结缔组织生长因子基因表达与大鼠肝纤维化关系初步研究

目的探讨结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）基因在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及其在肝纤维化发展中的作用。方法采用四氯化碳（CCl4）皮下注射制备肝纤维化模型，并于注射后1、4、8周取大鼠肝组织，免疫组化检测CTGF的表达，RT—PCR检测肝组织结缔组织生长因子和I型胶原α2[COL Ⅰ（α2）]基因的转录，并作图像扫描和统计学分析。结果CTGF免疫组化显示正常大鼠肝组织未见明显阳性着色，模型组大鼠注射CCl4 1周后，肝窦周和汇管区细胞出现阳性染色，随着CCl4注射时间的延长，其表达逐渐增强趋势。正常大鼠肝组织COLⅠ（α2）无表达，注射CCl4 1周后有弱表达，注射CCl4 4周后表达增强，8周时达到高峰。CTGF基因的表达与Ⅰ型胶原（α2）的表达呈正相关。结论CTGF作为TGF-β1的下游细胞因子在肝纤维化的发生和发展中可能发挥重要作用。     

反义抑制结缔组织生长因子对实验性肝纤维化的影响

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)反义RNA对实验性肝纤维化的影响。方法应用分子生物学技术构建CTGF反义RNA真核表达质粒,经腹腔注射入CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠体内;通过RT-PCR、Western blot及免疫组织化学等方法检测CTGF反义RNA基因转染前后CTGF mRNA和蛋白质在肝组织中含量的变化;并通过检测肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的变化,观察CTGF反义RNA对大鼠肝纤维化的影响。结果转染CTGF反义RNA后,可抑制CTGF mRNA和蛋白质的表达(P<0.01),减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积(P<0.01),并在一定程度上促进肝组织的改善(P<0.01)。结论CTGF反义RNA对肝纤维化有一定的治疗作用。     

结缔组织生长因子与肝纤维化相关性的研究进展

结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）是Bradham等于1991年首次在人脐静脉内皮细胞条件培养基中发现的细胞因子，它属于一种即刻早期基因（CTGF Cyr61 nov，CCN）家族成员之一，是转化生长因子（transforming growth factor-beta，TGF-β）的下游介质。广泛存在于人类肝脏、肾脏、心脏、肺脏和结缔组织等多种咒织器官中，具有明显的有丝分裂原性和趋化性，在体内参与胚胎发育、细胞增生、分化及创伤愈合等病理生理活动。     

结缔组织生长因子与肝纤维化

结缔组织生长因子(CTGF)是新近发现的一种在器官纤维化病变中起关键作用的细胞因子，它除特异性介导TGF-β促纤维化作用外，还可介导高血糖、高血压及脂质过氧化物等信号的促纤维化作用。在人肝纤维化、肝硬化及实验性肝纤维化模型中，CTGF表达显著增高，并与肝组织纤维化积分呈明显正相关，而抑制肝星状细胞CTGF表达，可显著减少胶原等细胞外基质基因表达及阻抑肝纤维化进展。现就CTGF的一般特性，生理及病理作用，CTGF在肝纤维化中的作用、信号通路及调控作一综述。     

结缔组织生长因子与肝纤维化的研究进展

肝纤维化是大多数慢性肝病共有的组织学改变,因此,能否终止肝纤维化的进展甚或逆转至正常,是治疗慢性肝病的关键.在肝纤维化的发病机制及治疗研究中,细胞因子网络始终是人们研究的热点.结缔组织生长因子(connective tissuegrowth factor CTGF)是一种新发现的细胞因子,1991年由Bradham等从人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养液中分离所得,为富含半胱氨酸的多肽.目前,CTGF在肝纤维化的研究中已成为新的热点.本文就CTGF的结构,生物学特性,主要调节因素及其与肝纤维化的关系作一综述.     

结缔组织生长因子与肝纤维化

肝纤维化的病理过程受着细胞因子的调节，结缔组织生长因子作为转化生长因子－β1的下游反应元件，在肝纤维化的发生、发展过程中起着关键的作用，不同类型的肝经每人经模型中均存在结缔组织生长因子的高表达，且与病理上纤维化的程度相平行。本文就结缔组织生长因子的分类、结构、特性及其在肝纤维化病理机制中的作用和临床意义作一综述。     

结缔组织生长因子与器官纤维化的关系

结缔组织生长因子(CTGF)是一种新的可刺激成纤维细胞增殖和分泌胶原的生长因子，与肺、肝、肾、心脏、皮肤等器官的纤维化有重要联系。CTGF基因属即刻早期基因，启动子含转化生长因子β应答元件，可被TGF-β选择性诱导激活，并作为其下游介质促进胶原合成。以CTGF为特异性靶标将给器官纤维化治疗开创新纪元。     

抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA防治大鼠肝纤维化的研究

目的 探讨经腹腔注射抗结缔组织生长因子(CTGF)小分子干扰RNA(siRNA)是否能抑制大鼠体内肝脏CTGF基因表达及防治大鼠肝纤维化.方法 雄性SD大鼠30只,随机分成5组,分别为模型组腹腔注射40%CCl4 (3 mL/kg)及尾静脉注射生理盐水,1次/3 d,连续8周;预防组腹腔注射40%CCl4 及尾静脉注射...     

