5p水平与短暂性脑缺血发作病人预后的关 系

目的 探讨短暂性脑缺血发作（TIA）病人血清miR-122-5p水平变化及其在病人预后评估中的作用。方法 选取2013年1月至2016年1月收治的TIA病人150例,采集空腹静脉血检测血清miR-122-5p水平。根据入院ABCD2评分分为高危、中危、低危组。以发病90 d内发生脑梗死或死亡、与症状相关的大动脉狭窄≥50%或心源性栓子需要抗凝治疗为主要结局衡量终点事件。结果 150例中,低危组49例,中危组71例,高危组20例。150例中,41例（27.33%）出现终点事件,其中脑梗死10例,死亡1例,大动脉狭窄≥50%有21例,心源性血栓需抗凝治疗9例;其余109例（72.67%）无终点事件情况发生。血清miR-122-5p水平与病人ABCD2评分呈正相关（r=0.784,P<0.05）。发生终点事件TIA病人血清miR-122-5p明显高于无终点事件病人（P<0.05）,其中症状相关的大动脉狭窄≥50%病人、脑卒中/死亡病人血清miR-122-5p水平均明显增高（P<0.05）,而心源性栓子需抗凝治疗病人血清miR-122-5p水平无明显变化（P>0.05）。多因素logistic回归分析结果显示,血清miR-122-5p水平增高是TIA病人发生终点事件的独立危险因素（P<0.05）。结论 TIA病人血清miR-122-5p水平与ABCD2评分呈正相关;血清miR-122-5p水平增高提示TIA病人预后不良。     

lncRNA-FTX与脑胶质瘤病人预后的相关性分析

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）FTX表达水平与脑胶质瘤病人预后的相关性。方法 前瞻性收集2016年1月~2018年1月手术切除的脑胶质瘤88例（46例获得瘤旁组织）,采用实时逆转录PCR检测lncRNA FTX表达水平,以脑胶质瘤组织lncRNA FTX表达水平均值为界分为高表达组（n=57）和低表达组（n=31）。术后随访3年,主要观察指标为无进展生存期、总生存期。结果 脑胶质瘤组织lncRNA FTX表达水平[（7.54±2.15）]明显高于瘤旁组织[（2.65±0.69）;P<0.001]。多因素Cox比例回归风险模型分析显示,lncRNA FTX高表达是脑胶质瘤生存预后不良的独立危险因素（RR=1.589;95% CI 1.004~2.515;P=0.048）。生存曲线分析显示,高表达组无进展生存期（15.10个月）和总生存期（20.24个月）较低表达组（分别为18.96和25.53个月）明显缩短（P<0.05）。结论 脑胶质瘤lncRNA FTX呈高表达,与病人不良生存预后有关。     

Ddx5 和 Ddx17在人脑胶质瘤中的表达及其与病人生存期的关系

目的 探讨Ddx5 和 Ddx17在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病人生存期的关系。方法 收集2013年1月至2016年6月手术切除的胶质瘤组织120例和颅脑损伤内减压术中切取正常脑组织50例（对照组），采用免疫组化法检测Ddx5 和 Ddx17的表达水平，根据染色评分分为高表达和低表达。采用多因素Cox比例风险模型分析胶质瘤病人生存预后的影响因素。结果 胶质瘤组织Ddx5（70.00%，84/120）和Ddx17（65.83%，79/120）高表达率均明显高于正常脑组织[分别为28.00%（14/50）、38.00%（19/50）；P<0.05]。多因素Cox比例风险模型分析结果显示Ddx5和Ddx17高表达是胶质瘤病人无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）较短的独立影响因素（P<0.05）。与低表达组比较，Ddx5和Ddx17高表达组病人PFS和OS均明显缩短（P<0.05）。结论 人脑胶质瘤Ddx5和Ddx17呈高表达，二者均与胶质瘤病人的不良预后有关     

锥体束受侵犯程度与岛叶胶质瘤患者术后疗效的关系

目的探讨锥体束受侵犯程度与岛叶胶质瘤患者术后疗效的关系。方法回顾性分析2010年7月至2019年7月于中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)神经外科行手术治疗的41例岛叶胶质瘤患者的临床资料。根据MRI显示锥体束受侵犯程度将患者分为3型,其中肿瘤仅侵犯岛叶前下部为Ⅰ型,侵犯岛叶后上部为Ⅱ型,浸润破坏内囊结构为Ⅲ型。分析各型患者术前、术后肢体运动功能障碍,病理学类型及术后疗效的差异。结果41例患者中,Ⅰ型18例(43.9%),Ⅱ型20例(48.8%),Ⅲ型3例(7.3%)。Ⅰ型患者术前、术后均无运动功能障碍。Ⅱ型患者术前4例有运动功能障碍,其中3例术后得到了改善,1例症状进一步加重,1例术后新发生了运动功能障碍。Ⅲ型患者术前均有运动功能障碍,术后症状均进一步加重。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型肿瘤全切除者分别有11例、5例、1例,与Ⅰ型比较,Ⅱ+Ⅲ型肿瘤全切除比例低[分别为26.1%(6/23),11/18],差异有统计学意义(P=0.026);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型患者中,世界卫生组织(WHO)Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤患者分别有3例(3/18)、7例(7/20)、3例(3/3),差异有统计学意义(P=0.015)。术后29例获3~72(22.7±12.0)个月的随访。Ⅰ型患者随访13例,均未复发;Ⅱ型患者随访15例,其中7例复发;Ⅲ型患者随访1例,术后第3个月因残留肿瘤增大而死亡。Kaplan-Meier生存分析3型患者的生存率差异有统计学意义(P<0.01)。结论锥体束受侵犯程度越重,岛叶胶质瘤的病理学级别越高,手术全切除率越低,术后疗效越差。     

胶质母细胞瘤组织RBM8A表达与病人预后及替莫唑胺化疗敏感性的关系

目的 探讨胶质母细胞瘤（GBM）组织RNA结合基序8A（RBM8A）蛋白表达与病人预后及替莫唑胺（TMZ）化疗敏感性的关系。方法 选取2015年6月至2020年6月手术切除的GBM组织130例及颅脑损伤减压术中切取的非肿瘤脑组织20例（对照）,用免疫组化法检测组织RBM8A表达。术随访时间3~50个月,中位随访时间为12个月。结果 GBM组织RBM8A高表达率[86.15%（112/130）]明显高于对照组[20%（4/20）;P<0.05]。随访期间死亡98例,失访2例;多因素Cox回归分析显示,RBM8A高表达是GBM病人生存预后不良的独立危险因素（P<0.05）。生存曲线分析显示,RBM8A高表达GBM病人中位无复发生存时间和总生存时间均明显低于低表达病人（P<0.05）;RBM8A低表达GBM病人中,TMZ化疗病人无复发生存时间和总生存时间均明显高于未化疗病人（P<0.05）;TMZ化疗与RBM8A高表达GBM病人无复发生存时间和总生存时间无明显关系（P>0.05）。结论 GBM组织RBM8A呈高表达,与病人不良生存预后有关。检测RBM8A有助于评估GBM病人对TMZ化疗敏感性。