结缔组织生长因子与肝纤维化

结缔组织生长因子(CTGF)是新近发现的一种在器官纤维化病变中起关键作用的细胞因子,它除特异性介导TGF-β促纤维化作用外,还可介导高血糖、高血压及脂质过氧化物等信号的促纤维化作用。在人肝纤维化、肝硬化及实验性肝纤维化模型中,CTGF表达显著增高,并与肝组织纤维化积分呈明显正相关,而抑制肝星状细胞CTGF表达,可显著减少胶原等细胞外基质基因表达及阻抑肝纤维化进展。现就CTGF的一般特性,生理及病理作用,CTGF在肝纤维化中的作用、信号通路及调控作一综述。     

抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA防治大鼠肝纤维化研究

目的探讨经门静脉注射抗结缔组织生长因子(CTGF)小分子干扰RNA(siRNA)是否能在体内抑制大鼠肝CTGF基因表达及防治大鼠肝纤维化。方法雄性SD大鼠24只,均分成4组,模型组皮下注射40%CCl4(3ml/kg)及门静脉注射生理盐水,每3d1次,连续6周;预防组皮下注射CCl4及门静脉注射抗CTGFsiRNA(0.1mg/kg),每3d1次,连续6周;治疗组皮下注射CCl42周,随后再给予抗CTGFsiRNA及CCl44周;对照组门静脉注射生理盐水6周。于最后1次CCl4注射后3d行门静脉测压,并取血及组织标本,检测血清转氨酶、透明质酸(HA)及Ⅲ型前胶原(PⅢNP)浓度,应用RTPCR及Western印迹法检测CTGFmRNA及蛋白质在大鼠肝组织表达,应用HE及Siriusred胶原染色检测肝组织炎症及纤维化,应用偏光扫描对肝组织胶原染色面积进行定量。结果与模型组相比,预防组及治疗组大鼠肝组织CTGFmRNA及蛋白质表达显著下调,肝组织炎症、坏死及纤维化明显减轻,血清转氨酶、HA及PⅢNP浓度显著降低;预防组、模型组和治疗组的肝组织胶原染色面积分别为5.8%±0.8%、12.3%±0.8%和7.2%±0.9%(P<0.01);门静脉压力分别为(14.2±2.3)cmH2O、(20.6±5.8)cmH2O和(15.1±3.6)cmH2O(P<0.05),明显降低。结论经门静脉注射抗CTGFsiRNA能在体内显著抑制大鼠肝CTGF基因表达并能有效防治大鼠肝纤维化,提示抗CTGFsiRNA有潜力成为防治肝纤维化的一种新策略。     

Smad泛素化调节因子2在肝纤维化过程中对结缔组织生长因子的作用研究

目的:在体内和体外研究Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在肝纤维化过程中对结缔组织生长因子(CTGF)的作用。方法:建立四氯化碳诱导肝纤维化大鼠模型,收集人类肝硬化和正常肝组织样本,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot,WB)、免疫组织化学(IHC)方法检测Smurf2和CTGF的表达;培养人类肝星状细胞(LX-2),构建Smurf2表达质粒和小干扰RNA(siRNA),在转化生长因子β1(TGF-β1)作用后,通过WB检测Smurf2过表达和小干扰后对CTGF表达的影响。结果:在大鼠肝纤维化时,Smurf2表达增加,伴有CTGF水平增高;大鼠和人类肝硬化组织中,Smurf2表达反而减少,CTGF表达仍然增加。体外肝星状细胞用TGF-β1处理后,CTGF蛋白水平升高;过表达Smurf2可以阻断CTGF蛋白的合成;抑制Smurf2表达后,CTGF表达持续增加。TGF-β1处理LX-2后可以诱导Smurf2表达内源性轻度增加。结论:Smurf2可以由TGF-β1诱导产生,作为负反馈抑制子抑制肝纤维化过程中CTGF表达的增加。     

沉默结缔组织生长因子对鼠转化生长因子β/Smads信号的影响

目的 研究小干扰RNA(siRNA)沉默结缔组织生长因子(CTGF)对大鼠转化生长因子(TGF)β/Smads信号通路的影响.方法 将化学合成CTGF siRNA转染肝星状细胞(HSC)T6和经门静脉注入CCl4诱导6周的肝纤维化大鼠,设空白及随机siRNA对照,抽提HSC T6及大鼠肝组织总RNA和蛋白质,应用Western blot和RT-PCR检测HSC T6及肝组织CTGF及TGF β1,Smad2、3、7蛋白质和基因表达. 结果与空白对照组相比,siRNA能显著下调HSC T6 CTGF蛋白表达,以48 h最明显,CTGF蛋白表达下调94%±4%(t=46.196,P<0.01),而TGF β1、Smad2,3,7 mRNA表达差异无统计学意义;模型组及对照siRNA组,CCl4诱导的大鼠肝组织CTGF和TGF β1蛋白表达明显上调,与模型组相比,CTGF siRNA组大鼠肝组织CTGF及TGF β1蛋白表达分别下调95%±2%(F=21.234,P<0.01)和74%±8%(F=13.464,P<0.05),但Smad2和Smad7蛋白表达无明显改变. 结论沉默CTGF基因表达对大鼠肝TGF β/Smads信号具有阻抑作用.     

沉默结缔组织生长因子对大鼠肝纤维化的影响

目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)小干扰RNA(siRNA)在CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型中的抗肝纤维化作用及其对肝星状细胞(HSC)激活的影响.方法 雄性SD大鼠24只,随机分成4组.模型组:皮下注射CCl4及经门静脉注射等渗盐水,每3 d 1次,连续6周(给药频率与时间,下同);CTGF siRNA干预组:皮下注射CCl4及经门静脉注射CTGF siRNA ;对照siRNA干预组:皮下注射CCl4及经门静脉注射对照siRNA;正常对照组:经门静脉注射等渗盐水.用HE染色和Sirius red染色评估大鼠肝组织学变化,Western blot检测肝组织CTGF及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,免疫组织化学染色评估肝组织α-SMA阳性细胞数量.对实验数据用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验分析.结果 模型组及对照siRNA组大鼠肝组织CTGF及α-SMA蛋白表达显著上调,α-SMA染色阳性细胞数量明显增加.与模型组相比,CTGF siRNA组CTGF及α-SMA蛋白表达分别下调95%±2%和86%±11%(F值分别为21.234和12.473,P值均＜0.01);肝组织α-SMA染色阳性细胞数减少76%±9%(F=9.179,P＜0.01);组织学检查显示肝纤维化程度明显减轻.结论 siRNA沉默CTGF基因能显著减轻大鼠实验性肝纤维化,减少活化HSC数量可能是其改善肝纤维化的主要机制之一.     

葛根素对异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化和心肌结缔组织生长因子表达的影响

目的:研究葛根素对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的大鼠心肌纤维化和心肌结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的影响。方法:雄性SD大鼠随机分成4组:①造模组(M组)16只,采用0.05%ISO(5mg·kg-1.d-1×10d)皮下注射制作大鼠心肌纤维化模型;②早期干预组(Pa组)12只,造模同时给予葛根素(100mg·kg-1.d-1)腹腔注射56d;③后期治疗组(Pp组)12只,造模10d后给予葛根素腹腔注射46d;④对照组(C组)8只。对各组计算左心室质量指数,检测左室心肌组织中羟脯氨酸浓度,进行VG染色、免疫组化染色,测算胶原容积积分(collagen volume fraction,CVF)和CTGF蛋白含量,RT-PCR检测CTGF mRNA水平。结果:Pa组、Pp组和M组的左心室质量指数、CVF、心肌组织羟脯氨酸浓度和CTGF均较C组明显增加(P<0.01);Pa组和Pp组的左心重量指数、CVF、心肌组织羟脯氨酸浓度和CTGF均较M组明显减少(P<0.01),Pa组减少更明显。结论:葛根素减少胶原沉积,从而减轻和延缓ISO诱导的心肌纤维化,早期干预效果更明显,这种作用机制可能是通过抑制CTGF的过度表达来实现。     

结缔组织生长因子在慢性乙型肝炎患者中的检测及其意义

转化生长因子(TGF)β1是目前已知最强的促肝纤维化细胞因子,而且是肝纤维化形成过程中重要的始动刺激因子之一[1].结缔组织生长因子(CTGF)是TGF β1致纤维化作用的直接下游效应介质[2];在许多纤维化疾病中CTGF与TGFβ1的表达同步增高,TGF β1主要在组织纤维化病变的早期表达,而CTGF持续表达被认为是纤维化病变缓慢进展的重要因素,CTGF表达增加可能是器官纤维化发生发展的中心环节[3].